Name: simple and effective administration and visualization of microparticles in the circulatory system of small fishes using kidney injection
Uploaded: 2018-06-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Simple and Effective Administration and Visualization of Microparticles in the Circulatory System of Small Fishes Using Kidney Injection at JoVE.com

Авторы признают значительно помощью Богдан Осадчий и Евгений Протасов (Иркутский государственный университет, Россия) в рамках подготовки видео протокола. Это исследование было поддержано Российского научного фонда (#15-14-10008) и российского фонда фундаментальных исследований (#15-29-01003).

Все экспериментальные процедуры были проведены в соответствии с директивой ЕС 2010/63/ЕС для экспериментов на животных и были одобрены животное темам исследований Комитета из Института биологии Иркутского государственного университета.
1. Изготовление микрокапсулы
<p class...

<ol>
	<li>Rivas-Aravena, A., Sandino, A. M., Spencer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticles+and+microparticles+of+polymers+and+polysaccharides+to+administer+fish+vaccines.">Nanoparticles and microparticles of polymers and polysaccharides to administer fish vaccines.</a> Biol. Res. 46 (4), 407-419 (2013).</li><li>Yashchenok, A. M., Jose, J., Trochet, P., Sukhorukov, G. B., Gorin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifunctional+polyelectrolyte+microcapsules+as+a+contrast+agent+for+photoacoustic+imaging+in+blood.">Multifunctional polyelectrolyte microcapsules as a contrast agent for photoacoustic imaging in blood.</a> J. Biophotonics. 9 (8), 792-799 (2016).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+injection+in+adult+zebrafish.">Retro-orbital injection in adult zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).</li><li>Gurkov, A., Shchapova, &. #. 1. 0. 4. 5. ;., Bedulina, D., Baduev, B., Borvinskaya, E., Timofeyev, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remote+in+vivo+stress+assessment+of+aquatic+animals+with+microencapsulated+biomarkers+for+environmental+monitoring.">Remote in vivo stress assessment of aquatic animals with microencapsulated biomarkers for environmental monitoring.</a> Sci. Rep. 6, e36427 (2016).</li><li>Borvinskaya, E., Gurkov, A., Shchapova, E., Baduev, B., Shatilina, Z., Sadovoy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+in+vivo+monitoring+of+pH+in+gill+capillaries+and+muscles+of+fishes+using+microencapsulated+biomarkers.">Parallel in vivo monitoring of pH in gill capillaries and muscles of fishes using microencapsulated biomarkers.</a> Biol. Open. 6 (5), 673-677 (2017).</li><li>Diep, C. Q., Davidson, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+cells+directly+into+the+kidney+of+adult+zebrafish.">Transplantation of cells directly into the kidney of adult zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (51), e2725 (2011).</li><li>Kreft, O., Javier, A. M., Sukhorukov, G. B., Parak, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymer+microcapsules+as+mobile+local+pH-sensors.">Polymer microcapsules as mobile local pH-sensors.</a> J. Mater. Chem. 17 (42), 4471-4476 (2007).</li><li>Sadovoy, A., Teh, C., Korzh, V., Escobar, M., Meglinski, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microencapsulated+bio-markers+for+assessment+of+stress+conditions+in+aquatic+organisms+in+vivo.">Microencapsulated bio-markers for assessment of stress conditions in aquatic organisms in vivo.</a> Laser Phys. Lett. 9 (7), 542-546 (2012).</li><li>Ferreira, T., Rasband, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ImageJ User Guide - Version 1.44. , (2012).</li><li>Poland, R. S., Bull, C., Syed, W. A., Bowers, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+brain+microinjection+to+study+molecular+substrates+of+motivated+behavior.">Rodent brain microinjection to study molecular substrates of motivated behavior.</a> J. Vis. Exp. (103), e53018 (2015).</li><li>Liu, L., Duff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+serial+collection+of+cerebrospinal+fluid+from+the+cisterna+magna+in+mouse.">A technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse.</a> J. Vis. Exp. (21), e960 (2008).</li><li>Johnston, L., Ball, R. E., Acuff, S., Gaudet, J., Sornborger, A., Lauderdale, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+recording+in+the+brain+of+intact+adult+zebrafish.">Electrophysiological recording in the brain of intact adult zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (81), e51065 (2013).</li><li>Gerlach, G. F., Schrader, L. N., Wingert, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+the+adult+zebrafish+kidney.">Dissection of the adult zebrafish kidney.</a> J. Vis. Exp. (54), e2839 (2011).</li><li>McKee, R. A., Wingert, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+renal+pathology:+Emerging+models+of+acute+kidney+injury.">Zebrafish renal pathology: Emerging models of acute kidney injury.</a> Curr Pathobiol Rep. 3 (2), 171-181 (2015).</li><li>Donath, E., Sukhorukov, G. B., Caruso, F., Davi, S. A., M&#246;hwald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+hollow+polymer+shells+by+colloid-templated+assembly+of+polyelectrolytes.">Novel hollow polymer shells by colloid-templated assembly of polyelectrolytes.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 37 (17), 2201-2205 (1998).</li><li>Antipov, A. A., Shchukin, D., Fedutik, Y., Petrov, A. I., Sukhorukov, G. B., M&#246;hwald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbonate+microparticles+for+hollow+polyelectrolyte+capsules+fabrication.">Carbonate microparticles for hollow polyelectrolyte capsules fabrication.</a> Colloids Surf. A. 224, 175-183 (2003).</li><li>Gaponik, N., Radtchenko, I. L., Gerstenberger, M. R., Fedutik, Y. A., Sukhorukov, G. B., Rogach, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labeling+of+biocompatible+polymer+microcapsules+with+near-infrared+emitting+nanocrystals.">Labeling of biocompatible polymer microcapsules with near-infrared emitting nanocrystals.</a> Nano Lett. 3 (3), 369-372 (2003).</li><li>Volodkin, D. V., Larionova, N. I., Sukhorukov, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+encapsulation+via+porous+CaCO3+microparticles+templating.">Protein encapsulation via porous CaCO3 microparticles templating.</a> Biomacromolecules. 5 (5), 1962-1972 (2004).</li><li>Tzaneva, V., Perry, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Time+differential+staining+technique+coupled+with+full+bilateral+gill+denervation+to+study+ionocytes+in+fish.">A Time differential staining technique coupled with full bilateral gill denervation to study ionocytes in fish.</a> J. Vis. Exp. (97), e52548 (2015).</li></ol>

