Name: electrically conductive scaffold to modulate and deliver stem cells
Uploaded: 2018-04-13T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electrically Conductive Scaffold to Modulate and Deliver Stem Cells at JoVE.com

Vi tackar Dr Kati Andreasson (Institutionen för neurologi och neurologisk vetenskap, Stanford University) för användning av qRT-PCR-maskinen. Arbetet stöds av nationella institut för hälsa bidrag K08NS098876 (till P.M.G.) och Stanford School of Medicine rektorns postdoktorsstipendium (att B.O.).

Alla stamceller och djur förfaranden godkändes av Stanfords Stem Cell Research Oversight kommittén och Stanford University administrativa panelen på laboratorium djur vård (Bolagsverket-616 och APLAC-31909).
1. etsning av ITO-glas
<ol><li>Förbereda den indium tinoxiden (ITO)-täckt glasskiva genom att placera en maskering agent över ledande sida av glaset. Obs: De flesta kommersiella transparent tejp kan användas som en maskering agent.<ol>
<li>Ta bort överflödigt masken med hj?...

<ol>
	<li>Moskowitz, M. A., Lo, E. H., Iadecola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Science+of+Stroke:+Mechanisms+in+Search+of+Treatments.">The Science of Stroke: Mechanisms in Search of Treatments.</a> Neuron. 67 (2), 181-198 (2010).</li><li>George, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+Preconditioning+of+Stem+Cells+with+a+Conductive+Polymer+Scaffold+Enhances+Stroke+Recovery.">Electrical Preconditioning of Stem Cells with a Conductive Polymer Scaffold Enhances Stroke Recovery.</a> Biomaterials. 142, 31-40 (2017).</li><li>Steinberg, G. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Outcomes+of+Transplanted+Modified+Bone+Marrow-Derived+Mesenchymal+Stem+Cells+in+Stroke:+A+Phase+1/2a+Study.">Clinical Outcomes of Transplanted Modified Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells in Stroke: A Phase 1/2a Study.</a> Stroke. 47 (7), 1817-1824 (2016).</li><li>George, P. M., Steinberg, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Stroke+Therapeutics:+Unraveling+Stroke+Pathophysiology+and+Its+Impact+on+Clinical+Treatments.">Novel Stroke Therapeutics: Unraveling Stroke Pathophysiology and Its Impact on Clinical Treatments.</a> Neuron. 87 (2), 297-309 (2015).</li><li>Schabitz, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+Brain-Derived+Neurotrophic+Factor+Enhances+Poststroke+Sensorimotor+Recovery+and+Stimulates+Neurogenesis.">Intravenous Brain-Derived Neurotrophic Factor Enhances Poststroke Sensorimotor Recovery and Stimulates Neurogenesis.</a> Stroke. 38 (7), 2165-2172 (2007).</li><li>Liauw, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombospondins+1+and+2+Are+Necessary+For+Synaptic+Plasticity+and+Functional+Recovery+After+Stroke.">Thrombospondins 1 and 2 Are Necessary For Synaptic Plasticity and Functional Recovery After Stroke.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 28 (10), 1722-1732 (2008).</li><li>Cantu, D. A., Hematti, P., Kao, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Encapsulating+Biomaterial+Regulates+Mesenchymal+Stromal/Stem+Cell+Differentiation+and+Macrophage+Immunophenotype.">Cell Encapsulating Biomaterial Regulates Mesenchymal Stromal/Stem Cell Differentiation and Macrophage Immunophenotype.</a> Stem Cells Translational Medicine. 1 (10), 740-749 (2012).</li><li>Chaudhuri, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogels+with+Tunable+Stress+Relaxation+Regulate+Stem+Cell+Fate+and+Activity.">Hydrogels with Tunable Stress Relaxation Regulate Stem Cell Fate and Activity.</a> Nat Mater. 15 (3), 326-334 (2016).</li><li>Ballios, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Hyaluronan-Based+Injectable+Hydrogel+Improves+the+Survival+and+Integration+of+Stem+Cell+Progeny+following+Transplantation.">A Hyaluronan-Based Injectable Hydrogel Improves the Survival and Integration of Stem Cell Progeny following Transplantation.</a> Stem Cell Reports. 4 (6), 1031-1045 (2015).