Name: de novo generation of somatic stem cells by yap/taz
Uploaded: 2018-05-07T14:00:00
Duration: 13 min 5 s
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우리는 tetO 얍S127A 마우스;의 선물에 감사 F. 카 마르고 R26-rtTAM2 마우스 (주식 #006965)는 잭슨 실험실에서 구입 했다. 우리는 키 아 라 Frasson와 주세페 바소 FACS 절차에 대 한 감사. 이 작품 AIRC 특별 프로그램 분자 임상 종양학 'mille 당 5 '에 의해 지원 되 고는 AIRC PI-그랜트 머리글, 그리고 Epigenetics 플래그십 프로젝트 CNR Miur S.P.에 부여 이 프로젝트는 유럽 연합의 수평선 2020 연구 및 혁신 프로그램 (부여 계약 DENOVOSTEM No. 670126)에서 유럽 연구 회의 (ERC)에서 자금을 받았다.

<ol>
	<li>Panciera, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+Expandable+Tissue-Specific+Stem/Progenitor+Cells+through+Transient+Expression+of+YAP/TAZ.">Induction of Expandable Tissue-Specific Stem/Progenitor Cells through Transient Expression of YAP/TAZ.</a> Cell Stem Cell. 19 (6), 725-737 (2016).</li><li>Bar-Nur, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+conversion+induced+by+pluripotency+factors+involves+transient+passage+through+an+iPSC+stage.">Lineage conversion induced by pluripotency factors involves transient passage through an iPSC stage.</a> Nat Biotechnol. 33 (7), 761-768 (2015).</li><li>Xu, J., Du, Y., Deng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+lineage+reprogramming:+strategies,+mechanisms,+and+applications.">Direct lineage reprogramming: strategies, mechanisms, and applications.</a> Cell Stem Cell. 16 (2), 119-134 (2015).</li><li>Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+Development+and+Disease+with+Organoids.">Modeling Development and Disease with Organoids.</a> Cell. 165 (7), 1586-1597 (2016).</li><li>Blanpain, C., Fuchs, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+plasticity.+Plasticity+of+epithelial+stem+cells+in+tissue+regeneration.">Stem cell plasticity. 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저자 아무 경쟁 금융 관심사를 선언합니다.

