Name: protocol for acute and chronic ecotoxicity testing of the turquoise killifish nothobranchius furzeri
Uploaded: 2018-04-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri at JoVE.com

Wij zijn dankbaar aan de bol-groep van de UAntwerpen en de Vakgroep gewasbescherming van de Ugent voor analyse van watermonsters. Tijdens dit project werd ondersteund door de Excellence Center ' Eco en sociaal-evolutionaire dynamiek (PF/10/007) van het Fonds voor het onderzoek van de KU Leuven. AFG (11Q0516N) en ESJT (FWO-SB151323) als doctorale werden gefinancierd en TP (12F0716N) als postdoc door FWO Vlaanderen (Fonds Wetenschappelijk Onderzoek).

Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de ethische commissie van de KULeuven.
1. broedeieren en het algemene onderhoud van N. furzeri
<ol><li>Bereiden vis medium (pH 7) bij een temperatuur van 14 ° C en gezuiverd water Type II, met toegevoegde gestandaardiseerde zouten, toevoegen aan een geleiding van 600 µS/cm (24 ° C).</li>
	<li>Selecteer eieren in de GRZ (Gona-Rhe-Zhou) laboratorium lijn die zijn opgeslagen onder gestandaardiseerde condities<sup class="...

<ol>
	<li>European-Chemicals-Bureau. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> TAPIR Three point three-A Project for the Information Requirements of REACH. Final Report-2 August 2005. Scoping study on the development of a Technical Guidance Document on information requirements on intrinsic properties of substances (RIP 3.3-1). , (2005).</li><li>Philippe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+chronic+sensitivity+to+copper+of+a+promising+ecotoxicological+model+species,+the+annual+killifish+Nothobranchius+furzeri.">Acute and chronic sensitivity to copper of a promising ecotoxicological model species, the annual killifish Nothobranchius furzeri.</a> Ecotoxicol Environ Saf. , 26-35 (2017).</li><li>Noyes, P. D., Lema, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forecasting+the+impacts+of+chemical+pollution+and+climate+change+interactions+on+the+health+of+wildlife.">Forecasting the impacts of chemical pollution and climate change interactions on the health of wildlife.</a> Current Zoology. 61 (4), 669-689 (2015).</li><li>Consommateurs, S. S. d. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Health &amp; Consumer Protection Directorate-General European Commission. 4, (2002).</li><li>Commission, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidance+document+on+aquatic+ecotoxicology.+Under+Council+directive+91/414/EEC.">Guidance document on aquatic ecotoxicology. Under Council directive 91/414/EEC.</a> SANCO/3268/2001 Rev 4. 2002b. , (2002).</li><li>. Ecological Effects Test Guidelines, OPPTS 850.1500 Fish life cycle toxicity Available from: <a target="_blank" href="https://www.epa.gov/sites/production/files/2015-07/documents/850-1500.pdf">https://www.epa.gov/sites/production/files/2015-07/documents/850-1500.pdf</a> (1996)</li><li>Philippe, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+chronic+sensitivity+to+copper+of+a+promising+ecotoxicological+model+species,+the+annual+killifish+Nothobranchius+furzeri.">Acute and chronic sensitivity to copper of a promising ecotoxicological model species, the annual killifish Nothobranchius furzeri.</a> Ecotoxicol Environ Saf. , (2017).