Name: dorsal root ganglia isolation and primary culture to study neurotransmitter release
Uploaded: 2018-10-06T13:00:00
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Agradecemos a Dr. M. Calkins para la edición de inglés. Este trabajo fue apoyado por el Chang Gung Memorial Hospital (CMRPD1F0482), Chang Gung University, centro de investigación de envejecimiento saludable (EMRPD1G0171) y Ministerio de ciencia y tecnología (105-2320-B-182-012-MY2).

Todos los métodos descritos que utilizan animales de experimentación fueron aprobados por el institucional cuidado Animal y el Comité uso (IACUC) de Chang Gung University (CGU 13-014).
1. recoger DRG Lumbar de las ratas experimentales
<ol><li>Utilizar 2 a 3 ratas de Sprague-Dawley (SD) semana para colección de DRG lumbar. Nota: Las neuronas DRG obtenidas de ratas durante 4 semanas de edad no crecen bien bajo las condiciones de cultivo descritas.</li>
	<li>Esterilizar todos los instrum...

<ol>
	<li>Bear, M. F., Connors, B. W., Paradiso, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuroscience: exploring the brain. , (2007).</li><li>Hunt, S. P., Mantyh, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+dynamics+of+pain+control.">The molecular dynamics of pain control.</a> Nat Rev Neurosci. 2 (2), 83-91 (2001).</li><li>Kandel, E. R., Schwartz, J. H., Jessell, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Principles of neural science. , (2000).</li><li>Julius, D., Basbaum, A. 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J., Staats, P., Kramer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Dorsal+Root+Ganglion+as+a+Therapeutic+Target+for+Chronic+Pain.">The Dorsal Root Ganglion as a Therapeutic Target for Chronic Pain.</a> Reg Anesth Pain Med. 41 (4), 511-519 (2016).</li><li>Lee, J. S., Han, J. S., Lee, K., Bang, J., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+peripheral+and+central+mechanisms+underlying+itch.">The peripheral and central mechanisms underlying itch.</a> BMB Rep. 49 (9), 474-487 (2016).</li><li>Valtcheva, M. 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T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+NPFFR2+leads+to+hyperalgesia+through+the+spinal+inflammatory+mediator+CGRP+in+mice.">Activation of NPFFR2 leads to hyperalgesia through the spinal inflammatory mediator CGRP in mice.</a> Exp Neurol. 291, 62-73 (2017).</li><li>Yang, H. Y., Tao, T., Iadarola, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulatory+role+of+neuropeptide+FF+system+in+nociception+and+opiate+analgesia.">Modulatory role of neuropeptide FF system in nociception and opiate analgesia.</a> Neuropeptides. 42 (1), 1-18 (2008).</li><li>Takeda, M., Takahashi, M., Matsumoto, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+the+activation+of+satellite+glia+in+sensory+ganglia+to+pathological+pain.">Contribution of the activation of satellite glia in sensory ganglia to pathological pain.</a> Neurosci Biobehav Rev. 33 (6), 784-792 (2009).</li></ol>

En el presente artículo, nos muestran la colección, disociación de la enzima y la cultura de lumbar de la rata DRG. Con el apoyo de neurotróficos de NGF, los axones de las neuronas DRG extendido dentro de 3 días después de la siembra de células. Los axones extendidos fueron claramente observables después de que las células se tiñeron para proteína CGRP, que es sintetizada en el soma celular y transportada a lo largo de las fibras de axones. Los procesos de células satélite también extendidos, permitiendo qu...

