Name: treatment with vancomycin loaded calcium sulphate and autogenous bone in an improved rabbit model of bone infection
Uploaded: 2019-03-14T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Treatment with Vancomycin Loaded Calcium Sulphate and Autogenous Bone in an Improved Rabbit Model of Bone Infection at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי את נבחרת מדעי הטבע קרן של סין (81803808, 81873062), ג'ג'יאנג המחוז רפואי, מדע הבריאות בטכנולוגיית קרן (2017KY271) ו המדע ואת הטכנולוגיה פרוייקט של בפרובינצית ג'ה-ג'יאנג (2017C 37181).

ארנבים השתמשו במחקר הנוכחי טופלו לפי המדריך על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה. כל ההליכים ניסיוני הובילו את החוקים של ביואתיקה הוועדה של ג'ה-ג'יאנג האקדמיה של הרפואה הסינית המסורתית.
1. הכנת ההשעיה חיידקי
<ol><li>להמיס 0.5 מ ג של S. aureus ליופיליזציה אבקת (בקרת האוויר 6538) עם mL 0.3 ל?...

<ol>
	<li>Malizos, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+Forum:+The+Burden+of+Bone+and+Joint+Infection:+A+Growing+Demand+for+More+Resources.">Global Forum: The Burden of Bone and Joint Infection: A Growing Demand for More Resources.</a> Journal of Bone and Joint Surgery-American Volume. 99, 20 (2017).</li><li>Peeters, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Teicoplanin+-+based+antimicrobial+therapy+in+Staphylococcus+aureus+bone+and+joint+infection:+tolerance,+efficacy+and+experience+with+subcutaneous+administration.">Teicoplanin - based antimicrobial therapy in Staphylococcus aureus bone and joint infection: tolerance, efficacy and experience with subcutaneous administration.</a> BMC Infectious Diseases. 16, 622 (2016).</li><li>Sugaya, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+autologous+concentrated+bone+marrow+grafting+in+the+treatment+for+nonunion.">Percutaneous autologous concentrated bone marrow grafting in the treatment for nonunion.</a> European Journal of Orthopeadic Surgery and Traumatology. 24, 671-678 (2014).</li><li>Birt, M. C., Anderson, D. W., Bruce, T. E., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteomyelitis:+Recent+advances+in+pathophysiology+and+therapeutic+strategies.">Osteomyelitis: Recent advances in pathophysiology and therapeutic strategies.</a> Journal of Orthopeadics. 14, 45-52 (2017).</li><li>Walter, G., Kemmerer, M., Kappler, C., Hoffmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+algorithms+for+chronic+osteomyelitis.">Treatment algorithms for chronic osteomyelitis.</a> Deutsches Arzteblatt International. 109, 257-264 (2012).</li><li>Henriksen, K., Neutzsky-Wulff, A. V., Bonewald, L. F., Karsdal, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+communication+on+and+within+bone+controls+bone+remodeling.">Local communication on and within bone controls bone remodeling.</a> Bone. 44, 1026-1033 (2009).</li><li>Mendoza, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+vancomycin+powder+on+bone+healing+in+a+rat+spinal+rhBMP-2+model.">The effect of vancomycin powder on bone healing in a rat spinal rhBMP-2 model.</a> Journal of Neurosurgery Spine. 25, 147-153 (2016).</li><li>Cohn Yakubovich, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computed+Tomography+and+Optical+Imaging+of+Osteogenesis-angiogenesis+Coupling+to+Assess+Integration+of+Cranial+Bone+Autografts+and+Allografts.">Computed Tomography and Optical Imaging of Osteogenesis-angiogenesis Coupling to Assess Integration of Cranial Bone Autografts and Allografts.</a> Journal of Visualized Experiments. (106), e53459 (2015).</li><li>Brecevich, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+Comparison+of+Accell+Evo3+and+Grafton+Demineralized+Bone+Matrix+Putties+against+Autologous+Bone+in+a+Rat+Posterolateral+Spine+Fusion+Model.">Efficacy Comparison of Accell Evo3 and Grafton Demineralized Bone Matrix Putties against Autologous Bone in a Rat Posterolateral Spine Fusion Model.</a> Spine Journal. 17, 855-862 (2017).</li><li>Jensen, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+porcine+model+of+implant-associated+osteomyelitis:+A+comprehensive+analysis+of+local,+regional,+and+systemic+response.">Novel porcine model of implant-associated osteomyelitis: A comprehensive analysis of local, regional, and systemic response.</a> Journal of Orthopeadic Research. 35, 2211-2221 (2016).</li><li>de Mesy Bentley, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+Staphylococcus+Aureus+Deformation,+Proliferation,+and+Migration+in+Canaliculi+of+Live+Cortical+Bone+in+Murine+Models+of+Osteomyelitis.">Evidence of Staphylococcus Aureus Deformation, Proliferation, and Migration in Canaliculi of Live Cortical Bone in Murine Models of Osteomyelitis.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 32, 985-990 (2017).</li><li>Norden, C. W., Kennedy, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+osteomyelitis.+I:+A+description+of+the+model.">Experimental osteomyelitis. I: A description of the model.