여기 선물이 그들의 해당 조직의 특정 조상 세포 (또는 ySCs)로 다른 조직의 비보 전 말기 분화 상피 세포를 프로그램을 프로토콜 얍의 과도 식으로 보고 이전1. 우리 두 절차 세부: lentiviral 벡터와 두 번째 하나는 바이러스 감염을 방지 하 고 유전자 변형 얍 식의 활용을 통해 셀 FACS 정화의 프로그래밍 허용 하나. 각 프로토콜 효율적인 전략을 제시 하 고 문화 기본 차별화 된 세포와 세 하 전략 짖 차별화 된 세포에 유전자 발현에 드 노 보 체세포 조직-특정 확장 줄기 세포 (참조 생성 그림 1A 와 2A음모).
우리는 우리가 결코 부정적인 컨트롤 샘플 (그림 1C 와 2c)에서 어떤 결과 감지 하는 사실에 의해 증명 여기 제시 효과적으로 격리 전략의 차별화 된 셀의 순수한 인구 격리 시연 했다.
기본 유 방 LD 셀의 프로그래밍에 대 한이 연구에 사용 된 lentiviral 벡터 doxycycline 유도할 수 있는 transgene 식;의 꽉 컨트롤의 가능성을 제공 하는 이 설정에 있으며 exogenous 얍 오프에 식을 것 이다. 특히 주의 프로그래밍 효율성 측면에서 해로운 수 과도 한 바이러스 titer의 사용을 피하에 두어야 한다. 주요 포상 세포의 경우 우리는 최소한의 조작으로 얍 따라 프로그래밍를 완전히 유전자 변형 방법 전환. 이 후자의 전략도 고립 된 포상 클러스터는 거의 순종 lentiviral 감염 하 고 매우 깨지기 쉬운 기본 췌 acini 특히 적합 이다. 유전자 변형 전략 고용 유전자 발현의 꽉 컨트롤 doxycycline 종속 lentiviral 벡터의 동일한 이점을 제공 합니다. 또한, 유전자 변형 전략 기본 췌 acini와 착취는 훨씬 높은 재활 효율 유 LD 세포의 바이러스 성 유도 프로그래밍에 비해의 추가적인 장점을 맺는 다. 다른 조직에서 파생 된 셀에 연결 된 다른 본질적인 소성 넘어 췌 장 프로그래밍의 더 높은 속도 모두 균일 하 고 자치 얍 식에 연관 된 식의 높은 효율에서 파생 될 수 있습니다. explanted 셀입니다. 특히, 우리는 외 인 야프는 더 이상 필요 (yMaSC 식민지 그리고 yDucts), ySCs의 생성 후 자신의 자기 재생 능력을 영향을 주지 않고 증명 하고있다. YSCs 생 얍/TAZ를 다시 활성화 하 고 꺼지면 exogenous 얍1자기 갱신에 대 한 그들을 사용 하는 때문입니다.
우리는 ySCs 유전자 계보 추적 유효성 검사1통해 우리의 재활 실험의 원래 셀을 제어 하 여 차별화 된 세포에서 실제로 등장 하는 개념 검증.
광범위 한 특성ySCs의 표시는 일반 체세포 SCs1 로 생성 프로그래밍 유도 하는 YAP) transcriptomic 수준에서 ySCs 네이티브 SCs;와 대규모 중복 표시 ii) ySCs 감 별 법 잠재력을 표시 하 고의 그들의 조직의 정체성을 항상 제한 multilineage 자손을 생성할 수 있습니다. ySCs iii) 변형 비 고 비 tumorigenic 때 생체 내에이식.
여기 우리 또한 유지 하 고 문화에 확장 하는 절차를 설명 100% 지하실 멤브레인 매트릭스 hydrogels에 포함 된 yMaSCs와 organoids로 yDucts. 자기 조직에 대 한 이러한 조건이 허용 stemness 속성 장기 문화에의 유지 보수를 보장 하는 3 차원 organoids에 ySCs의 다운스트림 분석 및 응용 프로그램에 대 한 것입니다 인구 줄기 이러한 확장을 사용. 알 수 없는 이유로, 우리는 yMaSC를 실패 했습니다 배치 하 여 organoids 감염 organoid 문화 조건에 직접 LD 셀 플라스틱 조직 문화 접시; doxycycline 치료 후 7 일 즉, 유 방 식민지 상태에서 중간 성장 단계는 필수적입니다. 우리의 손에 네이티브 MaSCs organoid 문화에 뿌리고 전에 유 방 식민지 상태를 요구 한다. 또한, 가장 효율적인 organoid 파생물은 우리가 단일 세포로 기본 식민지를 해리를 방지 하지만 오히려 organoid 문화 조건에 그대로 식민지를 전송 때 얻어진 다.
Organoid 문화 조건 또한 ySCs, cryopreserve에 organoids cryopreservation 질소 목욕에 있는 이전 셀 분리를 피하고 그들의 행렬에서 복구 되는 주는 장점은 곰.
제시 하는 절차를 프로그래밍 하는 얍 (우리는 테스트 유 방, 췌 장 및 신경 세포를 사용 하 여) 그들의 해당 조직 관련 줄기 세포로 다른 성인 조직에서 파생 하는 뚜렷한 차별화 된 셀 형식을 변환할 수 있습니다1. Ipsc 또는 기타 재활 노력에서 차이에서 얍/유도 SCs 근원의 그들의 직물의 기억을 유지할 수 있다. 메모의 세포 줄기 같은 속성 부여로 체세포의 탈 분화 세포 운명 소성의 유일한 형태 이다 하 고 상처 치유5,17 을 지원 하 고 조직 손상 후 예 vivo에서 관찰 프로그래밍 , 18 , 19 , 20. 그것은 주목할 만한 야프와 TAZ는 크게 일반 항상성 위해 불가결 하지만 여러 조직11,21조직 수리를 위해 중요 한. 일관 되 게 여기 설명 된 재활 단계의 생리 적 기능, 얍/TAZ 최근 표시 되었습니다 발생으로 성인 장 셀의 변환 하 여 궤 양성 대 장 염 환자의 마우스 모델에서 장 재생에 필요한 것으로 태아 창 자19의 기능을 표시 하는 수리 상피 지금까지 시험관을 잡으려고 도전 상태 체세포 줄기 세포를 생성 하는 수단을 제공 하 여 현재 유도 셀 소성 전략 확장 따라서 얍 프로그래밍 합니다. 이 방법은 또한 인간 파생 셀에 확장 하는 경우 체세포 stemness 상태의 연구 재생 의학 응용 프로그램에서 광범위 한 관련 되 고 체세포의 확장을 위한 줄기 세포에 생체 외에서.

