Name: dorsal root ganglia isolation and primary culture to study neurotransmitter release
Uploaded: 2018-10-06T13:00:00
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Wir danken Dr. M. Calkins für englische Bearbeitung. Diese Arbeit wurde von Chang Gung Memorial Hospital (CMRPD1F0482), Chang Gung University, Healthy Aging Research Center (EMRPD1G0171) und Ministerium für Wissenschaft und Technologie (105-2320-B-182-012-MY2) unterstützt.

Alle Methoden, die hier beschriebenen, die Versuchstiere benutzen stimmten die institutionellen Animal Care und verwenden Committee (IACUC) von Chang Gung University (CGU 13-014).
1. sammeln Sie lumbale DRG aus experimentellen Ratten
<ol><li>Verwenden Sie 2 bis 3 Wochen alten Sprague-Dawley (SD) Ratten für Lendenwirbelsäule DRG-Sammlung. Hinweis: DRG-Neuronen von Ratten gesammelt über 4 Wochen wachsen nicht gut unter den hier beschriebenen Kulturbedingungen.</li>
	<li>Alle chirurgische...

<ol>
	<li>Bear, M. F., Connors, B. W., Paradiso, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuroscience: exploring the brain. , (2007).</li><li>Hunt, S. P., Mantyh, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+dynamics+of+pain+control.">The molecular dynamics of pain control.</a> Nat Rev Neurosci. 2 (2), 83-91 (2001).</li><li>Kandel, E. R., Schwartz, J. H., Jessell, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Principles of neural science. , (2000).</li><li>Julius, D., Basbaum, A. 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In diesem Artikel zeigen wir die Sammlung, Enzym-Dissoziation und Kultur der Ratte Lenden DRG. Mit der neurotrophe Unterstützung von NGF erweitert die Axone der DRG-Neuronen innerhalb von 3 Tagen nach der Aussaat der Zelle. Die erweiterte Axone waren eindeutig beobachtbaren, nachdem Zellen für CGRP Protein, gebeizt wurden die in der Zelle Soma synthetisiert und entlang den Axon Fasern transportiert. Die Prozesse der satellitenzellen auch erweitert, so dass diese teilenden Gliazellen umgeben die Neurone innerhalb von Ta...