Los cuerpos celulares de las neuronas sensoriales están contenidos dentro de DRG. Estas neuronas son pseudo-unipolares e inervan los tejidos periféricos y el sistema nervioso central. Las terminaciones nerviosas periféricas de las neuronas sensoriales se encuentran en el músculo, piel, órganos viscerales y óseas, entre otros tejidos. Transmiten las señales de sensación periférica nervio conclusiones en el cuerno dorsal espinal y las señales se transmiten luego al cerebro a través de diferentes vías ascendentes de la sensibilidad somática1,2. Sensación somática permite al cuerpo a sentir (es decir, tacto, dolor y sensaciones térmicas) y percibir el movimiento y orientación espacial (sensaciones propioceptivas)1,3. Hay cuatro subclases de axones aferentes primarios, incluyendo el grupo I (Aα) fibras que responden a la propiocepción de los músculos esqueléticos, fibras de II (Aβ) grupo que responden a los mecanorreceptores de la piel, y grupo III (Aδ) y fibras de V (C) grupo que responden al dolor y temperatura. Sólo las fibras C son amielínicas, mientras que el resto son myelinated en diferentes grados.
Nociceptores son las neuronas sensoriales primarias, que son activadas por estímulos nocivos (estímulo mecánico, térmico y químico) que llevan la posibilidad de daño tisular. Estas neuronas están compuestos por fibras Aδ myelinated y unmyelinated fibras de C1,4. Las fibras Aδ expresan los receptores para el factor de crecimiento nervioso (NGF, trkA receptor), CGRP y SP. Las fibras C se clasifican como fibras C o peptidérgicos y no peptidérgicos. Por otra parte, las fibras de C peptidérgicos no expresan los receptores para el factor neurotrophic glial-derivado (GDNF, RET y GFR receptores), proteína IB4 y ATP-gated ion canal subtipo (P2X3)5,6,7. Nociceptores pueden ser distinguidos por la expresión de canales iónicos y activados por factores neurotróficos, citoquinas, neuropéptidos, ATP u otro producto químico compuestos de8. Sobre el estímulo, se pueden liberar neurotransmisores, como glutamato, CGRP y SP de los terminales de la neurona sensorial en el cuerno dorsal espinal para transmitir las señales nociceptivas2. DRG no sólo están compuesta de neuronas, pero también contienen células glial satélite. Las células satélites rodean las neuronas sensoriales y proporcionar soporte mecánico y metabólico9,10. Curiosamente, hay un creciente cuerpo de evidencia que indica que las células glial satélite en el DRG podrían estar implicadas en la regulación de la sensación de dolor11.
Las neuronas sensoriales se han divulgado más con frecuencia utilizan las células neuronales primarias12 y se han utilizado para estudios de liberación de neurotransmisor, electrofisiología y transducción de la señal. Comúnmente se utilizan para explorar los mecanismos celulares del desarrollo neuronal, dolor inflamatorio, dolor neuropático, sensación de la piel (como pica) y axón resultado12,13,14,15. Cultivos primarios de DRG pueden cultivarse como neuronas disociadas para evaluar los cambios bioquímicos en uno o varias celdas, permitiendo a los científicos realizar estudios que no se puede realizar en sujetos experimentales. Recientemente, DRG fueron cultivadas con éxito de los donantes de órganos humanos que podrían beneficiarse enormemente la investigación traslacional16. Por otra parte, las neuronas sensoriales pueden cultivarse también como explantes de DRG. Los explantes DRG preservar la arquitectura original del tejido de las neuronas, incluyendo las células de Schwann y células gliales por satélite y son especialmente útiles para estudiar las interacciones entre las células neuronales y no neuronales17. Cultivos primarios DRG pueden prepararse fácilmente en 2,5 horas. Las propiedades y composición de la célula son altamente reflectantes de la fuente DRG, y como tal, GRD específico (DRG lumbar o torácica) se recogerán según demandas experimentales. Cultivos de neuronas DRG embrionarias y neonatales requieren NGF sobrevivir e inducir consecuencia de axon, pero cultivos de neuronas adultas no requieren la adición de factores neurotróficos a los medios de comunicación12,17. También hay disponibles comercialmente líneas celulares de hibridoma DRG como ND7/23 y F11, que no requieren el uso de animales de experimentación. Sin embargo, la falta de la cación potencial transitorio del receptor canal de miembros de la subfamilia V 1 (TRPV1) expresión (un marcador importante para pequeñas sensoriales neuronas nociceptivas) y perfiles de expresión génica incongruente limitan sus aplicaciones18. Recientemente, inmortalizado células neuronales DRG líneas han sido derivadas de rata (50B11)19 y20de ratón (MED17.11), que son convenientes para usan en pantallas de alto rendimiento de drogas dirigidas a estudios. Sin embargo, la expresión génica perfiles para estas líneas celulares aún no ha realizarse. Así, los experimentos de validación comparando estas células inmortalizadas en las neuronas sensoriales están aún en curso.
NPFFR2 es sintetizado en el DRG y trasladadas a las terminales nerviosas sensoriales en el cuerno dorsal espinal21. En este artículo, proporcionamos un protocolo para el cultivo de células DRG lumbares y tratamiento con un agonista de los NPFFR2 para inducir la liberación de neurotransmisores, CGRP y SP. La dependencia de NPFFR2 más se prueba usando NPFFR2 pequeña interferencia RNA (siRNA), que puede transfected en las células cultivadas de la DRG.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Mixture of tiletamine and zolazepam (Zoletil)</td>
			<td>Virbac</td>
			<td>Zoletil 50</td>
			<td>anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>04-001-1</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S8636</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/streptomycin</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>03-033-1</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM-F12</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>12400024</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-l-lysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9011</td>
			<td>Coating dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase IA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>9001-12-1</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>14170-112</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin EDTA</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>03-051-5</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipette</td>
			<td>Hilgenberg</td>
			<td>3150102</td>
			<td>Cell trituration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytarabine (Ara-C)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6645</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NGF</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>NC011</td>
			<td>Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NPFFR2 siRNA</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>L-099691-02-0005</td>
			<td>Transfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-targeting siRNA</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>L-001810-10-05</td>
			<td>Transfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NeuroPORTER Reagent</td>
			<td>Genlantis</td>
			<td>T400150</td>
			<td>Transfection reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNPA</td>
			<td>Genemed Synthesis</td>
			<td>N/A</td>
			<td>NPFFR2 agonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CGRP ELISA</td>
			<td>Cayman</td>
			<td>589001</td>
			<td>EIA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP ELISA</td>
			<td>Cayman</td>
			<td>583751</td>
			<td>EIA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CGRP antibody</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>PC205L</td>
			<td>IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10236276001</td>
			<td>IHC</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dorsal root ganglia isolation and primary culture to study neurotransmitter release

