Name: retroductal nanoparticle injection to the murine submandibular gland
Uploaded: 2018-05-03T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Retroductal Nanoparticle Injection to the Murine Submandibular Gland at JoVE.com

Pesquisa reportada nesta publicação foi apoiada pelo Instituto Nacional de dentária e Craniofacial Research (NIDCR) e o National Cancer Institute (NCI) do institutos nacionais da saúde sob prêmio número R56 DE025098, DE027695 UG3 e CA206296 F30. O conteúdo é exclusivamente da responsabilidade dos autores e não representa necessariamente a opinião oficial do institutos nacionais da saúde. Este trabalho também foi apoiado pela NSF DMR 1206219 e a inovação IADR no prêmio de cuidado Oral (2016).
Gostaríamos de agradecer sua ajuda na realização de experimentos IVIS Jayne Gavrity. Gostaríamos de agradecer a Karen Bentley para sua entrada e assistência na realização de EM. Gostaríamos de agradecer sua ajuda com IHC Pei-Lun Weng. Gostaríamos de agradecer a Matthew Ingalls por sua assistência na preparação de figura. Gostaríamos de agradecer o Dr. Elaine Smolock e Emily Wu para leitura crítica deste manuscrito.

Todos na vivo os procedimentos descritos abaixo foram aprovados pela Comissão Universidade recursos animais na Universidade de Rochester, Rochester, NY.
1. preparação
<ol><li>Usando o tubo de cateter intracraniano 32G com inserir fio, corte 3 cm do tubo para formar uma ponta chanfrada, aproximadamente 45° ao eixo longo. Confirme que o fio é mais do que o tubo de pelo menos 1 cm.</li>
	<li>Carrega 50 µ l de solução de nanopartículas PSMA (Figura 1</stron...

