Name: intracerebroventricular treatment with resiniferatoxin and pain tests in mice
Uploaded: 2020-09-02T12:30:00
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ここで使用される実験プロトコルはすべて武蔵野大学動物の世話と使用委員会によって承認されました。雄のddYマウス(SLC、静岡、日本)は、水と食物のアドリビタムの実験の前に、少なくとも7日間、12時間の明暗サイクル下で飼育した。5週齢または6週齢のマウスを実験に使用した。
1. 薬物の調製
<ol><li>
Rtx 注:アルコール性RTX溶液は、重度の皮膚の火傷や...

<ol>
	<li>Cavanaugh, D. J., Chesler, A. T., Braz, J. M., Shah, N. M., Julius, D., Basbaum, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restriction+of+transient+receptor+potential+vanilloid-1+to+the+peptidergic+subset+of+primary+afferent+neurons+follows+its+developmental+downregulation+in+nonpeptidergic+neurons.">Restriction of transient receptor potential vanilloid-1 to the peptidergic subset of primary afferent neurons follows its developmental downregulation in nonpeptidergic neurons.</a> J Neurosci. 31 (28), 10119-10127 (2011).</li><li>Caterina, M. J., Schumacher, M. A., Tominaga, M., Rosen, T. A., Levine, J. D., Julius, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+capsaicin+receptor:+a+heat-activated+ion+channel+in+the+pain+pathway.">The capsaicin receptor: a heat-activated ion channel in the pain pathway.</a> Nature. 389 (6653), 816-824 (1997).</li><li>Caterina, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+nociception+and+pain+sensation+in+mice+lacking+the+capsaicin+receptor.">Impaired nociception and pain sensation in mice lacking the capsaicin receptor.</a> Science. 288 (5464), 306-313 (2000).</li><li>Starowicz, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tonic+endovanilloid+facilitation+of+glutamate+release+in+brainstem+descending+antinociceptive+pathways.">Tonic endovanilloid facilitation of glutamate release in brainstem descending antinociceptive pathways.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 27 (50), 13739-13749 (2007).</li><li>Gavva, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vanilloid+receptor+TRPV1+is+tonically+activated+in+vivo+and+involved+in+body+temperature+regulation.">The vanilloid receptor TRPV1 is tonically activated in vivo and involved in body temperature regulation.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 27 (13), 3366-3374 (2007).</li><li>Marsch, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+anxiety,+conditioned+fear,+and+hippocampal+long-term+potentiation+in+transient+receptor+potential+vanilloid+type+1+receptor-deficient+mice.">Reduced anxiety, conditioned fear, and hippocampal long-term potentiation in transient receptor potential vanilloid type 1 receptor-deficient mice.</a> Journal of Neuroscience. 27 (4), 832-839 (2007).</li><li>Tzavara, E. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocannabinoids+activate+transient+receptor+potential+vanilloid+1+receptors+to+reduce+hyperdopaminergia-related+hyperactivity:+Therapeutic+implications.">Endocannabinoids activate transient receptor potential vanilloid 1 receptors to reduce hyperdopaminergia-related hyperactivity: Therapeutic implications.</a> Biological Psychiatry. 59 (6), 508-515 (2006).</li><li>Naz&#305;ro&#287;lu, M., &#214;vey, &. #. 3. 0. 4. ;. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+apoptosis+and+calcium+accumulation+through+TRPV1+channels+in+neurobiology+of+epilepsy.">Involvement of apoptosis and calcium accumulation through TRPV1 channels in neurobiology of epilepsy.</a> Neuroscience. 293, 55-66 (2015).</li><li>Mallet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPV1+in+brain+is+involved+in+acetaminophen-induced+antinociception.">TRPV1 in brain is involved in acetaminophen-induced antinociception.</a> PloS one. 5 (9), 1-11 (2010).</li><li>Barri&#232;re, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+amide+hydrolase-dependent+generation+of+antinociceptive+drug+metabolites+acting+on+TRPV1+in+the+brain.">Fatty acid amide hydrolase-dependent generation of antinociceptive drug metabolites acting on TRPV1 in the brain.</a> PloS one. 8 (8), e70690 (2013).</li><li>Jancs&#243;, G., Kiraly, E., Jancs&#243;-G&#225;bor, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologically+induced+selective+degeneration+of+chemosensitive+primary+sensory+neurones.">Pharmacologically induced selective degeneration of chemosensitive primary sensory neurones.</a> Nature. 270 (5639), 741-743 (1977).</li><li>Szallasi, A., Blumberg, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vanilloid+receptor+loss+in+rat+sensory+ganglia+associated+with+long+term+desensitization+to+resiniferatoxin.">Vanilloid receptor loss in rat sensory ganglia associated with long term desensitization to resiniferatoxin.