Name: preclinical assessment of the bioactivity of the anticancer coumarin ot48 by spheroids, colony formation assays, and zebrafish xenografts
Uploaded: 2018-06-26T13:00:00
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SNU में अनुसंधान ट्यूमर Microenvironment ग्लोबल कोर रिसर्च सेंटर (GCRC) अनुदान के लिए कोरिया के MEST द्वारा नेशनल रिसर्च फाउंडेशन (एनआरएफ) द्वारा समर्थित है, [अनुदान संख्या 2011-0030001]; सियोल नेशनल यूनिवर्सिटी रिसर्च ग्रांट और ब्रेन कोरिया (BK21) प्लस प्रोग्राम द्वारा ।

1. कॉलोनी गठन परख
<ol><li>संस्कृति A549 कोशिकाओं की एकाग्रता में २०,००० कोशिकाओं/सेमी2 RPMI1640 सेल संस्कृति मध्यम के 15 मिलीलीटर में 10% FBS (भ्रूण गोजातीय सीरम) और 1% में एक सह2 मशीन में ७५ सेमी2 कुप्पी में एंटी?...

<ol>
	<li>Giancotti, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deregulation+of+cell+signaling+in+cancer.">Deregulation of cell signaling in cancer.</a> FEBS Letters. 588 (16), 2558-2570 (2014).</li><li>Knowlton, S., Onal, S., Yu, C. H., Zhao, J. J., Tasoglu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioprinting+for+cancer+research.">Bioprinting for cancer research.</a> Trends in Biotechnology. 33 (9), 504-513 (2015).</li><li>Santo, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+screening+in+3D+in+vitro+tumor+models:+overcoming+current+pitfalls+of+efficacy+read-outs.">Drug screening in 3D in vitro tumor models: overcoming current pitfalls of efficacy read-outs.</a> Biotechnology Journal. 12 (1), (2017).</li><li>Tanner, K., Gottesman, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+3D+culture+models+of+cancer.">Beyond 3D culture models of cancer.</a> Science Translational Medicine. 7 (283), 283ps289 (2015).</li><li>Haycock, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+cell+culture:+a+review+of+current+approaches+and+techniques.">3D cell culture: a review of current approaches and techniques.</a> Methods in Molecular Biology. 695, 1-15 (2011).</li><li>Talhi, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bis(4-hydroxy-2H-chromen-2-one):+synthesis+and+effects+on+leukemic+cell+lines+proliferation+and+NF-kappaB+regulation.">Bis(4-hydroxy-2H-chromen-2-one): synthesis and effects on leukemic cell lines proliferation and NF-kappaB regulation.</a> Bioorganic and Medicinal Chemistry. 22 (11), 3008-3015 (2014).</li><li>Franken, N. A., Rodermond, H. M., Stap, J., Haveman, J., van Bree, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonogenic+assay+of+cells+in+vitro.">Clonogenic assay of cells in vitro.</a> Nature Protocols. 1 (5), 2315-2319 (2006).</li><li>Katt, M. E., Placone, A. L., Wong, A. D., Xu, Z. S., Searson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vitro+Tumor+Models:+Advantages,+Disadvantages,+Variables,+and+Selecting+the+Right+Platform.">In Vitro Tumor Models: Advantages, Disadvantages, Variables, and Selecting the Right Platform.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 4, 12 (2016).</li><li>Lee, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytostatic+hydroxycoumarin+OT52+induces+ER/Golgi+stress+and+STAT3+inhibition+triggering+non-canonical+cell+death+and+synergy+with+BH3+mimetics+in+lung+cancer.">Cytostatic hydroxycoumarin OT52 induces ER/Golgi stress and STAT3 inhibition triggering non-canonical cell death and synergy with BH3 mimetics in lung cancer.</a> Cancer Letters. 416, 94-108 (2018).</li><li>Rotem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+to+the+soft-agar+assay+that+permits+high-throughput+drug+and+genetic+screens+for+cellular+transformation.">Alternative to the soft-agar assay that permits high-throughput drug and genetic screens for cellular transformation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (18), 5708-5713 (2015).</li><li>Spoerri, L., Beaumont, K. A., Anfosso, A., Haass, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-Time+Cell+Cycle+Imaging+in+a+3D+Cell+Culture+Model+of+Melanoma.">Real-Time Cell Cycle Imaging in a 3D Cell Culture Model of Melanoma.</a> Methods in Molecular Biology. 1612, 401-416 (2017).</li><li>Beaumont, K. A., Anfosso, A., Ahmed, F., Weninger, W., Haass, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging-+and+Flow+Cytometry-based+Analysis+of+Cell+Position+and+the+Cell+Cycle+in+3D+Melanoma+Spheroids.">Imaging- and Flow Cytometry-based Analysis of Cell Position and the Cell Cycle in 3D Melanoma Spheroids.</a> Journal of Visualized Experiments. (106), e53486 (2015).</li><li>Lovitt, C. J., Shelper, T. B., Avery, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+cell+culture+techniques+for+cancer+drug+discovery.">Advanced cell culture techniques for cancer drug discovery.</a> Biology (Basel). 3 (2), 345-367 (2014).</li><li>Ji, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dialkyl+resorcinol+stemphol+disrupts+calcium+homeostasis+to+trigger+programmed+immunogenic+necrosis+in+cancer.">The dialkyl resorcinol stemphol disrupts calcium homeostasis to trigger programmed immunogenic necrosis in cancer.</a> Cancer Letters. 416, 109-123 (2018).</li></ol>

