Name: a ligated intestinal loop model in anesthetized specific pathogen free chickens to study clostridium perfringens virulence
Uploaded: 2018-10-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence at JoVE.com

Bu eser Veteriner Tıp Fakültesi üzerinden Université de Montréal Tavukçuluk araştırma (M. Boulianne) sandalyede tarafından desteklenmiştir. DRS. Boulianne ve üst modelini geliştirmiştir. DRS. Boulianne ve üst ameliyatlar yapılır. Doktor Burns'ü anestezi protokolünü geliştirmede yardımcı oldu. Dr. üst düzenlenmiş video ve el yazması yazdı. DRS Burns, el yazması Desrochers ve Boulianne düzenlenmiş.

Canlı hayvan kullanımı ile tüm yordamları Etik Komitesi, Veteriner Tıp Fakültesi, Université de Montréal tarafından yetkili (CÉUA, 'Comite d' éthique de l'utilisation des Animaux').
1. ameliyat öncesi hakkında önemli noktalar
<ol><li>10 haftalık özel patojen ücretsiz (SPF) Livorno tavuk ameliyatı için seçin. Not: Kendi ağırlığı 1.0 ve 1.2 kg arasında olması gerekir.</li>
	<li>Besleme bağırsak boşaltmak için yordamlar önce 12 h geri alıyorum.</li>
	<li>Ame...