Ganglios de raíz dorsal (GRD) contienen cuerpos celulares de neuronas sensoriales. Este tipo de neurona es pseudo-unipolar, con dos axones que inervan los tejidos periféricos, tales como piel, músculo y órganos viscerales, así como el cuerno dorsal espinal del sistema nervioso central. Las neuronas sensoriales transmiten sensación somática, como tacto, dolor, sensaciones térmicas y propioceptivas. Por lo tanto, cultivos primarios DRG son ampliamente utilizados para estudiar los mecanismos celulares del nociception, funciones fisiológicas de las neuronas sensoriales y desarrollo neuronal. Las neuronas cultivadas pueden aplicarse en estudios de electrofisiología, transduction de la señal, liberación de neurotransmisor o proyección de imagen de calcio. Con cultivos primarios de DRG, los científicos pueden cultura disociada las neuronas DRG para monitorear los cambios bioquímicos en solo o varias celdas, superando muchas de las limitaciones asociadas con experimentos en vivo . En comparación con comercialmente disponibles líneas celulares de hibridoma DRG o inmortalizadas las líneas de células neuronales de DRG, la composición y propiedades de las células primarias son mucho más similares a las neuronas sensoriales en el tejido. Sin embargo, debido al limitado número de DRG primaria las células cultivadas que pueden ser aislados de un solo animal, es difícil realizar pantallas de alto rendimiento de drogas dirigidas a estudios. En el actual artículo, se describen los procedimientos para la colección de DRG y la cultura. Además, demostramos que el tratamiento de células cultivadas de DRG con un agonista del receptor del neuropéptido FF tipo 2 (NPFFR2) para inducir la liberación de neurotransmisores péptido (péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CRGP) y sustancia P (SP)).

Rata lumbar DRG neuronas cultivadas en un plato 24-well, fueron cultivadas en medio de cultivo con Ara-C adicional para inhibir la proliferación de células gliales y NGF para apoyar el crecimiento neuronal. La morfología de la vida se observaron células DRG. Como se muestra en la figura 3, el cuerpo celular de una neurona sola fue atado en el fondo de un plato en 1 día y seleccionado para la observación. Crecimiento del Axon fue monitoreado desde el dí...

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Cultivos primarios de raíz dorsal (GRD) de los ganglios se utilizan con frecuencia para estudiar las funciones fisiológicas o eventos relacionados con patología en las neuronas sensoriales. Aquí, se demuestra el uso de culturas DRG lumbares para detectar la liberación de neurotransmisores después de receptor del neuropéptido FF tipo 2 estimulación con un agonista selectivo.

Aislamiento de los ganglios de raíz dorsal y en cultivo primario para el estudio de liberación de neurotransmisor

Dorsal root ganglia (DRG) contain cell bodies of sensory neurons. This type of neuron is pseudo-unipolar, with two axons that innervate peripheral ...

