Name: virus delivery of crispr guides to the murine prostate for gene alteration
Uploaded: 2018-04-27T15:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration at JoVE.com

MIJNHEER werd gefinancierd door een beurs van de Deense cancer society (R146-A9394-16-S2). MFB en MKT werden gefinancierd door AUFF NOVA (AUFF-E-2015-FLS-9-8). De heer en MFB werden medegefinancierd door Graduate School, gezondheid, AU. Het E.F.W.-laboratorium wordt ondersteund door subsidies van het Spaanse ministerie van economie (SAF2015-70857, medegefinancierd door het EFRO-EU) en een ERC advanced grant (741888 - CSI-Fun).
We willen bedanken Liliana Fajardo Mellor (genen, ontwikkeling en ziekte; Nationale Cancer Research Center) voor de kritische lezing van het manuscript.

Dit protocol omvat een chirurgische ingreep in laboratorium muizen. Alle dierproeven moeten afzonderlijk worden beoordeeld en goedgekeurd door een institutionele Animal Care en gebruik Comité (IACUC). De aanpak is gebaseerd op dierlijke herstel en overleven, zorgen voor passende anesthesie en pijnbehandeling een aseptische chirurgische omgeving te allen tijde. Gebruik een verwarming pad te voorkomen hypothermie tijdens chirurgie en tot herstel van de verdoving.
1. begin overwegingen
<ol><li...

<ol>
	<li>Ferlay, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+incidence+and+mortality+worldwide:+sources,+methods+and+major+patterns+in+GLOBOCAN+2012.">Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012.</a> Int J Cancer. 136, E359-E386 (2015).</li><li>Gerlinger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratumor+heterogeneity+and+branched+evolution+revealed+by+multiregion+sequencing.">Intratumor heterogeneity and branched evolution revealed by multiregion sequencing.</a> N Engl J Med. 366, 883-892 (2012).</li><li>Robinson, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrative+Clinical+Genomics+of+Advanced+Prostate+Cancer.">Integrative Clinical Genomics of Advanced Prostate Cancer.</a> Cell. 162, 454 (2015).</li><li>Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R., Elder, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+transgenesis:+an+overview.">Animal transgenesis: an overview.</a> Brain Struct Funct. 214, 91-109 (2010).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+prostate+epithelial+cell-specific+Cre+transgenic+mouse+model+for+tissue-specific+gene+ablation.">Generation of a prostate epithelial cell-specific Cre transgenic mouse model for tissue-specific gene ablation.</a> Mech Dev. 101, 61-69 (2001).</li><li>Ma, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+biallelic+inactivation+of+Pten+in+the+mouse+prostate+leads+to+prostate+cancer+accompanied+by+increased+epithelial+cell+proliferation+but+not+by+reduced+apoptosis.">Targeted biallelic inactivation of Pten in the mouse prostate leads to prostate cancer accompanied by increased epithelial cell proliferation but not by reduced apoptosis.</a> Cancer Res. 65, 5730-5739 (2005).</li><li>Chen, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crucial+role+of+p53-dependent+cellular+senescence+in+suppression+of+Pten-deficient+tumorigenesis.">Crucial role of p53-dependent cellular senescence in suppression of Pten-deficient tumorigenesis.</a> Nature. 436, 725-730 (2005).</li><li>Leow, C. C., Wang, X. D., Gao, W. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+method+of+generating+prostate-specific+Cre-LoxP+gene+switching+via+intraductal+delivery+of+adenovirus.">Novel method of generating prostate-specific Cre-LoxP gene switching via intraductal delivery of adenovirus.</a> Prostate. 65, 1-9 (2005).</li><li>Thomsen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+JUNB/AP-1+promotes+invasive+prostate+cancer.">Loss of JUNB/AP-1 promotes invasive prostate cancer.</a> Cell Death Differ. 22, 574-582 (2015).</li><li>Cho, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+novel+GEM+model+for+metastatic+prostate+cancer+analysis+and+therapy,+reveals+myc+as+a+driver+of+Pten-mutant+metastasis.">a novel GEM model for metastatic prostate cancer analysis and therapy, reveals myc as a driver of Pten-mutant metastasis.</a> Cancer Discov. 4, 318-333 (2014).</li><li>Cho, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+in+vivo+validation+of+candidate+drivers+derived+from+the+PTEN-mutant+prostate+metastasis+genome.">Rapid in vivo validation of candidate drivers derived from the PTEN-mutant prostate metastasis genome.</a> Methods. 77-78, 197-204 (2015).</li><li>Platt, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR-Cas9+knockin+mice+for+genome+editing+and+cancer+modeling.">CRISPR-Cas9 knockin mice for genome editing and cancer modeling.</a> Cell. 159, 440-455 (2014).</li><li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostate-specific+deletion+of+the+murine+Pten+tumor+suppressor+gene+leads+to+metastatic+prostate+cancer.">Prostate-specific deletion of the murine Pten tumor suppressor gene leads to metastatic prostate cancer.</a> Cancer Cell. 4, 209-221 (2003).</li><li>Liu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Copy+number+analysis+indicates+monoclonal+origin+of+lethal+metastatic+prostate+cancer.">Copy number analysis indicates monoclonal origin of lethal metastatic prostate cancer.</a> Nat Med. 15, 559-565 (2009).</li><li>Haffner, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+the+clonal+origin+of+lethal+prostate+cancer.">Tracking the clonal origin of lethal prostate cancer.</a> J Clin Invest. 123, 4918-4922 (2013).</li><li>Daya, S., Berns, K. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+using+adeno-associated+virus+vectors.">Gene therapy using adeno-associated virus vectors.</a> Clin Microbiol Rev. 21, 583-593 (2008).</li><li>Price, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+Aspects+of+Development+and+Structure+in+the+Prostate.">Comparative Aspects of Development and Structure in the Prostate.</a> Natl Cancer Inst Monogr. 12, 1-27 (1963).</li><li>McNeal, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+prostate:+an+historical+survey+of+divergent+views.">Anatomy of the prostate: an historical survey of divergent views.</a> Prostate. 1, 3-13 (1980).</li><li>Thomsen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SOX9+elevation+in+the+prostate+promotes+proliferation+and+cooperates+with+PTEN+loss+to+drive+tumor+formation.">SOX9 elevation in the prostate promotes proliferation and cooperates with PTEN loss to drive tumor formation.</a> Cancer Res. 70, 979-987 (2010).</li></ol>