Die Zellkörper der sensorischen Neuronen sind in DRG enthalten. Diese Neuronen sind Pseudo-unipolar und innervieren peripheren Geweben und das zentrale Nervensystem. Die peripheren Nervenenden der sensorischen Neuronen finden sich in Muskeln, Haut, viszeralen Organe und Knochen, unter anderen Geweben. Sie Strahlen peripheren Empfindung Signale zu Nerven, die Endungen in der Wirbelsäule Hinterhorn und die Signale dann an das Gehirn über verschiedene aufsteigende Wege von somatischen Sensation1,2übertragen werden. Somatische Empfindung ermöglicht dem Körper zu fühlen (d.h., Berührungs-, Schmerz-, und thermische Empfindungen) und Bewegung und räumliche Orientierung (propriozeptive Empfindungen)1,3wahrnehmen. Es gibt vier Unterklassen der primären afferenten Axone, einschließlich der Gruppe I (Aα) Fasern, die Propriozeption der Skelettmuskulatur, Gruppe II (Aβ) Fasern, die Beantwortung von Mechanorezeptoren der Haut reagieren und Gruppe III (Aδ) und Gruppe V (C) Fasern, die auf Schmerzen reagieren und Temperatur. Nur die C-Fasern sind unmyelinierten, während der Rest sind Markhaltige in unterschiedlichem Ausmaß.
Nozizeptoren sind die primären sensorischen Neuronen, die durch Schmerzreize (mechanische, thermische und chemische Stimulation) aktiviert werden, das Potenzial für Gewebeschäden führen. Diese Neuronen bestehen aus Markhaltige Aδ-Fasern und unmyelinierten C Fasern1,4. Die Aδ-Fasern zum Ausdruck bringen, der Rezeptoren für den Nervenwachstumsfaktor (NGF, TrkA Rezeptor), CGRP und SP. Die C-Fasern sind entweder Peptidergic und nicht Peptidergic C-Fasern eingestuft. Auf der anderen Seite der nicht-Peptidergic-C-Fasern zum Ausdruck bringen der Rezeptoren für Glia-derived Neurotrophic Factor (GDNF, RET und GFR-Rezeptoren), Isolectin IB4 und ATP-gated Ion Channel Subtyp (P2X3)5,6,7. Nozizeptoren können zeichnet sich durch den Ausdruck von Ionenkanälen und durch neurotrophe Faktoren aktiviert, Zytokine, Neuropeptide, ATP oder andere chemische Verbindungen8. Nach Stimulation können Neurotransmitter, darunter CGRP, SP und Glutamat von sensorischen Neuron-Terminals in der Wirbelsäule Hinterhorn nozizeptiven Signale2übertragen entbunden werden. DRG bestehen nicht nur aus Neuronen, aber auch Satelliten Glia-Zellen enthalten. Satellitenzellen umgeben die sensorischen Neuronen und bieten mechanische und metabolische Unterstützung9,10. Interessanterweise gibt es eine wachsende Zahl von beweisen, die darauf hinweist, dass Sat-Gliazellen im DRG beteiligt sein können, bei der Regulierung der Schmerz Empfindung11.
Sensorische Neuronen wurden gemeldet, die am häufigsten verwendeten primären Nervenzellen12 und haben für Elektrophysiologie, Signaltransduktion und Neurotransmitter-Freisetzung Studien verwendet worden sein. Sie dienen häufig auch die zellulären Mechanismen der neuronalen Entwicklung, entzündliche Schmerzen, neuropathische Schmerzen, Hautgefühl (z. B. Juckreiz) und Axon Auswuchs12,13,14,15zu erkunden. DRG Primärkulturen können kultiviert werden, als dissoziierte Neuronen zu beurteilen, biochemische Veränderungen in einzelne oder mehrere Zellen, so dass Wissenschaftler, Studien durchzuführen, die in Versuchspersonen durchgeführt werden kann. Vor kurzem, DRG wurden erfolgreich kultiviert aus menschlichen Organspendern die translationale Forschung16profitieren könnte. Auf der anderen Seite können die sensorische Neuronen auch kultiviert werden wie DRG explants. Die DRG-Explantaten bewahren die ursprüngliche Gewebearchitektur der Neuronen, einschließlich Schwann-Zellen und Gliazellen Satelliten, und sind besonders nützlich, um Interaktionen zwischen neuronalen und nicht-neuronalen Zellen17zu untersuchen. DRG Primärkulturen können leicht innerhalb von 2,5 Stunden hergestellt werden. Die Zelle Zusammensetzung und Eigenschaften sind stark reflektierende der Quelle DRG, und als solche kann spezifische DRG (Lenden- oder Brustwirbelsäule DRG) gesammelt werden, nach experimentellen Anforderungen. Kulturen der embryonalen und neonatale DRG-Neuronen erfordern NGF zu überleben und Axon Auswuchs zu induzieren, aber Kulturen von Erwachsenen Nervenzellen benötigen keine Zugabe von neurotrophen Faktoren, die die Medien12,17. Außerdem gibt es im Handel erhältliche DRG-Hybridom-Zell-Linien wie SD7/23 und F11, die nicht den Einsatz von Versuchstieren erfordern. Jedoch der Mangel an der transienten Rezeptor potenzielle kation Kanal Unterfamilie V Mitglied 1 (TRPV1) Ausdruck (ein wichtiger Marker für kleine sensorischen nozizeptiven Neuronen) und inkongruente gen expressionsprofile begrenzen ihre Anwendungen18. Vor kurzem verwenden verewigt DRG neuronale Zelle, die Ratte (50B11)19 Linien abgeleitet worden und Maus (MED17.11)20, die geeignet sind für Drug targeting Studien im Hochdurchsatz-Bildschirme. Gen-Expression profiling für diesen Zelllinien muss jedoch noch durchgeführt werden. Somit sind die Validierung Experimente vergleicht diese verewigt Zellen zu sensorischen Neuronen noch nicht abgeschlossen.
NPFFR2 ist in der DRG synthetisiert und an den Klemmen sensorische Nerven in der Wirbelsäule Hinterhorn21umgesiedelt. In diesem Artikel bieten wir ein Protokoll für Lendenwirbelsäule DRG-Zellen kultiviert und Behandlung mit Agonist NPFFR2 induzieren die Freisetzung von Neurotransmittern, CGRP und SP. Die Abhängigkeit von NPFFR2 wird weiter getestet, mit NPFFR2 kleinen interferierende RNA (SiRNA), die in kultivierten Zellen DRG transfiziert werden kann.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Mixture of tiletamine and zolazepam (Zoletil)</td>
			<td>Virbac</td>
			<td>Zoletil 50</td>
			<td>anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>04-001-1</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S8636</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/streptomycin</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>03-033-1</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM-F12</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>12400024</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-l-lysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9011</td>
			<td>Coating dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase IA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>9001-12-1</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>14170-112</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin EDTA</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>03-051-5</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipette</td>
			<td>Hilgenberg</td>
			<td>3150102</td>
			<td>Cell trituration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytarabine (Ara-C)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6645</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NGF</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>NC011</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NPFFR2 siRNA</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>L-099691-02-0005</td>
			<td>Transfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-targeting siRNA</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>L-001810-10-05</td>
			<td>Transfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NeuroPORTER Reagent</td>
			<td>Genlantis</td>
			<td>T400150</td>
			<td>Transfection reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNPA</td>
			<td>Genemed Synthesis</td>
			<td>N/A</td>
			<td>NPFFR2 agonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CGRP ELISA</td>
			<td>Cayman</td>
			<td>589001</td>
			<td>EIA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP ELISA</td>
			<td>Cayman</td>
			<td>583751</td>
			<td>EIA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CGRP antibody</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>PC205L</td>
			<td>IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10236276001</td>
			<td>IHC</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dorsal root ganglia isolation and primary culture to study neurotransmitter release