<ol>
	<li>Miranda-Rius, J., Brunet-Llobet, L., Lahor-Soler, E., Farre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+Secretory+Disorders,+Inducing+Drugs,+and+Clinical+Management.">Salivary Secretory Disorders, Inducing Drugs, and Clinical Management.</a> International Journal Of Medical Sciences. 12 (10), 811-824 (2015).</li><li>Acauan, M. D., Figueiredo, M. A. Z., Cherubini, K., Gomes, A. P. N., Salum, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy-induced+salivary+dysfunction:+Structural+changes,+pathogenetic+mechanisms+and+therapies.">Radiotherapy-induced salivary dysfunction: Structural changes, pathogenetic mechanisms and therapies.</a> Archives of Oral Biology. 60 (12), 1802-1810 (2015).</li><li>Dirix, P., Nuyts, S., Vander Poorten, V., Delaere, P., Van den Bogaert, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+xerostomia+after+radiotherapy+on+quality+of+life.">The influence of xerostomia after radiotherapy on quality of life.</a> Supportive Care in Cancer. 16 (2), 171-179 (2008).</li><li>Vissink, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+management+of+salivary+gland+hypofunction+and+xerostomia+in+head-and-neck+cancer+patients:+successes+and+barriers.">Clinical management of salivary gland hypofunction and xerostomia in head-and-neck cancer patients: successes and barriers.</a> International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (4), 983-991 (2010).</li><li>Delporte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+fluid+secretion+after+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+to+irradiated+rat+salivary+glands.">Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (7), 3268-3273 (1997).</li><li>Samuni, Y., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+delivery+in+salivary+glands:+from+the+bench+to+the+clinic.">Gene delivery in salivary glands: from the bench to the clinic.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1812 (11), 1515-1521 (2011).</li><li>Beahm, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+approaches+to+the+submandibular+gland:+A+review+of+literature.">Surgical approaches to the submandibular gland: A review of literature.</a> International Journal of Surgery. 7 (6), 503-509 (2009).</li><li>Zheng, C., Shinomiya, T., Goldsmith, C. M., Di Pasquale, G., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convenient+and+reproducible+in+vivo+gene+transfer+to+mouse+parotid+glands.">Convenient and reproducible in vivo gene transfer to mouse parotid glands.</a> Oral diseases. 17 (1), 77-82 (2011).</li><li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+Radiation-Induced+Salivary+Hypofunction+Following+hKGF+Gene+Delivery+to+Murine+Submandibular+Glands.">Prevention of Radiation-Induced Salivary Hypofunction Following hKGF Gene Delivery to Murine Submandibular Glands.</a> Clinical Cancer Research. 17 (9), 2842-2851 (2011).</li><li>Okazaki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acceleration+of+rat+salivary+gland+tissue+repair+by+basic+fibroblast+growth+factor.">Acceleration of rat salivary gland tissue repair by basic fibroblast growth factor.</a> Archives of Oral Biology. 45 (10), 911-919 (2000).</li><li>Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticle-mediated+gene+silencing+confers+radioprotection+to+salivary+glands+in+vivo.">Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo.</a> Molecular Therapy. 21 (6), 1182-1194 (2013).</li><li>Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+irradiation-induced+salivary+hypofunction+by+microvessel+protection+in+mouse+salivary+glands.">Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands.</a> Molecular Therapy. 15 (12), 2101-2106 (2007).</li><li>Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dispersed+donor+salivary+gland+cells+are+widely+distributed+in+the+recipient+gland+when+infused+up+the+ductal+tree.">Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 84 (6), 253-260 (2009).</li><li>Grundmann, O., Fillinger, J. L., Victory, K. R., Burd, R., Limesand, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+radiation+therapy-induced+salivary+gland+dysfunction+in+mice+by+post+therapy+IGF-1+administration.">Restoration of radiation therapy-induced salivary gland dysfunction in mice by post therapy IGF-1 administration.</a> BMC Cancer. 10, 417-417 (2010).</li><li>Limesand, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-Like+Growth+Factor-1+Preserves+Salivary+Gland+Function+After+Fractionated+Radiation.">Insulin-Like Growth Factor-1 Preserves Salivary Gland Function After Fractionated Radiation.</a> International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (2), 579-586 (2010).