</a> Neuroscience Letters. 140 (1), 51-54 (1992).</li><li>Cavanaugh, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+subsets+of+unmyelinated+primary+sensory+fibers+mediate+behavioral+responses+to+noxious+thermal+and+mechanical+stimuli.">Distinct subsets of unmyelinated primary sensory fibers mediate behavioral responses to noxious thermal and mechanical stimuli.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (22), 9075-9080 (2009).</li><li>Jeffry, J. A., Yu, S. Q., Sikand, P., Parihar, A., Evans, M. S., Premkumar, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+targeting+of+TRPV1+expressing+sensory+nerve+terminals+in+the+spinal+cord+for+long+lasting+analgesia.">Selective targeting of TRPV1 expressing sensory nerve terminals in the spinal cord for long lasting analgesia.</a> PLoS ONE. 4 (9), e7021 (2009).</li><li>Jancs&#243;, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracisternal+capsaicin:+selective+degeneration+of+chemosensitive+primary+sensory+afferents+in+the+adult+rat.">Intracisternal capsaicin: selective degeneration of chemosensitive primary sensory afferents in the adult rat.</a> Neuroscience letters. 27 (1), 41-45 (1981).</li><li>Gamse, R., Saria, A., Lundberg, J. M., Theodorsson-Norheim, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+neurochemical+changes+after+intracisternal+capsaicin+treatment+of+the+guinea+pig.">Behavioral and neurochemical changes after intracisternal capsaicin treatment of the guinea pig.</a> Neuroscience Letters. 64 (3), 287-292 (1986).</li><li>Neubert, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+mouse+orofacial+pain+and+the+effects+of+lesioning+TRPV1-expressing+neurons+on+operant+behavior.">Characterization of mouse orofacial pain and the effects of lesioning TRPV1-expressing neurons on operant behavior.</a> Molecular pain. 4, 43 (2008).</li><li>Karai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+vanilloid+receptor+1-expressing+primary+afferent+neurons+for+pain+control.">Deletion of vanilloid receptor 1-expressing primary afferent neurons for pain control.</a> The Journal of clinical investigation. 113 (9), 1344-1352 (2004).</li><li>Fukushima, A., Mamada, K., Iimura, A., Ono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supraspinal-selective+TRPV1+desensitization+induced+by+intracerebroventricular+treatment+with+resiniferatoxin.">Supraspinal-selective TRPV1 desensitization induced by intracerebroventricular treatment with resiniferatoxin.</a> Scientific reports. 7 (1), 12452 (2017).</li><li>Haley, T. J., McCormick, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+effects+produced+by+intracerebral+injection+of+drugs+in+the+conscious+mouse.">Pharmacological effects produced by intracerebral injection of drugs in the conscious mouse.</a> British journal of pharmacology and chemotherapy. 12 (1), 12-15 (1957).</li><li>Tj&#248;lsen, A., Berge, O. G., Hunskaar, S., Rosland, J. H., Hole, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+formalin+test:+an+evaluation+of+the+method.">The formalin test: an evaluation of the method.</a> Pain. 51 (1), 5-17 (1992).</li><li>Ohsawa, M., Miyabe, Y., Katsu, H., Yamamoto, S., Ono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+sensory+nerve+fiber+responsible+for+lysophosphatidic+acid-induced+allodynia+in+mice.">Identification of the sensory nerve fiber responsible for lysophosphatidic acid-induced allodynia in mice.</a> Neuroscience. 247, 65-74 (2013).</li><li>Tanabe, M., Tokuda, Y., Takasu, K., Ono, K., Honda, M., Ono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+synthetic+TRH+analogue+taltirelin+exerts+modality-specific+antinociceptive+effects+via+distinct+descending+monoaminergic+systems.">The synthetic TRH analogue taltirelin exerts modality-specific antinociceptive effects via distinct descending monoaminergic systems.</a> British journal of pharmacology. 150 (4), 403-414 (2007).</li><li>Ono, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+sympathetic+nerve+activity+as+a+possible+mechanism+for+the+hypothermic+effect+of+oseltamivir,+an+anti-influenza+virus+drug,+in+normal+mice.">Reduction in sympathetic nerve activity as a possible mechanism for the hypothermic effect of oseltamivir, an anti-influenza virus drug, in normal mice.</a> Basic &amp; clinical pharmacology &amp; toxicology. 113 (1), 25-30 (2013).</li><li>Kauer, J. A., Gibson, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hot+flash:+TRPV+channels+in+the+brain.">Hot flash: TRPV channels in the brain.</a> Trends in neurosciences. 32 (4), 215-224 (2009).</li></ol>

