Name: microdissection of primary renal tissue segments and incorporation with novel scaffold-free construct technology
Uploaded: 2018-03-27T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microdissection of Primary Renal Tissue Segments and Incorporation with Novel Scaffold-free Construct Technology at JoVE.com

NIH institutionella postdoktorala utbildning Grant, NIH-HL-007260

Alla djur kirurgiska förfaranden som beskrivs nedan har godkänts av den institutionella djur vård och använda kommittén (IACUC) på Medical University of South Carolina innan alla djur operationer eller användning av någon djurvävnader.
1. murina nefrektomi
<ol><li>Don kirurgisk mask och bouffant keps för att minimera risken för kontaminering. Upprätthålla sterilitet under uppbyggnaden av det kirurgiska området.<ol>
<li>Placera icke-fenestrated operationsdukar på operationsbord...

<ol>
	<li>Jha, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+kidney+disease:+global+dimension+and+perspectives.">Chronic kidney disease: global dimension and perspectives.</a> Lancet. 382 (9888), 260-272 (2013).</li><li>2016 USRDS Annual Data Report: Epidemiology of Kidney Disease in the United States. U.S.R.D Available from: <a target="_blank" href="https://www.usrds.org/2016/download/v2_ESRD_16.pdf">https://www.usrds.org/2016/download/v2_ESRD_16.pdf</a> (2016)</li><li>Hart, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OPTN/SRTR+2015+Annual+Data+Report:+Kidney.">OPTN/SRTR 2015 Annual Data Report: Kidney.</a> American journal of transplantation : official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 17, 21-116 (2017).</li><li>de Vries, E. F., Rabelink, T. J., van den Hout, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+the+Cost-Effectiveness+of+Delaying+End-Stage+Renal+Disease.">Modelling the Cost-Effectiveness of Delaying End-Stage Renal Disease.</a> Nephron. 133 (2), 89-97 (2016).</li><li>Lefebvre, P., Duh, M. S., Mody, S. H., Bookhart, B., Piech, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+economic+impact+of+epoetin+alfa+therapy+on+delaying+time+to+dialysis+in+elderly+patients+with+chronic+kidney+disease.">The economic impact of epoetin alfa therapy on delaying time to dialysis in elderly patients with chronic kidney disease.</a> Disease management : DM. 10 (1), 37-45 (2007).</li><li>Mennini, F. S., Russo, S., Marcellusi, A., Quintaliani, G., Fouque, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+effects+of+treatment+of+chronic+kidney+disease+with+low-protein+diet.">Economic effects of treatment of chronic kidney disease with low-protein diet.</a> Journal of renal nutrition : the official journal of the Council on Renal Nutrition of the National Kidney Foundation. 24 (5), 313-321 (2014).</li><li>Moon, K. H., Ko, I. K., Yoo, J. J., Atala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+diseases+and+tissue+engineering.">Kidney diseases and tissue engineering.</a> Methods. 99, 112-119 (2016).</li><li>Wobma, H., Vunjak-Novakovic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine+2015:+A+Year+in+Review.">Tissue Engineering and Regenerative Medicine 2015: A Year in Review.</a> Tissue engineering. Part B, Reviews. 22 (2), 101-113 (2016).</li><li>Langer, R., Vacanti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+tissue+engineering.">Advances in tissue engineering.</a> Journal of pediatric surgery. 51 (1), 8-12 (2016).</li><li>Jakab, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+engineering+by+self-assembly+and+bio-printing+of+living+cells.">Tissue engineering by self-assembly and bio-printing of living cells.</a> Biofabrication. 2 (2), 022001 (2010).</li><li>Fisher, M. B., Mauck, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+engineering+and+regenerative+medicine:+recent+innovations+and+the+transition+to+translation.">Tissue engineering and regenerative medicine: recent innovations and the transition to translation.</a> Tissue engineering. Part B, Reviews. 19 (1), 1-13 (2013).</li><li>Stewart, D. E., Garcia, V. C., Rosendale, J. D., Klassen, D. K., Carrico, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosing+the+Decades-Long+Rise+in+the+Deceased+Donor+Kidney+Discard+Rate+in+the+United+States.">Diagnosing the Decades-Long Rise in the Deceased Donor Kidney Discard Rate in the United States.