</li><li>Marmary, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiation-induced+loss+of+salivary+gland+function+is+driven+by+cellular+senescence+and+prevented+by+IL-6+modulation.">Radiation-induced loss of salivary gland function is driven by cellular senescence and prevented by IL-6 modulation.</a> Cancer Research. , (2016).</li><li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+responses+to+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+for+radiation-induced+salivary+hypofunction.">Early responses to adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA for radiation-induced salivary hypofunction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (47), 19403-19407 (2012).</li><li>Arany, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-apoptotic+gene+knockdown+mediated+by+nanocomplexed+siRNA+reduces+radiation+damage+in+primary+salivary+gland+cultures.">Pro-apoptotic gene knockdown mediated by nanocomplexed siRNA reduces radiation damage in primary salivary gland cultures.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 113 (6), 1955-1965 (2012).</li><li>Benoit, D. S. W., Henry, S. M., Shubin, A. D., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=pH-responsive+polymeric+siRNA+carriers+sensitize+multidrug+resistant+ovarian+cancer+cells+to+doxorubicin+via+knockdown+of+polo-like+kinase+1.">pH-responsive polymeric siRNA carriers sensitize multidrug resistant ovarian cancer cells to doxorubicin via knockdown of polo-like kinase 1.</a> Molecular pharmaceutics. 7 (2), 442-455 (2010).</li><li>Malcolm, D. W., Varghese, J. J., Sorrells, J. E., Ovitt, C. E., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effects+of+Biological+Fluids+on+Colloidal+Stability+and+siRNA+Delivery+of+a+pH-Responsive+Micellar+Nanoparticle+Delivery+System.">The Effects of Biological Fluids on Colloidal Stability and siRNA Delivery of a pH-Responsive Micellar Nanoparticle Delivery System.</a> ACS Nano. , (2017).</li><li>Baranello, M. P., Bauer, L., Benoit, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly(styrene-alt-maleic+anhydride)-based+diblock+copolymer+micelles+exhibit+versatile+hydrophobic+drug+loading,+drug-dependent+release,+and+internalization+by+multidrug+resistant+ovarian+cancer+cells.">Poly(styrene-alt-maleic anhydride)-based diblock copolymer micelles exhibit versatile hydrophobic drug loading, drug-dependent release, and internalization by multidrug resistant ovarian cancer cells.</a> Biomacromolecules. 15 (7), 2629-2641 (2014).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fracture-Targeted+Delivery+of+&#946;-Catenin+Agonists+via+Peptide-Functionalized+Nanoparticles+Augments+Fracture+Healing.">Fracture-Targeted Delivery of &#946;-Catenin Agonists via Peptide-Functionalized Nanoparticles Augments Fracture Healing.</a> ACS Nano. 11 (9), 9445-9458 (2017).</li><li>Baranello, M. P., Bauer, L., Jordan, C. T., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micelle+Delivery+of+Parthenolide+to+Acute+Myeloid+Leukemia+Cells.">Micelle Delivery of Parthenolide to Acute Myeloid Leukemia Cells.</a> Cellular and Molecular Bioengineering. 8 (3), 455-470 (2015).</li><li>Kuriki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cannulation+of+the+Mouse+Submandibular+Salivary+Gland+via+the+Wharton's+Duct.">Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct.</a> Journal of Visualized Experiments. (51), e3074 (2011).</li><li>Nair, R. P., Zheng, C., Sunavala-Dossabhoy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retroductal+Submandibular+Gland+Instillation+and+Localized+Fractionated+Irradiation+in+a+Rat+Model+of+Salivary+Hypofunction.">Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), (2016).</li><li>Wang, Y., Malcolm, D. W., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+and+sustained+delivery+of+siRNA/NPs+from+hydrogels+expedites+bone+fracture+healing.">Controlled and sustained delivery of siRNA/NPs from hydrogels expedites bone fracture healing.</a> Biomaterials. 139 (Supplement C), 127-138 (2017).</li><li>Hoffman, M. D., Van Hove, A. H., Benoit, D. S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degradable+hydrogels+for+spatiotemporal+control+of+mesenchymal+stem+cells+localized+at+decellularized+bone+allografts.">Degradable hydrogels for spatiotemporal control of mesenchymal stem cells localized at decellularized bone allografts.</a> Acta Biomaterialia. 10 (8), 3431-3441 (2014).</li><li>Nguyen, C. Q., Yin, H., Lee, B. H., Chiorini, J. A., Peck, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL17:+potential+therapeutic+target+in+Sjogren's+syndrome+using+adenovirus-mediated+gene+transfer.">IL17: potential therapeutic target in Sjogren's syndrome using adenovirus-mediated gene transfer.</a> Laboratory Investigation. 91 (1), 54-62 (2011).</li></ol>

