Name: experimental protocol for using drosophila as an invertebrate model system for toxicity testing in the laboratory
Uploaded: 2018-07-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory at JoVE.com

أيد هذا المنشور بمنحه من وزارة التعليم (العلاقات العامة جائزة #P031C160025-17، وعنوان المشروع: ج 84.031) إلى مجتمعات جامعة ولاية كولورادو-بويبلو (CSU-بويبلو) "وقف نشاط بناء" مشاركة (ج-قاعدة). ونحن نشكر "الحيوان الحالي" ونشرت السفير لتوفير الحق في استخدام النتائج ممثلة في الورقات السابقة، فضلا عن المحررين من جوف على إتاحة لنا الفرصة لنشر هذا البروتوكول. ونود أيضا أن نشكر ج-قاعدة "البرنامج"، الدكتور برايان فاندن Heuvel (ج-قاعدة وقسم علم الأحياء، والاتحاد الاجتماعي المسيحي-بويبلو)، وقسم "البيولوجيا" الاتحاد الاجتماعي المسيحي-بويبلو، غرازيانو توماس، والدكتور برنارد بوسيدينتي (قسم البيولوجيا، كلية سكيدمور)، والدكتورة كلير آريان راموس (قسم علم الأحياء، جامعة ولاية كولورادو-بويبلو) للدعم والمساعدة.

البروتوكول التالي بروتوكول تجريبية المستخدمة في تربية الأنواع في جنس المورفولوجية في المتوسط الملوثة عند الابتلاع عن طريق الفم من السم مناسب؛ أشكال أخرى من التعرض من الممكن استخدام المورفولوجية نموذج11،15،،من162...

تم إنشاء melanogaster المورفولوجية كنموذج قوي لمجموعة من العمليات البيولوجية بسبب حفظ واسعة النطاق للجينات والممرات بين13، ميلانوجاستير د والبشر14. وبرز المورفولوجية لنفس الأسباب فإن نموذج قوي للعلوم الطبية، نظام نموذج مناسب لدراسة تأثير التلوث ا...