</li><li>Ankley, G. T., Villeneuve, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fathead+minnow+in+aquatic+toxicology:+past,+present+and+future.">The fathead minnow in aquatic toxicology: past, present and future.</a> Aquatic Toxicology. 78 (1), 91-102 (2006).</li><li>Pola&#269;ik, M., Bla&#382;ek, R., Reichard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+breeding+of+the+short-lived+annual+killifish+Nothobranchius+furzeri.">Laboratory breeding of the short-lived annual killifish Nothobranchius furzeri.</a> Nature Protocols. 11 (8), 1396-1413 (2016).</li><li>Reichwald, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+Sex+Chromosome+Evolution+and+Aging+from+the+Genome+of+a+Short-Lived+Fish.">Insights into Sex Chromosome Evolution and Aging from the Genome of a Short-Lived Fish.</a> Cell. 163 (6), 1527-1538 (2015).</li><li>Valenzano, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+African+Turquoise+Killifish+Genome+Provides+Insights+into+Evolution+and+Genetic+Architecture+of+Lifespan.">The African Turquoise Killifish Genome Provides Insights into Evolution and Genetic Architecture of Lifespan.</a> Cell. 163 (6), 1539-1554 (2015).</li><li>Shedd, T. R., Widder, M. W., Toussaint, M. W., Sunkel, M. C., Hull, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+annual+killifish+Nothobranchius+guentheri+as+a+tool+for+rapid+acute+toxicity+screening.">Evaluation of the annual killifish Nothobranchius guentheri as a tool for rapid acute toxicity screening.</a> Environ. Toxicol. Chem. 18 (10), 2258-2261 (1999).</li><li>Platzer, M., Englert, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nothobranchius+furzeri:+a+model+for+aging+research+and+more.">Nothobranchius furzeri: a model for aging research and more.</a> Trends Genet. 32 (9), 543-552 (2016).</li><li>Watters, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ecology+and+distribution+of+Nothobranchius+fishes.">The ecology and distribution of Nothobranchius fishes.</a> J Am Killifish Assoc. 42, 58-61 (2009).</li><li>Op de Beeck, L., Verheyen, J., Stoks, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Competition+magnifies+the+impact+of+a+pesticide+in+a+warming+world+by+reducing+heat+tolerance+and+increasing+autotomy.">Competition magnifies the impact of a pesticide in a warming world by reducing heat tolerance and increasing autotomy.</a> Environ Pollut. 233, 226-234 (2018).</li><li>Patra, R. W., Chapman, J. C., Lim, R. P., Gehrke, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+three+organic+chemicals+on+the+upper+thermal+tolerances+of+four+freshwater+fishes.">The effects of three organic chemicals on the upper thermal tolerances of four freshwater fishes.</a> Environ. Toxicol. Chem. 26 (7), 1454-1459 (2007).</li><li>Beitinger, T. L., Bennett, W. A., McCauley, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temperature+tolerances+of+North+American+freshwater+fishes+exposed+to+dynamic+changes+in+temperature.">Temperature tolerances of North American freshwater fishes exposed to dynamic changes in temperature.</a> Environ Biol Fishes. 58 (3), 237-275 (2000).</li><li>Cellerino, A., Valenzano, D. R., Reichard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+the+bush+to+the+bench:+the+annual+Nothobranchius+fishes+as+a+new+model+system+in+biology.">From the bush to the bench: the annual Nothobranchius fishes as a new model system in biology.</a> Biological Reviews. , (2015).</li></ol>

