Name: virus delivery of crispr guides to the murine prostate for gene alteration
Uploaded: 2018-04-27T15:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration at JoVE.com

MR ble finansiert av et fellesskap fra den danske Kreftforeningen (R146-A9394-16-S2). MFB og MKT ble finansiert av AUFF NOVA (AUFF-E-2015-FLS-9-8). MR og MFB var delfinansiert av Graduate School, helse, AU. E.F.W. laboratorium støttes av tilskudd fra det spanske departementet for økonomi (SAF2015-70857, delfinansiert av ERDF-EU) og en EUCLID (741888 - CSI-moro).
Vi ønsker å takke Liliana Fajardo Mellor (gener, utvikling og sykdom; National Cancer Research Center) for kritisk lesing av manuskriptet.

Denne protokollen innebærer en kirurgisk prosedyre i laboratoriet mus. Alle dyreforsøk må være individuelt vurdert og godkjent av en institusjonell Animal Care og bruk Committee (IACUC). Som tilnærmingen er basert på dyr utvinning og overlevelse, sikre riktig anestesi, smertelindring og et aseptiske kirurgisk miljø hele tiden. Bruke en varmeputen for å hindre nedkjøling under operasjonen og til utvinning fra anestesi.
1. Start hensyn
<ol><li>Avhengig av viruset brukes, kan annen tit...

<ol>
	<li>Ferlay, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+incidence+and+mortality+worldwide:+sources,+methods+and+major+patterns+in+GLOBOCAN+2012.">Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012.</a> Int J Cancer. 136, E359-E386 (2015).</li><li>Gerlinger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratumor+heterogeneity+and+branched+evolution+revealed+by+multiregion+sequencing.">Intratumor heterogeneity and branched evolution revealed by multiregion sequencing.</a> N Engl J Med. 366, 883-892 (2012).</li><li>Robinson, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrative+Clinical+Genomics+of+Advanced+Prostate+Cancer.">Integrative Clinical Genomics of Advanced Prostate Cancer.</a> Cell. 162, 454 (2015).</li><li>Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R., Elder, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+transgenesis:+an+overview.">Animal transgenesis: an overview.</a> Brain Struct Funct. 214, 91-109 (2010).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+prostate+epithelial+cell-specific+Cre+transgenic+mouse+model+for+tissue-specific+gene+ablation.">Generation of a prostate epithelial cell-specific Cre transgenic mouse model for tissue-specific gene ablation.</a> Mech Dev. 101, 61-69 (2001).</li><li>Ma, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+biallelic+inactivation+of+Pten+in+the+mouse+prostate+leads+to+prostate+cancer+accompanied+by+increased+epithelial+cell+proliferation+but+not+by+reduced+apoptosis.">Targeted biallelic inactivation of Pten in the mouse prostate leads to prostate cancer accompanied by increased epithelial cell proliferation but not by reduced apoptosis.</a> Cancer Res. 65, 5730-5739 (2005).</li><li>Chen, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crucial+role+of+p53-dependent+cellular+senescence+in+suppression+of+Pten-deficient+tumorigenesis.">Crucial role of p53-dependent cellular senescence in suppression of Pten-deficient tumorigenesis.</a> Nature. 436, 725-730 (2005).</li><li>Leow, C. C., Wang, X. D., Gao, W. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+method+of+generating+prostate-specific+Cre-LoxP+gene+switching+via+intraductal+delivery+of+adenovirus.">Novel method of generating prostate-specific Cre-LoxP gene switching via intraductal delivery of adenovirus.</a> Prostate. 65, 1-9 (2005).</li><li>Thomsen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+JUNB/AP-1+promotes+invasive+prostate+cancer.">Loss of JUNB/AP-1 promotes invasive prostate cancer.</a> Cell Death Differ. 22, 574-582 (2015).</li><li>Cho, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+novel+GEM+model+for+metastatic+prostate+cancer+analysis+and+therapy,+reveals+myc+as+a+driver+of+Pten-mutant+metastasis.">a novel GEM model for metastatic prostate cancer analysis and therapy, reveals myc as a driver of Pten-mutant metastasis.</a> Cancer Discov. 4, 318-333 (2014).</li><li>Cho, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+in+vivo+validation+of+candidate+drivers+derived+from+the+PTEN-mutant+prostate+metastasis+genome.">Rapid in vivo validation of candidate drivers derived from the PTEN-mutant prostate metastasis genome.</a> Methods. 77-78, 197-204 (2015).</li><li>Platt, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR-Cas9+knockin+mice+for+genome+editing+and+cancer+modeling.">CRISPR-Cas9 knockin mice for genome editing and cancer modeling.</a> Cell. 159, 440-455 (2014).</li><li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostate-specific+deletion+of+the+murine+Pten+tumor+suppressor+gene+leads+to+metastatic+prostate+cancer.">Prostate-specific deletion of the murine Pten tumor suppressor gene leads to metastatic prostate cancer.</a> Cancer Cell. 4, 209-221 (2003).</li><li>Liu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Copy+number+analysis+indicates+monoclonal+origin+of+lethal+metastatic+prostate+cancer.">Copy number analysis indicates monoclonal origin of lethal metastatic prostate cancer.</a> Nat Med. 15, 559-565 (2009).</li><li>Haffner, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+the+clonal+origin+of+lethal+prostate+cancer.">Tracking the clonal origin of lethal prostate cancer.</a> J Clin Invest. 123, 4918-4922 (2013).</li><li>Daya, S., Berns, K. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+using+adeno-associated+virus+vectors.">Gene therapy using adeno-associated virus vectors.</a> Clin Microbiol Rev. 21, 583-593 (2008).</li><li>Price, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+Aspects+of+Development+and+Structure+in+the+Prostate.">Comparative Aspects of Development and Structure in the Prostate.</a> Natl Cancer Inst Monogr. 12, 1-27 (1963).</li><li>McNeal, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+prostate:+an+historical+survey+of+divergent+views.">Anatomy of the prostate: an historical survey of divergent views.</a> Prostate. 1, 3-13 (1980).</li><li>Thomsen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SOX9+elevation+in+the+prostate+promotes+proliferation+and+cooperates+with+PTEN+loss+to+drive+tumor+formation.">SOX9 elevation in the prostate promotes proliferation and cooperates with PTEN loss to drive tumor formation.</a> Cancer Res. 70, 979-987 (2010).</li></ol>