</a> Journal of Infectious Diseases. 122, 410-418 (1970).</li><li>Mistry, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel,+multi-barrier,+drug+eluting+calcium+sulfate/biphasic+calcium+phosphate+biodegradable+composite+bone+cement+for+treatment+of+experimental+MRSA+osteomyelitis+in+rabbit+model.">A novel, multi-barrier, drug eluting calcium sulfate/biphasic calcium phosphate biodegradable composite bone cement for treatment of experimental MRSA osteomyelitis in rabbit model.</a> Journal of Controlled Release. 239, 169-181 (2016).</li><li>Bernthal, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+In+vivo+Optical+and+&#181;CT+Imaging+to+Monitor+Infection,+Inflammation,+and+Bone+Anatomy+in+an+Orthopaedic+Implant+Infection+in+Mice.">Combined In vivo Optical and &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e51612 (2014).</li><li>Koeth, L. M., DiFranco-Fisher, J. M., McCurdy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Reference+Broth+Microdilution+Method+for+Dalbavancin+In+Vitro+Susceptibility+Testing+of+Bacteria+that+Grow+Aerobically.">A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53028 (2015).</li><li>Uttra, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ephedra+gerardiana+aqueous+ethanolic+extract+and+fractions+attenuate+Freund+Complete+Adjuvant+induced+arthritis+in+Sprague+Dawley+rats+by+downregulating+PGE2,+COX2,+IL-1&#946;,+IL-6,+TNF-&#945;,+NF-kB+and+upregulating+IL-4+and+IL-10.">Ephedra gerardiana aqueous ethanolic extract and fractions attenuate Freund Complete Adjuvant induced arthritis in Sprague Dawley rats by downregulating PGE2, COX2, IL-1&#946;, IL-6, TNF-&#945;, NF-kB and upregulating IL-4 and IL-10.</a> Journal of Ethnopharmacology. 224, 482-496 (2018).</li><li>Harrasser, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+model+of+implant-related+osteomyelitis+in+the+metaphysis+of+rat+tibiae.">A new model of implant-related osteomyelitis in the metaphysis of rat tibiae.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 17, 152 (2016).</li><li>Abedon, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Commentary:+Phage+Therapy+of+Staphylococcal+Chronic+Osteomyelitis+in+Experimental+Animal+Model.">Commentary: Phage Therapy of Staphylococcal Chronic Osteomyelitis in Experimental Animal Model.</a> Frontiers in Microbiology. 7, 1251 (2016).</li><li>Tan, H. L., Ao, H. Y., Ma, R., Lin, W. T., Tang, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+effect+of+quaternized+chitosan-loaded+polymethylmethacrylate+bone+cement+on+methicillin-resistant+Staphylococcus+epidermidis+infection+of+the+tibial+metaphysis+in+a+rabbit+model.">In vivo effect of quaternized chitosan-loaded polymethylmethacrylate bone cement on methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis infection of the tibial metaphysis in a rabbit model.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 58, 6016-6023 (2014).</li><li>Chiara, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+Osteomyelitis+in+the+Diabetic+Foot+by+Imaging+Techniques:+A+Systematic+Review+and+Meta-analysis+Comparing+MRI,+White+Blood+Cell+Scintigraphy,+and+FDG-PET.">Detection of Osteomyelitis in the Diabetic Foot by Imaging Techniques: A Systematic Review and Meta-analysis Comparing MRI, White Blood Cell Scintigraphy, and FDG-PET.</a> Diabetes Care. 40, 1111-1120 (2017).</li><li>Khalid, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raman+Spectroscopy+detects+changes+in+Bone+Mineral+Quality+and+Collagen+Cross-linkage+in+Staphylococcus+Infected+Human+Bone.">Raman Spectroscopy detects changes in Bone Mineral Quality and Collagen Cross-linkage in Staphylococcus Infected Human Bone.</a> Scientific Reports. 8, 9417 (2018).</li><li>Putters, T. F., Schortinghuis, J., Vissink, A., Raghoebar, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+prospective+study+on+the+morbidity+resulting+from+calvarial+bone+harvesting+for+intraoral+reconstruction.">A prospective study on the morbidity resulting from calvarial bone harvesting for intraoral reconstruction.</a> International Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 44, 513-517 (2015).</li><li>Yin, J., Jiang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Completely+resorption+of+autologous+skull+flap+after+orthotopic+transplantation:+a+case+report.">Completely resorption of autologous skull flap after orthotopic transplantation: a case report.</a> International Journal of Clinical and Experimental Medicine. 7, 1169-1171 (2014).</li><li>Takehiko, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+results+of+managing+large+medial+tibial+defects+in+primary+total+arthroplasty:+autogenous+morcellised+bone+graft.">Preliminary results of managing large medial tibial defects in primary total arthroplasty: autogenous morcellised bone graft.</a> International Orthopaedics. 41, 931-937 (2017).</li></ol>

