Name: a ligated intestinal loop model in anesthetized specific pathogen free chickens to study clostridium perfringens virulence
Uploaded: 2018-10-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence at JoVE.com

이 작품 대학교 드 몬트리올의 수의학의 학부에서 가금류 연구 (M. Boulianne)에 자에 의해 지원 되었다. 박사 Boulianne 및 부모 모델 개발. 박사 Boulianne 및 부모는 수술을 수행. 박사 화상 마 취 프로토콜을 개발에 도움. 박사 부모 비디오를 편집 하 고 원고를 썼다. Drs 번즈, 원고를 편집 하는 Desrochers 및 Boulianne.

라이브 동물 사용과 모든 절차의 학부의 수의학, 대학교 드 몬트리올 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 (CÉUA, '위원회 회의 d' éthique 드 데 동물 ').
1입니다. 수술 전 고려 사항
<ol><li>10 주 오래 된 수술에 대 한 특정 병원 체 자유롭게 (SPF) 레그 닭을 선택 합니다. 참고: 자신의 체중 1.0과 1.2 k g 사이 여야 합니다.</li>
	<li>피드를 빈 창 자 절차 이전 12 h를 철회 한다.</li>
	<li>수술...

<ol>
	<li>Vitale, A., Chiarotti, F., Alleva, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+animal+models+in+disease+research.">The use of animal models in disease research.</a> Rare diseases and orphan drugs. 2 (1), 1-4 (2015).</li><li>Uzal, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+to+study+the+pathogenesis+of+human+and+animal+Clostridium+perfringens+infections.">Animal models to study the pathogenesis of human and animal Clostridium perfringens infections.</a> Veterinary Microbiology. , (2015).</li><li>Bernier, G., Phaneuf, J. B., Filion, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+enteritis+in+broiler+chickens.+III.+Study+of+the+factors+favoring+the+multiplication+of+Clostridium+perfringens+and+the+experimental+transmission+of+the+disease.">Necrotic enteritis in broiler chickens. III. Study of the factors favoring the multiplication of Clostridium perfringens and the experimental transmission of the disease.</a> Canadian Journal of Comparative Medicine. 41 (1), 112-116 (1977).</li><li>Al-Sheikhly, F., Truscott, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathology+of+necrotic+enteritis+of+chickens+following+infusion+of+broth+cultures+of+Clostridium+perfringens+into+the+duodenum.">The pathology of necrotic enteritis of chickens following infusion of broth cultures of Clostridium perfringens into the duodenum.</a> Avian Diseases. 21 (2), 230-240 (1977).</li><li>Wicker, D. L., Iscrigg, W. N., Trammell, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+control+and+prevention+of+necrotic+enteritis+in+broilers+with+zinc+bacitracin.">The control and prevention of necrotic enteritis in broilers with zinc bacitracin.</a> Poultry Science. 56 (4), 1229-1231 (1977).</li><li>Keyburn, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NetB,+a+new+toxin+that+is+associated+with+avian+necrotic+enteritis+caused+by+Clostridium+perfringens.">NetB, a new toxin that is associated with avian necrotic enteritis caused by Clostridium perfringens.</a> PLoS Pathog. 4 (2), e26 (2008).</li><li>Timbermont, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origin+of+Clostridium+perfringens+isolates+determines+the+ability+to+induce+necrotic+enteritis+in+broilers.">Origin of Clostridium perfringens isolates determines the ability to induce necrotic enteritis in broilers.</a> Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 32 (6), 503-512 (2009).</li><li>Paradis, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+avilamycin+for+the+prevention+of+necrotic+enteritis+caused+by+a+pathogenic+strain+of+Clostridium+perfringens+in+broiler+chickens.">Efficacy of avilamycin for the prevention of necrotic enteritis caused by a pathogenic strain of Clostridium perfringens in broiler chickens.</a> Avian Pathol. 45 (3), 365-369 (2016).</li><li>Valgaeren, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lesion+development+in+a+new+intestinal+loop+model+indicates+the+involvement+of+a+shared+Clostridium+perfringens+virulence+factor+in+haemorrhagic+enteritis+in+calves.">Lesion development in a new intestinal loop model indicates the involvement of a shared Clostridium perfringens virulence factor in haemorrhagic enteritis in calves.