I denne protokollen beskriver vi en metode for å endre genuttrykk i fremre flik av murine prostata ved virus injeksjon, opprette en kraftig ny musemodell for prostatakreft (figur 2). Vellykket administrasjonen av en Adenovirus ble først beskrevet av Leow et al. i 20058. Vi har tidligere vist hvordan en Adenovirus koding for en grobunn recombinase protein kan erstatte tidkrevende krysset-formering av en grobunn allelet for vev-spesifikke sletting <sup class=...

Oppdagelse og behandling av prostatakreft har forbedret det siste tiåret. Likevel, er forekomsten av prostatakreft er økende, etter levealder. Med en anslått 1,1 millioner nye tilfeller på verdensbasis er blant de vanligste årsakene til kreft-relaterte dødsfall i menn 1. Prostatakreft er treg i sin utvikling, men når kreften har kommet til en avansert metastatisk tilstand, prognosen er dårlig på grunn av begrenset behandlingstilbud. Så langt bare noen gener har blitt identifisert som vanlige drivere i denne kreft, og heterogenitet og multifocality hindrer oppdagelsen av biomarkers og targetable sykdom drivere2,3.
Klassiske teknikker for genererer GEMMs er ofte nedsatt av sin kompleksitet, betimelig utgifter og kostnader. Betinget knockout modeller har vært mye brukt til å studere prostatakreft kandidat gener, som resulterer i embryonale dødelighet når inaktivert i germline4. Vanligste modeller innebære en prostata-spesifikt grobunn recombinase drevet av enten en modifisert Probasin5 eller en PSA6 promoter integrert i GEMM flere krysset-formering. I disse modellene, skal genet av interesse nås i de fleste prostata epitelceller, generere hyperplasia i hele orgel, som kan forringe dyrets urinveisinfeksjon funksjon7.
Viral levering av grobunn protein ved injeksjon i den fremre lobe av murine prostata kan løse dette problemet ved bare målretting noen celler8. Hensyntatt laboratorier tekniske forutsetninger, ekspertise og mål, metoden fordelene fra et bredt spekter av mulige variasjoner. Vellykkede tilnærminger utnytte Adenovirus rettet mot JunB og Pten9 eller Lentivirus rettet mot Pten og Trp5310 vist seg blant andre. Legger til effekter av transgener, som luciferase, viral Konstruer eller GEMM gjør videre ikke-invasiv overvåking av sykdomsprogresjon via bioluminescens imaging11.
Genomet redigering basert på CRISPR/Cas9 teknologi avslører en ny og rask mulighet til å studere kreft gjennom rask generasjon somatiske fortrenging12. Viral levering av enkelt guide RNAs (sgRNAs) til den fremre flik av murine prostata etablerer en fysiologisk mer relevante modell av prostatakreft. På denne måten, kan enkeltceller bærer valgte mutasjoner danne kloner som kan ekspansjon og invasjon. Videre genererer bruk av guide RNAs for flere mål gener cellen kloner med endringer i ulike gener. Dette vil tillate svulst heterogenitet og en naturlig utvalg press på kreft progresjon, som kan avsløre betydningen av hver genet endring eller epistatic mekanismer.
Her presenterer vi en metode for å levere virus partikler til murine prostata for endring av genuttrykk. En liten mage snitt, den murine fremre prostata lobe er utsatt og virus partikler som injiseres i lobe. Fem dager etter operasjonen, kirurgisk klipp kan fjernes fra huden og prostatic kreft kan analyseres fra 8 uker etter. Samlet sett er dette en rask og kostnadseffektiv prosedyre, som har liten effekt på musen og tillater større svulst å utvikle uten at musen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B6J.129(B6N)-Gt(ROSA)26Sortm1(CAG-cas9*,-EGFP)Fezh/J mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>26175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0,5 ml U-100 insulin syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>324825</td>
			<td>for virus injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>300013</td>
			<td>for anesthesia injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 G 1/2&#39;&#39; needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>304000</td>
			<td>for anesthesia injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Polysorb Suture</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>GL889</td>