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la investigación sensorial, como la nocicepción periférica. La principal ventaja de este técnico es que la investigación del mecanismo celular de las neuronas sensoriales con el modelo que más simula a la condición fisiológica. Recoger los ganglios de la raíz dorsal lumbar del tronco de una rata de dos a tres semanas de edad.Comience haciendo dos cortes a lo largo de los lados de la columna vertebral y un corte lateral para marcar la extensión rostral de la columna lumbar. Luego, usa fórceps de corte óseo para eliminar los músculos dorsales de la columna vertebral. A continuación, retire la parte dorsal de las vértebras y exponga la médula espinal.Luego usa tijeras de disección y fórceps para extirpar la médula espinal. Identifique el DRG lumbar contando las vértebras de la última costilla. Este diagrama muestra las posiciones de las vértebras.Utilice micro tijeras para recoger el DRG lumbar bilateral de 12 P. Retire las fibras neuronales adheridas para mejorar la pureza del cultivo. Transfiera cada DRG lumbar a un plato de cultivo de 35 milímetros que contenga dos mililitros de medio libre de suero helado. Transfiera el plato de 35 milímetros que contiene DRG a una capucha laminar, y lave el DRG con un medio libre de suero tres veces por pipeta.Utilice pinzas estériles para mover los DRG a un nuevo plato de cultivo de 35 milímetros que contenga dos mililitros de colágeno estéril tipo 1A. Coloque el tejido en solución de colagenasa en la incubadora de cultivo de tejido Celsius de 37 grados durante 30 minutos para comenzar la disociación de las células. Después de la incubación, retire la solución de colagenasa y lave el DRG tres veces en dos mililitros de la solución de sal equilibrada de Hank.A continuación, agregue dos mililitros de 0,05% de trippsina preadmanientes al plato, y digiere el DRG en la incubadora durante 30 minutos como antes. Después de la digestión, utilice una pipeta de vidrio para transferir los dos mililitros de solución que contiene DRG a un tubo centrífugo de 15 mililitros. El DRG podría adherirse a la pipeta de vidrio por lo que este paso debe realizarse con cuidado.La pérdida real se puede evitar manteniendo la solución que contiene DRG en el extremo cónico de la pipeta de vidrio, y transfiriendo la solución al tubo de centrífuga lentamente pero sin pausa. A continuación, centrifugar la solución a 290 veces G durante cinco minutos a cuatro grados centígrados. Después de centrifugar, retire el sobrenadante y agregue otros dos mililitros de medio libre de suero para resuspender el DRG.Repita el lavado dos veces, utilizando dos mililitros de medio de cultivo preadizo para resuspender el tejido después de la centrifugación final. Utilice la pipeta de pulido de llama estéril previamente preparada para triturar manualmente el DRG aproximadamente 60 veces. A continuación, retire de la incubadora de CO2 una placa de poli-L-lisina recubierta de 24 pozos que contenga un mililitro de medio de cultivo por pozo.Aspirar el medio de cultivo incubado del plato. Siembra las células DRG de una rata en cuatro de los pozos. Esto da una densidad de siembra de aproximadamente 500.000 células por pozo.Al día siguiente, reemplace el medio de cultivo por un medio complementado con 10 araC micromolares y 100 nanogramos por mililitro de NGF. En el tercer día después del enchapado celular, cambie el medio a 0,5 mililitros de medio preadniérico libre de suero, e incubar durante una hora. Durante la incubación, añada 50 siRNA militrolar en un microlitro de agua libre de RNase a 12,5 microlitros de medio libre de suero por transfección.A continuación, pipetear 2,5 microlitros de reactivo de transfección en 10 microlitros de medio libre de suero para cada transfección. Mezclar ambas soluciones por pipeta e incubar esta solución de transfección mixta durante 10 minutos a temperatura ambiente. Después de 10 minutos, agregue la solución de transfección en los pocillos de la placa de 24 pocillos que contiene DRG y mezcle agitando suavemente.Después de una incubación de seis horas, añadir 0,5 mililitros de medio de cultivo con 20%FBS, 10 araC micromolares y 100 nanogramos por mililitro NGF en cada poc de células. Finalmente, incubar el DRG en una incubadora de CO2 de 37 grados Celsius durante otras 66 horas. En el día seis después del enchapado, y 72 horas después de la transfección del SIRNA, cambie el medio de cultivo a 200 microlitros de medio libre de suero.Después de una incubación de 30 minutos, agregue un microlitro del químico de estimulación y mezcle suavemente por pipeteo. Aquí se utilizan el agonista NPFFR2, el dNPA y el vehículo correspondiente. Después de incubar durante el período requerido, recoger el medio de cultivo del plato de cultivo, y centrifugar a 5000 veces G durante cinco minutos a cuatro grados centígrados para eliminar cualquier impureza suspendida.Recoger el sobrenadante de la centrifugación y diluir con solución salina tamponada con fosfato según sea necesario. Ensayo de los niveles de neurotransmisores con kits de inmunoensayos enzimáticos disponibles comercialmente. En el primer día, el cuerpo celular de una sola neurona indicada por la flecha estaba unido en la parte inferior de un plato.También está presente una celda glial indicada por una punta de flecha. Las células gliales duplicaron y extendieron los procesos para rodear el cuerpo celular de la neurona sensorial en el segundo día, un proceso que fue aún más prominente en el tercer día. En otro cultivo, la proteína CGRP se tiñeba para revelar la forma de las neuronas.La tinción de proteína CGRP aparece en el citoplasma y los axones de las neuronas sensoriales. Las morfologías nucleares de las neuronas y las células gliales son distintas cuando se tiñen con DAPI. Las neuronas tienen un núcleo más grande y más redondeado que las células gliales.En comparación, los núcleos del glial son más ovalados en forma. Una vez masterada, esta técnica se puede hacer en dos horas y media si se realiza correctamente. Después de ver este video, usted debe tener una buena comprensión de cómo diseccionar y cultivar el ganglio de raíz dorsal, y utilizarlo como una herramienta para investigar las funciones fisiológicas subyacentes.No olvide que trabajar con células primarias puede ser mucho más difícil que trabajar con líneas celulares regulares, y ser suave siempre es la mejor manera al realizar estos procedimientos.

