Name: experimental protocol for using drosophila as an invertebrate model system for toxicity testing in the laboratory
Uploaded: 2018-07-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory at JoVE.com

פרסום זה נתמך על ידי מענק של משרד החינוך (PR פרס # 17-P031C160025, כותרת פרוייקט: 84.031 C) לקהילות קולורדו סטייט-פואבלו (CSU-Pueblo) כדי לבנות גזע פעיל האירוסין (C-בסיס). אנו מודים זואולוגיה הנוכחי ופרסמה Elsevier למתן זכות שימוש בו את התוצאות נציג עבודות קודמות, כמו גם העורכים של יופיטר סיפק לנו ההזדמנות לפרסם פרוטוקול זה. כן נרצה להודות C-בסיס התוכנית, ד ר בריאן סטאש מציע (C-בסיס, המחלקה לביולוגיה, CSU-Pueblo), הפקולטה לביולוגיה CSU-פואבלו, תומאס דה גרציאנו Graziano ד ר ברנרד Possidente (המחלקה לביולוגיה, סקידמור המכללה), ד ר קלייר וריאן ראמוס (החוג לביולוגיה, אוניברסיטת מדינת קולורדו-Pueblo) על תמיכתם סיוע.

פרוטוקול הבאים הוא טיפול נסיוני נהגה אחורי מינים של הסוג דרוזופילה באמצעי מזוהמים בעת בליעה דרך הפה של רעלן מתאים; צורות אחרות של חשיפה אפשריים באמצעות דרוזופילה דגם11,15,16,26. בשיטות המתוארות פרוטוקול זה שתוארו...

דרוזופילה melanogaster הוקם כמודל עוצמה עבור מגוון רחב של תהליכים ביולוגיים עקב השימור נרחב של גנים מסלולים בין13, melanogaster ד . ובני14. מאותן סיבות שזה מודל רב עוצמה עבור מדע הרפואה, דרוזופילה התפתחה מערכת מודל מתאים לחקור את ההשפעה של זיהום אנתרופוגני?...