</a> Journal of Comparative Pathology. 149 (1), 103-112 (2013).</li><li>Goossens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+C-terminal+domain+of+Clostridium+perfringens+alpha+toxin+as+a+vaccine+candidate+against+bovine+necrohemorrhagic+enteritis.">The C-terminal domain of Clostridium perfringens alpha toxin as a vaccine candidate against bovine necrohemorrhagic enteritis.</a> Vet Res. 47 (1), 52 (2016).</li><li>Goossens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxin-neutralizing+antibodies+protect+against+Clostridium+perfringens-induced+necrosis+in+an+intestinal+loop+model+for+bovine+necrohemorrhagic+enteritis.">Toxin-neutralizing antibodies protect against Clostridium perfringens-induced necrosis in an intestinal loop model for bovine necrohemorrhagic enteritis.</a> BMC Vet Res. 12 (1), 101 (2016).</li><li>Parent, E., Archambault, M., Charlebois, A., Bernier-Lachance, J., Boulianne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chicken+intestinal+ligated+loop+model+to+study+the+virulence+of+Clostridium+perfringens+isolates+recovered+from+antibiotic-free+chicken+flocks.">A chicken intestinal ligated loop model to study the virulence of Clostridium perfringens isolates recovered from antibiotic-free chicken flocks.</a> Avian Pathol. 46 (2), 138-149 (2017).</li><li>Janvilisri, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+differential+proteomes+of+Clostridium+difficile+in+the+pig+ileal-ligated+loop+model.">Temporal differential proteomes of Clostridium difficile in the pig ileal-ligated loop model.</a> PLoS One. 7 (9), e45608 (2012).</li><li>Aabo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+in+vivo+model+for+study+of+intestinal+invasion+by+Salmonella+enterica+in+chickens.">Development of an in vivo model for study of intestinal invasion by Salmonella enterica in chickens.</a> Infection and Immunity. 68 (12), 7122-7125 (2000).</li><li>Meurens, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+immune+response+following+Salmonella+enterica+subspecies+enterica+serovar+Typhimurium+infection+in+porcine+jejunal+gut+loops.">Early immune response following Salmonella enterica subspecies enterica serovar Typhimurium infection in porcine jejunal gut loops.</a> Vet Res. 40 (1), 5 (2009).</li><li>Gerdts, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+intestinal+'loops'+provide+an+in+vivo+model+to+analyse+multiple+mucosal+immune+responses.">Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses.</a> J Immunol Methods. 256 (1-2), 19-33 (2001).</li><li>Wade, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adherent+abilities+of+Clostridium+perfringens+strains+are+critical+for+the+pathogenesis+of+avian+necrotic+enteritis.">The adherent abilities of Clostridium perfringens strains are critical for the pathogenesis of avian necrotic enteritis.</a> Vet Microbiol. 197, 53-61 (2016).</li><li>Cooper, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+for+chickens+of+Clostridium+perfringens+isolated+from+poultry+and+other+sources.">Virulence for chickens of Clostridium perfringens isolated from poultry and other sources.</a> Anaerobe. 16 (3), 289-292 (2010).</li><li>Cooper, K. K., Songer, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+of+Clostridium+perfringens+in+an+experimental+model+of+poultry+necrotic+enteritis.">Virulence of Clostridium perfringens in an experimental model of poultry necrotic enteritis.</a> Veterinary Microbiology. 142 (3-4), 323-328 (2010).</li><li>Chalmers, G., Bruce, H. L., Toole, D. L., Barnum, D. A., Boerlin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+enteritis+potential+in+a+model+system+using+Clostridium+perfringens+isolated+from+field+outbreaks.">Necrotic enteritis potential in a model system using Clostridium perfringens isolated from field outbreaks.</a> Avian Diseases. 51 (4), 834-839 (2007).</li></ol>