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JoVE Journal

Neuroscience

Dorsal Root Ganglia Isolation and Primary Culture to Study Neurotransmitter Release

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury (Video) | JoVE

Inmunoprecipitación de la cromatina de los tejidos ganglios de la raíz dorsal después de una lesión axonal

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Investigación

Neurociencias

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy (Video) | JoVE

Imágenes en vivo de los axones de la raíz dorsal después de rizotomía

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons

Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons (Video) | JoVE

Estudio genético de la regeneración axonal en neuronas cultivadas de Adultos ganglio de la raíz dorsal

It is well known that mature neurons in the central nervous system (CNS) cannot regenerate their axons after injuries due to diminished intrinsic ability ...

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration (Video) | JoVE

Ganglios de raíz dorsal neuronas y las células madre derivadas de la adiposa diferenciada: Un<em&gt; In Vitro</em&gt; Co-cultivo modelo para estudiar la regeneración de los nervios periféricos

Dorsal root ganglia (DRG) neurons, located in the intervertebral foramina of the spinal column, can be used to create an in vitro system facilitating the ...

Live Imaging of Nicotine Induced Calcium Signaling and Neurotransmitter Release Along Ventral Hippocampal Axons

Live Imaging of Nicotine Induced Calcium Signaling and Neurotransmitter Release Along Ventral Hippocampal Axons (Video) | JoVE

Imágenes en vivo de nicotina señalización de calcio inducido y neurotransmisor lanzamiento Junto ventrales hipocampo axones

Sustained enhancement of axonal signaling and increased neurotransmitter release by the activation of pre-synaptic nicotinic acetylcholine receptors ...

An Approach to Enhance Alignment and Myelination of Dorsal Root Ganglion Neurons

An Approach to Enhance Alignment and Myelination of Dorsal Root Ganglion Neurons (Video) | JoVE

Un Enfoque para Mejorar la alineación y la mielinización de las neuronas del ganglio de la raíz dorsal

Axon regeneration is a chaotic process due largely to unorganized axon alignment. Therefore, in order for a sufficient number of regenerated axons to ...

Hydraulic Extrusion of the Spinal Cord and Isolation of Dorsal Root Ganglia in Rodents

Hydraulic Extrusion of the Spinal Cord and Isolation of Dorsal Root Ganglia in Rodents (Video) | JoVE

Extrusión hidráulica de la médula espinal y aislamiento de los ganglios de la raíz dorsal en roedores

Traditionally, the spinal cord is isolated by laminectomy, i.e. by breaking open the spinal vertebrae one at a time. This is both time consuming and may ...

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration (Video) | JoVE

Inyección de raíz dorsal ganglio de raíz dorsal y Lesión por aplastamiento como modelo para la regeneración del axón sensorial

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each ...

Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages

Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages (Video) | JoVE

Aislamiento rápido de macrófagos de ganando de raíz dorsal

There are growing interests to study the molecular and cellular interactions among immune cells and sensory neurons in the dorsal root ganglia after ...

Enrichment of Adult Mouse Dorsal Root Ganglia Neuron Cultures by Immunopanning

Enrichment of Adult Mouse Dorsal Root Ganglia Neuron Cultures by Immunopanning (Video) | JoVE

Enriquecimiento de cultivos de neuronas de ganglios de la raíz dorsal de ratones adultos mediante inmunopanización

Dorsal root ganglia (DRGs) are peripheral structures adjacent to the dorsal horn of the spinal cord, which house the cell bodies of sensory neurons as ...