</li><li>Mothe, A. J., Tam, R. Y., Zahir, T., Tator, C. H., Shoichet, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+of+the+Injured+Spinal+Cord+by+Transplantation+of+Neural+Stem+Cells+in+a+hyaluronan-based+hydrogel.">Repair of the Injured Spinal Cord by Transplantation of Neural Stem Cells in a hyaluronan-based hydrogel.</a> Biomaterials. 34 (15), 3775-3783 (2013).</li><li>Saini, M., Singh, Y., Arora, P., Arora, V., Jain, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implant+Biomaterials:+A+Comprehensive+Review.">Implant Biomaterials: A Comprehensive Review.</a> World J Clin Cases. 3 (1), 52-57 (2015).</li><li>Huang, Y., Li, Y., Chen, J., Zhou, H., Tan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+Stimulation+Elicits+Neural+Stem+Cells+Activation:+New+Perspectives+in+CNS+Repair.">Electrical Stimulation Elicits Neural Stem Cells Activation: New Perspectives in CNS Repair.</a> Front Hum Neurosci. 9, (2015).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon.">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J Vis Exp. (47), (2011).</li><li>Abdelwahid, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+Cell+Death+and+Survival+in+Heart+Regeneration+and+Repair.">Stem Cell Death and Survival in Heart Regeneration and Repair.</a> Apoptosis. 21 (3), 252-268 (2016).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Clinical+Status+of+Stem+Cell+Therapy+for+Ischemic+Cardiomyopathy.">The Clinical Status of Stem Cell Therapy for Ischemic Cardiomyopathy.</a> Stem Cells Int. 2015, (2015).</li><li>George, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+and+Biocompatibility+of+Polypyrrole+Implants+Suitable+for+Neural+Prosthetics.">Fabrication and Biocompatibility of Polypyrrole Implants Suitable for Neural Prosthetics.</a> Biomaterials. 26 (17), 3511-3519 (2005).</li><li>Aravamudan, B., Thompson, M., Pabelick, C., Prakash, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain-Derived+Neurotrophic+Factor+Induces+Proliferation+of+Human+Airway+Smooth+Muscle+Cells.">Brain-Derived Neurotrophic Factor Induces Proliferation of Human Airway Smooth Muscle Cells.</a> J Cell Mol Med. 16 (4), 812-823 (2012).</li><li>Lopes, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombospondin+2+Regulates+Cell+Proliferation+Induced+by+Rac1+Redox-Dependent+Signaling.">Thrombospondin 2 Regulates Cell Proliferation Induced by Rac1 Redox-Dependent Signaling.</a> Mol Cell Biol. 23 (15), 5401-5408 (2003).</li><li>Ploughman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain-Derived+Neurotrophic+Factor+Contributes+to+Recovery+of+Skilled+Reaching+After+Focal+Ischemia+in+Rats.">Brain-Derived Neurotrophic Factor Contributes to Recovery of Skilled Reaching After Focal Ischemia in Rats.</a> Stroke. 40 (4), 1490-1495 (2009).</li><li>Baker, E. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+Pluripotent+Stem+Cell-Derived+Neural+Stem+Cell+Therapy+Enhances+Recovery+in+an+Ischemic+Stroke+Pig+Model.">Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Stem Cell Therapy Enhances Recovery in an Ischemic Stroke Pig Model.</a> Sci Rep. 7 (1), 10075 (2017).</li><li>Bacigaluppi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+Stem+Cell+Transplantation+Induces+Stroke+Recovery+by+Upregulating+Glutamate+Transporter+GLT-1+in+Astrocytes.">Neural Stem Cell Transplantation Induces Stroke Recovery by Upregulating Glutamate Transporter GLT-1 in Astrocytes.</a> J Neurosci. 36 (41), 10529-10544 (2016).</li></ol>

Alltfler bevis visat löftet om stamceller som en roman stroke terapi. Detta löfte har resulterat i en stor ansträngning att avancera stamceller therapeutics till sängkanten med minst 40 pågående eller avslutade kliniska prövningar. Stroke patologi erbjuder en unik neurologisk sjukdom som lämpar sig för stamcellsterapi eftersom efter akut förolämpningen, det finns ingen neurodegenerativ process förhindra återhämtning. Den exakta mekanismen för stamceller-förbättrade stroke återvinning är fortfarande okl...