במחקרים קודמים, נבנו סוגים שונים של מודלים בעלי חיים כדי ללמוד הן זיהום אקוטי וכרוני העצם; עם זאת, חפש את המודל האידיאלי עדיין נמשכת17,18. בנוסף, המודל זיהום עצם אידיאלי צפוי לדמות את מאפייני פתולוגי של העצם זיהום בסביבה קלינית, תוך התקופות הדוגמנות, להישאר זול...

דלקת העצם נובע בדרך כלל חיידקים או אחרים הפלישה מיקרואורגניזם לאחר טראומה, שבר או מחלות אחרות עצם1. עצם זיהום עלול לגרום רמה גבוהה של דלקת והרס רקמות העצם. במרפאה, Staphylococcus aureus (S. aureus) הוא סוכן סיבתי הדומיננטית של העצם זיהום2,3. הזיהום עצם מכאיב, מתישה, ולוקח בדרך כלל קורס כרונית קשה מאוד לטפל4. בזמן הנוכחי, הטריה של רקמת נמק, השתלת של סידן טעון ונקומיצין (VCS) חרוזים אושרו כמו אסטרטגיית יעיל לשליטה זיהום מקומי5,6. עם זאת, 10% עד 15% מהמטופלים חוו של תהליך התיקון עצם ממושך, מתעכב איחוד או והמעלית לאחר טיפול נגד זיהום7. קטע גדול של פגם עצם הבעיה הקשה ביותר מנתחים אורטופדיים. שתל עצם אוטולוגי נחשב התחליף האופטימלי עצם עצם הטיפול, והמעלית8,9.
נכון להיום, רוב המחקרים על עצם זיהום, עצם אוטולוגי השרשה נערכו בסוגים שונים של מודלים בעלי חיים, כגון חולדות, ארנבים, כלבים, חזירים, כבשים10,11. ארנב מודלים הנפוץ ביותר ללימודים דלקת העצם, כמו הראשונה שבוצעה על-ידי נורדן, קנדי בשנת 197012,13. במחקר הקודם שלנו, השתמשנו מודלים ארנב בעקבות השיטה של נורדן, מצאנו כי הכמות של S. aureus מוזרק מח העצם יכול לא ניתן לכמת במדויק, כפי דולף הדם. מח עצם הוביל חיידקים פתרון גלישה.
מאמר זה מציג שיטה כירורגית משופרת עבור גרימת זיהום עצם על ארנבים. בסופו של ההליך, בדיקת דם לביוכימיה, בדיקה בקטריולוגית של היסטופתולוגיות בוצעו כדי לאמת את המודל זיהום של העצם. לאחר מכן, VCS הושתל לעכב זיהום, עצם autogenous הושתל לקדם התחדשות העצם.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:824px;" width="825">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">absorbable surgical suture</td>
			<td style="width:264px;">Jinghuan</td>
			<td style="width:119px;">18S0604A</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">asepsis injector</td>
			<td style="width:264px;">Jinglong</td>
			<td style="width:119px;">20170501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">bone wax</td>
			<td style="width:264px;">ETHICON</td>
			<td style="width:119px;">JH5CQLM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">CCD camera</td>
			<td style="width:264px;">Olympus</td>
			<td style="width:119px;">DP72</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">EDTA-K2 anticoagulant blood vessel</td>
			<td style="width:264px;">XINGE</td>
			<td style="width:119px;">20170802</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">Electric bone drill unit</td>
			<td style="width:264px;">Bao Kang</td>
			<td style="width:119px;">BKZ-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:264px;">Codos</td>
			<td style="width:119px;">3800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">flexible silica gel mold&#160;</td>
			<td style="width:264px;">WRIGHT</td>