Clostridium perfringens Clostridium 남과 어울리지 않 는, 등 다양 한 장 병원 체로 인 한 질병의 병 인 호스트 병원 체 상호 작용을 공부 하 고 수많은 종에 창 자 루프 모델 설명 되었습니다. 살 모 넬 라 enterica7,,913,,1415. 그것은 또한 점 막 면역 응답1...

인간과 동물에 영향을 미치는 전염병 연구 동물 모델의 사용 규제 정교를 방지 하거나 질병1치료 전략으로 특정 조건 또한의 병 독성 요인 평가에서 중앙 도구입니다. 동물 모델을 사용 하 여 다양 한 질병 연구의 수많은 장점에도 불구 하 고이 연습에 대하여 윤리적인 관심사는 발생 하는. 연구팀은 중요 하 고 유효한 결과 가져오는 동안 동물 사용을 최소화 해야 합니다. 3 Rs 원칙 (대체, 감소 및 수정)의 개념은 복지 문제 같은 재판에서 해결 했다 보장 하기 위해 정교 했다. 닭 괴 사 성 장 염 연구, 치킨 모델 vivo에서 병 인, 예방, 및이 조건2,3,,45의 치료를 조사 하는 데 사용 됩니다. C. perfringens 들고 NetB 독 소6, 등 특정 독성 요인의 병원 성 긴장 닭7에서 괴 사 성 장 염을 일으킬 관리 됩니다. 교체 원리가 이다, 따라서, 이러한 독성 요인으로 중요 한 다른 동물 종에 되지 않을 수도 있습니다 이러한 경우에 달성 하기 어렵습니다. 대부분 닭에서 괴 사 성 장 염에 대 한 위험 요소, coccidiosis 등의 조합을 사용 하 여 모델과의 C. perfringens2. 의 많은 수를 포함 하는 국물 문화 gavage 뒤 괴 사 성 장 염을 유발 하는 다이어트를 변경 이러한 모델에 많은 닭, 질병을 유발 한다 고 사망률 같은 재판8, 따라서 동물 연구에서 감소와 상세 원칙에 대 한 우려를 제기에 중요할 수 있습니다.
장 합자 루프 모델 원리 감소 및 구체화 장내 병원 균에 의해 유도 된 질병의 연구에 대 한 바람직한 대안입니다. 이 모델에서 '루프' 라는 장 세그먼트 병원 체는 혼자9 주입 될 수 있는 독립적이 고 밀폐 구획을 형성 하는 창 자를 따라 또는 백신 후보자 등 다른 분자와 연자를 배치 하 여 만들어집니다. 10 , 11. 관심의 병원 체 장 세포와 가까운 접촉에 배치 되 고 몇 시간 후 감염 시간, 장 샘플 추가 분석을 위해 재기 될 수 있다. 이 같은 동물에서 여러 치료 및 제어 그룹의 사용을 수 있습니다. 그룹 간의 차별의 힘을 증가 하 고 구강 재판에 비해 필요한 닭의 수를 감소, 반복된 측정 모델 통계 분석을 수행할 수 있습니다. 또한, 수술 절차와 후속 감염 시간 연속 전신 마 취 및 진통, 따라서 동물 고통 최소화에서 수행 됩니다. 폐쇄 루프 ligations 호스트 숫자를 줄이고 동물 연구에서 더 인간적 시스템을 만들기 위한 이상적인 서식 파일입니다.
장 합자 루프 모델 송아지, 토끼 및 쥐2,9, 등 다양 한 종에 잘 설명 되어 있지만 제대로 닭7에 설명 된. 이 수술 모델의 최적의 사용에 대 한 적절 한 기술과 실행 장 무결성에 손상을 피하기 위해 합자 장 루프의 창조를 위해 필수적입니다. 이 원고의 목표 치킨 모델에 여러 장 루프의 생성에서 단계 메서드를 설명 하는 것입니다. 이 기술은 정확한 절차는 프로젝트의 성공을 위해 필수적으로 외과 의사의 기술과 경험에 의해 제한 됩니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>EZ-Scrub 747</td>
			<td>Becton Dickinson and Company</td>
			<td></td>
			<td>4% chlorhexidine gluconate detergent impregnated sterile brush. No catalog number available. Web address: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropyl alcohol 70% USP 4 L</td>
			<td>Commercial isopropyl alcohol</td>
			<td>P016IP70</td>
			<td>Web address: http://www.comalc.com/products/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorexidine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>282227-1G</td>
			<td>Chlorhexidine gluconate solution, must be diluted to 4%. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr&#38;region=CA&#38;gclid=EAIaIQobChMI8vHr4_OY1wIV3rrACh2ZWQKuEAAYAiAAEgLKx_D_BwE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Drape Small (27 inch x 24 inch) with 3 x 6 inch Fenestration</td>
			<td>Veterinary Specialty Products</td>
			<td>32724</td>
			<td>Web address: http://www.vetspecialtyproducts.com/index.cfm?fuseaction=ecommercecatalog.detail&#38;productgroup_id=15</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades #3</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>301</td>
			<td>Web address: https://www.swann-morton.com/product/16.php</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline NaCl 0.9%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8776-100ML</td>
			<td>Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s8776?lang=fr&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl 3-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>D9003</td>
			<td>Polyglactin multifilament absorbable suture material. Web address: http://www.ethicon.com/healthcare-professionals/products/wound-closure/absorbable-sutures/coated-vicryl-polyglactin-910-suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 1 ml with 26G needle</td>
			<td>Becton Dickinson and Company</td>
			<td>329652</td>
			<td>Web address: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/diabetes-care/insulin-syringes/bd-1-ml-conventional-insulin-syringes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brain Heart Infusion</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>1104930500</td>
			<td>Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/mm/110493?lang=fr&#38;region=CA&#38;cm_sp=Insite-_-prodRecCold_xorders-_-prodRecCold2-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tube</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9661-500EA</td>
			<td>Microcentrifuge tube. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t9661?lang=fr&#38;region=CA&#38;gclid=EAIaIQobChMI-YizzfiY1wIVRkCGCh30SQjuEAAYAiAAEgLK5fD_BwE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin solution, buffered neutral, 10%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td>Ratio tissue : formalin of 1: 10 for adequate fixation. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clostridium perfringens strains</td>
			<td>Universit&#233; de Montr&#233;al, Chaire en recherche avicole</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Specific to each laboratory, available upon request to correspondant author</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a ligated intestinal loop model in anesthetized specific pathogen free chickens to study clostridium perfringens virulence