MCBM के साथ प्राप्त कॉलोनी गठन की दरें कोशिका प्रकार पर निर्भर करती हैं. आमतौर पर, गैर अनुयाई कोशिकाओं के लिए, अनुयाई कोशिकाओं की तुलना में कालोनियों की संख्या बहुत अधिक है । हमने देखा है कि A549 कोशिकाओं को 10 ?...

कैंसर सेलुलर उत्परिवर्तनों के कारण होता है और एक परिणाम के रूप में जैव रासायनिक संकेत रास्ते अनियंत्रित कोशिका विभाजन और कोशिका मृत्यु के लिए प्रतिरोध को ट्रिगर बाधित कर रहे हैं । ट्यूमर पाचन, तंत्रिका, संचार प्रणालियों और बाद में पड़ोसी ऊतकों के शारीरिक कार्यों के साथ हस्तक्षेप1. व्यापक अनुसंधान प्रयासों के बावजूद, कैंसर दुनिया में सबसे अधिक प्रचलित जीवन-धमकी रोग2रहता है । प्रेसिजन चिकित्सा भविष्य कैंसर चिकित्सकीय की नींव के रूप में मांयता प्राप्त किया गया है । नई आणविक संस्थाओं नियमित रूप से मौजूदा दवाओं के साथ संयोजन में परीक्षण कर रहे है नैदानिक परिणाम में सुधार होगा ।
हालांकि, महत्वपूर्ण नई कुशल लक्षित चिकित्सा के विकास के साथ जुड़े सीमाओं में से एक आमतौर पर इस्तेमाल किया परख की विफलता के लिए दवा जोखिम3के सटीक जैविक परिणाम अनुकरण है । कैंसर की दवा खोज अभी भी ज्यादातर कैंसर सेल में चिकित्सकीय एजेंटों की प्रभावकारिता परीक्षण पर निर्भर करता है 2 डी monolayer संस्कृतियों, जो नैदानिक परीक्षणों4में मांय करने के लिए मुश्किल है संस्कृति लाइनों में । इसलिए बेहतर कैंसर मॉडल विकसित करने के लिए रुचि बढ़ रही है जो वीवो5में ट्यूमर की देशी सुविधाओं की बेहतर नकल है । हाल के वर्षों में, 3 डी संस्कृति मॉडल में एक बढ़ती ब्याज 3 डी ट्यूमर मॉडल5का उत्पादन करने के लिए सुधार के तरीके के विकास के परिणामस्वरूप ।
यहां, हम तीन अलग 3 डी सेल संस्कृति के साथ एक दृष्टिकोण वर्तमान BH3 mimetics के साथ संयोजन में hydroxycoumarin OT486 की शक्ति की समझ में सुधार की अनुमति के लिए और अधिक से पहले vivo परख में गहराई में । हमारा तरीका एक zebrafish मॉडल पर आधारित एक vivo ट्यूमर गठन परीक्षण में एक के साथ कॉलोनी और SFAs संयोजन के होते हैं और फेफड़ों के कैंसर की कोशिकाओं में OT48 और BH3 mimetics के संयोजन की प्रभावकारिता को मान्य करने के लिए और एक जीवित में कैंसर प्रगति की निगरानी जीव.
कॉलोनी गठन परख नियमित रूप से दोनों के लिए ठोस के रूप में अच्छी तरह से टेम कैंसर के लिए विरोधी एजेंटों की प्रभावकारिता का आकलन किया जाता है । परख एक सेल की क्षमता को अनिश्चित काल के पैदा करना और फार्म कालोनियों7निर्धारित करता है । कोशिकाओं की कॉलोनी बनाने की क्षमता पर एक विरोधी एजेंट के प्रभाव की संख्या में कमी और कालोनियों के आकार के द्वारा निर्धारित किया जाता है ।
Spheroids इन विट्रो ट्यूमर मॉडल में प्रतिनिधित्व करते हैं और विरोधी एजेंटों के लिए एक कम लागत वाली स्क्रीनिंग मंच के रूप में काम करते हैं । Spheroids निलंबन में बढ़ रही है या एक 3 डी मैट्रिक्स में एंबेडेड कोशिकाओं के समुच्चय हैं । इस दृष्टिकोण व्यापक रूप से दवा स्क्रीनिंग और ट्यूमर के विकास, प्रसार और प्रतिरक्षा संपर्क8के अध्ययन के लिए प्रयोग किया जाता है ।
एक नई दवा के गुणों को पूरी तरह समझने के लिए, यह कुतर पर vivo प्रयोगों में आयोजित करने के लिए आवश्यक है । हालांकि, इस पारंपरिक विधि महंगा है और समय लगता है । हाल के वर्षों में, zebrafish (ढाणियो rerio) एक व्यापक रूप से अध्ययन प्रयोगशाला जीव है कि सस्ता और तेजी से बढ़ा है बन गया । ट्यूमर zebrafish में विकसित एक 3 डी सेल संस्कृति दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करते हैं, लेकिन एक हड्डीवाला9की सेटिंग में वीवो के भीतर ।
कुल मिलाकर, हम यहां CFAs, SFAs और vivo ट्यूमर गठन में zebrafish सहित तीन अलग 3 डी संस्कृति दृष्टिकोण का उपयोग hydroxycoumarin OT48 के संयोजन में एक फेफड़ों के कैंसर A549 सेल मॉडल में BH3 mimetics की क्षमता विरोधी प्रदर्शन करने के लिए ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Materials required for colony formation assays</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A549</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-185</td>
			<td>37 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>30096</td>
			<td>4 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>S1520-500</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-602E</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask T75</td>
			<td>SPL</td>
			<td>70075</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS solution</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30256.02</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5ml tube</td>
			<td>Extragene</td>
			<td>Tube-170-C</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml tube</td>
			<td>Hyundai Micro</td>
			<td>H20015</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 well plate</td>
			<td>SPL</td>
			<td>30012</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MethoCult</td>
			<td>StemCell technologies</td>
			<td>4230</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (MTT powder)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M5622</td>