조직의 특정 체세포 줄기 세포 (SCs) 부상 후 조직 재생 및 복구에 대 한 중요 하다. 쉽게 분리 하 고 unlimitedly 확장 한다 확장 ex vivo 체세포 SCs 나타냅니다 중요 한 문제가 잠재적인 재생 치료, 뿐만 아니라 기본 연구 및 질병 모델링에 SC 응용 프로그램에 대 한 가능성. 하지만이 방향으로 진행, 다양 한 상피 장기 체 외의 SC 상태 캡처의 어려움에 의해 제한 되었습니다. 실제로, 여러 성인 조직에서 거주 SCs 수 있습니다 존재 하지 쉽게 사용할 수 없습니다 또는 그들의 번호와 재생 잠재력 노화 또는 질병 조건에 의해 침식 수 있습니다. 2016 년, 우리는 그 표현의 단일 transcriptional coactivator 보고 하 여이 간격을 채우기 위해 시작 얍 (예-관련 된 단백질) 또는 말기 차별화 된 세포로 그것의 밀접 하 게 관련된 단백질 TAZ (PDZ 모티브로 transcriptional 활성 제), 효율적으로 운영 및 분자로 그들의 해당 조직의 특정 SCs1분간 되지 않은 기능, 확장, 비 tumorigenic, 자가 세포 인구를 만듭니다. 펄스 지속 얍 또는 몇 일 동안 TAZ 활동 자체 갱신 체세포 SCs의 외관을 유도 하기에 충분. 이것은 소성 얍/TAZ1식 추가 없이 셀 세대를 통해 전달 될 수 있다로 연속 transgene 식에 의존은 더 이상 안정 된 상태 이다. 프로토콜 제시 여기 내용은 유선 및 췌 장,이 조직의 차별화 된 세포에서 시작의 드 노 보 상피 줄기/뿌리 세포를 생성 하는 데 사용 되는 절차. 이 절차는 현재 프로그래밍/transdifferentiation 경기장에서 블랙 박스를 채웁니다. 주요 활동 방향으로 지금까지 실제로 셀 전환 유도 만능 줄기 세포 (iPSC) 상태로, 이러한 배아의 변환 다음에 중심으로 고로 만능 SCs는 더 세포 분화. 그러나, Ipsc tumorigenic는 한 번 그들의 완전 하 고 효율적인 차별화2에 대 한 프로토콜 개발의 필요성을 제기 하는 성인 조직에 도입. 그러나,이 감 별 법 단계 가능한 경우에 온다 장기 확장성, 자기 조직 및 기관 repopulation 잠재력의 가격. 이들은 일반 생 조직 관련 SCs의만 및 현재 설명된 유도 하는 YAP SCs (ySCs)의 실제로 장기 재생을 위한 필수 특성입니다. 마찬가지로, 다양 한 녹음 방송 요인 또한 생성의 칵테일을 사용 하 여 다른 한 셀 형식의 직접 transdifferentiation 필수 증식 stemness 잠재적인3부족 세포 분화.
여기 설명 하는 절차 또한 활용 최근에 소개 된 organoid 기술, 여 생 SCs 확장 될 수 있다 및 비보 전4분화. 유도 하는 YAP SCs는 생 SCs 존재 하지 않는 실험, 생물 학적 또는 질병 조건 에서도 organoid 형성 SCs를 생성할 수 있습니다. 우리는, 다른 재활 절차와 차이에 셀 소성 얍에 의해이 수의 유형 생활 조직에서 발생 하는 사우스 캐롤라이나와 같은 상태에 복귀의 유일한 형태에 해당 수 있습니다 싶습니다. 사우스 캐롤라이나-같은 특성의 획득 조직 복구 또는 종양 활성화5와 연결 되었습니다. 비록 여러 성인 조직의 항상성 위해 불가결, 야프 TAZ는 재생, 종양 성장 및 체 외1,6,,78 체세포 SCs의 확장에 대 한 절대적으로 필수 9,10,,1112