괴 사 성 장 염은 다양 한 비보에 감염 모델을 사용 하 여 닭에 공부 했다. 대부분의 gavage 또는 Clostridium perfringens를 사용 하 여 피드를 통해 관리 predisposing 요소, coccidiosis, 다이어트, 등의 조합을 사용 합니다. 이러한 모델에서 독성 연구에 대 한 여러 C. perfringens 긴장의 비교는 많은 중요 한 결과 얻기 위해 호스트 필요 합니다. 연구의 과정에서 사망률 따라서 연구에서 동물 복지에 관한 윤리적 우려를 제기 하는 실험 모델에 따라 높은 수 있습니다. 적은 동물 공부 병 인, 아직 제공 하 고 통계적으로 중요 하 고 유효한 결과 요구 하는 새로운 감염 모델의 개발 연구에서 동물 사용 감소에 중요 하다. 쥐, 토끼, 송아지 등 다양 한 종에서 clostridial 감염 공부 하 장 합자 루프 모델 사용 되었습니다. 합자 루프 세그먼트를 만드는 수술 절차에 따라 C. perfringens 긴장 박테리아와 장 점 막 사이의 긴밀 한 접촉을 설정 하는 루프에 직접 주입 됩니다. 소장 및 luminal 내용을 샘플 몇 시간 후 절차의 종료에 찍힌다. 여러 세균성 긴장 따라서 실험에서 필수 과목의 수를 줄이고 각 동물에 주사 될 수 있습니다. 또한, 절차는 동물 통증을 줄이기 위해 전신 마 취 아래 수행 됩니다. 닭,이 모델을, 때문에 적은 동물 필요 없음 predisposing 요소, 질병을 유발 하는 데 필요한 통증 진통제에 의해 제어 됩니다 C. perfringens 스트레인 pathogenicity 비교할 구강 관리 보다 더 적절 한 것 . 장 합자 루프 모델은 닭에 제대로 설명 하 고 표준화의 최적의 사용을 위해 필수적 이다. 이 원고는 닭에 수많은 장 합자 루프를 만드는 데 필요한 모든 단계를 제공 하 고 유효한 결과 얻기 위해 중요 한 포인트에 대 한 정보를 제공.