Чтобы продемонстрировать инъекции микрочастиц в почках данио рерио, мы использовали полупроницаемой микрокапсулы, загружен с красителем индикатора. Таким образом в протоколе содержатся инструкции для изготовления микрокапсулы, используя слой за слоем Ассамблея противоположно заря?...

Администрация микро размера частиц в организм животных является одной из важных задач в таких областях, как наркотиков и доставки вакцины1, сосудистую визуализации2, трансгенными ячейку имплантации3и имплантации крошечные оптический датчик 4 , 5. Однако, трудно процедура имплантации микромасштабной частиц в сосудистой системе мелких лабораторных животных, особенно для деликатной водных организмов. Для популярных исследований образцов как данио рерио, он сообщил, что эти процедуры необходимо уточнить с помощью видео протоколов.
Внутрисердечной и капиллярной микроинъекций требуют квалифицированного персонала и уникальных микрохирургии зал для доставки microobjects в zebrafish кровь. Ранее ретро орбиталь ручной инъекций3 было предложено как простой и эффективный метод для управления всей клетки. Однако по нашему опыту, из-за небольшой площади глаз капиллярной сети, это занимает много практики для достижения желаемых результатов от этого метода.
Здесь мы описываем метод для надежной и эффективной микрочастица имплантации в кровеносную систему путем ручной инъекции непосредственно в ткани почек взрослых рыбок данио, который богат капилляров и почечных сосудов. Эта техника основана на протоколе видео для трансплантации клеток в zebrafish почек6, но болезненным и длительным микрохирургическое шаги были ликвидированы. Предложенный метод характеризуется низкой смертности (0-20%) и высокая эффективность (70-90% успеха) и это легко институт с помощью обычно доступных оборудования.
Важной частью предлагаемого протокола является визуализация имплантированных микрочастиц (если они флуоресцентные или раскрашенная) в капиллярах Гилл, который позволяет для проверки качества инъекции, грубый относительной оценки числа вводят частицы и обнаружение спектрального сигнала для физиологических измерений непосредственно из циркулирующей крови. В качестве примера возможных применений описаны методики, мы демонстрируем протокол для измерений в vivo данио рерио рН крови с помощью Микрокапсулированный флуоресцентного зонда, SNARF-1, первоначально предложенных в Borvinskaya и др. 20175.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>SNARF-1-dextran, 70000 MW</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>D3304</td>
			<td>Fluorescent probe. Any other appropriate polymer-bound fluorescent dye can be used as a microcapsule filler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Albumin-fluorescein isothiocyanate conjugate (FITC-BSA)</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>A9771</td>
			<td>Fluorescent probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodamine B isothiocyanate-Dextran (RITC-dextran)</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>R9379</td>
			<td>Fluorescent probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>C1016</td>
			<td>CaCO3 templates formation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium carbonate</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>S7795</td>
			<td>CaCO3 templates formation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly(allylamine hydrochloride), MW 50000 (PAH)</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>283215</td>
			<td>Cationic polymer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly(sodium 4-styrenesulfonate), MW 70000 (PSS)</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>243051</td>
			<td>Anionic polymer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine [20 kDa] grafted with polyethylene glycol [5 kDa], g = 3.0 to 4.5 (PLL-g-PEG)</td>
			<td>SuSoS</td>
			<td>PLL(20)-g[3.5]-PEG(5)</td>
			<td>Final polymer to increase the biocompatibility of microcapsules</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>S8776</td>
			<td>To dissolve applied polymers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Purification System</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SIMSV0000</td>
			<td>To prepare deionized water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer</td>
			<td>Stegler</td>
			<td></td>
			<td>For CaCO3 templates formation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf&#160;Research&#160;plus pipette, 1000 &#181;L</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td></td>
			<td>Dosing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf&#160;Research&#160;plus pipette, 10 &#181;L</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td></td>
			<td>Dosing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips, volume range 200 to 1000 &#181;L</td>
			<td>F.L. Medical</td>
			<td>28093</td>
			<td>Dosing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips, volume range 0.1-10&#160;&#956;L</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>Z640069</td>
			<td>Dosing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-centrifuge Microspin 12, High-speed</td>
			<td>BioSan</td>
			<td></td>
			<td>For microcapsule centrifugation-washing procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tubes, 2 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>Z666513</td>
			<td>Microcapsule synthesis and storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker Intelli-mixer RM-1L</td>