Retroductal injeção é fundamental para a entrega de drogas localizadas à glândula salivar. Essa técnica tem aplicações na triagem de agentes terapêuticos para condições, incluindo a síndrome de Sjogren e RIH9,10,28. Entrega da droga direto para a SMG através da injeção de retroductal fornece uma vantagem chave sobre administração sistémica no seu potencial para reduzir os efeitos fora do alvo, incluindo ativaç...

Disfunção da glândula salivar tem várias etiologias, incluindo a síndrome de Sjögren, uma auto-imune mediada por perda de tecido secretor funcional e radiação induzida hipossalivação (RIH), uma comum sequelas de cabeça e pescoço câncer radioterapia1. Perda da função salivar devido qualquer condição predispõe indivíduos a infecção oral e sistêmica, cárie dentária, disfunção digestiva e deglutição, Imparidade de discurso e depressão1,2,3. Como resultado, qualidade de vida significativamente sofre, com intervenções limitadas a paliação dos sintomas ao invés de cura4. Para investigar novas terapias na vivo, é de interesse para administrar compostos bioativos diretamente à glândula salivar.
Injeção de Retroductal é um método valioso para entregar compostos bioativos diretamente para as glândulas salivares e testar a eficácia na doença, lesão, ou sob a homeostase do tecido normal. As três principais glândulas salivares são as parótidas (PG), a submandibular (SMG) e a sublingual (SLG), todos que vazio na cavidade oral através de ductos excretores. A anatomia do murino SMG permite acesso direto através de cateterização do ducto de Wharton, localizado no assoalho da boca sob a língua5. Após a cateterização, solvated drogas podem ser administradas diretamente para a SMG. Após o parto retroductal, difusão extra glandular é restrito pela cápsula de tecido circundante, que regula a troca de material com em torno de estruturas6. O SMG e seu ducto estruturam-se da mesma forma em seres humanos e rotineiramente são acessados durante SMG cirurgia e sialoendoscopy7. Em humanos e ratos, o PG é igualmente acessível através do duto de Stensen na mucosa bucal8.
Em modelos murino da RIH, injeção de retroductal SMG tem sido utilizada para entregar terapêutica incluindo fatores de crescimento, as células primárias, vetores adenovírus, citocinas e compostos antioxidantes modular a resposta celular a lesões, e reduzir o tecido danos5,9,10,11,12,13,14,15,16. O mais notável sucesso clínico da injeção de retroductal é a administração do vetor adenovírus para direcionar a expressão de um canal de água (aquaporina 1; AQP1) em pacientes após a radiação para câncer de cabeça e pescoço17.
Anteriormente, desenvolvemos e demonstrado a eficácia de um sistema de nanopartículas poliméricas-siRNA retroductally injetado para proteger a função da glândula salivar de RIH11,18,19,20. Como uma extensão de nossos trabalhos anteriores, aqui, demonstramos nosso protocolo para injeção de SMG retroductal usando uma nanopartícula fluorescente etiquetada (NP) capaz de carregar e entregar outra forma pouco solúvel drogas21,22, 23.
Podemos ter sintetizado o NP de um copolímero de diblock composto de poli (estireno-alt-hidrazida anhydride)-b-poly(styrene) (PSMA) através da polimerização de fragmentação (balsa) de cadeia de adição reversível, conforme descrito anteriormente,21. Através da troca de solvente, estes polímeros espontaneamente auto-montagem em estruturas de NP micelle com um hidrofóbico hidrofílico e interior exterior21. O NPs é rotulado com o fluoróforo Texas-vermelho para permitir a verificação da entrega NP nas glândulas sem sacrificar o animal. Viver a imagem animal e imuno-histoquímica SMG é mostrado em 1 h e 1 dia após a injeção.
Esta actualizado e protocolo de canulação reprodutível deve permitir que outros conseguir injeção de retroductal. Esperamos que esta técnica refinada se torne crítica para estudos em vivo e desenvolvimento terapêutico24,25.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="690">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">Pilocarpine hydrochloride</td>
			<td style="width:128px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P6503</td>
			<td style="width:225px;">Pilocarpine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">Student Vannas Spring Scissors</td>
			<td style="width:128px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">91500-9</td>
			<td>Spring Scissors for Tracheostomy</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">Sterile Saline Solution</td>
			<td style="width:128px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">RDI30296H</td>
			<td>Saline</td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:219px;">Dumont #7 Forceps</td>
			<td style="width:128px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11274-20</td>
			<td>Curved Forceps</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:219px;">Dumont #5 Forceps</td>
			<td style="width:128px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11251-10</td>
			<td>Straight Forceps</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:219px;">Standard Pattern Forceps</td>
			<td style="width:128px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11000-12</td>
			<td>Blunt Forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">Fine Scissors- Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:128px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">14568-09</td>
			<td>Dissection Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:219px;">Microhematocrit Heparinized Capillary Tubes</td>
			<td style="width:128px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">22362566</td>
			<td>Capillary tubes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">Lubricant Eye Ointment</td>
			<td style="width:128px;">Refresh</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Refresh Lacri-Lube</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:219px;">Goat polyclonal anti-Nkcc1</td>
			<td style="width:128px;">Santa Cruz Biotech</td>
			<td style="width:119px;">SC-21545</td>
			<td>Nkcc1 Antibody</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:219px;">DAPI (4&#39;,6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride)</td>
			<td style="width:128px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">D1306</td>
			<td>DAPI</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">GraphPad Prism</td>
			<td style="width:128px;">GraphPad</td>
			<td style="width:119px;">ver6.0</td>
			<td>Statistical Software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">Cotton tipped applicator</td>
			<td style="width:128px;">Medline</td>
			<td style="width:119px;">MDS202000</td>
			<td>Applicator for eye ointment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:219px;">0.5cc Insulin Syringe, 29G x 1/2&#34;</td>
			<td style="width:128px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">7629</td>
			<td>Syringe for intraperitoneal injection</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

retroductal nanoparticle injection to the murine submandibular gland

Dois objetivos comuns das glândulas salivares terapêutica são prevenção e cura da disfunção do tecido seguindo ou auto-imune ou radiação. Entregando localmente compostos bioativos para as glândulas salivares, maiores concentrações de tecido podem ser alcançadas com segurança contra administração sistémica. Além disso, fora o tecido-alvo os efeitos da acumulação extra glandular de material podem ser drasticamente reduzidos. A este respeito, injeção de retroductal é um método amplamente usado para investigar a biologia das glândulas salivares e a fisiopatologia. Retroductal administração de fatores de crescimento, as células primárias, vetores adenovírus e drogas pequena molécula mostrou para apoiar a função da glândula no cenário do ferimento. Nós anteriormente demonstraram a eficácia de uma estratégia de siRNA nanoparticle retroductally injetada para manter a função da glândula após irradiação. Aqui, um método altamente eficaz e reprodutível para administrar nanomateriais para a glândula submandibular murino através do ducto de Wharton é Detalhado (Figura 1). Descrevemos a acessar a cavidade oral e descrevem as etapas necessárias ao duto de cannulate da Wharton, com novas observações servindo como verificações de qualidade durante todo o procedimento.