			<td>to close the peritoneum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable sterilized surgery drape</td>
			<td>multiple suppliers</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>multiple suppliers</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-Iodine Prep Pad</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-669-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimming machine</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT415</td>
			<td>to shave the abdomen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11252-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Micro Needle Holder</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12500-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Narrow Pattern Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ring Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11106-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound Clip System Handle incl. Clips</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12030-01</td>
			<td>to close the skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound Clip System Remover</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12030-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>different models have been used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antisedan</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butorphanol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidinhydrochlorid</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>obtained from the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100% Ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-032-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye ointment</td>
			<td>Takeda</td>
			<td>7242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virus (AAV, AV)</td>
			<td>multiple suppliers</td>
			<td></td>
			<td>virus used in this protocol is an in-house production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAKT antibody</td>
			<td>CST</td>
			<td>4060</td>
			<td>used 1:200 dillution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP anitbody</td>
			<td>CST</td>
			<td>2956</td>
			<td>used 1:100 dillution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

virus delivery of crispr guides to the murine prostate for gene alteration

Med et økende forekomst av prostatakreft er identifisering av nye svulst drivere eller modulatorer avgjørende. Genmodifiserte musen modeller (GEMM) for prostatakreft er hemmet av svulst heterogenitet og dets komplekse microevolution dynamikk. Tradisjonelle prostatakreft musen modeller inkluderer, blant annet germline og betinget knockouts, transgene uttrykk for oncogenes og xenograft modeller. Generasjon av de novo mutasjoner i disse modellene er komplekse, tidkrevende og kostbare. I tillegg rette de fleste av tradisjonelle modeller flertallet av prostata epitel, mens menneskelig prostata kreft er kjent for å utvikle seg som en isolert begivenhet i bare en undergruppe av celler. Verdifulle modeller må simulere ikke bare prostatakreft innvielsen, men også progresjon til avansert sykdom.
Her beskriver vi en metode for å målrette noen celler i prostata epitel av transducing celler av virus partikler. Levering av en konstruert virus til murine prostata tillater endring av genuttrykk i prostata epithelia. Virus type og antall definerer herved antall målrettet celler for genet endring av transducing noen celler for kreft initiering og mange celler for genterapi. Gjennom kirurgi-baserte injeksjon i fremre flik, distale fra urin spor, kan svulst i denne modellen utvide uten at dette skader funksjonen urin av dyret. Videre av målretting bare et delsett av prostata epitelceller teknikken gjør klonal ekspansjon av svulsten, og derfor etterligner menneskelige svulst innvielsen, progresjon, samt invasjonen gjennom basale membran.
Denne teknikken gir en kraftig prostatakreft modell forbedret fysiologiske relevans. Dyr lider er begrenset, og siden det kreves ingen ekstra avl, samlet dyr antall reduseres. Samtidig, er analyse av ny kandidat gener og veier akselerert, som er mer kostnadseffektivt.