			<td>ELMY Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>To reduce microcapsule aggregation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To reduce microcapsule aggregation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Head phones&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To protect ears from ultrasound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>EDS</td>
			<td>To dissolve the CaCO3 templates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monosodium phosphate</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>S9638</td>
			<td>Preparation of pH buffers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disodium phosphate</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>S9390</td>
			<td>Preparation of pH buffers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>S8045</td>
			<td>To adjust the pH of the EDTA solution and buffers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermostat chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To dry microcapsules on glass slide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer blood cell count chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To investigate the size distribution and concentration of the prepared microcapsules</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent microscope Mikmed 2</td>
			<td>LOMO</td>
			<td></td>
			<td>In vivo visualization of microcapsules in fish blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Set of fluorescent filters for SNARF-1 (should be chosen depending on the microscope model; example is provided)</td>
			<td>Chroma</td>
			<td>79010</td>
			<td>Visualization of microcapsules with fluorescent probes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber spectrometer QE Pro</td>
			<td>Ocean Optics</td>
			<td></td>
			<td>Calibration of microcapsules under microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical fiber QP400-2-VIS NIR, 400 &#956;m, 2 m</td>
			<td>Ocean Optics</td>
			<td></td>
			<td>To connect spectrometer with microscope port</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collimator F280SMA-A</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td></td>
			<td>To connect spectrometer with microscope port</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microscope slide</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-550-A3</td>
			<td>Calibration of microcapsules under microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips, 22 x 22 mm</td>
			<td>Pearl</td>
			<td>MS-SLIDCV</td>
			<td>Calibration of microcapsules under microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microcapillaries Intra MARK, 10 &#181;L</td>
			<td>Blaubrand</td>
			<td>BR708709</td>
			<td>To collect fish blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clove oil</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>C8392</td>
			<td>Fish anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lancet No 11</td>
			<td>Apexmed international B.V.</td>
			<td>P00588</td>
			<td>To cut the fish tail and release the steel needle from the tip of insulin autoinjector</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin, 5000 U/mL</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>L6510-BC</td>
			<td>For treating all surfaces that come in contact with fish blood during fish blood collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seven 2 Go Pro pH-meter with a microelectrode</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td></td>
			<td>To determine fish blood pH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin pen needles Micro-Fine Plus, 0.25 x 5 mm</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td></td>
			<td>For injection procedure. Any thin needle (&#216; 0.33 mm or less) is appropriate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass capillaries, 1 x 75 mm</td>
			<td>Hirschmann Laborger&#228;te GmbH &#38; Co</td>
			<td>9201075</td>
			<td>For injection procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas torch</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To solder steel needle to glass capillary</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjector IM-9B</td>
			<td>NARISHIGE</td>
			<td></td>
			<td>For precise dosing of microcapsules suspension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, 60 mm x 15 mm, polystyrene</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>P5481</td>
			<td>For manipulations with fish under anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic spoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For manipulations with fish under anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Damp sponge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For manipulations with fish under anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection scissors</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>31212</td>
			<td>To remove the gill cover from the fish head</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipette, 3.5 mL</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>Z331767</td>
			<td>To moisten fish gills</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple and effective administration and visualization of microparticles in the circulatory system of small fishes using kidney injection