これらの実験で最も重要なステップは、i.c.v. インジェクションの成功です。ここで使用される i.c.v. 射出技術は非常に簡単ですが、いくつかの練習が必要です。実験の前に、染料(例えば生理食糸で0.5%トリパンブルー)を用いて練習することをお勧めします。注射が正しく行われる場合、針マークは冠状縫合糸に明らかであり、注入された染料は対側心室と第3心室に存在するべきである。また...

動物は、周辺神経のセンサーを通じて、環境から様々な物理的および化学的刺激を受けます。一過性受容体電位バニロイドタイプ1(TRPV1)は、熱センサ1、2、2およびTRPV1の活性化および/または変調として作用する熱感受性、非選択的カチオンチャネルの1つであり、正常および炎症性の両方の文脈におけるノシセプションの重要なステップであることが知られている3。全体的な発現パターンは議論の余地があるが、TRPV1の発現は、脊髄領域において、様々な脳活動(ノシセプション4、体温調節5、不安6、注意欠陥多動性障害7、およびてんかん8を含む)に関与することが示唆されている。さらに、最近、広く使用されている鎮痛剤であるアセトアミノフェンが、その鎮痛作用9,1010を惹起する中枢TRPV1の活性化を媒介することが示唆されている。
動物にカプサイシンおよびレジンイフェラトキシン(RTX)を含む過剰なTRPV1アゴニストの投与は、TRPV1陽性ニューロンの死およびTRPV1アゴニスト11、12,12への長期脱感作をもたらす。局所的な適用(内テカル13、14、内膜13,1515、16、17、16,17および神経節内18)と組み合わせることで、この化学的アブレーションアプローチは、TRPV1の生理学的機能を調査する別の方法を提供している。我々は最近、イントレーレブロナートラリカル(すなわち.c.v.)の注入がマウスにおけるアセトアミノフェンの鎮痛効果を阻害することを報告し、上髄選択的TRPV1脱感作19を示唆している。本稿では、i.c.v.注射とその後の疼痛検査のための正確なプロトコルを提示する。
脳の心室への薬物の直接注入は、任意の末梢効果を最小限に抑えながら、その中心的な効果を研究することが可能になります.ここで示すi.c.v.射出手順は、ヘイリーとマコーミック20によって報告された方法の変更です。この方法は、冠状縫合を通して側心室に注射針を挿入することを含む簡単であり、cannulationのための特別な装置または外科的処置を必要としない。
TRPV1アゴニストの末梢局所応用は、灼熱の痛みの感覚および神経因性炎症を呼び起こす。RTXで全身処理されるマウス、およびTRPV1-KOマウスは、この刺激13に対して無神経である。RTX-i.c.vにおける末梢TRPV1の保存を確認するために、RTX(RTX試験)の板腔内注入を行った。マウス。この方法は、従来のホルマリン試験21の改変である。
RTXおよびTRPV1-KOマウスで全身的に処置されたマウスは、機械的刺激11、13、2213,22に対して正常な閾値を示すことを報告されている。11ここでは、アセトアミノフェンの鎮痛効果の変化をテストするためのテール圧力試験の手順を提示します。
これらの手順はすべて正統性と汎用性があり、他の薬物の研究に適用することができます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="872">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Resiniferatoxin</td>
			<td style="width:191px;">LKT Laboratories</td>
			<td style="width:117px;">R1774</td>
			<td style="width:319px;">used for s.c./i.c.v. pretreatments and the RTX test</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">Acetaminophen</td>
			<td style="width:191px;">IWAKI SEIYAKU</td>
			<td style="width:117px;"></td>
			<td style="width:319px;">gifted from IWAKI SEIYAKU</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">Pentobarbital sodium salt</td>
			<td style="width:191px;">Tokyo Chemical Industry</td>
			<td style="width:117px;">P0776</td>
			<td style="width:319px;">used for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Ethanol (99.5)</td>
			<td style="width:191px;">Wako Pure Chemical Industries</td>
			<td style="width:117px;">057-00456</td>
			<td style="width:319px;">used for dissolving RTX</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monooleate</td>
			<td style="width:191px;">Wako Pure Chemical Industries</td>
			<td style="width:117px;">161-21621</td>
			<td style="width:319px;">used for dissolving RTX</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">25 mL microsyringe</td>
			<td style="width:191px;">Hamilton</td>
			<td style="width:117px;">1702LT</td>
			<td style="width:319px;">used for i.c.v. injection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">100 mL microsyringe</td>
			<td style="width:191px;">Hamilton</td>
			<td style="width:117px;">1710LT</td>
			<td style="width:319px;">used for intraplantar injection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">26-gauge disposable needle</td>
			<td style="width:191px;">TERUMO</td>
			<td style="width:117px;">NN-2613S</td>
			<td style="width:319px;">used for i.c.v. injection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">30-gauge disposable needle</td>
			<td style="width:191px;">NIPRO</td>
			<td style="width:117px;">01134</td>
			<td style="width:319px;">used for intraplantar injection</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Pressure meter</td>
			<td style="width:191px;">Ugo Basile</td>
			<td style="width:117px;">Analgesy-Meter Type 7200</td>
			<td style="width:319px;">used for tail pressure test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intracerebroventricular treatment with resiniferatoxin and pain tests in mice