9 장 루프와 8 interloops의 회로도 그림 1에 표시 됩니다. 이 모델에서는 총 9 루프와 8 interloops 간단한 합자 함께 만들어집니다. 2cm 근 합자에서 측정에 의해 인접 하 고 원심 합자 루프에 의하여 이루어져 있다. 두 개의 인접 한 루프는 1 cm의 interloop으로 구분 됩니다. 루프는 합자에서 누설에 의해 사이 상호 오염을의 가능한 위험을 감소, interloop 합자 원?...

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A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence

여기 치킨 소장에서 '장 합자 루프'를 수술로 만들려고 프로토콜 선물이. 이 절차는 여러 Clostridium perfringens 긴장의 독성에서 제자리에 단일 호스트에서의 비교에 대 한 수 있습니다. 이 메서드는 현저 하 게 일반적으로 비슷한 vivo에서 실험에 필요한 닭의 수 감소.

Clostridium Perfringens 독성 연구를 마 취 특정 병원 체 무료 닭에 합자 장 루프 모델

Necrotic enteritis was studied in chickens using various in vivo infection models. Most of these use a combination of predisposing factors, such as ...

이 방법은 치킨 괴사 장염 연구의 분야에서 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 특정 클로스트리듐 퍼프린지균균의 독성을 비교하는 것과 같이 이 질병을 일으키는 긴장. 이 기술의 주요 장점은 유사한 앰비보어 실험에 일반적으로 필요한 닭의 수를 현저하게 줄이라는 것입니다.이 방법은 클로스트리디움 퍼프린지 균주의 독성 잠재력에 대한 통찰력을 제공 할 수 있지만 클로스트리듐 디피실 또는 살모넬라 장과 같은 다른 장 병원균에도 적용 될 수 있습니다. 일반적으로, 이 방법에 새로운 개별은 외과 적 절차가 특정 훈련을 필요로하고 봉합과 같은 기술을 습득 한 사람들에 의해 수행되어야하기 때문에 투쟁한다, 실험 전에 기술. 10주 된 특정 병원체 프리 레그혼 닭을 마취한 후 중요한 측정을 위해 모니터를 설치하고 부드러운 견인력으로 복부에서 깃털을 수동으로 제거하기 시작합니다.다음으로, 부드러운 강모 브러시로 클로레시딘 글루코네이트를 사용하여 수술 부위를 문질러보십시오. 코스를 뒤집지 않고 5분 동안 중앙에서 주변으로 피부를 부드럽게 문질러주세요. 그런 다음, 살균 거즈를 사용하여 클로르헤시딘 글루코네이트 용액과 이소프로필 알코올로 수술 부위에 세 개의 교대 통로를 수행합니다.다시 말하지만, 중앙에서 주변으로 이동한 다음 닭을 휘감습니다. 수술 부위 위에 드레이프를 열고 3번 메스로 L자형 로우미드라인 피부 절개를 하고, 흉골에 1센티미터 의 포옹을 시작하고, 1센티미터의 두개골에서 클로이차까지 끝납니다. 