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1099">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">10 mL sterile syringes</td>
			<td style="width:123px;">Rays</td>
			<td style="width:112px;">10LC</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100 mm&#160; cell strainer</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352360</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">15 mL sterile conical tubes</td>
			<td style="width:123px;">Corning</td>
			<td style="width:112px;">430052</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">24-well ultra low attachment plates</td>
			<td style="width:123px;">Costar</td>
			<td style="width:112px;">3473</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">40 mm cell strainers</td>
			<td>Corning</td>
			<td style="width:112px;">352340</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">48-well multiwell plates</td>
			<td style="width:123px;">Corning</td>
			<td style="width:112px;">353078</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">50 mL sterile conical tubes</td>
			<td style="width:123px;">Corning</td>
			<td style="width:112px;">430290</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">6-well multiwell plates</td>
			<td style="width:123px;">Corning</td>
			<td style="width:112px;">353046</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Advanced DMEM/F12</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td style="width:112px;">12634028</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">B27 supplement (50x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504001</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BPE</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td>13028014</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BSA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9418</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">Collagenase, type I</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>17018029</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">dexamethasone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4902&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dispase</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td style="width:112px;">1705-041</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">Disposable scalpels</td>
			<td style="width:123px;">Swann-Morton</td>
			<td style="width:112px;">0503</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DMEM/F12</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td style="width:112px;">11320033</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">DMSO</td>
			<td style="width:123px;">Sigma</td>
			<td style="width:112px;">D2650</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DnaseI</td>
			<td style="width:123px;">Roche</td>
			<td style="width:112px;">11284932001</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">doxycycline hyclate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9891&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">EDTA</td>
			<td style="width:123px;">Sigma</td>
			<td style="width:112px;">E5134</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol 100%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>51976</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">FACS tubes (with strainer caps)</td>
			<td style="width:123px;">Falcon</td>
			<td style="width:112px;">352235</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FBS</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td>10270106</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FITC anti-mouse CD326 (Ep-CAM)</td>
			<td style="width:123px;">BioLegend</td>
			<td style="width:112px;">118208</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">FUdeltaGW-rtTA&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Addgene</td>
			<td style="width:112px;">&#160;#19780&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">FUW-tetO-EGFP</td>
			<td style="width:123px;">Addgene</td>
			<td style="width:112px;">&#160;#84041</td>
			<td style="width:384px;">used as negative control</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">FUW-tetO-MCS</td>
			<td style="width:123px;">Addgene</td>
			<td style="width:112px;">&#160;#84008</td>
			<td style="width:384px;">used as negative control</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">FUW-tetO-wtYAP</td>
			<td style="width:123px;">Addgene</td>
			<td style="width:112px;">&#160;#84009</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:481px;">FUW-tetO-YAPS94A</td>
			<td style="width:123px;">Addgene</td>
			<td style="width:112px;">&#160;#84010</td>
			<td style="width:384px;">used as negative control (transcriptionally dead YAP mutant)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">GlutaMax</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td style="width:112px;">35050061</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">HBSS</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td style="width:112px;">24020117</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">HCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>30721</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">heparin sodium salt</td>
			<td style="width:123px;">Sigma</td>
			<td style="width:112px;">H3149&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">HEPES buffer solution (1M)</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td style="width:112px;">15630-056</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">human R-Spondin1 (His Tag)</td>
			<td>Sino Biological</td>
			<td>11083-H08H-5</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hyaluronidase from bovine testes</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3506&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ITS-X</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td>51500056</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">K-14 antibody</td>
			<td style="width:123px;">Life Technologies</td>
			<td>Ab7800&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">K-8 antibody</td>
			<td style="width:123px;">Life Technologies</td>
			<td>Ab14053&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">L-Glutamine</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td style="width:112px;">&#160;25030081</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lin (allophycocyanin [APC] mouse lineage antibody cocktail)</td>
			<td style="width:123px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:112px;">51-9003632</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel&#174; Growth Factor Reduced Basement Membrane Matrix, Phenol Red-Free</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">N-Acetylcysteine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9165</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaOH</td>
			<td>J.T.Baker</td>
			<td>0402</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">NH4Cl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9434&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nicotinamide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>72340</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:481px;">non-cell adhesive 10 cm dishes (sterile polystirol petri dish &#248; 94)</td>
			<td style="width:123px;">ROLL</td>
			<td style="width:112px;">18248</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PBS 10x</td>
			<td>Euroclone</td>
			<td>ECM4004XL</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PE Hamster Anti-Mouse CD61</td>
			<td style="width:123px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:112px;">553347</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PE-Cy5 Rat Anti-Human CD49f</td>
			<td style="width:123px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:112px;">551129</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PE/Cy7 anti-mouse/rat CD29 Antibody</td>
			<td style="width:123px;">BioLegend</td>
			<td style="width:112px;">102222</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pen/Strep (10,000 U/mL)</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat Tail Collagen I (coating)</td>
			<td style="width:123px;">Sigma</td>
			<td style="width:112px;">122-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat Tail Collagen I for 3D culture</td>
			<td>Cultrex</td>
			<td>3447-020-01&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">recombinant human FGF10</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-26</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">recombinant human Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-10C</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">recombinant murine EGF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>315-09</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">recombinant murine FGF basic (bFGF)</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td style="width:112px;">450-33</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RPMI 1640 medium</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td>31870025</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SBTI (Trypsin inhibitor from Glycine max)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T6522&#160;</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tris BASE&#160;</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11814273001</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Trypsin-EDTA 0,05%</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25300054</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Waymouth medium</td>
			<td style="width:123px;">Gibco</td>
			<td>31220023</td>
			<td style="width:384px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