</a> Transplantation. 101 (3), 575-587 (2017).</li><li>Mohan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+weekend+effect+alters+the+procurement+and+discard+rates+of+deceased+donor+kidneys+in+the+United+States.">The weekend effect alters the procurement and discard rates of deceased donor kidneys in the United States.</a> Kidney international. 90 (1), 157-163 (2016).</li><li>Orlando, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discarded+human+kidneys+as+a+source+of+ECM+scaffold+for+kidney+regeneration+technologies.">Discarded human kidneys as a source of ECM scaffold for kidney regeneration technologies.</a> Biomaterials. 34 (24), 5915-5925 (2013).</li><li>Katari, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+bioengineering+with+scaffolds+generated+from+human+kidneys.">Renal bioengineering with scaffolds generated from human kidneys.</a> Nephron. Experimental nephrology. 126 (2), 119 (2014).</li><li>Kim, S. S., Park, H. J., Han, J., Choi, C. Y., Kim, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+tissue+reconstitution+by+the+implantation+of+renal+segments+on+biodegradable+polymer+scaffolds.">Renal tissue reconstitution by the implantation of renal segments on biodegradable polymer scaffolds.</a> Biotechnology letters. 25 (18), 1505-1508 (2003).</li><li>Guimaraes-Souza, N. K., Yamaleyeva, L. M., AbouShwareb, T., Atala, A., Yoo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+reconstitution+of+human+kidney+structures+for+renal+cell+therapy.">In vitro reconstitution of human kidney structures for renal cell therapy.</a> Nephrology, dialysis, transplantation : official publication of the European Dialysis and Transplant Association - European Renal Association. 27 (8), 3082-3090 (2012).</li><li>Kelley, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tubular+cell-enriched+subpopulation+of+primary+renal+cells+improves+survival+and+augments+kidney+function+in+rodent+model+of+chronic+kidney+disease.">Tubular cell-enriched subpopulation of primary renal cells improves survival and augments kidney function in rodent model of chronic kidney disease.</a> American journal of physiology. Renal physiology. 299 (5), 1026-1039 (2010).</li><li>Czajka, C. A., Drake, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembly+of+prevascular+tissues+from+endothelial+and+fibroblast+cells+under+scaffold-free,+nonadherent+conditions.">Self-assembly of prevascular tissues from endothelial and fibroblast cells under scaffold-free, nonadherent conditions.</a> Tissue engineering. Part A. 21 (1-2), 277-287 (2015).</li><li>Rhett, J. M., Wang, H., Bainbridge, H., Song, L., Yost, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Connexin-Based+Therapeutics+and+Tissue+Engineering+Approaches+to+the+Amelioration+of+Chronic+Pancreatitis+and+Type+I+Diabetes:+Construction+and+Characterization+of+a+Novel+Prevascularized+Bioartificial+Pancreas.">Connexin-Based Therapeutics and Tissue Engineering Approaches to the Amelioration of Chronic Pancreatitis and Type I Diabetes: Construction and Characterization of a Novel Prevascularized Bioartificial Pancreas.</a> Journal of diabetes research. 2016, 7262680 (2016).</li><li>Al-Awqati, Q., Oliver, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+in+the+kidney.">Stem cells in the kidney.</a> Kidney international. 61 (2), 387-395 (2002).</li><li>Aboushwareb, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Erythropoietin+producing+cells+for+potential+cell+therapy.">Erythropoietin producing cells for potential cell therapy.</a> World journal of urology. 26 (4), 295-300 (2008).</li></ol>

Metoderna att ingenjör levande nedsatt vävnad konstruktioner varierar kraftigt när det gäller både typ av celler och biomaterial utnyttjas, och i många fall är inaktuella eller inte välkarakteriserad i litteratur7. Medan många använder stamceller metoder eller går igenom enskilda komponenter nedsatt arkitekturen i isolering, utsikterna att artificiellt att återskapa hela organ med över 26 olika differentierade celltyper från cellulära suspensioner är överväldigande för att över...