Injeção de Retroductal pode ser usada para administrar o NPs para a SMG murino (Figura 1). Aqui, nós entregamos a 50 µ g PSMA NPs rotulado com vermelho Texas fluoróforo.
Colocação adequada do mouse permite fácil acesso e visualização do assoalho da boca (Fig. 2A-B). As papilas submandibulares são identificadas como duas saliências carnudas d...

Watch this Scientific Journal Video about Retroductal Nanoparticle Injection to the Murine Submandibular Gland at JoVE.com

Retroductal Nanoparticle Injection to the Murine Submandibular Gland

Entrega de drogas local para as glândulas submandibulares é de interesse em biologia de glândula salivar de entendimento e para o desenvolvimento de novas terapêuticas. Apresentamos um protocolo de injeção retroductal atualizadas e detalhadas, destinado a melhorar a precisão de entrega e reprodutibilidade experimental. O aplicativo aqui apresentado é a entrega de nanopartículas poliméricas.

Injeção de Retroductal de nanopartículas para a glândula Submandibular murino

Two common goals of salivary gland therapeutics are prevention and cure of tissue dysfunction following either autoimmune or radiation injury. By locally ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Projeto de um biorreator de pressão cíclica para o Ex Vivo Estudo de válvulas cardíacas Aórtica

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Bioengenharia

Synthesis, Assembly, and Characterization of Monolayer Protected Gold Nanoparticle Films for Protein Monolayer Electrochemistry

Síntese, Assembléia e Caracterização de monocamada Protected Films nanopartículas de ouro para Eletroquímica monocamada Protein

Colloidal gold nanoparticles protected with alkanethiolate ligands called monolayer protected gold clusters (MPCs) are synthesized and subsequently ...

A Hormone-responsive 3D Culture Model of the Human Mammary Gland Epithelium

Um modelo de cultura 3D Hormone-responsive da Human glândula mamária Epitélio

The process of mammary epithelial morphogenesis is influenced by hormones. The study of hormone action on the breast epithelium using 2D cultures is ...

Microfluidic Buffer Exchange for Interference-free Micro/Nanoparticle Cell Engineering

Microfluídico troca de tampão para Micro / nanopartículas celular Engenharia sem interferências

Engineering cells with active-ingredient-loaded micro/nanoparticles (NPs) is becoming an increasingly popular method to enhance native therapeutic ...

Determination of Zeta Potential via Nanoparticle Translocation Velocities through a Tunable Nanopore: Using DNA-modified Particles as an Example

Determinação do Potencial Zeta de nanopartículas de translocação através de velocidades por meio de um Tunable Nanopore: Utilizando partículas modificadas-ADN como um Exemplo

Nanopore technologies, known collectively as Resistive Pulse Sensors (RPS), are being used to detect, quantify and characterize proteins, molecules and ...

Intraductal Delivery to the Rabbit Mammary Gland

Entrega Intraductal ao Coelho glândula mamária

Localized intraductal treatments for breast cancer offer potential advantages, including efficient delivery to the tumor and reduced systemic toxicity and ...

An Integrated System to Remotely Trigger Intracellular Signal Transduction by Upconversion Nanoparticle-mediated Kinase Photoactivation

Um sistema integrado para acionar remotamente a transdução do sinal intracelular por Photoactivation Upconversion Nanoparticle-mediada da quinase

Upconversion nanoparticle (UCNP)-mediated photoactivation is a new approach to remotely control bioeffectors with much less phototoxicity and with deeper ...

Lipidico Injection Protocol for Serial Crystallography Measurements at the Australian Synchrotron

Protocolo de injeção de lipidico para medições de cristalografia serial no Síncrotron Australiano

A facility for performing serial crystallography measurements has been developed at the Australian synchrotron. This facility incorporates a purpose built ...

Transplantation of a 3D Bioprinted Patch in a Murine Model of Myocardial Infarction

Transplante de um Patch Bioimpresso 3D em um modelo murino de infarto do miocárdio

Testing regenerative properties of 3D bioprinted cardiac patches in vivo using murine models of heart failure via permanent left anterior descending (LAD) ...

Injectable Supramolecular Polymer-Nanoparticle Hydrogels for Cell and Drug Delivery Applications

Hidrogéis de polímero supramolecular injetável para aplicações de entrega de células e medicamentos

These methods describe how to formulate injectable, supramolecular polymer-nanoparticle (PNP) hydrogels for&#160;use as biomaterials. PNP hydrogels are ...