Dorsal Root Ganglien (DRG) enthalten Zellkörper der sensorischen Neuronen. Diese Art des Neurons ist Pseudo-unipolar, mit zwei Axone, die periphere Geweben wie Haut, Muskeln und viszeralen Organe sowie die Wirbelsäule Hinterhorn des zentralen Nervensystems innervieren. Sensorische Neuronen vermitteln somatische Gefühl, einschließlich Touch, Schmerzen, thermische und propriozeptive Empfindungen. Daher sind DRG Primärkulturen verbreitet, die zellulären Mechanismen der nozizeption, physiologische Funktionen des sensorischen Neuronen und neurale Entwicklung zu studieren. Die kultivierten Neuronen können in Studien mit Elektrophysiologie, Signaltransduktion, Neurotransmitter-Freisetzung oder Kalzium Imaging angewendet werden. Mit DRG Primärkulturen Wissenschaftler können dissoziierte DRG-Neuronen zur Überwachung der biochemischer Veränderungen in einzelnen Kultur oder mehrere Zellen, die viele der Einschränkungen zu überwinden in Vivo Experimente zugeordnet. Im Vergleich zu kommerziell sind verfügbar DRG-Hybridom-Zell-Linien oder verewigt DRG neuronalen Zelllinien, die Zusammensetzung und Eigenschaften von den Primärzellen sensorischen Neuronen im Gewebe viel ähnlicher. Aufgrund der begrenzten Anzahl von kultivierten DRG-Primärzellen, die von einem einzigen Tier isoliert werden können, ist es jedoch schwierig, Hochdurchsatz-Bildschirme für Drug targeting Studien durchführen. In dem aktuellen Artikel werden Verfahren für die DRG-Sammlung und Kultur beschrieben. Darüber hinaus zeigen wir Ihnen die Behandlung von kultivierten DRG Zellen mit Agonist Neuropeptid FF Rezeptor Typ 2 (NPFFR2), die Freisetzung von Neurotransmittern Peptid (Calcitonin-gen-related Peptid (CRGP) und Substanz P (SP)) zu induzieren.