Kronisk njursjukdom (CKD) är en av de nuvarande stora folkhälsan utmaningar världen över1. Prevalensen av CKD i Förenta staterna är över 14 procent av den totala befolkningen, med över 600 000 amerikaner lider av den allvarligaste formen, slutstadiet njursjukdom (ESRD)2. De nuvarande behandlingsalternativ som finns för dem med ESRD inkluderar dialys och njurtransplantation. Även om cirka 25.000 patienter genomgå njurtransplantation varje år, läggs ett betydande antal patienter årligen leder till en stor skillnad mellan de som väntar på en livräddande organ och de mottagande transplantation3. Förutom dess allvarliga negativa effekter på livslängd och livskvalitet är dialys associerade med en häpnadsväckande ekonomisk börda. Under 2014 Medicare betalda fordringar uppgick till över 30 miljarder dollar för ESRD patienter2. Med en begränsad orgel leverans och inga uppenbara stadigt i patienter som kräver dialys, forskningsinsatser som syftar till att identifiera alternativa lösningar till dialys och transplantation är någonsin viktiga. Även en relativt kort fördröjning i behov av dialys ökar patientens antalet kvalitetsjusterade levnadsår och produktiviteten väsentligt samtidigt skjuta upp kostnader relaterade till dialys4,5,6.
Lösningar för funktionell vävnad förlust, sånt i ESRD, studeras för närvarande i vävnadsteknik och regenerativ medicin laboratorier, med varierande strategier alltifrån byggnadsställning-baserade organoid fabrication till hela orgel engineering använder cell-lösa orgel strukturer för cellulära implantation7,8,9,10,11. Går igenom komplexa nedsatt strukturer från marginell eller kasserad njurarna har endast delvis utretts. I själva verket ignoreras nästan 20% av njurar anskaffas för transplantation för olika skäl12,13. Den funktionella nedsatt vävnaden från dessa förmodade grafter kan utnyttjas och införlivas med en eller flera vävnadstekniska konstruktioner. Tidigare studier har visat möjligheten att arbeta med dessa kasserade organ, utnyttja njurar för extra-cellulära matrisen för tissue engineering ändamål14,15. Dock har några används primära nephronal vävnad från friska njurar för vävnadsteknik ändamål16,17,18.
En metod som tidigare beskrivs av Kim et al. innebär isolering av nedsatt ”segment” från frisk råtta njurar, som då var seedad på polyglycolic syra (PGA) ställningar för konstruktion tillverkning16. Men lite information ges angående exakta dissektion metodik och segment erhölls från en kombination av fina malning och filtrering. Vi beskriver en ändring av detta protokoll, som Likaså producerar diskret nedsatt segment med intakt nephronal arkitektur, utan istället förlitar sig på lokalt tekniker. Nephrectomies utförs på levande vuxna möss, varefter njurarna överförs till mikroskopet dissektion där nedsatt kapseln avlägsnas och vävnaden är ytterligare dissekeras. Småkalibriga 30½ G nålar används som skärande instrument och även som vägleder medhjälp i dissektion, som nålen diameter är lika med målet diameter nedsatt segment. Segmenten isolerade, i detta fall murina, nedsatt bibehålla lönsamheten i kultur och införliva med byggnadsställning-fri endothelial-fibroblast cellulära konstruktioner19. Dessa konstruktioner har tidigare använts för att konstruera andra organ, inklusive en bio-konstgjord bukspottkörtel20.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:707px;" width="706">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Non-fenestrated Sterile Field</td>
			<td style="width:181px;">Busse Hospital Disposables</td>
			<td style="width:153px;">696</td>
			<td style="width:199px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Fenestrated Sterile Field</td>
			<td style="width:181px;">Busse Hospital Disposables</td>
			<td style="width:153px;">697</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Halsted Mosquito Forceps 5 Curved</td>
			<td style="width:181px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">Mil-7-4</td>
			<td>&#34;Hemostat&#34; in manuscript</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Extra Fine Graefe Forceps, Curved with teeth</td>
			<td style="width:181px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">11155-10</td>
			<td>Fine forceps with teeth</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Extra Fine Graefe Forceps, Serrated (without teeth)</td>
			<td style="width:181px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">11152-10</td>
			<td>Fine forceps without teeth</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Fine Scissors - Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:181px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">14568-09</td>
			<td>Iris Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Betadine Surgical Scrub with Pump, Povidone-iodine 7.5%</td>
			<td style="width:181px;">Purdue Products L.P.</td>
			<td style="width:153px;">67618-151-17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Sterile Cotton Gauze Pad (4&#34; x 4&#34;)</td>
			<td style="width:181px;">Fisher Healthcare</td>
			<td style="width:153px;">22-415-469</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Solution</td>
			<td style="width:181px;">Corning</td>