<ol>
	<li>Vitale, A., Chiarotti, F., Alleva, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+animal+models+in+disease+research.">The use of animal models in disease research.</a> Rare diseases and orphan drugs. 2 (1), 1-4 (2015).</li><li>Uzal, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+to+study+the+pathogenesis+of+human+and+animal+Clostridium+perfringens+infections.">Animal models to study the pathogenesis of human and animal Clostridium perfringens infections.</a> Veterinary Microbiology. , (2015).</li><li>Bernier, G., Phaneuf, J. B., Filion, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+enteritis+in+broiler+chickens.+III.+Study+of+the+factors+favoring+the+multiplication+of+Clostridium+perfringens+and+the+experimental+transmission+of+the+disease.">Necrotic enteritis in broiler chickens. III. Study of the factors favoring the multiplication of Clostridium perfringens and the experimental transmission of the disease.</a> Canadian Journal of Comparative Medicine. 41 (1), 112-116 (1977).</li><li>Al-Sheikhly, F., Truscott, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathology+of+necrotic+enteritis+of+chickens+following+infusion+of+broth+cultures+of+Clostridium+perfringens+into+the+duodenum.">The pathology of necrotic enteritis of chickens following infusion of broth cultures of Clostridium perfringens into the duodenum.</a> Avian Diseases. 21 (2), 230-240 (1977).</li><li>Wicker, D. L., Iscrigg, W. N., Trammell, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+control+and+prevention+of+necrotic+enteritis+in+broilers+with+zinc+bacitracin.">The control and prevention of necrotic enteritis in broilers with zinc bacitracin.</a> Poultry Science. 56 (4), 1229-1231 (1977).</li><li>Keyburn, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NetB,+a+new+toxin+that+is+associated+with+avian+necrotic+enteritis+caused+by+Clostridium+perfringens.">NetB, a new toxin that is associated with avian necrotic enteritis caused by Clostridium perfringens.</a> PLoS Pathog. 4 (2), e26 (2008).</li><li>Timbermont, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origin+of+Clostridium+perfringens+isolates+determines+the+ability+to+induce+necrotic+enteritis+in+broilers.">Origin of Clostridium perfringens isolates determines the ability to induce necrotic enteritis in broilers.</a> Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 32 (6), 503-512 (2009).</li><li>Paradis, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+avilamycin+for+the+prevention+of+necrotic+enteritis+caused+by+a+pathogenic+strain+of+Clostridium+perfringens+in+broiler+chickens.">Efficacy of avilamycin for the prevention of necrotic enteritis caused by a pathogenic strain of Clostridium perfringens in broiler chickens.</a> Avian Pathol. 45 (3), 365-369 (2016).</li><li>Valgaeren, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lesion+development+in+a+new+intestinal+loop+model+indicates+the+involvement+of+a+shared+Clostridium+perfringens+virulence+factor+in+haemorrhagic+enteritis+in+calves.">Lesion development in a new intestinal loop model indicates the involvement of a shared Clostridium perfringens virulence factor in haemorrhagic enteritis in calves.</a> Journal of Comparative Pathology. 149 (1), 103-112 (2013).</li><li>Goossens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+C-terminal+domain+of+Clostridium+perfringens+alpha+toxin+as+a+vaccine+candidate+against+bovine+necrohemorrhagic+enteritis.">The C-terminal domain of Clostridium perfringens alpha toxin as a vaccine candidate against bovine necrohemorrhagic enteritis.</a> Vet Res. 47 (1), 52 (2016).</li><li>Goossens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxin-neutralizing+antibodies+protect+against+Clostridium+perfringens-induced+necrosis+in+an+intestinal+loop+model+for+bovine+necrohemorrhagic+enteritis.">Toxin-neutralizing antibodies protect against Clostridium perfringens-induced necrosis in an intestinal loop model for bovine necrohemorrhagic enteritis.</a> BMC Vet Res. 12 (1), 101 (2016).</li><li>Parent, E., Archambault, M., Charlebois, A., Bernier-Lachance, J., Boulianne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chicken+intestinal+ligated+loop+model+to+study+the+virulence+of+Clostridium+perfringens+isolates+recovered+from+antibiotic-free+chicken+flocks.">A chicken intestinal ligated loop model to study the virulence of Clostridium perfringens isolates recovered from antibiotic-free chicken flocks.</a> Avian Pathol. 46 (2), 138-149 (2017).</li><li>Janvilisri, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+differential+proteomes+of+Clostridium+difficile+in+the+pig+ileal-ligated+loop+model.">Temporal differential proteomes of Clostridium difficile in the pig ileal-ligated loop model.</a> PLoS One. 7 (9), e45608 (2012).</li><li>Aabo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+in+vivo+model+for+study+of+intestinal+invasion+by+Salmonella+enterica+in+chickens.">Development of an in vivo model for study of intestinal invasion by Salmonella enterica in chickens.</a> Infection and Immunity. 68 (12), 7122-7125 (2000).</li><li>Meurens, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+immune+response+following+Salmonella+enterica+subspecies+enterica+serovar+Typhimurium+infection+in+porcine+jejunal+gut+loops.">Early immune response following Salmonella enterica subspecies enterica serovar Typhimurium infection in porcine jejunal gut loops.</a> Vet Res. 40 (1), 5 (2009).</li><li>Gerdts, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+intestinal+'loops'+provide+an+in+vivo+model+to+analyse+multiple+mucosal+immune+responses.">Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses.</a> J Immunol Methods. 256 (1-2), 19-33 (2001).</li><li>Wade, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adherent+abilities+of+Clostridium+perfringens+strains+are+critical+for+the+pathogenesis+of+avian+necrotic+enteritis.">The adherent abilities of Clostridium perfringens strains are critical for the pathogenesis of avian necrotic enteritis.</a> Vet Microbiol. 197, 53-61 (2016).</li><li>Cooper, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+for+chickens+of+Clostridium+perfringens+isolated+from+poultry+and+other+sources.">Virulence for chickens of Clostridium perfringens isolated from poultry and other sources.</a> Anaerobe. 16 (3), 289-292 (2010).</li><li>Cooper, K. K., Songer, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+of+Clostridium+perfringens+in+an+experimental+model+of+poultry+necrotic+enteritis.">Virulence of Clostridium perfringens in an experimental model of poultry necrotic enteritis.</a> Veterinary Microbiology. 142 (3-4), 323-328 (2010).</li><li>Chalmers, G., Bruce, H. L., Toole, D. L., Barnum, D. A., Boerlin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+enteritis+potential+in+a+model+system+using+Clostridium+perfringens+isolated+from+field+outbreaks.">Necrotic enteritis potential in a model system using Clostridium perfringens isolated from field outbreaks.</a> Avian Diseases. 51 (4), 834-839 (2007).</li></ol>

Bağırsak döngüler modelleri ev sahibi-patojen etkileşim ve Clostridium perfringens, Clostridium difficile ve gibi çeşitli bağırsak patojenlerin neden olduğu hastalıkların patogenezinde çalışmaya çok sayıda tür tarif var Salmonella enterica7,9,13,14,15. Mukozal immün yanıt16, antikorlar inte...