			<td style="width:119px;">1527745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">Hematoxylin and Eosin Staining Kit</td>
			<td style="width:264px;">Beyotime</td>
			<td style="width:119px;">20170523</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">Luria-Bertani culture medium</td>
			<td style="width:264px;">Baisi Biothchnology</td>
			<td style="width:119px;">20170306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">Medical-grade calcium sulphate</td>
			<td style="width:264px;">WRIGHT</td>
			<td style="width:119px;">1527745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">microcomputed tomography (micro-CT)</td>
			<td style="width:264px;">Bruker</td>
			<td style="width:119px;">SkyScan 1172&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">Microscope</td>
			<td style="width:264px;">Olympus</td>
			<td style="width:119px;">CX41</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">New Zealand white rabbits</td>
			<td style="width:264px;">Zhejiang Experimental Animal Center&#160;</td>
			<td style="width:119px;">SCXK 2014-0047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:275px;">No. 11 scalpel&#160;</td>
			<td style="width:264px;">Yuanlikang</td>
			<td style="width:119px;">20170604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">normal saline</td>
			<td style="width:264px;">Mingsheng</td>
			<td style="width:119px;">20170903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">PBS</td>
			<td style="width:264px;">TBD(Jingyi)</td>
			<td style="width:119px;">20170703-0592</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">pentobarbital sodium</td>
			<td style="width:264px;">Merk</td>
			<td style="width:119px;">2070124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">povidone-iodinesolution</td>
			<td style="width:264px;">Lierkang</td>
			<td style="width:119px;">20170114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:275px;">S. aureus freeze drying powder</td>
			<td style="width:264px;">China General Microbiological Culture Collection Center</td>
			<td style="width:119px;">ATCC 6538</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">sheep blood agar</td>
			<td style="width:264px;">HuanKai Microbial</td>
			<td style="width:119px;">3103210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:275px;">tryptic soy agar plates</td>
			<td style="width:264px;">HuanKai Microbial</td>
			<td style="width:119px;">3105697</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">tryptic soy broth tubes</td>
			<td style="width:264px;">HuanKai Microbial</td>
			<td style="width:119px;">3104260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:275px;">Vancomycin</td>
			<td style="width:264px;">Lilly</td>
			<td style="width:119px;">C599180</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

treatment with vancomycin loaded calcium sulphate and autogenous bone in an improved rabbit model of bone infection