In Kulturmedium mit zusätzlichen Ara-C, Glia Zellproliferation hemmen und NGF, neuronale Wachstum zu unterstützen wurde Ratte lumbale DRG-Neuronen, in einer 24-Well-Platte, kultiviert angebaut. Die Morphologie der lebenden Zellen DRG wurde beobachtet. Wie in Abbildung 3gezeigt, war der Zellkörper eines einzelnen Neurons angebracht an der Unterseite eines Tellers an Tag1 und für die Beobachtung ausgewählt. Axon Wachstum wurde ab Tag 1 – 3 überwacht. Di...

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Dorsal Root Ganglia Isolation and Primary Culture to Study Neurotransmitter Release

Dorsal Root Ganglien (DRG) Primärkulturen werden häufig verwendet, um physiologische Funktionen oder Pathologie-Veranstaltungen in sensorischen Neuronen zu studieren. Hier zeigen wir den Einsatz von lumbalen DRG-Kulturen, die Freisetzung von Neurotransmittern zu erkennen, nachdem Neuropeptid FF-Rezeptor Typ 2 Stimulation mit ein selektiver Agonist.

Dorsal Root Ganglien Isolation und Primärkultur Neurotransmitter-Freisetzung zu studieren

Dorsal root ganglia (DRG) contain cell bodies of sensory neurons. This type of neuron is pseudo-unipolar, with two axons that innervate peripheral ...

Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im sensorischen Forschungsbereich zu beantworten, wie z. B. periphere Nozieption. Der Hauptvorteil dieser technischen ist, dass die Untersuchung des zellulären Mechanismus der sensorischen Neuronen mit dem Modell, das am meisten simuliert physiologischen Zustand. Sammeln Sie die lenbale Dorsalwurzel ganglia aus dem Stamm einer zwei bis drei Wochen alten Ratte.Beginnen Sie mit zwei Schnitten an den Seiten der Wirbelsäule und einem seitlichen Schnitt, um die rostrale Ausdehnung der Lendenwirbelsäule zu markieren. Verwenden Sie dann KnochenschneidenZange, um die Rückenmuskulatur der Wirbelsäule zu entfernen. Als nächstes entfernen Sie den dorsalen Teil der Wirbel und setzen Sie das Rückenmark frei.Verwenden Sie dann eine Sezierschere und Zange, um das Rückenmark zu entfernen. Identifizieren Sie die Lendenwirbel DRG, indem Sie Wirbel aus der letzten Rippe zählen. Dieses Diagramm zeigt die Wirbelpositionen.Verwenden Sie Mikroschere, um die 12 bilaterale Lenden-DRG von L1 bis L6 zu sammeln. Entfernen Sie alle angeschlossenen neuronalen Fasern, um die Reinheit der Kultur zu verbessern. Jede Lendenwirbel-DRG auf ein 35-Millimeter-Kulturgericht mit zwei Millilitereiskaltem Serum-freien Medium übertragen. Die DRG-haltige 35-Millimeter-Schale in eine laminare Haube geben und das DRG dreimal per Pipette mit serumfreiem Medium waschen.Verwenden Sie eine sterile Pinzette, um die DRGs auf eine neue 35-Millimeter-Kulturschale zu verschieben, die zwei Milliliter steriler Kollagennase Typ 1A enthält. Legen Sie das Gewebe in Kollagenase-Lösung in der 37 Grad Celsius Gewebekultur Inkubator für 30 Minuten zu beginnen Dissoziation der Zellen. Nach der Inkubation die Kollagenaselösung entfernen und das DRG dreimal in zwei Millilitern von Hanks ausgewogener Salzlösung waschen.Als nächstes fügen Sie zwei Milliliter vorgewärmte 0,05%Trypsin EDTA in die Schale, und verdauen Sie die DRG im Inkubator für 30 Minuten wie zuvor. Nach der Verdauung verwenden Sie eine Glaspipette, um die zwei Milliliter DRG-haltige Lösung auf ein 15 Milliliter Zentrifugenrohr zu übertragen. Die DRG könnte an der Glaspipette kleben, so dass dieser Schritt mit Vorsicht durchgeführt werden sollte.Der tatsächliche Verlust kann vermieden werden, indem die DRG-haltige Lösung im Kegelende der Glaspipette gehalten und die Lösung langsam, aber ohne Pause in das Zentrifugenrohr übertragen wird. Als nächstes zentrifugieren Sie die Lösung bei 290 mal G für fünf Minuten bei vier Grad Celsius. Nach dem Zentrifugieren den Überstand entfernen und weitere zwei Milliliter serumfreies Medium hinzufügen, um das DRG wieder auszusetzen.Wiederholen Sie die Wäsche zweimal, mit zwei Millilitern vorgewärmten Kulturmedium, um das Gewebe nach der letzten Zentrifugation wieder auszusetzen. Verwenden Sie die zuvor vorbereitete sterile flammpolierte Pipette, um das DRG etwa 60 Mal manuell zu trituieren. Als nächstes entfernen Sie eine poly-L-Lysin beschichtete 24-Well-Platte, die einen Milliliter Kulturmedium pro Brunnen pro Brunnen enthält, aus dem CO2-Inkubator.Aspirieren Sie das inkubierte Kulturmedium aus dem Gericht. Säen Sie die DRG-Zellen von einer Ratte in vier der Brunnen. Dies ergibt eine Saatdichte von etwa 500.000 Zellen pro Brunnen.Ersetzen Sie am nächsten Tag das Kulturmedium durch ein Medium, das mit 10 Mikromolaren AraC und 100 Nanogramm pro Milliliter NGF ergänzt wird. Am dritten Tag nach der Zellbeschichtung das Medium auf 0,5 Milliliter vorgewärmtes serumfreies Medium ändern und eine Stunde lang inkubieren. Während der Inkubation 50 Millimolar siRNA in einem Mikroliter RNase-freiem Wasser zu 12,5 Mikroliter serumfreies Medium pro Transfektion hinzufügen.Dann Pipette 2,5 Mikroliter Transfektionreagenz in 10 Mikroliter serumfreies Medium für jede Transfektion. Mischen Sie beide Lösungen durch Pipetten, und inkubieren Sie diese gemischte Transfektionslösung für 10 Minuten bei Raumtemperatur. Nach 10 Minuten die Transfektionslösung in die Brunnen der DRG-haltigen 24-Well-Platte geben und durch sanftes Schütteln mischen.Nach einer sechsstündigen Inkubation, fügen Sie 0,5 Milliliter Kulturmedium mit 20%FBS, 10 Mikromolar AraC, und 100 Nanogramm pro Milliliter NGF in jeden Brunnen der Zellen. Schließlich inkubieren Sie die DRG in einem 37 Grad Celsius CO2-Inkubator für weitere 66 Stunden. Am sechsten Tag nach der Beschichtung und 72 Stunden nach der siRNA-Transfektion ändern Sie das Kulturmedium auf 200 Mikroliter serumfreies Medium.Nach einer 30-minütigen Inkubation einen Mikroliter der Stimulationschemikalie hinzufügen und sanft durch Pipettieren mischen. Hier kommen der NPFFR2-Agonist, dNPA und das entsprechende Fahrzeug zum Einsatz. Nach der Inkubation für den gewünschten Zeitraum, sammeln Sie das Kulturmedium aus dem Kulturgericht, und Zentrifuge bei 5000 mal G für fünf Minuten bei vier Grad Celsius, um alle ausgesetzten Verunreinigungen zu entfernen.Den Überstand aus der Zentrifugation sammeln und bei Bedarf mit phosphatgepufferter Saline verdünnen. Assay die Ebenen der Neurotransmitter mit handelsüblichen Enzym-Immunoassay-Kits. Am ersten Tag wurde der Zellkörper eines einzelnen Neurons, der durch den Pfeil angezeigt wurde, an der Unterseite einer Schale befestigt.Eine Gliazelle, die durch eine Pfeilspitze angezeigt wird, ist ebenfalls vorhanden. Die Gliazellen duplizierten und erweiterten Prozesse, um den Zellkörper des sensorischen Neurons am zweiten Tag zu umgeben, ein Prozess, der am dritten Tag noch stärker in den Vordergrund gerückt war. In einer anderen Kultur wurde CGRP-Protein gefärbt, um die Form von Neuronen zu offenbaren.CGRP-Proteinfärbung erscheint im Zytoplasma und Axonen sensorischer Neuronen. Die kerntechnischen Morphologien von Neuronen und Gliazellen sind deutlich, wenn sie mit DAPI gefärbt werden. Die Neuronen haben einen größeren und abgerundeteren Kern als Gliazellen.Im Vergleich dazu sind die Kerne von Glial ovaler. Einmal gemeistert, kann diese Technik in zweieinhalb Stunden durchgeführt werden, wenn sie richtig durchgeführt wird. Nachdem Sie sich dieses Video angeschaut haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie das dorsale Wurzelganglion sezieren und kulturieren können, und es als Werkzeug verwenden, um die zugrunde liegenden physiologischen Funktionen zu untersuchen.Vergessen Sie nicht, dass die Arbeit mit Primärzellen viel schwieriger sein kann als die Arbeit mit regulären Zelllinien, und sanft zu sein ist immer der beste Weg, wenn Sie diesen Eingriff durchführen.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Chromatin Immunopräzipitation aus Spinalganglien Tissue folgende axonale Schädigung