İnsan ve hayvanların etkileyen bulaşıcı hastalıklar çalışmaya hayvan modelleri kullanımını önlemek veya hastalıkları1tedavi stratejileri ayrıntılı olarak belirli bir koşulu de patogenezinde düzenleyen virülans faktörleri değerlendirirken merkezi bir araçtır. Çeşitli hastalıklar çalışmaya hayvan modelleri kullanmanın birçok yararları rağmen bu uygulama ile ilgili Etik kaygılar kaynaklanan. Araştırmacılar önemli ve geçerli sonuçlar elde etmek süre hayvan kullanımı en aza indirmek gerekir. 3 Rs ilkeleri (değiştir, azaltmak ve İyileştir) kavramı refah sorunları bu tür çalışmalarda ele alındı sağlamak için özenli. Tavuk nekrotik enterit çalışmalarda vivo içinde tavuk modelleri etyoloji, önleme ve tedavi bu koşul2,3,4,5araştırmak için kullanılır. C. perfringens NetB toksini6gibi belirli virülans faktörleri taşıyan patojen suşları nekrotik enterit tavuk7' neden için uygulanmaktadır. Yedek ilke, bu nedenle, bu virülans faktörleri-ebilmek değil var olmak içinde hayvan diğer türler gibi kritik olarak böyle durumda elde etmek zordur. Çoğu modeller tavuklarda nekrotik enterit için risk faktörleri, coccidiosis gibi bir arada kullanmak ve nekrotik enterit sonda ile besleme suyu kültür C. perfringens2. çok sayıda içeren tarafından takip ikna etmek için diyet değişmiş Bu modeller çok sayıda tavuk hastalığında teşvik ve mortalite böylece hayvan araştırma azaltma ve arıtma ilkeleri hakkında kaygıları gündeme getirme böyle denemeler8, önemli olabilir.
Bağırsak ve birleştirilmiş döngüler modelleri çalışma prensibi azaltma ve arıtma ile ilgili bağırsak patojenler tarafından indüklenen hastalıklar için arzu edilen bir alternatiftir. Bu modellerin nerede patojenler yalnız9 enjekte edilebilir bağımsız ve hermetik bölmeleri oluşturmak için bağırsak boyunca veya başka moleküllerin, aşı adaylar ile bitişik harfler yerleştirerek 'döngüler' olarak adlandırılan bağırsak kesimlerinde oluşturulur 10 , 11. faiz patojenler bağırsak hücreleri ile yakın temas içinde yerleştirilir ve enfeksiyon zaman birkaç saat sonra daha fazla çözümleme için bağırsak örnekleri elde edilebilir. Bu aynı hayvan birden fazla tedavi ve kontrol grubu kullanımına izin verir. İstatistiksel analiz grupları arasında ayrımcılık gücünü artırdığı ve gerekli tavuk oral gavaj denemeler için karşılaştırıldığında sayısını azaltır tekrarlanan ölçüler modelleri ile gerçekleştirilebilir. Ayrıca, cerrahi işlemler ve sonraki enfeksiyon kez sürekli genel anestezi ve analjezi, dolayısıyla hayvan ağrı en aza indirme altında gerçekleştirilir. Kapalı devre d ana bilgisayar numaraları azaltmak ve hayvan araştırma daha insancıl bir sistem oluşturmak için ideal bir şablonu vardır.
Bağırsak ve birleştirilmiş döngüler modelleri de çeşitli türlerden buzağılar, tavşan ve fareler2,9, açıklanan ama kötü tavuk7' de açıklanan. Cerrahi bu model en iyi bir kullanımı için uygun tekniği ve yürütme bağırsak bütünlüğü zarar önlemek için ve birleştirilmiş bağırsak döngü oluşturulması için gerekli olan. Bu el yazması bir tavuk modeli birden çok bağırsak döngü oluşturulması adım adım yöntemi açıklamak için hedeftir. Doğru yordamları projenin başarısı için gerekli olduğu gibi bu teknik cerrahın beceri ve deneyim, sınırlıdır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>EZ-Scrub 747</td>
			<td>Becton Dickinson and Company</td>
			<td></td>
			<td>4% chlorhexidine gluconate detergent impregnated sterile brush. No catalog number available. Web address: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropyl alcohol 70% USP 4 L</td>
			<td>Commercial isopropyl alcohol</td>
			<td>P016IP70</td>
			<td>Web address: http://www.comalc.com/products/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorexidine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>282227-1G</td>
			<td>Chlorhexidine gluconate solution, must be diluted to 4%. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr&#38;region=CA&#38;gclid=EAIaIQobChMI8vHr4_OY1wIV3rrACh2ZWQKuEAAYAiAAEgLKx_D_BwE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Drape Small (27 inch x 24 inch) with 3 x 6 inch Fenestration</td>
			<td>Veterinary Specialty Products</td>
			<td>32724</td>
			<td>Web address: http://www.vetspecialtyproducts.com/index.cfm?fuseaction=ecommercecatalog.detail&#38;productgroup_id=15</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades #3</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>301</td>
			<td>Web address: https://www.swann-morton.com/product/16.php</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline NaCl 0.9%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8776-100ML</td>
			<td>Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s8776?lang=fr&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl 3-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>D9003</td>
			<td>Polyglactin multifilament absorbable suture material. Web address: http://www.ethicon.com/healthcare-professionals/products/wound-closure/absorbable-sutures/coated-vicryl-polyglactin-910-suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 1 ml with 26G needle</td>
			<td>Becton Dickinson and Company</td>
			<td>329652</td>
			<td>Web address: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/diabetes-care/insulin-syringes/bd-1-ml-conventional-insulin-syringes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brain Heart Infusion</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>1104930500</td>
			<td>Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/mm/110493?lang=fr&#38;region=CA&#38;cm_sp=Insite-_-prodRecCold_xorders-_-prodRecCold2-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tube</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9661-500EA</td>
			<td>Microcentrifuge tube. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t9661?lang=fr&#38;region=CA&#38;gclid=EAIaIQobChMI-YizzfiY1wIVRkCGCh30SQjuEAAYAiAAEgLK5fD_BwE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin solution, buffered neutral, 10%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td>Ratio tissue : formalin of 1: 10 for adequate fixation. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clostridium perfringens strains</td>
			<td>Universit&#233; de Montr&#233;al, Chaire en recherche avicole</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Specific to each laboratory, available upon request to correspondant author</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a ligated intestinal loop model in anesthetized specific pathogen free chickens to study clostridium perfringens virulence