עצם התוצאות זיהום מפני פלישה חיידקים, אשר קשה מאוד לטפל בחדר ניתוח הקליני, אורטופדי, טראומטי. הזיהום העצם עלולה לגרום לדלקת ממושכת, דלקת עצם מוגלתית, והמעלית העצם בסופו של דבר. הקמת מודל בעלי חיים ריאלי לשחזור חשובה עצם זיהום מחקר וטיפול אנטיביוטי. כמודל ויוו, דגם ארנב נעשה שימוש נרחב במחקר זיהום של העצם. עם זאת, מחקרים קודמים על הארנב עצם מודלים זיהום כי מצב זיהום הוא לא עקבי, כמו גם כמות החיידקים משתנה. מחקר זה מציג שיטה כירורגית משופרת עבור גרימת זיהום עצם על ארנב, על ידי חסימת החיידק במח העצם. לאחר מכן, הערכות רשתי יכול להתבצע כדי לאמת את שיטת הדוגמנות.
באופן כללי, להסיר רקמות מתות רקמת נמק, השרשה של סידן טעון ואנקומיצין סולפט (VCS) הם השולט טיפול אנטיביוטי. למרות סולפט סידן ב VCS הטבות osteocyte זוחלים, צמיחת עצם חדשה, עצם מסיבית פגמים להתרחש לאחר להסיר רקמות מתות. עצם autogenous (אלב) היא אסטרטגיית מושך כדי להתגבר על עצם פגמים לטיפול של פגמים עצם מסיבית לאחר להסיר רקמות מתות נמק עצם.
במחקר זה, השתמשנו בעצם הזנב כמו עצם autogenous הושתלו בתוך עצם הפגם. עצם תיקון נמדדה באמצעות מיקרו-מחושב-טומוגרפיה (מיקרו-CT) וניתוח היסטולוגית לאחר להקריב חיה. כתוצאה מכך, בקבוצה VCS, עצם והמעלית בעקביות הושג. לעומת זאת, האזורים פגם עצם בקבוצה VCS-AB ירדו באופן משמעותי. שיטת מידול נוכח תיאר שיטה לשחזור, ריאלי, יציב כדי להכין מודל זיהום של העצם. הטיפול VCS-AB הביא נמוכים, והמעלית עצם לאחר טיפול אנטיביוטי. המודל זיהום עצם משופרת והטיפול שילוב של VCS ועצמות autogenous יכולים להיות לעזר בלימוד מנגנוני כבסיס זיהום ועצם התחדשות העצם הרלוונטי ליישומים אורתופדיים טראומה.

הערכה של מודל זיהום עצם לאחר זיהום עם S. aureus, ביטויים פתולוגיים ארנבים היו הדומה הסימפטום הייצוגי ביותר של דלקת עצם מוגלתית כרונית במרפאה. במחקר שלנו, ארנבים 30 היו נגועים, נתון כקבוצה מודל, ונחשפו ארנבים 10 היו כמו חיות בקרת. כל הארנבונים דגם יש נגוע הסינוסים ...

Watch this Scientific Journal Video about Treatment with Vancomycin Loaded Calcium Sulphate and Autogenous Bone in an Improved Rabbit Model of Bone Infection at JoVE.com

Treatment with Vancomycin Loaded Calcium Sulphate and Autogenous Bone in an Improved Rabbit Model of Bone Infection

מחקר זה מציג את הארנב משופרת של מודל נגוע Staphylococcus aureus על ידי חסימת את אותה כמות של חיידקים במח העצם. סולפט סידן ואנקומיצין טעון ועצמות autogenous משמשות לטיפול ותיקון אנטיביוטיקה ועצמות. הפרוטוקול יכול להיות מועיל עבור הלומדים העצם זיהום והתחדשות.

טיפול ונקומיצין טעון סולפט סידן ועצמות Autogenous במודל משופר הארנב של זיהום עצם

Bone infection results from bacterial invasion, which is extremely difficult to treat in clinical, orthopedic, and traumatic surgery. The bone infection ...