一過性受容体電位バニロイドタイプ1(TRPV1)は、熱感受性カチオンチャネルであり、末梢神経の疼痛を引き起こすことが知られている。その末梢機能に加えて、脳機能への関与も示唆されている。超強力なTRPV1アゴニストであるレジンイフェラトキシン(RTX)は、TRPV1の長期脱感作を誘発することが知られており、この脱感作はTRPV1発現細胞の生理的関連性を調べる代替アプローチとなっています。ここでは、マウスにおけるRTXによるイントレーブレブロナーリク(i.c.v.)治療のためのプロトコルについて説明する。末梢TRPV1刺激(RTX試験)および機械的刺激(テール圧試験)に対する分光試験の手順を説明する。RTX i.c.v.を投与されたマウスの不可解な応答は対照群のものと同等であったが、RTX-i.c.v.投与マウスはアセトアミノフェンの鎮痛効果に鈍感であったが、i.c.v.RTX治療は脊髄選択的TR1脱感作を誘導できることを示唆した。本マウスモデルは、脳/脊髄機能におけるTRPV1の役割を研究するための便利な実験システムとして使用することができる。これらの技術は、他の薬物の中心的な作用の研究にも適用することができる。

i.c.v.処理マウスは、その外観、自発的な活動、体重19 およびコア体温に明らかな異常を示さない(車両処置群、38.4±0.3°C、n=6;RTX処理基は、38.7±0.2°C、n=6)。
図2A-B-Bは、RTXの板腔内注射に対するs.c.-またはi.c.v.処置マウスの応答性を示す。車両処置マウスの舐め/噛み付き行...

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Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice

脊髄領域における一過性受容体電位バニロイドタイプ1(TRPV1)は、脳機能においていくつかの役割を果たすと示唆されている。ここで説明する、マウスにおける上髄TRPV1脱感作のためのリントレーブレベンタリシンのリントレーバラトキシン注射のためのプロトコルである。いくつかの疼痛検査の手順も提示される。

マウスにおけるリントレブレブロナートキシンと疼痛検査によるイントレーブレブロナーチキュラー治療

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), a thermosensitive cation channel, is known to trigger pain in the peripheral nerves. In ...