Stroke är den andra vanligaste dödsorsaken i världen och den femte vanligaste dödsorsaken, i USA. Trots dessa höga dödstal fortfarande behandlingar för stroke återvinning för närvarande en utmaning med ingen livskraftig medicinska alternativ tillgängliga1. Finns för närvarande omkring 300 kliniska prövningar med ischemisk stroke, varav endast 40 utnyttja stamceller. Tidigare studier har visat att stamceller terapier har en gynnsam effekt på stroke reparation2,3. Parakrin faktorer såsom hjärnan som härrör neurotrofa faktorn (BDNF) och thrombospondin-1 (THBS-1) frigörs från transplanterade mänskliga neurala stamceller (hNPCs) har visat förbättrad funktionell återhämtning genom mekanismer som är associerade med en ökning synaps bildas, angiogenes, dendritiska förgrening och nya axonal prognoser samt modulera immunförsvaret4,5,6. De optimala leveranssätt av stamcellerna kvarstår dock svårfångade.
Framgångsrika stamceller leverans till hjärnan fortfarande en utmaning. För närvarande, har injicerbara hydrogel och polymera ställningssystem införts för att leverera stamceller. Dessa leveransmetoder skyddar stamceller under transplantation samt erbjuder skydd från den hårda efter stroke miljön inklusive värdens inflammatorisk reaktion och hypoxisk villkor7,8,9 , 10. men de vanligaste materialen är inerta, vilket begränsar användningen av kontinuerlig modulering (dvs, elektrisk stimulering) av celler11. Elektrisk stimulering är en cue som påverkar differentiering, ion kanal täthet och neurite utväxt av stamceller12. Jämfört med inerta polymerer, kan ledande polymerer bära en nuvarande möjliggör elektrisk stimulering och manipulation av stamceller2. Den exakta mekanismen genom vilken elektrisk stimulering modulerar neurotrofa faktorn release (dvs BDNF och THBS-1) är dock fortfarande inte helt utforskat.
I detta protokoll beskriver vi stegen för att konstruera en cell kultur system bestående av en ledande polymer byggnadsställning, Polypyrrol (PPy), som möjliggör in vitro- elektrisk stimulering. På grund av det sätt som cellodlingssystem är påhittade, är efterföljande implantation av stamceller-seedade ställningen på peri-infarct cortex möjligt. För detta system förutsättning vi elektriskt stamceller på schavotten för en kort tid före implantation. Efter elektrisk stimulering, ledande polymer schavotten transporterar cellerna implanteras framgångsrikt intracranially med en minimalt invasiv metod.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="623">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">FGF-Basic</td>
			<td style="width:103px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">CTP0261</td>
			<td style="width:188px;">20 ng/mL for working media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Matrigel</td>
			<td style="width:103px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">cb40234a</td>
			<td style="width:188px;">1:200 dilution</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:213px;">LIF Protein, Recom. Hum. (10 &#181;g/mL)</td>
			<td style="width:103px;">EMD Millipore</td>
			<td style="width:119px;">LIF1010</td>
			<td style="width:188px;">10 ng/mL for working media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Sylgard 184 silicone 3.9 kg</td>
			<td style="width:103px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">NC0162601</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Hydrochloric acid</td>
			<td style="width:103px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">SA56-4</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:213px;">Nitric Acid Concentrate (Certified) ACS, Fisher Chemical</td>
			<td style="width:103px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">SA95</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">ITO Glass</td>
			<td style="width:103px;">Delta Technologies</td>
			<td style="width:119px;">CG-40IN-0115</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Sodium dodecylbenzenesulfonate</td>
			<td style="width:103px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">289957-1KG</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:213px;">Pyrrole</td>
			<td style="width:103px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">131709-500ML</td>
			<td style="width:188px;">Protect pyrrole solution from light and room temperature</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:213px;">8 well glass slide chambers</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Sci Nuc&#160;</td>
			<td style="width:119px;">125658</td>
			<td style="width:188px;">Detach the cell chamber and keep it under sterilized conditions</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Flat-Surface Bracket, 3&#34;x1&#34;</td>
			<td style="width:103px;">McMaster-Carr&#160;</td>
			<td style="width:119px;">1030A4</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:213px;">TWO PART SILVER PAINT 14G</td>
			<td style="width:103px;">Electron Microscopy Sciences&#160;</td>
			<td style="width:119px;">1264214</td>