Системного администрирования микро размера частиц в живой организм может применяться для визуализации сосудистую, наркотиков и вакцинации, имплантации крошечные оптических датчиков и трансгенных клеток. Однако внутривенного введения микроинъекций в мелких животных, которые в основном используются в биологических и ветеринарных лабораторий, очень сложны и требуют квалифицированного персонала. Здесь мы демонстрируем надежный и эффективный метод для введения микрочастиц в кровеносную систему взрослых рыбок данио (Danio рерио) путем инъекций в рыбы почек. Чтобы визуализировать введено микрочастиц в сосудистую, мы предлагаем простой метод прижизненной визуализации в жабры рыбы. В естественных условиях мониторинг pH крови данио рерио была выполнена с использованием вводят Микрокапсулированный флуоресцентный зонд, SNARF-1, чтобы продемонстрировать один из возможных применений описанные методики. Эта статья содержит подробное описание инкапсуляции рН чувствительных красителя и демонстрирует принципы быстрой инъекции и визуализации полученных микрокапсулы для записи в vivo флуоресцентного сигнала. Предложенный метод впрыска характеризуется низкой смертности (0-20%) и высокая эффективность (70-90% успеха) и это легко институт с помощью обычно доступных оборудования. Все описанные процедуры можно выполнять на других мелких рыб, таких как гуппи и оризии.

Полученные результаты приходят от одного из трех основных категорий представленных протокола: формирование флуоресцентный микрочастиц путем инкапсуляции флуоресцентные краски (рис. 1), почки инъекции микрокапсулы с дальнейшей визуализации в Джилл к?...