In dit protocol beschrijven we een methode om te wijzigen genexpressie in de voorste kwab van de lymfkliertest prostaat door virus injectie, maken een krachtige nieuwe muismodel voor prostaatkanker (Figuur 2). Het succesvolle beheer van een Adenovirus werd voor het eerst beschreven door Leow et al. in 20058. Wij hebben eerder getoond hoe tijdrovend kruisingen van een Cre-allel voor weefsel-specifieke schrapping 9 (...

Opsporing en behandeling van prostaatkanker hebben in de afgelopen tien jaar aanzienlijk verbeterd. Toch, de incidentie van prostaatkanker groeit, na levensverwachting. Met een geschatte 1,1 miljoen nieuwe gevallen wereldwijd is het een van de meest voorkomende oorzaken van kanker sterfgevallen in mannen 1. Prostaatkanker is traag in haar ontwikkeling, maar wanneer de kanker heeft geleid tot een metastatische vergevorderde, prognose is slecht als gevolg van de beperkte behandelmogelijkheden. Tot nu toe alleen een paar genen zijn geïdentificeerd als gemeenschappelijke stuurprogramma's in deze vorm van kanker, en haar heterogeniteit en multifocality belemmeren detectie van biomarkers en2,3van de stuurprogramma's van de targetable ziekte.
Klassieke technieken van genereren GEMMs ondervinden vaak door hun complexiteit, tijdige uitgaven en kosten. Voorwaardelijke knockout modellen hebben om te studeren van prostaatkanker kandidaat-genen, die in embryonale letaliteit resulteren als geïnactiveerd in de kiemcellen4wijd gebruikt. Meest voorkomende modellen betrekken een prostaat specifiek Cre recombinase gedreven door ofwel een gemodificeerde Probasin5 of een PSA6 promotor geïntegreerd in de GEMM door extra kruisingen. In deze modellen, zal het gen van belang in de meerderheid van de prostaat epitheliale cellen, het genereren van hyperplasie in het gehele orgaan, die afbreuk kan doen aan van het dier urinewegen functie7worden gericht.
Virale levering van het Cre-eiwit door injectie in de voorste kwab van de lymfkliertest prostaat kan dit probleem oplossen door slechts een paar cellen8. Technische vereisten van de laboratoria, deskundigheid en doelstellingen rekening houdend met, de voordelen van de methode van een breed scala aan mogelijke variaties. Succesvolle benaderingen met gebruikmaking van Adenovirus gericht op JunB en Pten9 of Lentivirus gericht op Pten en Trp5310 is o.a. gebleken. Transgenen, zoals luciferase, toe te voegen aan de virale constructie of aan de GEMM kan bovendien niet-invasieve monitoring van progressie van de ziekte via bioluminescentie imaging11.
Genoom bewerken op basis van de CRISPR/Cas9-technologie, onthult een nieuwe en snelle mogelijkheid om te studeren van kanker via een snelle generatie van somatische uitsparingen12. Virale levering van één gids RNAs (sgRNAs) gericht aan de voorste kwab van de lymfkliertest prostaat stelt een fysiologisch relevanter model van prostaatkanker. Op deze manier kunnen afzonderlijke cellen uitvoering gekozen mutaties klonen die in staat van expansie en invasie zijn vormen. Bovendien zal gebruik van gids RNAs voor meerdere doelgenen cel klonen met de wijzigingen genereren in verschillende genen. Hierdoor kan tumor heterogeniteit en een natuurlijke selectiedruk op progressie van kanker, die het belang van elk gen wijziging of epistatic mechanismen kan onthullen.
Hier presenteren we een methode om de virale deeltjes te leveren aan de lymfkliertest prostaat voor wijziging van de genexpressie. Door een kleine incisie van de buik, de lymfkliertest anterior prostaat kwab is blootgesteld en virale deeltjes worden ingespoten in de kwab. Vijf dagen na chirurgie, chirurgische clips kunnen worden verwijderd uit de huid en de prostaatkanker kan worden geanalyseerd vanaf 8 weken na. Globaal, is dit een snelle en kostenefficiënte procedure, die heeft weinig invloed op de muis en maakt grotere tumor te ontwikkelen zonder afbreuk te doen aan de muis.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B6J.129(B6N)-Gt(ROSA)26Sortm1(CAG-cas9*,-EGFP)Fezh/J mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>26175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0,5 ml U-100 insulin syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>324825</td>
			<td>for virus injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>300013</td>
			<td>for anesthesia injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 G 1/2&#39;&#39; needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>304000</td>