			<td style="width:188px;">Mix two parts (1:1) in plastic plate</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">DPBS, 1x, with Ca and Mg, No Phenol Red</td>
			<td style="width:103px;">Genesse&#160;</td>
			<td style="width:119px;">25-508C</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">AB2 ArunA Neural Cell Culture Media Kit</td>
			<td style="width:103px;">Aruna Biomedical&#160;</td>
			<td style="width:119px;">ABNS7013.2</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">hNP1 Human Neural Progenitor Expansion Kit</td>
			<td style="width:103px;">Aruna Biomedical&#160;</td>
			<td style="width:119px;">&#160;hNP7013.1</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:213px;">Noncontact Flow-Adjustment Valve, Nickel-Plated Brass, for 3/32&#34; to 5/8&#34; Tube OD</td>
			<td style="width:103px;">McMaster-Carr&#160;</td>
			<td style="width:119px;">5330K22</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Multimeter</td>
			<td style="width:103px;">Keysight&#160;</td>
			<td style="width:119px;">E3641A</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Wavefoam generator</td>
			<td style="width:103px;">Keysight</td>
			<td style="width:119px;">33210A-10MHz</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Pt meshes</td>
			<td style="width:103px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:119px;">298107-425MG</td>
			<td style="width:188px;">Reference electrode with dimensions, 1x1 cm</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:213px;">LIVE/DEAD Viability/Cytotoxicity Kit, for mammalian cells</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">L3224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:213px;">BDNF</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Hs02718934_s1</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">THBS1</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Hs00962908_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:213px;">GAPDH</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Hs02758991_g1</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">RNeasy Mini Kit (250)</td>
			<td style="width:103px;">Qiagen</td>
			<td style="width:119px;">74106</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">QIAshredder (250)</td>
			<td style="width:103px;">Qiagen</td>
			<td style="width:119px;">79656</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">RNase-Free DNase Set (50)</td>
			<td style="width:103px;">QIAGEN</td>
			<td style="width:119px;">79254</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:213px;">iScript cDNA Synthesis Kit, 100 x 20 &#181;L rxns</td>
			<td style="width:103px;">BIORAD</td>
			<td style="width:119px;">1708891</td>
			<td style="width:188px;"></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:213px;">TaqMan Gene Expression Master Mix</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">4369510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:213px;">7-8 Week Old, male, RNU Rats</td>
			<td style="width:103px;">NCI-Frederick</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:213px;">4-0 Ethicon Silk Suture</td>
			<td style="width:103px;">eSutures.com</td>
			<td style="width:119px;">683G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:103px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">29405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:213px;">V-1 Tabletop Laboratory Animal Anesthesia System</td>
			<td style="width:103px;">VetEquip</td>
			<td style="width:119px;">901806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:213px;">Surgicel Original Absorbable Hemostat</td>
			<td style="width:103px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">1952</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Lab Standard Stereotaxic Instrument, Rat</td>
			<td style="width:103px;">Stoelting</td>
			<td style="width:119px;">51600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:213px;">Kimberly-Clark Professional&#160;Safeskin Purple Nitrile Sterile Exam Gloves</td>
			<td style="width:103px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">19-063-130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Sterile Drape</td>
			<td style="width:103px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">DYNJSD1092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:213px;">Thermo Scientific&#160;Shandon Stainless-Steel Scalpel Blade Handle, Holds No. 20-25 Blades</td>
			<td style="width:103px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">53-34</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Walter Stern Scalpel Blade Series 300</td>
			<td style="width:103px;">Fisherbrand</td>
			<td>17-654-456</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:213px;">QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">4484642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:213px;">Frazier Micro Dissecting Hook</td>
			<td style="width:103px;">Harvard Apparatus</td>
			<td>52-2706</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