다음으로, 첫 번째 절개 끝에서 시작하여 두 번째 절개를 수행하여 첫 번째에 수직으로 L 자개를 계속하고 골반 라인을 따라 복부의 왼쪽에 5 센티미터를 계속합니다.이 개구부에서는 내장을 쉽게 추출할 수 있습니다. 다음으로 복강에 접근하기 위해 동일한 L자 모양 패턴을 사용하여 복막과 복부 근육을 엽니다. 공기 주머니가 노출되고 식염수 에 젖은 거즈를 사용하여 촉촉하게 유지해야합니다.다음으로, 왼쪽 복벽을 따라 복부 낭 주위의 후크를 작동시켜 복강에 스누크 스페이 후크를 삽입하여 내장을 추출합니다. 그런 다음, 마른 거즈를 사용하여, 부드럽게 제주를 노출장 외부화 계속. 창자를 펼치고 살린을 자주 살포하고 살린에 젖은 거즈로 덮어 촉촉하게 유지하십시오.과도한 긴장이 장 허혈성 병변으로 이어질 수 있는 장간 혈관을 파열시키고 절차의 결과를 크게 손상시킬 수 있기 때문에 장내를 꺼내는 동안 매우 부드러운 것이 중요합니다. 장내를 외형화한 후, 제주눔부터 창자에서 일련의 루프를 만든다. 각 루프는 다른 치료에 사용할 수 있습니다.근위 제주눔에서는 주요 막종 혈관의 합자를 피하면서 폴리글루타민 멀티필라멘트 합성 흡수성 물질로 간단한 합자를 배치한다. 다음으로, 첫 번째 루프를 완료하기 위해 근위 합자에서 2센티미터 떨어진 불강 합자를 배치합니다. 모든 근위 및 단면 합자 약 2센티미터 간격이어야 합니다.각 합자 쌍은 밀폐 세그먼트인 루프를 만듭니다. 다음으로 루프 사이에 인터루프 또는 창자 세그먼트를 만듭니다. 간단한 합자 반 센티미터를 첫 번째 루프의 단위 합자에 배치합니다.이 합자는 인터루프의 중간에 있으며 루프 간의 교차 오염이 감소합니다. 이제 인터루프 합자에서 반 센티미터 떨어진 다른 루프를 만드는 패턴을 계속 합니다. 여기서는 내장 26cm를 커버하는 9개의 루프와 8개의 인터루프가 만들어집니다.필요에 따라 루프 수를 조정할 수 있습니다. 다음으로 클로스트리디움 퍼프린지균의 균주를 루프에 주입하는 것을 진행합니다. 루프의 항-메젠트 측에, 45도 각도로 26 게이지 바늘을 사용하여 0.2 밀리리터의 BHI 용액을 주입하여 중간 성장 단계에서 100만 개의 콜로니 형성 단위를 함유한다.이 상황에서 9개의 루프가 있는 5개의 다른 균주는 차량만으로 주입된 개입 루프와 함께 교대루프에 주입됩니다. 병원균을 주입 한 후, 부드럽게 공기 낭 아래 복강의 등대 영역으로 내장을 교체. 그런 다음 복강을 닫습니다.폴리글루타민 멀티필라멘트 합성 흡수성 물질을 사용하여 간단한 연속 봉합추 패턴으로 골반을 따라 복막과 복부 근육을 봉합합니다. 간단한 연속 봉합사를 사용하여 흉골에서 회고에 복막과 복부 근육을 봉합하여 계속하십시오. 다음으로, 폴리글루타민 멀티필라멘트 합성 소재와 심플한 연속 패턴을 사용하여 피부를 가까이에 봉합합니다.첫째, 골반을 따라 봉합한 다음 흉골에서 응고까지 봉합합니다. 절개를 닫은 후 감염 시간 동안 동물의 통증을 최소화하기 위해 진통제를 적절히 사용하여 전신 마취 하에 닭을 유지하십시오. 적절한 마취 수준을 보장하기 위해 마취 모니터링을 계속합니다.본 실험에서 7시간 과 같은 원하는 양의 감염 시간 후에 새를 안락사시키고 장 조직을 수집한다. 