			<td>for anesthesia injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Polysorb Suture</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>GL889</td>
			<td>to close the peritoneum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable sterilized surgery drape</td>
			<td>multiple suppliers</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>multiple suppliers</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-Iodine Prep Pad</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-669-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimming machine</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT415</td>
			<td>to shave the abdomen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11252-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Micro Needle Holder</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12500-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Narrow Pattern Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ring Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11106-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound Clip System Handle incl. Clips</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12030-01</td>
			<td>to close the skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound Clip System Remover</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12030-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>different models have been used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antisedan</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butorphanol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidinhydrochlorid</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100% Ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-032-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye ointment</td>
			<td>Takeda</td>
			<td>7242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virus (AAV, AV)</td>
			<td>multiple suppliers</td>
			<td></td>
			<td>virus used in this protocol is an in-house production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAKT antibody</td>
			<td>CST</td>
			<td>4060</td>
			<td>used 1:200 dillution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP anitbody</td>
			<td>CST</td>
			<td>2956</td>
			<td>used 1:100 dillution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

virus delivery of crispr guides to the murine prostate for gene alteration

Met een steeds vaker voorkomen van prostaatkanker is identificatie van nieuwe stuurprogramma's van de tumor of modulatoren cruciaal. Genetisch gemodificeerde Muismodellen (GEMM) voor prostaatkanker worden belemmerd door de heterogeniteit van de tumor en de complexe micro dynamiek. Traditionele prostaatkanker Muismodellen omvatten onder anderen, kiemcellen en voorwaardelijke uitsparingen, transgene uiting van oncogenen en xenograft modellen. Generatie van DOVO mutaties in deze modellen is complex, tijdrovend en kostbaar. Bovendien, richten meeste van traditionele modellen de meerderheid van de prostaat epitheel, overwegende dat menselijke prostaatkanker is bekend om te evolueren als een op zichzelf staande gebeurtenis in slechts een klein gedeelte van de cellen. Waardevolle modellen wilt simuleren niet alleen de prostaatkanker initiatie, maar ook de progressie naar gevorderde ziekte.
Hier beschrijven we een methode te richten op een paar cellen in de prostaat epitheel door transducing cellen door virale deeltjes. De levering van een gemanipuleerde virus aan de lymfkliertest prostaat kunt ombouwen van genexpressie in de prostaat epitheel. Virustype en het aantal zal hierbij het aantal gerichte cellen voor gene wijziging definiëren door transducing een paar cellen voor het initiëren van de kanker en vele cellen voor gentherapie. Door middel van chirurgie gebaseerde injectie in de voorste kwab, distale uit de urine track, kan de tumor in dit model uitbreiden zonder afbreuk te doen aan de urinaire functie van het dier. Bovendien richten op slechts een subset van prostaat epitheliale cellen de techniek kunt klonen uitbreiding van de tumor, en daarom bootst menselijke tumor initiatie, progressie, evenals de invasie door de basale membraan.
Deze nieuwe techniek biedt een krachtige prostaatkanker model met verbeterde fysiologische relevantie. Dierenleed is beperkt, en aangezien geen extra fokken vereist is, over het geheel genomen dieren is verminderd. Op hetzelfde moment, wordt analyse van nieuwe kandidaat-genen en trajecten versneld, die op zijn beurt meer kostenefficiënt is.