			<td style="width:153px;">21-030-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Penicillin/Streptomycin Solution, 100X</td>
			<td style="width:181px;">Corning</td>
			<td style="width:153px;">30-002-Cl</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Isoflurane, USP</td>
			<td style="width:181px;">Manufacturer: Piramal, Distributor: McKesson</td>
			<td style="width:153px;">2254845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">Nair Hair Remover</td>
			<td style="width:181px;">Nair</td>
			<td style="width:153px;">22600-23307</td>
			<td>Hair Removal Cream in text</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">200 Proof Ethanol</td>
			<td style="width:181px;">Decon Laboratories</td>
			<td style="width:153px;">2705</td>
			<td>Diluted to 70% Ethanol Solution</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">BioLite 60mm Tissue Culture Dish</td>
			<td style="width:181px;">Themo-Scientific</td>
			<td style="width:153px;">130181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">Press&#39;n Seal</td>
			<td style="width:181px;">Glad</td>
			<td style="width:153px;">12587-70441</td>
			<td>Applied to Stereoscope</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">SZX16 Stereo Microscope</td>
			<td style="width:181px;">Olympus</td>
			<td style="width:153px;">SZX16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">Fiber Optic Illuminator</td>
			<td style="width:181px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:153px;">41720-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Self-Supporting Dual-Light Pipe, 23&#34; L Gooseneck</td>
			<td style="width:181px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:153px;">EW-41720-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">Scalpel Handle #3</td>
			<td style="width:181px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">Mil-4-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Sterile Rib-Back Carbon Steel Blade, Blade Size 15</td>
			<td style="width:181px;">Bard-Parker</td>
			<td style="width:153px;">371115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">31 1/2 Gauge Needle</td>
			<td style="width:181px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:153px;">14-826F</td>
			<td style="width:199px;">Becton Dickinson 305106</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium</td>
			<td style="width:181px;">Corning</td>
			<td style="width:153px;">10-017-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Fetal Select 100% Bovine Serum</td>
			<td style="width:181px;">Atlas Biologicals</td>
			<td style="width:153px;">FS-0500-AD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Normal Human Dermal Fibroblasts</td>
			<td style="width:181px;">Lonza</td>
			<td style="width:153px;">CC-2511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Human Adipose Microvascular Endothelial Cells</td>
			<td style="width:181px;">Sciencell Research Laboratories</td>
			<td style="width:153px;">7200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">Surgical Loupes (2.5x)</td>
			<td style="width:181px;">Orascoptic</td>
			<td style="width:153px;">(N/A) Custom Order</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">FGM-2 (Fibroblast Basal Medium with FGM-2 SingleQuots Added)</td>
			<td style="width:181px;">Lonza</td>
			<td style="width:153px;">CC-3131, CC-4126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">EGM-2 (Endothelial Basal Medium with EGM-2 SingleQuots Added)</td>
			<td style="width:181px;">Lonza</td>
			<td style="width:153px;">CC-3156, CC-4176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Live/Dead Viability/Cytotoxicity Kit for Mammalian Cells</td>
			<td style="width:181px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:153px;">L3224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Anti-Cytokeratin-18 Antibody</td>
			<td style="width:181px;">Abcam</td>
			<td style="width:153px;">ab668</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Goat anti-Mouse IgG, Alexa Fluor 633</td>
			<td style="width:181px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:153px;">A-21052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Goat anti-Rabbit IgG, Alexa Fluor 546</td>
			<td style="width:181px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:153px;">A-11010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:173px;">Anti-Von Willebrand Factor Antibody</td>
			<td style="width:181px;">Abcam</td>
			<td style="width:153px;">ab6994</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:173px;">Albumin, Fluorescein isothiocyanate Conjugate</td>
			<td style="width:181px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:153px;">A9771-50MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">Hoescht 33342</td>
			<td style="width:181px;">BD Pharmingen</td>
			<td style="width:153px;">561908</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:173px;">Background Buster</td>
			<td style="width:181px;">Innovex Biosciences</td>
			<td style="width:153px;">NB306</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microdissection of primary renal tissue segments and incorporation with novel scaffold-free construct technology