electrically conductive scaffold to modulate and deliver stem cells

Stamcellsterapi har vuxit fram som ett spännande stroke terapeutiska, men det optimala leveranssättet oklar. Medan tekniken med Mikroskop har använts i årtionden för att leverera stamceller i stroke modeller, är denna teknik begränsad av bristande förmåga att manipulera stamceller före injektion. Detta dokument specificerar en metod för att använda en elektriskt ledande polymer byggnadsställning för stamceller leverans. Elektrisk stimulering av stamceller med en ledande polymer byggnadsställning förändrar stem cellens gener som är involverade i cellöverlevnad, inflammatorisk reaktion och synaptic remodeling. Efter elektriska iordningställande transplanteras stamcellerna på schavotten intracranially i distala mellersta cerebral artär ocklusion råtta modell. Detta protokoll beskriver en kraftfull teknik för att manipulera stamceller via en ledande polymer byggnadsställning och skapar ett nytt verktyg för att ytterligare utveckla stamceller-baserad terapi.

Den schematiska Figur 1 representerar det totala arbetsflödet för elektrisk stimulering av hNPCs och eventuella efterföljande program. En nuvarande begränsning i stamcellsterapi är att stamceller utsätts för en hård efter transplantation miljö inklusive inflammation och ischemisk villkor. Dessa svåra förhållanden sannolikt begränsa deras terapeutiska effekt14,15. Användning av en ledande...

Watch this Scientific Journal Video about Electrically Conductive Scaffold to Modulate and Deliver Stem Cells at JoVE.com

Electrically Conductive Scaffold to Modulate and Deliver Stem Cells

Det här protokollet beskriver tillverkning av ett cellodlingssystem att sådd av stamceller på en ledande polymer byggnadsställning för in vitro- elektrisk stimulering och efterföljande i vivo implantation av stamceller-seedade byggnadsställning med en minimalinvasiv teknik.

Elektriskt ledande ställningen att modulera och leverera stamceller

Stem cell therapy has emerged as an exciting stroke therapeutic, but the optimal delivery method remains unclear. While the technique of microinjection ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Use of Human Perivascular Stem Cells for Bone Regeneration

Användning av mänskliga perivaskulär stamceller för benuppbyggnad

Human perivascular stem cells (PSCs) can be isolated in sufficient numbers from multiple tissues for purposes of skeletal tissue engineering1-3. PSCs are ...

Planar and Three-Dimensional Printing of Conductive Inks

Plana och tredimensionella Tryckning av ledande bläck

Printed electronics rely on low-cost, large-area fabrication routes to create flexible or multidimensional electronic, optoelectronic, and biomedical ...

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design av en cyklisk tryck Bioreaktor för Ex vivo Studie av Aorta hjärtklaffar

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells (hESC) to Different Lineages

Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells hESC to Different Lineages

Alginat mikrokapselkomposition som en 3D-plattform för förökning och differentiering av mänskliga embryonala stamceller (hESC) till olika linjer

Human embryonic stem cells (hESC) are emerging as an attractive alternative source for cell replacement therapy since they can be expanded in culture ...

Development, Expansion, and In vivo Monitoring of Human NK Cells from Human Embryonic Stem Cells (hESCs) and Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs)

Development, Expansion, and In vivo Monitoring of Human NK Cells from Human Embryonic Stem Cells hESCs and Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs

Utveckling, expansion och<em&gt; In vivo</em&gt; Övervakning av humana NK celler från mänskliga embryonala stamceller (hESCs) och och inducerad pluripotenta stamceller (iPSCs)

We present a method for deriving natural killer (NK) cells from undifferentiated hESCs and iPSCs using a feeder-free approach. This method gives rise to ...

Transplantation of Induced Pluripotent Stem Cell-derived Mesoangioblast-like Myogenic Progenitors in Mouse Models of Muscle Regeneration

Transplantation av inducerad Pluripotent Stamcell-härledd Mesoangioblast-liknande Myogena föregångare i musmodeller av muskelregenerering

Patient-derived iPSCs could be an invaluable source of cells for future autologous cell therapy protocols. iPSC-derived myogenic stem/progenitor cells ...

Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening

Beställa enskilda celler och Single Embryon i 3D Förlossning: En ny enhet för hög halt Screening

Biological cells are usually observed on flat (2D) surfaces. This condition is not physiological, and phenotypes and shapes are highly variable. Screening ...

Microdissection of Primary Renal Tissue Segments and Incorporation with Novel Scaffold-free Construct Technology

Lokalt av primära nedsatt vävnad segment och inkorporering med romanen byggnadsställning-fri konstruktion teknik

Kidney transplantation is now a mainstream therapy for end-stage renal disease. However, with approximately 96,000 people on the waiting list and only ...

Protocol for MicroRNA Transfer into Adult Bone Marrow-derived Hematopoietic Stem Cells to Enable Cell Engineering Combined with Magnetic Targeting

Protokoll för mikroRNA överföring till benmärgen-härrör hematopoetiska stamceller att aktivera Cell teknik kombinerat med magnetiska inriktning

While CD133+ hematopoietic stem cells (SCs) have been proven to provide high potential in the field of regenerative medicine, their low retention rates ...

Single-Cell Optical Action Potential Measurement in Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

Encellig optisk åtgärd potentiell mätning hos mänskliga inducerade pluripotenta stamcellsbaserade kardiomyocyter

Conventional intracellular microelectrode techniques to quantify cardiomyocyte electrophysiology are extremely complex, labor intensive, and typically ...