בכל שנה, כ- 1,000 כימיקלים חדשים מוצגים על-ידי1,התעשייה הכימית2; עם זאת, ההשפעות הסביבתית של רק אחוז קטן של כימיקלים אלה נבדקים לפני הפצה2,3. אסונות בקנה מידה גדול אמנם נדיר, חשיפה לא קטלני וכרוני מגוון רחב של מזהמים מתאפיינות בני אדם והן חיות הבר4,5. המוקד ההיסטורית של ecotoxicology, טוקסיקולוגיה סביבתית היה לבחון את הקטלניות, החשיפה כימי יחיד, חשיפה אקוטית, את ההשפעות הפיזיולוגיות של חשיפה, כאמצעי למדידת ההשפעה של מזהמים על הישרדות6, 7 , 8 , 9 , 10. למרות שיש שינוי לעבר גישות מוסריות לא פולשנית לניסויים בבעלי חיים, לגישות הם הגבלת בגלל התפקיד הזה פיתוח נכסים מתהווים, גורמים חיצוניים (כגון האוכלוסייה ברמת ו רמת המערכת האקולוגית אינטראקציות) לשחק תיווכה נקודות קצה אקולוגי-חשוב8. לכן, אין צורך בשיטות המשלבות בגישה הוליסטית יותר מבלי להתפשר על חיות הבר ו/או בעלי חוליות במעבדה.
מערכות מודל הגעה, כגון דרוזופילה melanogaster, הם אלטרנטיבה אטרקטיבית לענות על הצורך בגישה הוליסטית יותר בדיקות רעילות. ד melanogaster, פותחה במקור כמערכת מודל הגעה עבור האדם הקשורות מחקר גנטי לפני כמאה11. ד melanogaster עכשיו באופן בולט משמש כתחליף דגם חוליות מכמה סיבות: 1) שימור גנים מסלולים בין melanogaster ד ובני; 2) זמן דור קצר בהשוואה מודלים חוליות; 3) עלות זולה תחזוקה; 4) להקל על מנת לייצר גדלי מדגם גדולים; ו- 5) שפע של נקודות קצה פנוטיפי ו אקולוגי-רלוונטיות זמינות לבדיקה11,12,13,14,15,16,17 .
מספר מעבדות11,15,16,17,18,19,20,21,22, 23 , 24 , 25 . עכשיו משתמש melanogaster ד כתחליף דגם חוליות לבדיקת רעילות כדי להבין את ההשפעות של זיהום על בני אדם. מיני בר מקומיים דרוזופילה יכול להיות מנוצל, כמו גם, כמודלים רעילות עבור חיות הבר (ובני האדם) לענות באופן אקולוגי-, התנהגותית-, שאלות רלוונטיות אבולוציונית ברמות מרובות הביולוגי של הארגון. באמצעות מינים בתוך הסוג דרוזופילה כמודל, מספר נקודות הקצה למדידה הם אפשריים11,15,16,18,19,20 ,21,22,23,24,25. . In addition, באמצעות מודל דרוזופילה , יכול toxicologists: 1) מבחינה מוסרית לקשר אפקטים ברמות מרובות הביולוגי של הארגון; 2) לשלב את התפקיד של הגורמים מתהווים והתפתחות; 3) מחקר אקולוגי-חשוב נקודות הקצה (בנוסף חשוב מבחינה רפואית הקצה); 4) בדיקת לחצים מרובים בו זמנית. 5) ומבחן ארוך טווח multigenerational (למשל אבולוציוני ו transgenerational) ההשלכות של לחצים. לכן, השימוש דרוזופילה כמערכת מודל מאפשר מספר רב של גישות, לא רק ללמוד גישות מכניסטית עם המפגרים זני melanogaster ד במעבדה.
בנייר זה, אנו מציגים את השיטות לגידול ואיסוף דרוזופילה לענות על שאלות שונות רעילות. ליתר דיוק, אנו מתארים את המתודולוגיה 1) לגידול דרוזופילה בינוני עם אחד או יותר מזהמים; 2) איסוף את דרוזופילה במהלך פיתוח (למשל נודדים הזחלים השלישי-לחלל, המקרים הגולמי, ומבוגרים לאחרונה eclosed מבוגרים); ו 3) לגידול דרוזופילה במדיום מזוהמים מבחן דורי שידור transgenerational, כמו גם השלכות אבולוציונית של חשיפה toxicant לטווח ארוך. שימוש זה פרוטוקול, הקודם מחברים18,19,20,21,22,23,24,25 דיווחו אפקטים פיזיולוגיים גנטיים, התנהגותיים שונים של התפתחותית עופרת (Pb2 +) חשיפה. פרוטוקול זה מאפשר toxicologists להשתמש בגישה הוליסטית יותר רעילות, שהיא הכרחית להבנת כמה מזהמים הם גורמי סיכון הן בני אדם וחיות בסביבה מזוהם אי פעם יותר ויותר.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Carolina Biological Instant Drosophila Medium Formula 4-24</td>
			<td>Carolina Biological</td>
			<td>173204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vials, Narrow (PS), Polystyrene, Superbulk, 1000 vials/unit</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>32-116SB</td>
			<td>Used to store flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flugs Closures for vials and bottles, Narrow plastic vials</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>49-102</td>
			<td>Used to store flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardboard trays, trays only, narrow</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>32-124</td>
			<td>Used to organize populations of flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardboard trays, dividers only, narrow</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>32-126</td>
			<td>Used to organize populations of flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160;Nalgene Square Wide-Mouth HDPE Bottles with Closure</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>03-312D</td>
			<td>Useful for storage of contaminants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160;Nalgene Color-Coded LDPE Wash Bottles</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>03-409-17C</td>
			<td>Useful for storage of contaminants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf&#160;Repeater M4 Manual Handheld Pipette Dispenser</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>14-287-150</td>
			<td>Used to prepare medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Combitips Advanced Pipetter Tips - Standard, Eppendorf Quality Tips</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>13-683-708</td>
			<td>Used to prepare medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flypad, Standard Size (8.1 X 11.6cm)</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>59-114</td>
			<td>Used to anesthetize flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flystuff foot valve</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>59-121</td>
			<td>Used to anesthetize flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubing, green (1 continguous foot/unit)</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>59-124G</td>
			<td>Used to anesthetize flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral Oil, Light, White, High Purity Grade, 500 mL HDPE Bottle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97064-130</td>
			<td>Used to make a morgue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Erlenmeyer Flask Set - 3 Sizes - 50, 150 and 250ml, Karter Scientific 214U2</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Used to make a morgue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BGSET5 Glass Beaker Set Of 5</td>
			<td>Walmart</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inbred or wildtype line of Drosophila</td>
			<td>Bloomington Drosophila Stock Center at Indiana University</td>
			<td></td>
			<td>https://bdsc.indiana.edu</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wild popultions of Drosophila</td>
			<td>UC San Diego Drosophila Stock Center</td>
			<td></td>
			<td>https://stockcenter.ucsd.edu/info/welcome.php</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

experimental protocol for using drosophila as an invertebrate model system for toxicity testing in the laboratory