Nekrotik enterit çeşitli vivo içinde enfeksiyon modelleri kullanarak tavuklarda incelenmiştir. En-in bunlar sonda ile besleme veya Clostridium perfringenskullanarak yem üzerinden yönetim ile coccidiosis ve diyet, gibi yatkinlastirici faktörlerin birleşimi kullanın. Bu modellerinde, birden çok C. perfringens suşları virülans etütler karşılaştırılması çok sayıda önemli sonuçlar elde etmek için ana bilgisayarlar gerektirir. Çalışma süresince ölüm dolayısıyla araştırma hayvan refahı ile ilgili etik kaygıları gündeme getirme deneysel modeline bağlı olarak yüksek olabilir. Patogenez, henüz istatistiksel olarak önemli ve geçerli sonuçlar sağlayan eğitim için daha az sayıda hayvan gerektiren yeni enfeksiyon modelleri araştırma hayvan kullanımda azaltmada önemli bir gelişmedir. Bağırsak ve birleştirilmiş döngü modelleri fare, tavşan ve buzağı gibi çeşitli tür clostridial enfeksiyonları eğitim için kullanılmaktadır. Ve birleştirilmiş döngü segmentleri oluşturmak için cerrahi işlemler C. perfringens suşları doğrudan döngüler bakteri ve bağırsak mukoza arasında yakın bir temas kurmak için içine enjekte edilir. İnce bağırsak ve luminal İçindekiler örnekleri yordamları fesih bir kaç saat sonra alınır. Birden çok bakteri suşları dolayısıyla gerekli deneyler bireylerde sayısını azaltarak her hayvan aşılamak. Ayrıca, yordamlar hayvan ağrı azaltmak için genel anestezi altında gerçekleştirilir. Tavuklarda, bu model çok daha az sayıda hayvan ihtiyaç vardır, hiçbir yatkinlastirici faktörler hastalığın ikna etmek için gerekli olan ve ağrı ağrı kesici tarafından kontrol edilir çünkü C. perfringens zorlanma patojenitesi karşılaştırmak için sözlü yönetim daha uygun olur . Bağırsak ve birleştirilmiş döngü modeli tavuklarda kötü anlatılan ve standardizasyon optimal kullanımı için gereklidir. Bu el yazması çok sayıda bağırsak ve birleştirilmiş döngüler tavuklarda oluşturmak için gerekli tüm adımları sağlar ve geçerli sonuçlar elde etmek için kritik noktaları hakkında bilgi getiriyor.