			<td>4 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAS4000</td>
			<td>GE Healthcare Technologies</td>
			<td></td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Materials required for spheroid formation assay</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A549</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-185</td>
			<td>37 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>30096</td>
			<td>4 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>S1520-500</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-602E</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask T75</td>
			<td>SPL</td>
			<td>70075</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS solution</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30256.02</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25-300-054</td>
			<td>4 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning costar ultra low attachemnt 96 well plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3474</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopy</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Eclipse TS100</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Materials required for zebrafish xenografts</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A549</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-185</td>
			<td>37 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>30096</td>
			<td>4 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>S1520-500</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-602E</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask T25</td>
			<td>SPL</td>
			<td>70025</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask T75</td>
			<td>SPL</td>
			<td>70075</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask T175</td>
			<td>SPL</td>
			<td>71175</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5ml tube</td>
			<td>Extragene</td>
			<td>Tube-170-C</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well plate</td>
			<td>SPL</td>
			<td>30024</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petridish</td>
			<td>SPL</td>
			<td>10100</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS solution</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30256.02</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25-300-054</td>
			<td>4 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>71382</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride (KCL)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P9541</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4.7H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M2773</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium nitrate tetrahydrate (Ca(NO3)2)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C1396</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H0887</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate (Tricaine)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E10521</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol Red solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P0290</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M0512</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-phenyl-2-thiourea (PTU)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7629</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM-Dil dye</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C7001</td>
			<td>-20 C&#176;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass capillary</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW 100F-4</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller</td>
			<td>Shutter instrument, USA</td>
			<td>P-97</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro injector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>PV820</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>KOVAX</td>
			<td>1ml</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro loader</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5242956003</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slide</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>HSU-1000612</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DE/DM 5000B</td>
			<td>RT</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preclinical assessment of the bioactivity of the anticancer coumarin ot48 by spheroids, colony formation assays, and zebrafish xenografts