この前処理の全体的な目標は、マウスを生成することであり、TRPV1チャネルは、脊髄領域の上に脱感作される。この方法は、神経薬理学的分野の主要な質問に答えることができます。.この技術の主な利点は、上脊髄選択的TRPV1脱感作が非常に簡単な方法で誘導できることである。この手順を開始するには、ペントバルビタールナトリウム腹腔内でマウスを麻酔し、右反射の喪失をチェックします。皮下治療の場合は、体重10グラムあたり0.1ミリリットルの体積で首の後ろに20マイクログラム/ミリリットルでRTXを注入します。コントロールグループの場合は、同じ方法で車両を注入します。使い捨ての27ゲージ針を金属管に通し、針の3〜3.5ミリメートルの先端を露出させる。次に、マウスの扁壁の骨を指でしっかりと保持します。頭皮の上で針を横に動かし、針の先端が縫合糸に引っ掛かるように矢状縫合を見つける。先端を1ミリメートルほど右に動かし、その先端をロストラリーに動かして、冠状縫合を見つけます。その後、針をゆっくりと垂直に挿入します。RTX溶液を10秒間注入し、その後さらに10秒間保持します。その後、針をゆっくり引き出し、マウスを自宅のケージに戻します。RTX注射の1週間後、試験の少なくとも60分前に、マウスを試験室に移す。試験の30分前に、環境に順応できるようにプレキシガラスケージにマウスを入れる。そして、試験の20分前に、1キログラム当たり300ミリグラムでアセトアミノフェンをマウス腹腔内に投与する。小さな布袋にマウスをゆるく持ち、右後足のかかとに30ゲージの針を挿入します。ニードルを歩行パッドの近くに皮下に進め、1ミリリットル当たり0.05マイクログラムで20マイクロリットルのRTX溶液を注入します。続いて、各5分間のブロックで、罹患した足のグラブログア領域における舐めと噛み付き行動の期間を測定する。RTX注射の1週間後、マウスを試験室に移します。プレキシガラスケージにマウスを置きます。尾の基部から 1.5 センチメートルと 2.5 センチメートルでスポットをマークします。次に、マウスを小さな布袋にゆるく持ち、鈍いプローブでスポットに圧力を加えます。250グラムのカットオフ圧力は、組織の損傷を避けるために課されることに注意してください。エスケープ動作を引き出すために必要な圧力を決定し、2つのスポットで決定された圧力を平均化することによって、ノシケイプ閾値を計算します。15 分ごとに手順を繰り返します。ベースラインを得た後、1キログラム当たり300マイクログラムのアセトアミノフェンを腹腔内にマウスに投与し、90分に達するまで15分ごとに尾圧試験を繰り返す。これら2つの図は、RTXの板腔内注射に対するSCまたはICV処理マウスの応答性を示す。車両処理マウスの舐めと噛み付き行動は、最初の10分間で顕著であった。SC前処理マウスは舐めや噛み付きの挙動を全く示さなかったが、ICV前処理マウスは通常RTXの足底注入に反応した。さらに、アセトアミノフェンの腹腔内投与は、ICV処置マウスの車両ICV処置の舐めおよび噛み付き行動を減少させたが、RTX ICV処置マウスでは減少しなかった。このグラフは、尾圧試験で1キログラムあたり300マイクログラムでアセトアミノフェンの鎮痛効果を示しています。アセトアミノフェンは、両方の試験で前処理マウスの車両の聴薬応答を減少させたが、RTXでICVを前処理したマウスではアセトアミノフェンの鎮痛効果が阻害された。一度習得, この ICV 注射技術は、他の薬を適用することができます。.Resiniferatoxinを使用すると非常に危険であり、取扱い時に保護のためにゴム手袋とメガネを使用することを忘れないでください。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

春雨とカッペリーニの処理試験：ラットとマウスの器用な前足の機能の簡単な定量的指標

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

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後根潜在的記録によりマウスにおける脊髄シナプス前抑制を測定する<em&gt;インビボ</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

永続かつ広範な神経伝達のための新生児マウス脳の脳室内ウイルス注射

With the pace of scientific advancement accelerating rapidly, new methods are needed for experimental neuroscience to quickly and easily manipulate gene ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

マウスにおける低温感受性と適応を決定するためのシンプルで安価な方法

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Intracerebroventricular Injection of Amyloid-&#946; Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits

Intracerebroventricular Injection of Amyloid-ÃƒÅ½Ã‚Â² Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits

急性アルツハイマーなどの認知障害を誘発するために正常マウスにおけるアミロイドβペプチドの脳室内注射

Amyloid-&#946; (A&#946;) is a major pathological mediator of both familial and sporadic Alzheimer's disease (AD). In the brains of AD patients, ...

Intracranial Pharmacotherapy and Pain Assays in Rodents

頭蓋内薬物療法と痛みの試金の齧歯動物

Pain is a salient sensory experience with affective and cognitive dimensions. However, central mechanisms for pain remain poorly understood, hindering the ...

Comprehensive Autopsy Program for Individuals with Multiple Sclerosis

多発性硬化症の個人のための包括的な解剖プログラム

We describe a rapid tissue donation program for individuals with multiple sclerosis (MS) that requires scientists and technicians to be on-call 24/7, 365 ...

Burn Injury-Induced Pain and Depression-Like Behavior in Mice

マウスにおける火傷誘発性疼痛およびうつ病様行動

Scalding water is the most common cause of burn injury in both elderly and young populations. It is one of the major clinical challenges because of the ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

頭痛の前臨床モデルとしてのマウスにおける硬膜刺激および眼窩周囲フォンフレイ試験

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

Mechanical Conflict-Avoidance Assay to Measure Pain Behavior in Mice

マウスの疼痛行動を測定するための機械的衝突回避アッセイ

Pain comprises of both sensory (nociceptive) and affective (unpleasant) dimensions. In preclinical models, pain has traditionally been assessed using ...