في كل عام، حوالي 1,000 مواد كيميائية جديدة يتم تقديمها بواسطة الصناعة الكيميائية1،2؛ ومع ذلك، يتم اختبار الآثار البيئية المترتبة على نسبة صغيرة فقط من هذه المواد الكيميائية قبل توزيع2،3. على الرغم من أن الكوارث الواسعة النطاق غير المألوف، التعرض المقاسة والمزمن لمجموعة كبيرة ومتنوعة من الملوثات على نطاق واسع في كل من البشر والحيوانات البرية4،5. وكان تركيز التاريخية السمية والسمية البيئية لاختبار الفتك وواحد التعرض للمواد الكيميائية والتعرض الحاد والآثار الفسيولوجية للتعرض، كوسيلة لقياس تأثير الملوثات على بقاء6، 7 , 8 , 9 , 10-على الرغم من أن هناك تحولاً نحو النهج الأخلاقية وغير الغازية للتجارب الحيوانية، النهج الحالية تحد بسبب الدور تلك التنمية والخصائص الناشئة، والعوامل الخارجية (مثل مستوى السكان و تلعب التفاعلات على مستوى النظام الإيكولوجي) في التوسط في النهاية إيكولوجيا هاما8. ولذلك، هناك حاجة للأساليب التي تتضمن نهجاً أكثر شمولية دون التضحية بالحياة البرية و/أو الفقاريات في المختبر.
نظم نموذجية اللافقاريات، مثل melanogaster المورفولوجية، بديل جذاب لتلبية الحاجة إلى نهج أكثر شمولاً لاختبار السمية. دال-ميلانوجاستير، وضعت أصلاً كنظام نموذجي اللافقاريات للأبحاث الجينية ذات الصلة بالإنسان عن قرن11. ميلانوجاستير دال- الآن يستخدم مكاناً بارزا كبديل فقاريات نموذجي لعدة أسباب: 1) حفظ الجينات والممرات بين البشر؛ و دال-ميلانوجاستير 2) الوقت الجيل قصيرة مقارنة بنماذج الفقاريات؛ 3) رخيصة التكلفة للصيانة؛ 4) تخفيف في توليد العينات كبيرة الحجم؛ و 5) عدد كبير من نقاط النهاية المظهرية وإيكولوجيا-ذات الصلة المتاحة لاختبار11،،من1213،،من1415،16،17 .
عدة مختبرات11،15،16،17،،من1819،،من2021،22، 23 , 24 , 25 تستخدم الآن melanogaster دال- كبديل فقاريات نموذجي لاختبار السمية لفهم آثار التلوث على البشر. ويمكن استخدام الأنواع البرية المحلية من المورفولوجية ، أيضا، كنماذج سمية للحيوانات البرية (والبشر) للرد على إيكولوجيا-، وسلوكيا-، والمسائل المتصلة تقحم على مستويات التنظيم البيولوجي متعددة. استخدام الأنواع ضمن جنس المورفولوجية كنموذج، عدة نقاط النهاية للقياس هي ممكن11،،من1516،،من1819،20 ،،من2122،23،،من2425. In addition، باستخدام نموذج المورفولوجية ، يمكن السميات: 1) أخلاقيا ربط آثار متعددة المستويات البيولوجية للمنظمة؛ 2) إدماج دور العوامل الطارئة والتنمية؛ 3) دراسة نقاط النهاية إيكولوجيا هاما (بالإضافة إلى نقاط هامة طبيا)؛ 4) اختبار الإجهاد متعددة في وقت واحد؛ 5) واختبار طويل الأجل بين الأجيال (مثل التطورية وتخذها) المترتبة على العوامل المسببة للإجهاد. ولذلك، استخدام المورفولوجية كنظام نموذجي تمكن العديد من النهج، لا تقتصر على دراسة النهج الميكانيكية مع سلالات فطري من ميلانوجاستير دال في المختبر.
في هذه الورقة، نقدم أساليب تربية وجمع المورفولوجية للرد على مختلف الأسئلة السمية. وبشكل أكثر تحديداً، يمكننا وصف منهجية 1) تربية المورفولوجية في المتوسط الذي تغلب عليه أسهم مع واحد أو أكثر من الملوثات؛ 2) جمع المورفولوجية في جميع أنحاء التنمية (مثلاً تجول يرقات الطور الثالث والحالات الخوادر وحديثا اكلوسيد الكبار والبالغين ناضجة)؛ و 3) تربية المورفولوجية في المتوسط الملوثة إلى اختبار بين الأجيال وانتقال تخذها، فضلا عن التطوري الآثار المترتبة على التعرض للسمية طويلة الأجل. باستخدام هذا البروتوكول، السابقة الكتاب18،19،20،21،22،،من2324قد ذكرت،25 الآثار الفسيولوجية والجينية والسلوكية المختلفة للتنمية يؤدي التعرض (Pb2 +). ويتيح هذا البروتوكول السميات استخدام نهج أكثر شمولية سمية، هو أمر أساسي لفهم كيف الملوثات عوامل الخطر على البشر والحياة البرية في بيئة ملوثة على نحو متزايد.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Carolina Biological Instant Drosophila Medium Formula 4-24</td>
			<td>Carolina Biological</td>
			<td>173204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vials, Narrow (PS), Polystyrene, Superbulk, 1000 vials/unit</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>32-116SB</td>
			<td>Used to store flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flugs Closures for vials and bottles, Narrow plastic vials</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>49-102</td>
			<td>Used to store flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardboard trays, trays only, narrow</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>32-124</td>
			<td>Used to organize populations of flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardboard trays, dividers only, narrow</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>32-126</td>
			<td>Used to organize populations of flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160;Nalgene Square Wide-Mouth HDPE Bottles with Closure</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>03-312D</td>
			<td>Useful for storage of contaminants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160;Nalgene Color-Coded LDPE Wash Bottles</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>03-409-17C</td>
			<td>Useful for storage of contaminants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf&#160;Repeater M4 Manual Handheld Pipette Dispenser</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>14-287-150</td>
			<td>Used to prepare medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Combitips Advanced Pipetter Tips - Standard, Eppendorf Quality Tips</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>13-683-708</td>
			<td>Used to prepare medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flypad, Standard Size (8.1 X 11.6cm)</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>59-114</td>
			<td>Used to anesthetize flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flystuff foot valve</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>59-121</td>
			<td>Used to anesthetize flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubing, green (1 continguous foot/unit)</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>59-124G</td>
			<td>Used to anesthetize flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral Oil, Light, White, High Purity Grade, 500 mL HDPE Bottle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97064-130</td>
			<td>Used to make a morgue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Erlenmeyer Flask Set - 3 Sizes - 50, 150 and 250ml, Karter Scientific 214U2</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Used to make a morgue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BGSET5 Glass Beaker Set Of 5</td>
			<td>Walmart</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inbred or wildtype line of Drosophila</td>
			<td>Bloomington Drosophila Stock Center at Indiana University</td>
			<td></td>
			<td>https://bdsc.indiana.edu</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wild popultions of Drosophila</td>
			<td>UC San Diego Drosophila Stock Center</td>
			<td></td>
			<td>https://stockcenter.ucsd.edu/info/welcome.php</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

experimental protocol for using drosophila as an invertebrate model system for toxicity testing in the laboratory