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Forschung

Neurowissenschaften

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

Live-Imaging von Spinalganglien Axone nach Rhizotomie

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons

Genetic Study of Axonregeneration mit kultivierten adulten Spinalganglienneuronen

It is well known that mature neurons in the central nervous system (CNS) cannot regenerate their axons after injuries due to diminished intrinsic ability ...

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsalwurzelganglien Neuronen und differenzierten Fettgewebe gewonnene Stammzellen: Eine<em&gt; In-vitro-</em&gt; Co-Kultur Modell zur Regeneration peripherer Nerven Studieren

Dorsal root ganglia (DRG) neurons, located in the intervertebral foramina of the spinal column, can be used to create an in vitro system facilitating the ...

Live Imaging of Nicotine Induced Calcium Signaling and Neurotransmitter Release Along Ventral Hippocampal Axons

Live-Imaging von Nikotin induzierte Calcium Signaling und Neurotransmitterausschüttung Zusammen Ventral Hippocampus Axone

Sustained enhancement of axonal signaling and increased neurotransmitter release by the activation of pre-synaptic nicotinic acetylcholine receptors ...

An Approach to Enhance Alignment and Myelination of Dorsal Root Ganglion Neurons

Ein Ansatz zur Verbesserung der Ausrichtung und Myelinisierung von Dorsalwurzelganglion Neurons

Axon regeneration is a chaotic process due largely to unorganized axon alignment. Therefore, in order for a sufficient number of regenerated axons to ...

Hydraulic Extrusion of the Spinal Cord and Isolation of Dorsal Root Ganglia in Rodents

Hydraulische Extrusion des Rückenmarks und Isolierung von Dorsalwurzelganglien in Nagetiere

Traditionally, the spinal cord is isolated by laminectomy, i.e. by breaking open the spinal vertebrae one at a time. This is both time consuming and may ...

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration

Dorsalwurzelganglion Injection und dorsale Wurzel Quetschverletzungen als Modell für Sensory Axonregeneration

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each ...

Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages

Schnelle Isolierung von Dorsalwurzel Ganglion Makrophagen

There are growing interests to study the molecular and cellular interactions among immune cells and sensory neurons in the dorsal root ganglia after ...

Enrichment of Adult Mouse Dorsal Root Ganglia Neuron Cultures by Immunopanning

Anreicherung von adulten Dorsalwurzelganglien-Neuronenkulturen der adulten Maus durch Immunpanning

Dorsal root ganglia (DRGs) are peripheral structures adjacent to the dorsal horn of the spinal cord, which house the cell bodies of sensory neurons as ...