For å vurdere virus levering til murine prostata, ble prøver analysert tre måneder etter operasjonen. Rosa26-LSL-Cas9-EGFP mus12 uttrykke GFP i celler som har vært utsatt for grobunn protein uttrykt av viruset. Prostata prøvene ble undersøkt med en fluorescens mikroskopi identifisere områder med GFP signal (figur 2A). GFP signalet angir grobunn aktivitet i prostata epitel men ikke om genet redigering har blitt indusert av CRISPR...

Watch this Scientific Journal Video about Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration at JoVE.com

Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration

Denne protokollen beskriver en nyetablerte metode for virus levering til murine prostata. Bruker enten CRISPR/Cas9 teknologi, gene overuttrykte eller grobunn recombinase levering, teknikken tillater orthotopic endring av genuttrykk og implementerer en ny musemodell for prostatakreft.

Virus levering CRISPR guider til Murine prostata for Gene endring

With an increasing incidence of prostate cancer, identification of new tumor drivers or modulators is crucial. Genetically engineered mouse models (GEMM) ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

En musemodell av Fatigue indusert av Peripheral Bestråling

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Identification and Characterization of Metastatic Factors by Gene Transfer into the Novel RIP-Tag; RIP-tva Murine Model

Identification and Characterization of Metastatic Factors by Gene Transfer into the Novel RIP-Tag; RIP-tva Murine Model

Identifikasjon og karakterisering av metastatisk faktorer av genoverføring i romanen RIP-Tag; RIP-LiveTV murint modell

Metastatic cancer accounts for 90% of deaths in patients with solid tumors. There is an urgent need to better understand the drivers of cancer metastasis ...

Generation of Prostate Cancer Cell Models of Resistance to the Anti-mitotic Agent Docetaxel

Generasjon av prostata kreft cellen modeller av motstand mot anti-mitotisk Agent Docetaxel

Microtubule targeting agents (MTAs) are a mainstay in the treatment of a wide range of tumors. However, acquired resistance to chemotherapeutic drugs is a ...

Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells

Bruker CRISPR/Cas9 Gene redigering for å undersøke kreftfremkallende aktiviteten av muterte Calreticulin i cytokin avhengige blodkreft cellene

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) is an adaptive immunity system in prokaryotes that has been repurposed by scientists to ...

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabrikasjon av tungen ekstracellulær Matrix og rekonstituering tungen Squamous celle Carcinoma In Vitro

In order to construct an effective and realistic model for tongue squamous cell carcinoma (TSCC) in vitro, the methods were created to produce ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

En Bioluminescent og fluorescerende Orthotopic Syngeneic murint modell av Androgen-avhengige og kastrering-resistente prostatakreft

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

Phosphopeptide Enrichment Coupled with Label-free Quantitative Mass Spectrometry to Investigate the Phosphoproteome in Prostate Cancer

Phosphopeptide berikelse kombinert med etikett-fri kvantitative massespektrometri å undersøke Phosphoproteome i prostatakreft

Phosphoproteomics involves the large-scale study of phosphorylated proteins. Protein phosphorylation is a critical step in many signal transduction ...

Preparation of Exosomes for siRNA Delivery to Cancer Cells

Utarbeidelse av Exosomes for siRNA levering til kreftceller

Extracellular vesicles, in particular exosomes, have recently gained interest as novel drug delivery vectors due to their biological origin, abundance, ...

Evaluating the Differentiation Capacity of Mouse Prostate Epithelial Cells Using Organoid Culture

Vurderer differensiering kapasitet på Mouse prostata epitelceller bruke Organoid kultur

The prostate epithelium is comprised predominantly of basal and luminal cells. In vivo lineage tracing has been utilized to define the differentiation ...