נכסים מתהווים וגורמים חיצוניים (האוכלוסייה וברמת ברמת המערכת האקולוגית אינטראקציות, בפרט) משחק תפקידים חשובים במתווכים הקצה חשוב מבחינה אקולוגית, למרות שהם נחשבים לעתים נדירות מחקרים רעילות. ד melanogaster מתגלה כמודל הרעלים עבור התנהגותית נוירולוגית, גנטי ההשפעות של חשיפה לרעלים, שם כמה. חשוב מכך, מינים של הסוג דרוזופילה יכול להיות מנוצל כמו מערכת מודל לגישה אינטגרטיבית מסגרת לשלב נכסים מתהווים ולענות על שאלות רלוונטיות מבחינה אקולוגית במחקר הרעלים. מטרת מאמר זה היא לספק פרוטוקול חשיפת מינים של הסוג דרוזופילה לחומרים מזהמים כדי לשמש כמערכת מודל עבור מגוון של פלטים פנוטיפי, שאלות רלוונטיות מבחינה אקולוגית. ליתר דיוק, פרוטוקול זה יכול לשמש כדי 1) לקשר מספר רמות ביולוגיות של ארגון ולהבין את ההשפעה של חשיפה לרעלים על שני הפרט ואת האוכלוסייה-ברמת הכושר; 2) לבחון את ההשפעה של חשיפה לרעלים בשלבים שונים של חשיפה התפתחותי; 3) לבדוק את ההשלכות multigenerational ואבולוציוני של מזהמים; . ו-4) בדיקת לחצים וגורם לניתוקו מרובים בו-זמנית.

מאת אורלית שחשף דרוזופילה contaminant(s) במהלך פיתוח, שאלות רעילות שונים יכול להיבדק על ידי חשיפת דרוזופילה ברמות שונות של הארגון הביולוגי. סעיף זה מציג נציג התוצאות המתקבלות באמצעות פרוטוקול זה מאמרים שפורסמו בעבר23,24. בפרט, פרוטוקול ז...

Watch this Scientific Journal Video about Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory at JoVE.com

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

בנייר זה, אנו מספקים פרוטוקול מפורט עבור חשיפת מינים של הסוג דרוזופילה לחומרים מזהמים עם המטרה של הלומדים את ההשפעה של חשיפה על מגוון של תפוקות פנוטיפי בשלבים התפתחותיים שונים, יותר מאשר דור אחד.

נסיוני באמצעות דרוזופילה כמערכת מודל הגעה לבדיקת רעילות במעבדה

Emergent properties and external factors (population-level and ecosystem-level interactions, in particular) play important roles in mediating ...

Research

JoVE Journal

Biology

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

בדיקת סובלנות ניקוטין ב כנימות באמצעות ניסוי דיאט מלאכותית

Plants may upregulate the production of many different seconday metabolites in response to insect feeding. One of these metabolites, nicotine, is well ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

לטווח ארוך רעילות מבחן קטלני עם לסרטן הארטמיה franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Investigating the Spreading and Toxicity of Prion-like Proteins Using the Metazoan Model Organism C. elegans

Investigating the Spreading and Toxicity of Prion-like Proteins Using the Metazoan Model Organism C. elegans

חוקר את החלבונים כמו פריון-הפצת ורעילות של שימוש במטזואניים דגם אורגניזם<em&gt; C. elegans</em

Prions are unconventional self-propagating proteinaceous particles, devoid of any coding nucleic acid. These proteinaceous seeds serve as templates for ...

A Protocol for Using Gene Set Enrichment Analysis to Identify the Appropriate Animal Model for Translational Research

פרוטוקול להצפנה באמצעות גנים להגדיר העשרה ניתוח כדי לזהות את המודל החייתי המתאים עבור המחקר Translational

Recent studies that compared transcriptomic datasets of human diseases with datasets from mouse models using traditional gene-to-gene comparison ...

Laboratory Protocol for Genetic Gut Content Analyses of Aquatic Macroinvertebrates Using Group-specific rDNA Primers

פרוטוקול המעבדה הגנטית ניתוחים תוכן הבטן של הימית Macroinvertebrates באמצעות קבוצה ספציפית rDNA תחל

Analyzing food webs is essential for a better understanding of ecosystems. For example, food web interactions can undergo severe changes caused by the ...

Establishment of an Extracellular Acidic pH Culture System

הקמת מערכת התרבות pH חומצי חוץ-תאית

Conditions of the tumor microenvironment, such as hypoxia or nutrient starvation, play critical roles in cancer progression and malignancy. However, the ...

A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish (Nothobranchius furzeri)

A Protocol for Laboratory Housing of Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

פרוטוקול עבור המעבדה דיור של טורקיז דגים גמבוזיים (Nothobranchius furzeri)

The development of husbandry practices in non-model laboratory fish used for experimental purposes has greatly benefited from the establishment of ...

Protocols for Testing the Toxicity of Novel Insecticidal Chemistries to Mosquitoes

פרוטוקולים לבדיקת הרעילות של הרומן בדיקות, חרקים הביוכימיה על היתושים

New classes of insecticides with novel modes of action are needed to control insecticide resistant populations of mosquitoes that transmit diseases such ...

An Air-liquid Interface Bronchial Epithelial Model for Realistic, Repeated Inhalation Exposure to Airborne Particles for Toxicity Testing

מודל אפיתל ממשק נוזלי אוויר לחשיפה מציאותית וחוזרת ונשנית לחלקיקים מוטסים לבדיקות רעילות

For toxicity testing of airborne particles, air-liquid interface (ALI) exposure systems have been developed for in vitro tests in order to mimic realistic ...