Njurtransplantation är nu en mainstream terapi för slutstadiet njursjukdom. Dock med cirka 96 000 personer på väntelista och endast en fjärdedel av dessa patienter som uppnådde transplantation, finns det ett trängande behov för alternativ för dem med misslyckas organ. För att minska de skadliga konsekvenserna av dialys tillsammans med de övergripande hälso-och sjukvårdskostnader som det ådrar sig, pågår aktiv utredning jakten på alternativa lösningar till organtransplantation. Implanterbara vävnadstekniska nedsatt cellulär konstruktioner är en sådan möjlig strategi till att ersätta förlorade nedsatt funktionalitet. Här är beskrivs för första gången, lokalt murina njurar för isolering av levande corticomedullary nedsatt segment. Dessa segment klarar snabb inkorporering inom byggnadsställning-fri endothelial-fibroblast konstruktioner som kan aktivera snabb anslutning med värd vaskulatur en gång implanteras. Vuxen mus njurarna uppbringades från levande donatorer, följt av stereoskop lokalt att få nedsatt segment 200-300 µm i diameter. Flera nedsatt konstruktioner var fabricerade med hjälp av primära nedsatt segment skördas från endast en njure. Denna metod visar ett förfarande som kunde rädda funktionella nedsatt vävnad från organ som annars skulle kasseras.