de novo generation of somatic stem cells by yap/taz

여기 기본 분화 세포 및 녹음 방송 요인의 과도 식으로 같은 혈통의 줄기/시 조 세포 (SCs)로 그들 짖 차례 분리 프로토콜 선물이. 이 방법으로 마우스 유선의 luminal 차별화 (LD) 세포는 유 방 SCs. 얍 분자 속성과 기능 또한 회전 완전히 분화 췌 장 외 분 비 세포 췌 장로 덕트 같은 셀으로 변환 됩니다. 창시자입니다. 마찬가지로, 내 생, 자연 SCs를 유도 하는 YAP 줄기 모양의 셀 ("ySCs") 확장할 수 있습니다 결국 organoid 문화 장기 생체 외에서, 소성 얍/TAZ의 추가 필요 없이 상속 자체 갱신 SC 같은 상태와 부여 하는 ySCs로.
여기에 제시 된 재활 절차를 생성 하 고 차별화 된 셀에서 시작 하는 다양 한 조직 소스의 조상 세포 생체 외에서 확장 가능성을 제공 합니다. Ex vivo 체세포의 간단한 확장 세포 및 개발 생물학 연구를 위한 일반적으로 종양 개시의 메커니즘을 이해 하 고, 더 많은 대 한 재생 의학에 대 한 의미를 갖는다.