الخصائص الناشئة والعوامل الخارجية (السكان-مستوى النظام الإيكولوجي والتفاعلات، وبخاصة) تؤدي أدواراً هامة في التوسط في النهاية إيكولوجيا هاما، على الرغم من أنها نادراً ما يعتبر في دراسات السمية. ميلانوجاستير دال- تبرز كنموذج علم السموم للتأثيرات السلوكية والعصبية والوراثية سميات، على سبيل المثال لا الحصر. الأهم من ذلك، يمكن استخدام الأنواع في جنس المورفولوجية كنظام نموذجي لنهج إطار تكاملي لدمج الخصائص الناشئة والإجابة على الأسئلة ذات الصلة بإيكولوجيا في أبحاث علم السموم. الهدف من هذه الورقة تقديم بروتوكول لتعريض الأنواع في جنس المورفولوجية للملوثات التي ستستخدم كنظام نموذجي لمجموعة من النواتج المظهرية والمسائل ذات الصلة بإيكولوجيا. وبشكل أكثر تحديداً، يمكن استخدام هذا البروتوكول ل 1) ربط عدة مستويات التنظيم البيولوجي وفهم تأثير سميات في لياقة على مستوى الفرد والسكان على حد سواء؛ 2) اختبار تأثير سميات في مراحل مختلفة من التعرض الإنمائية؛ 3) اختبار الآثار الأجيال والتطورية للملوثات؛ و 4) اختبار الملوثات وضغوطات متعددة في وقت واحد.

بتعريض شفويا المورفولوجية contaminant(s) في جميع أنحاء التنمية، يمكن اختبار مختلف الأسئلة السمية بتعريض المورفولوجية على مختلف مستويات التنظيم البيولوجي. ويعرض هذا القسم الممثل النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام هذا البروتوكول في الورقات المنشورة سابقا<sup class="xre...

Watch this Scientific Journal Video about Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory at JoVE.com

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

في هذه الورقة، نقدم بروتوكول مفصل لتعريض الأنواع في جنس المورفولوجية للملوثات بالهدف دراسة أثر التعرض على مجموعة من النواتج المظهرية في مراحل إنمائية مختلفة وأكثر من جيل واحد.

بروتوكول تجريبي لاستخدام المورفولوجية كنظام نموذجي اللافقاريات لاختبار السمية في المختبر

Emergent properties and external factors (population-level and ecosystem-level interactions, in particular) play important roles in mediating ...

Research

JoVE Journal

Biology

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

اختبار تسامح النيكوتين في المن باستخدام تجربة حمية الاصطناعي

Plants may upregulate the production of many different seconday metabolites in response to insect feeding. One of these metabolites, nicotine, is well ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

على المدى الطويل اختبار السمية المهلكة مع القشريات الأرتيميا franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Investigating the Spreading and Toxicity of Prion-like Proteins Using the Metazoan Model Organism C. elegans

Investigating the Spreading and Toxicity of Prion-like Proteins Using the Metazoan Model Organism C. elegans

التحقيق في نشر وسمية البروتينات مثل بريون باستخدام Metazoan نموذج حي<em&gt; C. ايليجانس</em

Prions are unconventional self-propagating proteinaceous particles, devoid of any coding nucleic acid. These proteinaceous seeds serve as templates for ...

A Protocol for Using Gene Set Enrichment Analysis to Identify the Appropriate Animal Model for Translational Research

تعيين بروتوكول لاستخدام الجينات إثراء التحليل لتحديد نموذج الحيوان المناسب للبحوث متعدية

Recent studies that compared transcriptomic datasets of human diseases with datasets from mouse models using traditional gene-to-gene comparison ...

Laboratory Protocol for Genetic Gut Content Analyses of Aquatic Macroinvertebrates Using Group-specific rDNA Primers

بروتوكول مختبر لتحليل محتوى الأمعاء الوراثية ماكروينفيرتيبراتيس المائية استخدام مجموعة محددة المتاشب كبسولة تفجير

Analyzing food webs is essential for a better understanding of ecosystems. For example, food web interactions can undergo severe changes caused by the ...

Establishment of an Extracellular Acidic pH Culture System

إنشاء درجة الحموضة خارج الخلية الحمضية منظومة الثقافة

Conditions of the tumor microenvironment, such as hypoxia or nutrient starvation, play critical roles in cancer progression and malignancy. However, the ...

A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish (Nothobranchius furzeri)

A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

بروتوكول لمختبر الإسكان من الفيروز Killifish (فورزيري نوثوبرانتشيوس)

The development of husbandry practices in non-model laboratory fish used for experimental purposes has greatly benefited from the establishment of ...

Protocols for Testing the Toxicity of Novel Insecticidal Chemistries to Mosquitoes

بروتوكولات لاختبار السمية لرواية كيمياء مبيدات الحشرات للبعوض

New classes of insecticides with novel modes of action are needed to control insecticide resistant populations of mosquitoes that transmit diseases such ...

An Air-liquid Interface Bronchial Epithelial Model for Realistic, Repeated Inhalation Exposure to Airborne Particles for Toxicity Testing

نموذج ظهاري لواجهة هوائية-سائلة لتعرض واقعي ومكرر للاستنشاق للجسيمات المحمولة جواً لاختبار السمية

For toxicity testing of airborne particles, air-liquid interface (ALI) exposure systems have been developed for in vitro tests in order to mimic realistic ...