इन विट्रो में और vivo पूर्व नैदानिक स्क्रीनिंग उपंयास चिकित्सीय एजेंटों के कैंसर की दवा खोज में एक आवश्यक उपकरण हैं । हालांकि मानव कैंसर कोशिका लाइनों 2d (आयामी) monolayer सेल संस्कृतियों में चिकित्सीय यौगिकों का जवाब, 3 डी संस्कृति प्रणालियों और अधिक शारीरिक रूप से प्रासंगिक मॉडलों में दवाओं की प्रभावकारिता को समझने के लिए विकसित किया गया । हाल के वर्षों में, एक बदलाव पूर्व में मनाया नैदानिक अनुसंधान के लिए 3 डी संस्कृति प्रणालियों में नए अणुओं की शक्ति को मांय किया गया था, और अधिक ठीक ट्यूमर microenvironment नकल उतार । इन प्रणालियों एक अधिक शारीरिक प्रासंगिक तरीके से रोग राज्य विशेषताएं और बेहतर यंत्रवत अंतर्दृष्टि और एक दिया अणु की औषधीय शक्ति की समझ हासिल करने में मदद । इसके अलावा, vivo कैंसर मॉडल में सुधार लाने में मौजूदा रुझान के साथ, zebrafish एक महत्वपूर्ण हड्डीवाला मॉडल के रूप में vivo ट्यूमर के गठन में मूल्यांकन और चिकित्सकीय एजेंटों के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए उभरा है । यहां, हम hydroxycoumarin OT48 अकेले या फेफड़ों के कैंसर सेल लाइन A549 में BH3 mimetics के साथ संयोजन में कॉलोनी गठन की परख सहित तीन अलग 3 डी संस्कृति प्रणालियों का उपयोग करके की चिकित्सीय प्रभावकारिता की जांच की, अंडाकार आकृति गठन परख (SFA) और में vivo zebrafish xenografts.

चित्रा 2में, फेफड़े के कैंसर के सेल लाइन A549 MCBM में OT48 अकेले या संकेत सांद्रता पर BH3 mimetic A1210477 के साथ संयोजन के साथ उपचार के बाद कालोनियों फार्म का बीज था । परिणाम से पता चला है कि संयोजन का...

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Preclinical Assessment of the Bioactivity of the Anticancer Coumarin OT48 by Spheroids, Colony Formation Assays, and Zebrafish Xenografts

Spheroids, कॉलोनी के गठन की परख, और Zebrafish Xenografts द्वारा विरोधी अनंतमूलि OT48 की सी गतिविधि के नैदानिक मूल्यांकन

यहां, हम 3 डी संस्कृति और zebrafish का उपयोग कर विरोधी coumarins के नैदानिक स्क्रीनिंग प्रस्तुत करते हैं ।

In vitro and in vivo pre-clinical screening of novel therapeutic agents are an essential tool in cancer drug discovery. Although human cancer cell lines ...

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