מודל של בעלי חיים פתלתל חשוב מאוד למחקר זיהום העצם. עם זאת, כיום אין מודל ארנב שעבורו מצב הזיהומים ומספר החיידקים עקבי. מודל הארנב שלנו לזיהום בעצמות משתמש בחיידק עקבי ומטופל על ידי סידן גופרתי טעון ונדקומיצין ושברי אוטוגניים.ניתן להאריך את הטכניקה לאבחון של זיהום בעצמות וטיפול אי-איחוד בעצמות, ובהבנת הפתוגנזה של זיהום בעצמות. שיטה זו יכולה לספק תובנה על מודלים אחרים של זיהום בעצמות בחולדות, עכברים וחזירים. קשה לטעון את אותו נפח של השעיה חיידקית למח העצם.הדגמה חזותית יכולה לעזור לחוקרים לבצע את השלבים הקריטיים בקלות ובדייקנות. כדי להכין את ההשעיה חיידקי, הראשון להמיס 0.5 מיליגרם של אבקה S.aureus מיובשים בהקפאה ב 0.3 מיליליטר של מדיום תרבות LB. מערבבים את ההשעיה ביסודיות, ומפוספסים את החיידקים על צלחות אגר סויה טריפטיות עבור הדגירה שלהם במשך 16 שעות ב 37 מעלות צלזיוס.למחרת בבוקר, לבחור יחידה אחת להרכיב מושבה חיידקית לתרבות בצינורות מרק סויה טריפטי במשך 24 שעות ב 37 מעלות צלזיוס. כאשר החיידקים נמצאים בשלב הצמיחה הלוגאריתמית האמצעית, מעבירים מיליליטר אחד של חיידקים לצינור של 1.5 מיליליטר, ואוסף את החיידקים על ידי צנטריפוגה. לאחר מכן, לשטוף את גלולת התא החיידקי שלוש פעמים ב 100 microliters של PBS לכל לשטוף, resuspending את החיידקים ב 3 מיליליטר של PBS טרי לאחר הכביסה הסופית.כדי להקים את עובש זיהום העצם, לאשר חוסר תגובה קמצוץ כפות רגליים ב 3 ק"ג זכר ניו זילנד ארנב לבן, ולהשתמש מכונת גילוח חשמלית כדי להסיר את השיער מאזור טיביאלי proximal נגד הכיוון של צמיחת השיער. לחטא את העור החשוף עם פתרון יוד povidone, ולהשתמש בעט וסרגל כדי לסמן את הקצה העליון של השוקה ואת מיקום חור הקידוח עבור הזרקת S.Aureus, דואג כי מיקום חור הקידוח הוא באמצע האופקי של הרמה tibial. לאחר מכן, השתמש באזמל מספר 11 כדי לבצע חתך בעור, ואחריו חתך של סנטימטר אחד בצלף.באמצעות יחידת קידוח עצם חשמלית, אגרוף חור בקוטר שני מילימטר בשוקה, ולחץ על החור עם קוטר שני מילימטר שני מילימטר ארוך של שעווה בעצמות. הסר כל שעווה עצם חילוף לאורך המישור האופקי של הרמה tibial, ולאשר כי החור מלא שעווה בעצמות. לאחר מכן, השתמש תפרים כירורגיים נספגים לתפור את periosteum ואת העור בתפר מזרן אנכי כדי למנוע את החיה ללעוס את התפרים.ולהשתמש מזרק אלח דם מיליליטר אחד לאט להזריק פעם אחת 10 לשמונה יחידות יוצרות מושבה למיליליטר של פתרון S.Aureus לתוך חור הקידוח. ביום השביעי, 14, 21 ו -28 לאחר ההזרקה, מניחים את הארנבים הנגועים לתוך מרסן ארנב עם הראש והאוזן מחוץ לרסן, ולאסוף דגימות דם מן כלי הרכב עבור תאי דם לבנים וניתוח חלבון תגובתי C. לאחר הרדמה, להשתמש באזמל מספר 11 כדי להפוך את העור tibial סנטימטר חתכים צפי, ולנקות את שעוות העצם.לאחר מכן, השתמש ביחידת מקדחת עצם חשמלית כדי לחבוט בשני חורים סמוכים בקוטר 4.8 מ"מ כדי לרוקע את העצם הנקרוטית, ולהשתמש בכף עצם כדי לתחקר את מח העצם הנקרוטי ואת רקמת הגרגריון. לאחר מכן, לגרד ולנקות את רקמת העצם בין שני החורים, ולהפיץ מיליליטר אחד של מח העצם debrided על צלחות אגר דם כבשים לדגירה לילה ב 37 מעלות צלזיוס. למחרת בבוקר, בחר לוחות עם 30 עד 300 מושבות, וחשב את מספר היחידות יוצרות המושבה לכל חיה נגועה.