YMaSCs의 생성 얍의 과도 식으로 기본 유 방 LD 셀 프로그램을 실험 전략의 개요 그림 1A에 제공 됩니다. 기본 유 방 LD 상피 세포13정렬 형광 활성화 된 세포에 의해 정화 된다. 그림 1B 세 가지 가지 부분 모집단을 얻기 위해 일반적인 정렬 프로시저를 나타냅니다: 기저 세포 (EpCAM낮은CD49f높은CD61-), Luminal 조상 (LP) 세포 (EpCAM높은CD49f낮은CD61+ )와 LD 셀 (EpCAM높은CD49f낮은CD61-). 주의 3 부분 모집단의 게이팅 격리 LD 셀의 순수한 준비 필수, 그는 완전히 분화 하 고 성장 때 유선 식민지 형성 ( 그림 1C, 왼쪽 패널 참조)에서 시드를 체포 하는 완전히. 반대로, exogenous 얍을 표현 하도록 유도, LD 셀 시작 5% 지하실 멤브레인 매트릭스 현 탁 액 문화 (그림 1C)에 쉽게 인식할 수 있는 조밀한 상피 식민지를 확산. 프로그래밍, 효율 인증 약 3%는 전형적인 실험, 원래 지하실 멤브레인 매트릭스 현 탁 액 문화 (그림 1D)에 시드 단일 셀의 수에 식민지의 수를 계산 하 여 득점 될 수 있다. 재설정된 luminal 셀 (yMaSCs) 다음 상태로 100% 지하실 멤브레인 매트릭스 organoid 문화 ( 그림 1A에서 구성표 참조), 스스로 여러 루멘 주위를 개발 하는 복잡 한 organoid 같은 구조로 조직 통과 수 고 doxycycline (즉 유전자 변형 얍 식의 부재에서)의 부재에도 놀라운 자기 재생 능력을 표시 (그림 1E). 조직학, yMaSC에서 파생 된 organoids 표시 기저 레이어 (긍정적인 K14), ECM 및 luminal 레이어 (K8 긍정적인), organoid (그림 1 층) 내에서 루멘 모양의 구멍을 직면 하 고 재구성 지하실 멤브레인 매트릭스를 직면 하 고. 이 아키텍처는 네이티브 MaSCs (그림 1 층)에 의해 형성 하는 organoids의 저것에서 구별할 수 없습니다.
YDucts의 생성 주 췌 acini 야프의 과도 식으로 프로그램을 실험 전략에 대 한 개요는 그림 2A에 표시 됩니다. 전체 포상 클러스터 온화한 분리 및 여과 통해 크기 배제의 조합에 의해 췌 장 조직의 대부분에서 격리 됩니다. 일반적인 준비는 그림 2B에서 제공 됩니다. 절연, 포상 세포 클러스터 exocrine 포상 단위의 균질 크기, 내 분 비 Langerhans islets 또는 췌 장 ductal 트리와 단일 셀에 최소한의 분리의 조각에 의해 오염 없이의 정지로 표시 됩니다. 내 분 비 작은 섬 또는 ductal 파편 오염은 가혹한 처리;으로 인해 부족 한 선택적 여과 (2.1.10 단계)의 표시 단일 셀에 포상 클러스터의 원치 않는 분리 추가 SBTI 치료 curbed 수 조직에 의해 발표 하는 분해 효소의 과도 한 콜라 치료 또는 버퍼링으로 인해 수 있습니다.
전형적인 포상 재활 실험은 그림 2C; 제시 3D 콜라겐에서 문화의 5-7 일 이내-히드로 doxycycline 존재를 기반으로, 췌 장의 acini R26-rtTAM2/tetO-얍S127A 마우스에서 쉽게 파생 덕트 같은 클러스터로 얇은 작곡 (그 우리 라는 yDucts), 확장 중앙 구멍 주위 확산 상피 세포의 단층. 약 70% 인 전형적인 실험에 대 한, 재활 효율성 시드 acini (그림 2D)의 총 수에 덕트 같은 클러스터 수를 득점으로 쉽게 측정할 수 있습니다. 부정적인 통제 세포, 즉 R26-rtTAM2 / + 셀 또는 R26-rtTAM2/tetO-얍S127A 셀 왼쪽 doxycycline, 하지 않고 변함없이 유지 하지 이러한 문화 조건에, 이전 보고1 포스트 mitotic 포상 클러스터로 ,,1415. 있으 나 재설정된 yDucts Matrigel 기반 organoid 문화 조건16 으로 단일 세포 수준에서 다음 passaged 될 수 있다 ( 그림 2A에서 구성표 참조), doxycycline (즉 의 부재에도 놀라운 자기 재생 능력을 표시 유전자 변형 얍 식의 부재)에서 (그림 2E).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57462/57462fig1.jpg"> 그림 1: 기본 유 방 LD의 고립 세포와 유도의 유 방 줄기 세포. (A) 실험 절차의 도식 표현 기본 유 방 LD 셀 프로그램을 채택 했다. (B) 대표 FACS-구획 전형적인 정렬 절차를 보여주는 LD 세포를 정화. i) 천연된 셀 고 측면 분산형 라이브 셀 (P1; 블루);에 따라 문이 ii) 인구 P1의 린 프로 파일에 따라 추가 문이 다음: 혈통 부정적인 세포 (P2; 그레이)의 부분 모집단 선택 제외 혈통 긍정적인 조 혈 모 세포; 3) 인구 P2 다음는 EpCAM높은 (P3, 옐로우 + 그린)와 EpCAM낮은 (P6, 레드) 모집단;으로 구분 4) P3, P6는 다음 추가 문이 그들의 CD61/CD49f 프로 파일에 따라 3 개의 모집단으로: EpCAM낮은CD49f높은CD61- 기저 세포 (P7, 레드), EpCAM높은CD49f낮은CD61+ LP 셀 (P8, 노랑) 그리고 EpCAM높은CD49f낮은CD61- LD 셀 (P9; 녹색). (C) 이미지는 유 방 식민지 매체에 뿌리기 후 15 일 유 방 식민지를 형성 하는 LD 셀, 지정 된 구조와 감염의 기능 설명입니다. 식민지 형성으로 셀 턴 얍 표현 셀, 반면 부정적인 제어 (EGFP 감염) 세포 유지 성장 체포 단일 셀으로. 눈금 막대 = 50 μ m. (D) (C)에서 표시 된 셀의 능력을 형성 하는 식민지의 정량화. 데이터 의미 + 사 우 스 다코타 제시 되며 각각 6 기술 복제 5 개의 독립적인 실험의 대표. (E) 얍 재설정 유 방 줄기 세포와 같은 세포 (yMaSCs) 상태로 organoid 문화에 신선한 3 차원 100% 지하실 멤브레인 매트릭스 히드로 부재에 Doxycycline의 12 일 후의 대표 이미지. 눈금 막대 100 μ m =. (F) organoids의 (레드) luminal 마커 K8 기저 마커 K14 (녹색)에 대 한 대표적인 면역 형광 이미지 organoid 문화 조건에 12 일 후에 하는 지정 된 셀에서 파생 된. 눈금 막대 = 10 μ m. 이 그림은 Panciera 그 외 여러분, 20161에서 재생 된다. <a href="/files/ftp_upload/57462/57462fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57462/57462fig2.jpg"> 그림 2 : 기본 췌 장 acinar 세포 및 췌 장 창시자의 유도의 격리. (A) 실험 절차의 도식 대표 주 췌 exocrine 포상 세포를 프로그램을 채택. (B) 기본 췌 acini 격리 절차 (단계 2.1.14) 직후의 대표 이미지. 포상 준비 포상 클러스터의 균질 정지로 단일 셀의 최소한의 존재와 함께 나타납니다. 눈금 막대 = 400 μ m. (C) 기본 췌 acini의 대표 이미지 R26-rtTAM2 (위 패널)에서 파생 된또는 R26-rtTAM2; tetO 얍S127A (낮은 패널) 쥐 나 3 차원 콜라겐에 경작 하 고-함께 또는 없이 5 일 동안 하이드로 겔을 기반으로 Doxycycline (doxy), 표시 된 대로입니다. 만 주 acini 얍 표현 Doxycycline 추가 후 낭종 같은 organoid로 성장 하는 셀을 변환 합니다. 스케일 바 = 70 μ m. (D) (C)와 같이 유전자 변형 얍 overexpression에 ductal organoids를 형성 하는 췌 장 acini의 기능의 정량화. 데이터 의미 + 사 우 스 다코타 제시 되며 4 개의 기술 복제 수행 5 개의 독립적인 실험의 대표. (E) 얍 reprogramed ductal 같은 셀 (yDucts) 후 신선한 3 차원 100% 지하실 멤브레인 매트릭스 히드로 Doxycycline의 부재에 3 구절의 대표 이미지. 눈금 막대 = 130 μ m. <a href="/files/ftp_upload/57462/57462fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="2">기본 유 방 세포의 고립</td>
		</tr>
<tr>
<td>캘리포니아2 + 해결책 킬레이트 화</td>
			<td>4 ° C에서 저장소</td>
		</tr>
<tr>
<td>EDTA</td>
			<td>0.02 %w / V</td>
		</tr>
<tr>
<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">콜라겐 코팅 솔루션 나</td>
		</tr>
<tr>
<td>초 산 0.02N, pH 3,23</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>쥐 꼬리 콜라겐 (코팅)</td>
			<td>1:50</td>
		</tr>
<tr>
<td>Dispase 솔루션</td>
			<td>4 ° C에서 저장소</td>
		</tr>
<tr>
<td>Dispase</td>
			<td>5 mg/ml</td>
		</tr>
<tr>
<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>분리 매체</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>DMEM:F12</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>Hyaluronidase 재고 솔루션</td>
			<td>400 U/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>재고 솔루션 콜라 나</td>
			<td>600 U/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>Haemolytic 솔루션</td>
			<td>4 ° C에서 저장소</td>
		</tr>
<tr>
<td>NH4Cl 솔루션</td>
			<td>1 부품</td>
		</tr>
<tr>
<td>TrisBase 20.6 g/L</td>
			<td>9 부품</td>
		</tr>
<tr>
<td>pH 7.2 조정</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>HBSS/PS</td>
			<td>4 ° C에서 저장소</td>
		</tr>
<tr>
<td>HBSS</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>2 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>Hyaluronidase 재고 솔루션</td>
			<td>0.2 µ m 필터, 4 ° C에서 저장</td>
		</tr>
<tr>