Protokollet beskrivs producerar cirka 50 nedsatt segment per pyramidal 2 mm3 avsnitt av nedsatt vävnad. Nedsatt segment som har bearbetats och avbildade har tubulär och glomerulär komponenter i olika proportioner (se figur 2). Segmenten intakt utsattes för ett test för att bestämma lönsamheten för olika segment en gång varje 24 h i tre dagar. Grön fluorescerande calcein-AM är närvarande med intracellulära esterasaktivitet, vägledande ...

Watch this Scientific Journal Video about Microdissection of Primary Renal Tissue Segments and Incorporation with Novel Scaffold-free Construct Technology at JoVE.com

Microdissection of Primary Renal Tissue Segments and Incorporation with Novel Scaffold-free Construct Technology

Vävnadstekniska nedsatt konstruktioner ger en lösning för organbrist och skadliga effekter av dialys. Här beskriver vi ett protokoll till micro dissekera murina njurar för isolering av cortico-medullär segment. Dessa segment implanteras i byggnadsställning-fri cellulära konstruktioner, bildar nedsatt organoids.

Lokalt av primära nedsatt vävnad segment och inkorporering med romanen byggnadsställning-fri konstruktion teknik

Kidney transplantation is now a mainstream therapy for end-stage renal disease. However, with approximately 96,000 people on the waiting list and only ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Magnetic Resonance Elastography Methodology for the Evaluation of Tissue Engineered Construct Growth

Magnetic Resonance elastografi Metodik för utvärdering vävnadstekniska Construct tillväxt

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Human Brosk Tissue Fabrication Använda Tredimensionell Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

A Novel Stretching Platform for Applications in Cell and Tissue Mechanobiology

A Novel Stretching plattform för tillämpningar inom cell-och vävnads mechanobiology

Tools that allow the application of mechanical forces to cells and tissues or that can quantify the mechanical properties of biological tissues have ...

Epithelial Cell Repopulation and Preparation of Rodent Extracellular Matrix Scaffolds for Renal Tissue Development

Epitelceller Återplantering och framställning av gnagare Extracellular Matrix Byggnadsställningar för njurvävnad utveckling

This protocol details the generation of acellular, yet biofunctional, renal extracellular matrix (ECM) scaffolds that are useful as small-scale model ...

Three-dimensional Biomimetic Technology: Novel Biorubber Creates Defined Micro- and Macro-scale Architectures in Collagen Hydrogels

Tredimensionell Biomimetic Technology: Novel Biorubber Skapar Defined mikro- och makroskala arkitekturer i Collagen Hydrogeler

Tissue scaffolds play a crucial role in the tissue regeneration process. The ideal scaffold must fulfill several requirements such as having proper ...

Melt Electrospinning Writing of Three-dimensional Poly(&#949;-caprolactone) Scaffolds with Controllable Morphologies for Tissue Engineering Applications

Melt Electrospinning Writing of Three-dimensional PolyÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Âµ-caprolactone Scaffolds with Controllable Morphologies for Tissue Engineering Applications

Smälta Electrospinning handstil av tredimensionella Poly(ε-caprolactone) ställningar med kontrollerbar morfologier för Tissue Engineering program

This tutorial reflects on the fundamental principles and guidelines for electrospinning writing with polymer melts, an additive manufacturing technology ...

Bioprinting of Cartilage and Skin Tissue Analogs Utilizing a Novel Passive Mixing Unit Technique for Bioink Precellularization

Bioprinting av brosk och hud vävnad analoger utnyttja en roman passiv enhet blandningsteknik för Bioink Precellularization

Bioprinting is a powerful technique for the rapid and reproducible fabrication of constructs for tissue engineering applications. In this study, both ...

A Novel Tenorrhaphy Suture Technique with Tissue Engineered Collagen Graft to Repair Large Tendon Defects

En ny tenorrhaphy sutur teknik med vävnadskonstruerad kollagen graft för att reparera stora sena defekter

Surgical management of large tendon defects with tendon grafts is challenging, as there are a finite number of sites where donors can be readily ...

A Net Mold-based Method of Scaffold-free Three-Dimensional Cardiac Tissue Creation

En netto mögel-baserade metod byggnadsställning-fri tredimensionella hjärtvävnad skapelsens

This protocol describes a novel and easy net mold-based method to create three-dimensional (3-D) cardiac tissues without additional scaffold material. ...

Pancreatic Tissue-Derived Extracellular Matrix Bioink for Printing 3D Cell-Laden Pancreatic Tissue Constructs

Pankreasvävnad-härledda extracellulära matrix Bioink för utskrift 3D cell-lastat Pankreasvävnad konstruktioner

The transplantation of pancreatic islets is a promising treatment for patients who suffer from type 1 diabetes accompanied by hypoglycemia and secondary ...