9 bağırsak döngüler ve 8 interloops bir şematik resim 1' de gösterilen. Bu modelde, toplam 9 döngüler ve 8 interloops ile basit bağ oluşturulur. Proksimal bağ ölçülür 2 cm aralıklı proksimal ve distal bitişik harfler, bir döngü oluşur. İki bitişik döngü 1 cm bir Interloop tarafından ayrılır. Kaçak bir bağ üzerinden tarafından döngüler arasında çapraz bulaşma olası riski azaltmak için interloop bir bağ orta yolda distal ...

Watch this Scientific Journal Video about A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence at JoVE.com

A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence

Burada cerrahi olarak tavuk küçük bağırsaklarında 'bağırsak ve birleştirilmiş döngüler' oluşturmak için bir iletişim kuralı mevcut. Bu yordam, birden çok Clostridium perfringens suşları virülans in situ tek bir ana bilgisayar karşılaştırılması için verir. Bu yöntem belirgin tavuk genellikle benzer in vivo deneyler için gerekli sayısını azaltır.

Clostridium Perfringens virülans çalışmaya imzalat belirli patojen ücretsiz tavuk ve birleştirilmiş bağırsak döngü modelinde

Necrotic enteritis was studied in chickens using various in vivo infection models. Most of these use a combination of predisposing factors, such as ...