Dit werk beschrijft een nieuwe bioassay met behulp van Nothobranchius furzeri, een opkomende modelorganisme, te bestuderen van het individu en langetermijneffecten van toxische stoffen en andere stressoren gecombineerd. De gepresenteerde protocollen werden met succes toegepast voor het meten van de gevoeligheid van de soorten naar een matrix van toxische stoffen (koper, cadmium, 3,4-dichloroaniline en chloorpyrifos). Als gevolg van de snelle levenscyclus, dit gewervelde model zorgt voor beoordeling van subletale...

Profielen van de gevoeligheid van een matrix voor toxische stoffen in strategisch geselecteerde soorten zijn beschreven1 voor de Europese REACH wetgeving (registratie, evaluatie, autorisatie en beperking van chemische stoffen). Acute of op korte termijn toxiciteitstesten werden meestal gebruikt voor dit doel als ze een snelle indicatie van een soort gevoeligheid geven. Echter in hun natuurlijke omgeving, organismen worden blootgesteld gedurende veel langere en volledige levenscyclus of zelfs meerdere generaties kon worden getroffen2. Bovendien worden organismen in vervuilde omgevingen meestal blootgesteld aan meer dan één stressor tegelijkertijd, die met elkaar samenwerken kunnen, mogelijk resulterend in synergetische effecten3. Vandaar, veilige concentraties berekend op basis van acute, één stressor toxiciteitstesten kunnen onderschatten de werkelijke risico's die worden opgelegd door toxische stoffen in natuurlijke omgevingen. Het is daarom aan te raden om ook het bestuderen van de chronische en multigeneratie effecten van subletale concentraties van toxische stoffen in een milieu relevante context zoals bepleit door de EuropeseCommissie4,5 en de USEPA (United States Environmental Protection Agency)6,7. Vooral in gewervelde onderzoek zijn de kosten op het gebied van arbeid, geld en tijd hoog bij het uitvoeren van studies van de chronische en multigeneratie blootstelling vanwege de relatief lange levensduur van gewervelde dieren ten opzichte van ongewervelde modelorganismen. Daarom is het raadzaam om te kiezen van de meest geschikte modelorganisme voor vis, afhankelijk van de onderzoeksvraag. Bovendien moet een breed scala van gewervelde dieren beschikbaar om te testen van de algemeenheid van reacties over soorten om het aanpassen van de verordeningen op basis van de meest gevoelige soorten te kunnen zijn. Voor nu moet er een nieuwe, efficiënte protocollen met gewervelde model soorten gekenmerkt door korte levenscyclus te verlagen van de kosten van het uitvoeren van chronische en multigeneratie posities op gewervelde dieren7,8te ontwikkelen.
De turquoise poolfish Nothobranchius furzeri is een interessant model van vis in dergelijke langdurige blootstelling experimenten vanwege de korte rijpingstijd en levenscyclus (generatietijd minder dan 4 weken9) gebruiken. Dit betekent dat ecologisch relevante eindpunten zoals rijpingstijd en vruchtbaarheid binnen een kort tijdsbestek in vergelijking met andere vis modellen7kunnen worden bestudeerd. Bovendien, deze vissen produceren droogte-resistente, slapende eieren die levensvatbaarheid jarenlang wanneer opgeslagen onder standaardvoorwaarden, daardoor eliminerend de behoefte aan een continue cultuur9. In ecotoxicologisch onderzoek impliceert dit ook dat repliceren vis kunnen allemaal worden uitgebroed op exact hetzelfde moment, wat resulteert in tijd synchrony voor alle dieren, zelfs onder partijen eieren geproduceerd op verschillende tijdstippen. Wij adviseren met behulp van het laboratorium GRZ stam uit te voeren van de experimenten van de blootstelling. Deze spanning presteert goed onder laboratoriumomstandigheden, is homozygoot (met uitzondering van geslacht chromosomen) en het genoom is goed gekarakteriseerd10,11.
Ecotoxicologisch onderzoek is het belangrijk de juiste reeks testconcentraties wilt selecteren. Te dien einde kunnen verschillende complementaire methoden worden gebruikt. De nominale concentratiebereik kan worden gebaseerd op de gevoeligheid van een aanverwante soorten, zoals Nothobranchius guentheri12. U kunt ook kan het bereik worden gebaseerd op de gevoeligheid van standaard vis modellen, zoals zebravissen (Danio rerio)2 , die een vergelijkbare gevoeligheid voor toxische stoffen in de meeste (Philippe et al. (in review)). In combinatie, met beide opties, moet een oriënterend experiment worden uitgevoerd als de nominale concentratiebereik wilt selecteren. Voor het testen van de acute, moeten onderzoekers streven naar concentratie behandelingen met 100% mortaliteit, tussentijdse mortaliteit en 0% sterfte na 24 uur blootstelling aan de veroorzaken. Voor chronische testen, is het raadzaam om uit te voeren van het oriënterend experiment voor twee weken om te verifiëren als larvale sterfte in de staat met de hoogste testconcentraties niet hoger is dan 10% gedurende deze referentieperiode.
Het protocol kan dienen als een basislijn voor het uitvoeren van acute and chronische blootstelling aan drijvende/varende verontreinigende stoffen op N. furzeri, behandeling van de potentiële effecten van stressoren, zowel op het niveau van individuele en cellulaire. Het kan ook worden gebruikt voor het uitvoeren van meerdere stressor onderzoek zodat een hogere ecologische belang, dat het mengen van verschillende toxische verbindingen of studeren interactieve effecten tussen vervuiling en andere natuurlijke stressoren (bijvoorbeeld predatie) of antropogene stressoren (bijvoorbeeld opwarming van de aarde als gevolg van de klimaatverandering).