Om te beoordelen virus levering aan de lymfkliertest prostaat, werden monsters geanalyseerd drie maanden na de operatie. De Rosa26-LSL-Cas9-EGFP muizen12 express GFP in cellen die zijn blootgesteld aan Cre eiwit uitgedrukt door het virus. De prostaat monsters werden onderzocht met een fluorescentie microscopie om gebieden te identificeren met GFP signaal (figuur 2A). Het GFP-signaal geeft aan Cre activiteit in de prostaat epitheel, maa...

Watch this Scientific Journal Video about Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration at JoVE.com

Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration

Dit protocol beschrijft een nieuw opgerichte methode voor virus levering aan de lymfkliertest prostaat. Met behulp van technologie van de CRISPR/Cas9, gene overexpressie of Cre recombinase levering, de techniek kunt orthotopic wijziging van genexpressie en implementeert een roman muismodel voor prostaatkanker.

Virus levering van CRISPR gidsen voor de lymfkliertest prostaat voor Gene wijziging

With an increasing incidence of prostate cancer, identification of new tumor drivers or modulators is crucial. Genetically engineered mouse models (GEMM) ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Een muismodel van vermoeidheid geïnduceerd door Peripheral Bestraling

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Identification and Characterization of Metastatic Factors by Gene Transfer into the Novel RIP-Tag; RIP-tva Murine Model

Identification and Characterization of Metastatic Factors by Gene Transfer into the Novel RIP-Tag; RIP-tva Murine Model

Identificatie en karakterisering van metastatische factoren door genenoverdracht in de roman RIP-Tag; RIP-BTW lymfkliertest Model

Metastatic cancer accounts for 90% of deaths in patients with solid tumors. There is an urgent need to better understand the drivers of cancer metastasis ...

Generation of Prostate Cancer Cell Models of Resistance to the Anti-mitotic Agent Docetaxel

Generatie van prostaatkanker modellen van de cel van de weerstand tegen de anti-mitotische Agent Docetaxel

Microtubule targeting agents (MTAs) are a mainstay in the treatment of a wide range of tumors. However, acquired resistance to chemotherapeutic drugs is a ...

Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells

Met behulp van CRISPR/Cas9 Gene bewerken om te onderzoeken de oncogene activiteit van Mutant Calreticulin in Cytokine afhankelijke hematopoietische cellen

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) is an adaptive immunity system in prokaryotes that has been repurposed by scientists to ...

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabricage van tong extracellulaire Matrix en reconstructie van tong plaveiselcelcarcinoom In Vitro

In order to construct an effective and realistic model for tongue squamous cell carcinoma (TSCC) in vitro, the methods were created to produce ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

Een bioluminescente en fluorescerende Orthotopic Syngeneic lymfkliertest Model van androgeen-afhankelijke en castratie-resistente prostaatkanker

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

Phosphopeptide Enrichment Coupled with Label-free Quantitative Mass Spectrometry to Investigate the Phosphoproteome in Prostate Cancer

Verrijking van de Phosphopeptide in combinatie met kwantitatieve Label-vrije Spectrometrie van de massa te onderzoeken van de Phosphoproteome in prostaatkanker

Phosphoproteomics involves the large-scale study of phosphorylated proteins. Protein phosphorylation is a critical step in many signal transduction ...

Preparation of Exosomes for siRNA Delivery to Cancer Cells

Voorbereiding van Exosomes van siRNA levering aan kankercellen

Extracellular vesicles, in particular exosomes, have recently gained interest as novel drug delivery vectors due to their biological origin, abundance, ...

Evaluating the Differentiation Capacity of Mouse Prostate Epithelial Cells Using Organoid Culture

Evaluatie van de differentiatie capaciteit van muizen prostaat epitheelcellen met behulp van Organoid cultuur

The prostate epithelium is comprised predominantly of basal and luminal cells. In vivo lineage tracing has been utilized to define the differentiation ...