Bu yöntem Tavuk Nekrotik Enterit araştırma alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu hastalığa neden olan belirli Clostridium perfringens suşlarının virülansını karşılaştırmak gibi. Bu tekniğin en büyük avantajı, genellikle benzer ambivot deneyleri için gerekli olan tavuk sayısını önemli ölçüde azaltmasIdır.Bu yöntem Clostridium perfringens suşlarının virülans potansiyeline dair içgörü sağlarken, Clostridium difficile veya Salmonella enterica gibi diğer bağırsak patojenlerine de uygulanabilir. Genel olarak, cerrahi prosedürlerin özel eğitime ihtiyacı olduğu ve sadece denemeden önce bir teknik olan dikiş gibi beceriler edinmiş kişiler tarafından gerçekleştirileceği için bu yönteme yeni başlayan bireyler mücadele edecektir. 10 haftalık özel patojensiz leghorn tavuk anestezi sonra, hayati ölçümler için monitörler kurmak ve hafif çekiş ile karın tüyleri elle çıkarmadan başlar.Daha sonra, yumuşak bir kıl fırçası ile Klorheksidin glukonat kullanarak cerrahi alanı temizleyin. Yavaşça ders ters olmadan beş dakika boyunca merkezinden çevreye deri ovmak. Daha sonra, steril gazlı bezler kullanarak Klorheksidin glukonat çözeltisi ve isopropil alkol ile cerrahi sitede üç alternatif pasajlar gerçekleştirin.Yine, merkezinden çevreye gidin, sonra, tavuk perde. Cerrahi sitenin üzerinde perde açarak başlayın, sonra bir numara üç neşter ile L şeklinde düşük orta deri kesi yapmak, sternum bir santimetre sarılmak başlayan, ve kloicha bir santimetre kranial biten. Daha sonra, ilk kesi sarılma sonundabaşlayan ikinci bir kesi yaparak ilk dik L şeklinde kesi devam ve pelvis hattı takip ederek karın sol tarafına beş santimetre devam edin.Bu açıklık bağırsakların kolay çıkarılmasını sağlayacaktır. Daha sonra, karın boşluğuna erişmek için aynı L şeklindeki deseni kullanarak periton ve karın kaslarını açın. Hava keseleri şimdi maruz kalacak ve tuzlu gazlı bez kullanılarak nemli tutulmalıdır.Daha sonra, sol karın duvarı aşağıdaki ve bağırsak ayıklamak için karın hava keseleri etrafında kanca çalışarak karın boşluğuna bir Snook spay kanca takın. Sonra, kuru gazlı bez kullanarak, jejunum ortaya çıkarmak için yavaşça bağırsakdışlaştırma devam edin. Bağırsakları dışarı yayın ve Tuzlu su ile sık sık püskürtme ile nemli tutmak ve Tuzlu gazlı bez ile kaplayarak.Aşırı gerginlik bağırsak iskemik lezyonlara yol açabilir ve büyük ölçüde işlemin sonucunu tehlikeye mezenterik damarları yırtmak çünkü bağırsak çıkarırken çok nazik olmak önemlidir. Bağırsakları dışa doğru dışa doğru yaptıktan sonra, Jejunum'dan başlayarak bağırsaklarda bir dizi döngü yapın. Her döngü farklı tedavi için kullanılabilir.Proksimal Jejunum olarak, büyük mezenterik damarların ligature kaçınarak bir Polyglutamine Multifilament sentetik emilebilir malzeme ile basit bir ligatür yerleştirin. Daha sonra, ilk döngüyü tamamlamak için proksimal ligatürden iki santimetre uzakta distal bir ligatür yerleştirin. Tüm proksimal ve distal ligatürler yaklaşık iki santimetre aralıklı olmalıdır.Ligatürler her çifti bir döngü yapar, hangi bir hermetik segmenttir. Sonra, döngüler arasında bir interloop veya bağırsak bir segment oluşturun. Basit bir ligature yarım santimetre aborely ilk döngü distal ligature yerleştirin.Bu bağ interloop ortasında ve döngüler arasında olası çapraz kontaminasyon azaltacaktır. Şimdi, interloop ligature başka bir döngü yarım santimetre aborely oluşturma desenine devam edin. Burada, dokuz döngüler ve sekiz interloops bağırsak 26 santimetre kapsayan oluşturulur.Döngü sayısı gerektiği gibi ayarlanabilir. Daha sonra, döngüler içine Clostridium perfringens enjekte suşu ile devam edin. Döngünün anti-mezenterik tarafına, orta log büyüme aşamasında bir milyon koloni oluşturan bakteri birimlerini içeren 0,2 mililitre BHI çözeltisi enjekte etmek için 45 derecelik açıyla 26 ölçü iğnesi kullanın.Bu durumda, dokuz döngü ile, beş farklı suşları negatif kontroller olarak tek başına araç enjekte intervening döngüler ile alternatif döngüler enjekte edilir. Patojenler enjekte ettikten sonra, yavaşça hava keseleri altında karın boşluğunun dorsal alana bağırsak sistemi değiştirin. Sonra karın boşluğunu kapatın.Bir Polyglutamin Multifilament sentetik emilebilir malzeme kullanarak basit bir sürekli dikiş deseni ile pelvis boyunca periton ve karın kasları dikiş. Basit sürekli dikişler kullanarak göğüs kafesinden kloze periton ve karın kaslarını dikerek devam edin. Daha sonra, poliglutamin Multifilament sentetik malzeme ve basit bir sürekli desen kullanarak cildi yakın dikiş.Önce leğen kemiği boyunca dikiş, sonra göğüs kafesine dikiş. Kesileri kapattıktan sonra, enfeksiyon sırasında hayvan ağrılarını en aza indirmek için analjeziklerin uygun kullanımı ile genel anestezi altında tavuk tutun. Yeterli anestezi düzeyini sağlamak için anestezi takibine devam edin.Bu deneyde yedi saat gibi enfeksiyon süresi istenilen miktarda sonra, kuş ötenazi ve bağırsak dokuları toplamak. Üç numaralı neşter kullanarak, yarım ila bir santimetrelik döngü bölümünü kesip atın. Daha sonra, gecefiksasyonu ve daha ileri histopatolojik analiz için%10 Formalin bölümü aktarın.Daha sonra, aynı döngü üzerinde aynı neşter bıçak kullanın döngü geri kalanı kesip ve bakteri izolasyonu için mikrofüzyon tüp bu doku transferi. Her seferinde yeni bir neşter bıçağı kullanarak her döngü için bu yordamı tekrarlayın. Enjeksiyondan yedi saat sonra, kontrol steril bir ortam enjekte edilen bir bağırsak halkası nekroz olmadan sağlam bir mukozal fırça sınırına sahiptir.Segmentlerin bağırsak tabakalarında hafif tıkanıklık nadir değildir. Patojen ile enjeksiyondan yedi saat sonra, Clostridium perfringens, villi ipuçları ipuçları çevreleyen nekrotik giriş siteleri ile aşınmış. Ve sonra villi çevreleyen nekrotik malzeme, büyük çubuk şeklinde bakteri kümeleri vardır.Bazen nekroz kötü prosedür yürütme nedeniyle ve bakteriler tarafından üretilen lezyonlar olarak yanlış yorumlanabilir. Bir telltale işaretleri histolojik bölümünde bakteri yokluğudur. Ayrıca, kas tabakasında kan damarları ciddi vasküler tıkanıklık göstergesi birçok dejeneratif eritrosit birikimi ile genişlemiş.Bu büyük olasılıkla bağırsaküzerinde aşırı fiziksel zorlanma yapmak için ligated olan ligated mezenterik kan damarları neden oldu. İskemik döngüler cerrahi işlemler sırasında mikroskobik olarak kolayca tespit edilebilir. Ligatür den birkaç dakika sonra şiddetli damar tıkanıklığı sonrasında, serosa normal pembe kırmızımsı renklendirme yerine koyu mavi olacak.Bu videoyu izledikten sonra, bağırsaklara ligatürler yerleştirerek bir tavuk modelinde birden fazla bağırsak döngüleri oluşturmak için nasıl iyi bir anlayışa sahip olmalıdır. Enfeksiyon süresi hariç cerrahi işlemlerde ustalaştıktan sonra, doğru şekilde yapılırsa üç saatten daha kısa sürede yapılabilir. Bu işlemi denerken, ağrıyı kontrol etmek ve cerrahi parça ve enfeksiyon süresini takiben dahil olmak üzere tüm işlemler sırasında hayati belirtileri izlemek için derin anestezi altında tavuk tutmak için hatırlamak önemlidir.Bu prosedürü veya bakteri izolasyonu gibi yöntemleri ni takip etmek ve pcr ile gen tespiti gibi düz tanımlama, ilk enjekte edilen patojenin iyileşmesi ve tanımlanması gibi dış soruları yanıtlamak için gerçekleştirilebilir. Bu gelişmeden sonra, bu teknik Clostridium perfringens patogenez alanında araştırmacılar için tavuknekrotik Enterit keşfetmek için bir yol açtı. Canlı hayvanlarla çalışmanın son derece değişken olabileceğini unutmayın.Bu işlemi gerçekleştirirken tavuğun sürekli anestezi takibi gibi önlemler her zaman yapılmalıdır.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