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>purified water Type 1 (milli Q)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sea Salt</td>
			<td>Instant Ocean</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2L plastic tank</td>
			<td>SAVIC</td>
			<td></td>
			<td>Always separate material for control and toxicity treatments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1L plastic tank (spawning)</td>
			<td>Avamoplast</td>
			<td></td>
			<td>Always separate material for control and toxicity treatments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nets</td>
			<td>Aqua bilzen</td>
			<td></td>
			<td>Always separate material for control and toxicity treatments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2L glass jars</td>
			<td>Sepac-Flacover</td>
			<td></td>
			<td>Always separate material for control and toxicity treatments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0,5L glass jars</td>
			<td>Sepac-Flacover</td>
			<td></td>
			<td>Always separate material for control and toxicity treatments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artemia eggs</td>
			<td>Ocean Nutrition</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chironomus</td>
			<td>Ocean Nutrition</td>
			<td></td>
			<td>frozen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tricaine</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petri dishes</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipettes</td>
			<td>MLS</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tweezers</td>
			<td>FST</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500 &#181;m mesh sieve</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
			<td>self-made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microcentrifuge tube (2ml)</td>
			<td>BRAND</td>
			<td></td>
			<td>To store fish in freezer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass vials</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td></td>
			<td>For water analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>weighing boat</td>
			<td>MLS</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jiffy 7c pellets</td>
			<td>Jiffy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>water bath</td>
			<td>Gilac</td>
			<td></td>
			<td>for Ctmax</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>liquid nitrogen</td>
			<td>Air liquide</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>digital thermometer</td>
			<td>Testo AG</td>
			<td>testo 926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HETO therm heater</td>
			<td>Anker Schmitt</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>calibrated balance</td>
			<td>Mettler-Toledo AG</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>camera</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>platform for camera</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
			<td>self-made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiparameter kit</td>
			<td>HACH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer (-80&#176;C)</td>
			<td>Panasonic Ultra low temperature freezer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fysio</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>homogenisation buffer</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td>0.1&#160;M TRIS&#8211;HCl, pH 8.5, 15&#160;% polyvinyl pyrrolidone, 153&#160;&#181;M MgSO4&#160;and 0.2&#160;% Triton X-100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chloroform:methanol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glyceryl tripalmitate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>amyloglucosidase</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glucose assay reagent</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G3293</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biorad protein dye</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well microtiter plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384 microtiter plates</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 ml glass tubes</td>
			<td>Fiers</td>
			<td></td>
			<td>For fat analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,5ml eppendorf tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>homogeniser</td>
			<td>Ultra-turrax TP 18/10</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>photospectrometer</td>
			<td>Infinite M200 TECAN</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>heater for glass tubes</td>
			<td>Hach COD REACTOR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>centrifuge</td>
			<td>Eppendorf Centrifuge 5415 R</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Bumako</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protocol for acute and chronic ecotoxicity testing of the turquoise killifish nothobranchius furzeri

De poolfish Nothobranchius furzeri is een opkomende model-organisme in het gebied van ecotoxicologie en de toepasbaarheid ervan in de acute en chronische ecotoxiciteit testen heeft aangetoond. Over het geheel genomen is de gevoeligheid van de soorten aan giftige stoffen in het bereik met, of hoger dan die van andere soorten model.
Dit werk beschrijft protocollen voor acute, chronische en multigeneratie bioassays van enkelvoudige en gecombineerde stressor effecten op N. furzeri. Vanwege de korte rijpingstijd en levenscyclus kunnen dit gewervelde model de studie van eindpunten zoals rijpingstijd en vruchtbaarheid binnen vier maanden. Transgenerationele volledige levenscyclus blootstelling proeven kunnen worden uitgevoerd in slechts 8 maanden. Aangezien deze soort produceert eieren die droogte-resistente zijn en levensvatbaar blijven jarenlang, de eigen cultuur van de soorten is niet nodig maar individuen kunnen worden aangeworven, wanneer dit nodig is. De protocollen zijn ontworpen om de maatregel levensgeschiedenis eigenschappen (sterfte, groei, vruchtbaarheid, gewicht) en kritieke thermische maximum.