<td>소 고환 (분말)에서 hyaluronidase</td>
			<td>2000 U/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>나트륨 인산 염 버퍼 1 M pH7.3</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>NH4Cl 솔루션</td>
			<td>T. amb에 저장 합니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td>H2O</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>NH4Cl</td>
			<td>7.1 g/L</td>
		</tr>
<tr>
<td>7.65에 pH를 조정</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>솔루션을 정렬</td>
			<td>0.2 µ m 필터, 4 ° C에서 저장</td>
		</tr>
<tr>
<td>BSA</td>
			<td>0.1%</td>
		</tr>
<tr>
<td>EDTA</td>
			<td>1mm</td>
		</tr>
<tr>
<td>HEPES pH 7</td>
			<td>25 m m</td>
		</tr>
<tr>
<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>세척 매체 #1</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>DMEM/F12</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>세척 매체 #2</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>DMEM/F12</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>FBS</td>
			<td>5%</td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>유 방 2D 문화 매체</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>DMEM/F12</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>FBS</td>
			<td>2%</td>
		</tr>
<tr>
<td>헤 파 린</td>
			<td>4 mg/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>L-글루타민</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>murine bFGF</td>
			<td>10 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>murine EGF</td>
			<td>10 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">유도 및 yMaSCs의 Passaging</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">유 방 식민지 매체</td>
		</tr>
<tr>
<td>DMEM:F12</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>FBS</td>
			<td>5%</td>
		</tr>
<tr>
<td>헤 파 린</td>
			<td>4 µ g/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>L-글루타민</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>Matrigel (뿌리기 직전 추가)</td>
			<td>5%</td>
		</tr>
<tr>
<td>murine bFGF</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>murine EGF</td>
			<td>10 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">유 방 Organoid 매체</td>
		</tr>
<tr>
<td>고급 DMEM:F12</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>B27</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>GlutaMax</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>헤 파 린</td>
			<td>4 µ g/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>Hepes</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>인간의 머리</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>murine bEGF</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>murine EGF</td>
			<td>50 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>R-Spondin 1</td>
			<td>1 µ g/mL</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1: yMaSCs의 생성. 모든 다른 문화 미디어와 기본 유 방 LD 세포의 분리 및 yMaSCs (제 1)의 유도에 필요한 솔루션의 구성
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="2">주 췌 acini의 절연</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">문화 매체 포상</td>
		</tr>
<tr>
<td>BPE</td>
			<td>50 µ g/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>BSA</td>
			<td>0.1%</td>
		</tr>
<tr>
<td>Dexamethasone</td>
			<td>1 µ g/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>FBS</td>
			<td>0.1%</td>
		</tr>
<tr>
<td>그것의 X</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>SBTI</td>
			<td>0.2 mg/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>Waymouth의 매체</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">포상 세척 매체</td>
		</tr>
<tr>
<td>BSA</td>
			<td>0.1%</td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>RPMI 매체</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>SBTI</td>
			<td>0.2 mg/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">포상 복구 매체</td>
		</tr>
<tr>
<td>문화 매체 포상</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>FBS</td>
			<td>30%</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">콜라 나 솔루션 A</td>
		</tr>
<tr>
<td>포상 세척 매체</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>재고 솔루션 콜라 나</td>
			<td>360 U/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>PBS/PS</td>
			<td>4 ° C에서 저장소</td>
		</tr>
<tr>
<td>PBS (인산 염 버퍼 염 분)</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>재고 솔루션 콜라 나</td>
			<td>-20 ° C에서 저장소</td>
		</tr>
<tr>
<td>콜라, 유형 I (분말)</td>
			<td>6000 U/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">췌 장 organoids의 뿌리고</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">콜라 나 솔루션 B</td>
		</tr>
<tr>
<td>PBS 1 x</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>재고 솔루션 콜라 나</td>
			<td>240 U/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">췌 장 Organoid 매체</td>
		</tr>
<tr>
<td>고급 DMEM/F12</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>B27</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>gastrin</td>
			<td>10 nM</td>
		</tr>
<tr>
<td>인간 FGF10</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>인간의 머리</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>murine EGF</td>
			<td>50 ng/ml</td>
		</tr>
<tr>
<td>N-진</td>
			<td>1.25 m m</td>
		</tr>
<tr>
<td>니코틴</td>
			<td>10 m m</td>
		</tr>
<tr>
<td>펜/Strep</td>
			<td>1 x</td>
		</tr>
<tr>
<td>R-Spondin 1</td>
			<td>1 mg/mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>SBTI</td>
			<td>0.2 mg/mL</td>
		</tr>
</tbody></table>표 2: yDucts의 생성. 모든 다른 문화 미디어와 yDucts (제 2)의 뿌리고 주 포상 세포와 유도의 격리에 필요한 솔루션의 구성