숫자 3 메스를 사용하여 반쪽에서 1센티미터 루프 섹션으로 잘라냅니다. 그런 다음, 하룻밤 고정 및 추가 조직 병리학 분석을 위해 섹션을 10 %의 포르말린으로 옮기.그런 다음 동일한 루프에서 동일한 메스 블레이드를 사용하여 루프의 나머지 부분을 잘라내고 박테리아의 분리를 위해 마이크로 융합 된 튜브로 조직을 전달하십시오. 매번 새 메스 블레이드를 사용하여 각 루프에 대해 이 절차를 반복합니다. 주입 후 7시간 후, 대조군 멸균 배지로 주입된 장 루프는 괴사가 없는 그대로 점막 브러시 테두리를 가집니다.세그먼트의 장 층의 온화한 혼잡은 드물지 않습니다. 병원체, 클로스트리듐 perfringens, 빌리 팁팁과 함께 주입 후 7시간 후, 팁을 둘러싼 괴사 진입 부위가 침식됩니다. 그리고 사악한 주변의 괴사 물질, 큰 막대 모양의 박테리아의 클러스터가있다.때때로 괴사는 가난한 절차 실행 때문이고 박테리아에 의해 생성된 병변으로 잘못 해석될 수 있습니다. 말할 줄 이같은 징후는 조직학 단면도에 박테리아가 없다는 것입니다. 또한, 근육층의 혈관은 혈관 혼잡을 나타내는 많은 퇴행성 적혈구의 축적에 의해 심하게 팽창된다.이것은 가능성이 창자에 과도 한 물리적 긴장을 할 리그 했다 계각 된 막연한 혈관에 의해 발생 했다. 허혈성 루프는 외과 적 시술 중에 현미경으로 쉽게 식별 할 수 있습니다. 합자 후 몇 분 후 심한 혈관 혼잡에 따라, 세로사는 정상적인 분홍색 붉은 색칠 대신 어두운 파란색이 될 것입니다.이 비디오를 시청한 후에는 장에 합자를 배치하여 닭 모델에 여러 장 루프를 만드는 방법에 대해 잘 이해해야 합니다. 일단 감염 시간을 제외하고 외과 적 절차를 마스터하면 제대로 수행될 경우 3 시간 이내에 수행 할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안, 고통을 통제하고 수술 부분 및 감염 시간을 따르는 것을 포함하여 모든 절차 도중 생명 징후를 감시하기 위하여 깊은 마취의 밑에 닭을 유지하는 것을 기억하는 것이 중요합니다.이러한 절차 나 세균 성 격리 와 같은 그들의 방법에 따라, PCR에 의한 유전자 검출과 같은 직선 식별은 초기 주입 된 병원체의 회복 및 식별과 같은 외부 질문에 대답하기 위해 수행 될 수있다. 이 개발 후,이 기술은 클로스트리듐 의 분야에서 연구원을위한 방법을 포장 은 닭에서 괴사 원염을 탐구하는 병인을 perfringens. 살아있는 동물과 함께 일하는 것은 매우 가변적 일 수 있다는 것을 잊지 마십시오.그리고 닭의 지속적인 마취 모니터링과 같은 예방 조치는 항상이 절차를 수행하는 동안 수행해야합니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

PTSD의, 신경 Hematologic, 그리고 행동 상관 관계를 누설하는 행위에 대해서는 동물 모델에서 생체

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연구

의학

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