Watch this Scientific Journal Video about Simple and Effective Administration and Visualization of Microparticles in the Circulatory System of Small Fishes Using Kidney Injection at JoVE.com

Simple and Effective Administration and Visualization of Microparticles in the Circulatory System of Small Fishes Using Kidney Injection

Простое и эффективное управление и визуализация микрочастиц в системе кровообращения малых рыб с помощью инъекций почек

Эта статья демонстрирует принципы быстро, миниинвазивная инъекции флуоресцентные микрочастиц в circulatory system рыбки и визуализации в vivo микрочастиц в крови рыб.

The systemic administration of micro-size particles into a living organism can be applied for vasculature visualization, drug and vaccine delivery, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Computer-assisted Large-scale Visualization and Quantification of Pancreatic Islet Mass, Size Distribution and Architecture

Компьютерный Крупномасштабные визуализации и количественной оценки островков поджелудочной железы Масса, распределении размеров и архитектуры

The pancreatic islet is a unique micro-organ composed of several hormone secreting endocrine cells such as beta-cells (insulin), alpha-cells (glucagon), ...

Visualization of DNA Replication in the Vertebrate Model System DT40 using the DNA Fiber Technique

Визуализация репликации ДНК в позвоночных DT40 Модель системы с использованием техники ДНК-волоконной

Maintenance of replication fork stability is of utmost importance for dividing cells to preserve viability and prevent disease. The processes involved not ...

Efficient Derivation of Human Cardiac Precursors and Cardiomyocytes from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Эффективное Вывод прав Сердечная Прекурсоры и кардиомиоциты из плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток человека с малыми Индукционная Молекула

To date, the lack of a suitable human cardiac cell source has been the major setback in regenerating the human myocardium, either by cell-based ...

Visualization of Caenorhabditis elegans Cuticular Structures Using the Lipophilic Vital Dye DiI

Visualization of Caenorhabditis elegans Cuticular Structures Using the Lipophilic Vital Dye DiI

Визуализация Caenorhabditis Elegans Кутикулы структур с помощью липофильных Vital краска, DII

The cuticle of C. elegans is a highly resistant structure that surrounds the exterior of the animal1-4. The cuticle not only protects the animal from the ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Визуализации и анализа молекул мРНК с помощью флуоресцентной<em&gt; В Ситу</em&gt; Гибридизация в<em&gt; Saccharomyces CEREVISIAE</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

En Face Detection оксида азота и супероксид в эндотелиальный слой малонарушенных артериях

Endothelium-derived nitric oxide (NO) produced from endothelial NO-synthase (eNOS) is one of the most important vasoprotective molecules in cardiovascular ...

Filtration Isolation of Nucleic Acids:  A Simple and Rapid DNA Extraction Method

Фильтрация Выделение нуклеиновых кислот: Простой и быстрый ДНК Метод экстракции

FINA, filtration isolation of nucleic acids, is a novel extraction method which utilizes vertical filtration via a separation membrane and absorbent pad ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

Мышь Изолированные перфузировались почки Техника

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Hydrodynamic Renal Pelvis Injection for Non-viral Expression of Proteins in the Kidney

Гидродинамические почечной лоханки инъекции для выражения-вирусных белков в почках

Hydrodynamic injection creates a local, high-pressure environment to transfect various tissues with plasmid DNA and other substances. Hydrodynamic tail ...

A Simple and Efficient Method for In Vivo Cardiac-specific Gene Manipulation by Intramyocardial Injection in Mice

A Simple and Efficient Method for In Vivo Cardiac-specific Gene Manipulation by Intramyocardial Injection in Mice

Простой и эффективный метод для в естественных условиях сердечной специфичные генные манипуляции путем инъекций Intramyocardial мышей

Gene manipulation specifically in the heart significantly potentiate the investigation of cardiac disease pathomechanisms and their therapeutic potential. ...