De resultaten van de acute blootstelling van N. furzeri aan verschillende concentraties van koper, berekend zoals 2.5.2, Toon cleardose-respons relaties (Figuur 1). Er is een toename van de sterfte met toenemende toxische concentratie. LC50 waarden afnemen in de tijd, wat betekent dat met PM10, meer tijd voordat 50% van het sterven wordt gerepliceerd verstrijkt. Voor de gedetailleerde resultaten over de acute en chronische blootstelling va...

Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri at JoVE.com

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

Protocol voor Acute en chronische ecotoxiciteit testen van de Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

In dit werk beschrijven we een acute, chronische en multigeneratie bioassay om te bestuderen van de effecten van gemeenschappelijke en gecombineerde stressoren op de Turquoise poolfish Nothobranchius furzeri. Dit protocol is ontworpen om te bestuderen levensgeschiedenis eigenschappen (sterfte, groei, vruchtbaarheid, gewicht) en kritieke thermische maximum.

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity ...

Research

JoVE Journal

Environment

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy

Geoptimaliseerd Negatieve kleuring: een High-throughput protocol voor de behandeling Kleine en Asymmetric Protein Structure door Electron Microscopy

Structural determination of proteins is rather challenging for proteins with molecular masses between 40 - 200 kDa. Considering that more than half of ...

LC-MS Analysis of Human Platelets as a Platform for Studying Mitochondrial Metabolism

LC-MS analyse van menselijke bloedplaatjes als een platform voor het bestuderen van mitochondriaal Metabolisme

Perturbed mitochondrial metabolism has received renewed interest as playing a causative role in a range of diseases. Probing alterations to metabolic ...

A Protocol for Collecting and Constructing Soil Core Lysimeters

Een protocol voor het verzamelen en Constructing Soil Core lysimeters

Leaching of nutrients from land applied fertilizers and manure used in agriculture can lead to accelerated eutrophication of surface water. Because the ...

Protocol for Microplastics Sampling on the Sea Surface and Sample Analysis

Protocol voor microplastics bemonstering op het zeeoppervlak en Sample Analysis

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of ...

Ecotoxicological Method with Marine Bacteria Vibrio anguillarum to Evaluate the Acute Toxicity of Environmental Contaminants

Ecotoxicological Method with Marine Bacteria Vibrio anguillarum to Evaluate the Acute Toxicity of Environmental Contaminants

Ecotoxicologische methode met mariene bacteriën<em&gt; Vibrio anguillarum</em&gt; De acute toxiciteit van milieuverontreinigende stoffen beoordelen

Bacteria are an important component of the ecosystem, and microbial community alterations can have a significant effect on biogeochemical cycling and food ...

Protocol for Assessing the Relative Effects of Environment and Genetics on Antler and Body Growth for a Long-lived Cervid

Protocol voor het beoordelen van de relatieve effecten van milieu en genetica op gewei en lichaam groei voor een langlevende Cervid

Cervid phenotype can be placed into one of two categories: efficiency, which promotes survival over extravagant morphometric growth, and luxury, which ...

Dispersion of Nanomaterials in Aqueous Media: Towards Protocol Optimization

Dispersie van nanomaterialen in waterige Media: op weg naar protocolverbetering

The sonication process is commonly used for de-agglomerating and dispersing nanomaterials in aqueous based media, necessary to improve homogeneity and ...

On the Preparation and Testing of Fuel Cell Catalysts Using the Thin Film Rotating Disk Electrode Method

Op de voorbereiding en het testen van de brandstofcel katalysatoren met behulp van de methode roterende schijf elektrode van dunne Film

We present a step-by-step tutorial to prepare proton exchange membrane fuel cell (PEMFC) catalysts, consisting of Pt nanoparticles (NPs) supported on a ...

The Hawaii Protocol for Scientific Monitoring of Coffee Berry Borer: a Model for Coffee Agroecosystems Worldwide

De Hawaii-Protocol voor wetenschappelijke Monitoring van koffie Berry Borer: een Model voor koffie Agro-ecosystemen wereldwijd

Coffee berry borer (CBB) is the most devastating insect pest for coffee crops worldwide. We developed a scientific monitoring protocol that is aimed at ...

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

Experimentele Protocol voor de behandeling van de gedragsmatige reactie profielen in larvale vissen: toepassing op de Neuro-stimulerende cafeïne

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...