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De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

체세포 SCs의 가용성은 재생 의학에 대 한 중요 한 질병 모델링 및 사우스 캐롤라이나 속성에 대 한 통찰력을 얻을. 여기에 우리가 프로그램을 실험 전략 제시 에 체 외, 단일 transcriptional 공동 활성 야프의 과도 식으로 그들의 해당 확장 조직 관련 줄기/시 조 세포로 성인 세포 분화.

드 노 보 그렇 구나/TAZ에 의해 체세포 줄기 세포의 생성

Here we present protocols to isolate primary differentiated cells and turn them into stem/progenitor cells (SCs) of the same lineage by transient ...

Research

JoVE Journal

Biology

De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

Generation of Human CD40-activated B cells

인간 CD40 - 활성화된 B 세포의 생성

CD40-activated B cells (CD40-B cells) have been identified as an alternative source of immuno-stimulatory antigen-presenting cells (APC) for cancer ...

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생물학

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Stemgent 인간 TF의 Lentivirus와 인간의 섬유아 세포를 프로그래밍하여 유도 Pluripotent 줄기 세포의 생성 세트

In 2006, Yamanaka and colleagues first demonstrated that retrovirus-mediated delivery and expression of Oct4, Sox2, c-Myc and Klf4 is capable of inducing ...

Analysis of Pluripotent Stem Cells by using Cryosections of Embryoid Bodies

Embryoid 기관의 Cryosections를 사용하여 Pluripotent 줄기 세포 분석

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Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs Using Retroviral Vector with GFP

GFP와 Retroviral 벡터를 사용하여 유도 Pluripotent 줄기 세포 (iPSCs)로 인간 체세포를 프로그래밍

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