TSSB, Nöral Hematolojik ve Davranış Bağlantılı Revealing için Hayvan Modelinde Biyobelirteçler

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

Functional Assessment of Intestinal Motility and Gut Wall Inflammation in Rodents: Analyses in a Standardized Model of Intestinal Manipulation

Bağırsak Manipülasyon bir Standart Model Analizleri: Kemirgenler Barsak Motilite ve Gut Duvar İnflamasyon İşlevsel Değerlendirilmesi

Inflammation of the gastrointestinal tract is a common reason for a variety of human diseases. Animal research models are critical in investigating the ...

A Human Ex Vivo Atherosclerotic Plaque Model to Study Lesion Biology

A Human Ex Vivo Atherosclerotic Plaque Model to Study Lesion Biology

Bir İnsan<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Aterosklerotik Plak Model Lezyon Biyoloji Eğitim için

Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease of the vasculature. There are various methods to study the inflammatory compound in atherosclerotic ...

Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury

Farelerde Yüz Sinir Aksotomi: Sakatlık Motonöron Yanıtı Eğitim için Bir Model

The goal of this surgical protocol is to expose the facial nerve, which innervates the facial musculature, at its exit from the stylomastoid foramen and ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Ven interpozisyonu Model: baypas açıklığının Eğitim için uygun bir model

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

A Model of Free Tissue Transfer: The Rat Epigastric Free Flap

Ücretsiz Doku Transferi Modeli: Sıçan Epigastrik Serbest Flep

Free tissue transfer has been increasingly used in clinical practice since the 1970s, allowing reconstruction of complex and otherwise untreatable defects ...

Intestinal Stem Cell Isolation and Culture in a Porcine Model of Segmental Small Intestinal Ischemia

Bağırsak kök hücre izolasyon ve Segmental küçük bağırsak iskemi, domuz bir modeli kültür

Intestinal ischemia remains a major cause of morbidity and mortality in human and veterinary patients. Many disease processes result in intestinal ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

Farede Miyokard Enfarktüsü Çalışması İçin Kriyoyaralanma Modeli

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...