ביום ה -28 לאחר ההדבקה, מוסיפים גרם אחד של אבקת הידרוכלוריד vancomycin ל 9.5 גרם של סידן גופרתי ברמה רפואית, ולהשתמש מרית כדי לערבב את התערובת עם שלושה מיליליטר של מלוחים רגילים במשך 30 עד 45 שניות. מוסיפים את המוצר המעורב לתבנית ג'ל סיליקה גמישה, ומאפשרים למוצר להתייבש בטמפרטורת החדר במשך 15 דקות. לאחר מכן, להגמיש את התבנית כדי להסיר את vancomycin טעון סידן גופרתי, או חרוז VCS.לטיפול אנטיביוטי והשתלה של העצם האוטוגנית, ראשית, לחשוף מחדש את השוקה הפצועה לפני גילוח אזור הזנב, ולחטא את עור הזנב החשוף בתווית יוד povidone. השתמש במספריים כירורגיים כדי לחתוך את הזנב, ולהשתמש תפרים כירורגיים נספגים כדי לסגור את העור בתפר מזרן אנכי כדי למנוע מהחיה ללעוס את התפרים. השתמש באזמל מספר 11 כדי לחתוך את עור הזנב כדי לחשוף את עצם הזנב.הסר כל שריר, רקמות רכות ו periosteum, ולנתק את עצם הזנב בכל מפרק. מעבירים את שברי העצם לצלחת פלסטיק 100 מילימטר המכילה מלח סטרילי. לאחר מכן, השתמש במספריים מעוקלים כדי להשתיל ארבע חתיכות של חרוז VCS לתוך חלל מח העצם הטיביאלי, ולהשתמש במקלפים מעוגלים כדי למלא את פגם העצם בשמונה חתיכות של שברי עצם הזנב autogenous.לאחר מכן, לסגור את periosteum ואת החתכים בעור עם תפרים כירורגיים נספגים באופן תפר מזרן. C-תגובתי חלבון ורמות תאי דם לבנים גבוהים יותר בקבוצת מודל זיהום העצם מאשר בבעלי חיים שליטה. שניים, ארבעה, שישה, ושמונה שבועות לאחר VCS או VCS טיפול בעצמות אוטוגניות, חלבון תגובתי C ורמות תאי הדם הלבנים מופחתים באופן משמעותי.תמונות שחזור דו מימדי מצביעות על עלייה הדרגתית בנפח העצם במהלך 12 השבועות שלאחר הטיפול ב- VCS או VCS ובעצם אוטוגנית, בעוד שאובדן עצם הוא משמעותי בקבוצת מודל זיהום העצם שלא טופלה. כדי לנתח את האינדקסים הכמותיים של התחדשות העצם, ניתן לשחזר תמונות מודל תלת-ממד באמצעות נתוני מפת סיביות, ו ניתן לבחור קוטר אליפטי של 4.8 מילימטר על-ידי אזור מעניין אליפטי באורך 9.6 מילימטר בכל עצם. היחס בין נפח העצם לנפח הרקמות בקבוצת מודל זיהום העצם שלא טופל נמוך משמעותית מאלה שנמדדו בקבוצות ה-VCS וה-VCS.ציוני המספר והעובי של trabecular בקבוצת העצמות האוטוגניות של VCS גבוהים משמעותית מאלה במודל זיהום העצם הבלתי מטופל ובעלי החיים ב- VCS. יתר על כן, ציוני ההפרדה הטרביקיו בקבוצת העצמות האוטוגניות של VCS נמוכים משמעותית מאלה שנמדדו במודל זיהום העצם הלא מטופל ובקבוצות VCS. יש לדאוג לבחור ארנבים עם משקל גוף מתאים.לחסום את פתרון סטפילוקוקוס אוראוס עם שעווה בעצמות. לשבור את העצם הנקרוטית לחלוטין, ולחבוט שני חורים סמוכים בקוטר 4.8 מילימטר. בעקבות ההליך, ניתן לבצע שיטת אבחון אחרת כגון אולטרסאונד, רדיולוגיה וטומוגרפיה ממוחשבת כדי לפקח על התהליכים הפתולוגיים של זיהום העצם ותיקון.מודל זיהום עצם משופר זה ואת השילוב VCS וטיפול בעצמות autogenous יכול להיות מועיל בחקר מנגנון קו תחתון של זיהום העצם והתחדשות העצם. כמו אבקה מיובשת בהקפאה סטפילוקוקוס aureus מסוכן, ההשעיה חיידקי תמיד צריך להיות מוכן במעבדה חיידקית מבודדת.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Anatomy and Physiology

Medicine

Unit 1

Bone Tissue and the Skeletal System

SCIENTISTS IN ACTION

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

באמצעות PCR כמוני בזמן אמת לקביעת engraftment תא התורם במודל תחרותי Murine מח עצם השתלה

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

הערכה טרום קלינית של מעכבי טירוזין קינאז לטיפול בלוקמיה חריפה

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

Combined In vivo Optical and &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Combined In vivo Optical and Ãƒâ€šÃ‚ÂµCT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

בשילוב<em&gt; בvivo</em&gt; אופטי וμCT הדמיה למעקב אחר זיהום, דלקת, ועצם אנטומיה בזיהום אורטופדיים שתל בעכברים

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

שיטה משופרת עבור אינטובציה מהירה של קנה הנשימה של עכברים

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Using a Knee Arthrometer to Evaluate Tissue-specific Contributions to Knee Flexion Contracture in the Rat

באמצעות Arthrometer של הברך כדי להעריך את תרומתה רקמות ספציפיות הברך הקופסית כיפוף בחולדה

Normal knee range of motion (ROM) is critical to well-being and allows one to perform basic activities such as walking, climbing stairs and sitting. Lost ...

The Generation of Closed Femoral Fractures in Mice: A Model to Study Bone Healing

הדור של שברי הירך סגור בעכברים: מודל ללמוד ריפוי עצם

Bone fractures impose a tremendous socio-economic burden on patients, in addition to significantly affecting their quality of life. Therapeutic strategies ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cell Subsets within the Murine Spleen, Bone Marrow, Lymph Nodes and Synovial Tissue in an Osteoarthritis Model

ניתוח ציתום זרימה של תת-סטים של תאים חיסוניים בתוך הטחול מורין, מח העצם, בלוטות הלימפה ורקמות Synovial במודל דלקת מפרקים ניוונית

Osteoarthritis (OA) is one of the most prevalent musculoskeletal diseases, affecting patients suffering from pain and physical limitations. Recent ...

Evaluation of Amino Acid Consumption in Cultured Bone Cells and Isolated Bone Shafts

הערכת צריכת חומצות אמינו בתאי עצם מתורבתים ובצירי עצם מבודדים

Bone development and homeostasis is dependent upon the differentiation and activity of bone forming osteoblasts. Osteoblast differentiation is ...

Improved Rodent Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury

מודל מכרסמים משופר של איסכמיה שריר הלב ופציעת רפרפוזיה

Myocardial ischemia and reperfusion injury (MIRI), induced by coronary heart disease (CHD), causes damage to the cardiomyocytes. Furthermore, evidence ...

3D Reconstruction for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Nodules

A 3D Digital Model for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Nodules

A 3D Digital Model for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Nodules (Video) | JoVE 

מודל דיגיטלי תלת ממדי לאבחון וטיפול בגושים ריאתיים

The three-dimensional (3D) reconstruction of pulmonary nodules using medical images has introduced new technical approaches for diagnosing and treating ...