Name: intracerebroventricular treatment with resiniferatoxin and pain tests in mice
Uploaded: 2020-09-02T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice at JoVE.com

Ни один.

Все используемые здесь экспериментальные протоколы были одобрены Комитетом по уходу за животными и использованию Университета Мусашино. Мышей-мышей (SLC, Сидзуока, Япония) держали по крайней мере 7 дней под 12-ч свет / темный цикл до экспериментов с водой и пищевой объявление libitum. Для эксп?...

<ol>
	<li>Cavanaugh, D. J., Chesler, A. T., Braz, J. M., Shah, N. M., Julius, D., Basbaum, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restriction+of+transient+receptor+potential+vanilloid-1+to+the+peptidergic+subset+of+primary+afferent+neurons+follows+its+developmental+downregulation+in+nonpeptidergic+neurons.">Restriction of transient receptor potential vanilloid-1 to the peptidergic subset of primary afferent neurons follows its developmental downregulation in nonpeptidergic neurons.</a> J Neurosci. 31 (28), 10119-10127 (2011).</li><li>Caterina, M. J., Schumacher, M. A., Tominaga, M., Rosen, T. A., Levine, J. D., Julius, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+capsaicin+receptor:+a+heat-activated+ion+channel+in+the+pain+pathway.">The capsaicin receptor: a heat-activated ion channel in the pain pathway.</a> Nature. 389 (6653), 816-824 (1997).</li><li>Caterina, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+nociception+and+pain+sensation+in+mice+lacking+the+capsaicin+receptor.">Impaired nociception and pain sensation in mice lacking the capsaicin receptor.</a> Science. 288 (5464), 306-313 (2000).</li><li>Starowicz, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tonic+endovanilloid+facilitation+of+glutamate+release+in+brainstem+descending+antinociceptive+pathways.">Tonic endovanilloid facilitation of glutamate release in brainstem descending antinociceptive pathways.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 27 (50), 13739-13749 (2007).</li><li>Gavva, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vanilloid+receptor+TRPV1+is+tonically+activated+in+vivo+and+involved+in+body+temperature+regulation.">The vanilloid receptor TRPV1 is tonically activated in vivo and involved in body temperature regulation.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 27 (13), 3366-3374 (2007).</li><li>Marsch, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+anxiety,+conditioned+fear,+and+hippocampal+long-term+potentiation+in+transient+receptor+potential+vanilloid+type+1+receptor-deficient+mice.">Reduced anxiety, conditioned fear, and hippocampal long-term potentiation in transient receptor potential vanilloid type 1 receptor-deficient mice.</a> Journal of Neuroscience. 27 (4), 832-839 (2007).</li><li>Tzavara, E. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocannabinoids+activate+transient+receptor+potential+vanilloid+1+receptors+to+reduce+hyperdopaminergia-related+hyperactivity:+Therapeutic+implications.">Endocannabinoids activate transient receptor potential vanilloid 1 receptors to reduce hyperdopaminergia-related hyperactivity: Therapeutic implications.</a> Biological Psychiatry. 59 (6), 508-515 (2006).</li><li>Naz&#305;ro&#287;lu, M., &#214;vey, &. #. 3. 0. 4. ;. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+apoptosis+and+calcium+accumulation+through+TRPV1+channels+in+neurobiology+of+epilepsy.">Involvement of apoptosis and calcium accumulation through TRPV1 channels in neurobiology of epilepsy.</a> Neuroscience. 293, 55-66 (2015).</li><li>Mallet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPV1+in+brain+is+involved+in+acetaminophen-induced+antinociception.">TRPV1 in brain is involved in acetaminophen-induced antinociception.</a> PloS one. 5 (9), 1-11 (2010).</li><li>Barri&#232;re, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+amide+hydrolase-dependent+generation+of+antinociceptive+drug+metabolites+acting+on+TRPV1+in+the+brain.">Fatty acid amide hydrolase-dependent generation of antinociceptive drug metabolites acting on TRPV1 in the brain.</a> PloS one. 8 (8), e70690 (2013).</li><li>Jancs&#243;, G., Kiraly, E., Jancs&#243;-G&#225;bor, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologically+induced+selective+degeneration+of+chemosensitive+primary+sensory+neurones.">Pharmacologically induced selective degeneration of chemosensitive primary sensory neurones.</a> Nature. 270 (5639), 741-743 (1977).</li><li>Szallasi, A., Blumberg, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vanilloid+receptor+loss+in+rat+sensory+ganglia+associated+with+long+term+desensitization+to+resiniferatoxin.">Vanilloid receptor loss in rat sensory ganglia associated with long term desensitization to resiniferatoxin.</a> Neuroscience Letters. 140 (1), 51-54 (1992).</li><li>Cavanaugh, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+subsets+of+unmyelinated+primary+sensory+fibers+mediate+behavioral+responses+to+noxious+thermal+and+mechanical+stimuli.">Distinct subsets of unmyelinated primary sensory fibers mediate behavioral responses to noxious thermal and mechanical stimuli.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (22), 9075-9080 (2009).</li><li>Jeffry, J. A., Yu, S. Q., Sikand, P., Parihar, A., Evans, M. S., Premkumar, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+targeting+of+TRPV1+expressing+sensory+nerve+terminals+in+the+spinal+cord+for+long+lasting+analgesia.">Selective targeting of TRPV1 expressing sensory nerve terminals in the spinal cord for long lasting analgesia.</a> PLoS ONE. 4 (9), e7021 (2009).</li><li>Jancs&#243;, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracisternal+capsaicin:+selective+degeneration+of+chemosensitive+primary+sensory+afferents+in+the+adult+rat.">Intracisternal capsaicin: selective degeneration of chemosensitive primary sensory afferents in the adult rat.</a> Neuroscience letters. 27 (1), 41-45 (1981).</li><li>Gamse, R., Saria, A., Lundberg, J. M., Theodorsson-Norheim, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+neurochemical+changes+after+intracisternal+capsaicin+treatment+of+the+guinea+pig.">Behavioral and neurochemical changes after intracisternal capsaicin treatment of the guinea pig.</a> Neuroscience Letters. 64 (3), 287-292 (1986).</li><li>Neubert, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+mouse+orofacial+pain+and+the+effects+of+lesioning+TRPV1-expressing+neurons+on+operant+behavior.">Characterization of mouse orofacial pain and the effects of lesioning TRPV1-expressing neurons on operant behavior.</a> Molecular pain. 4, 43 (2008).</li><li>Karai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+vanilloid+receptor+1-expressing+primary+afferent+neurons+for+pain+control.">Deletion of vanilloid receptor 1-expressing primary afferent neurons for pain control.</a> The Journal of clinical investigation. 113 (9), 1344-1352 (2004).</li><li>Fukushima, A., Mamada, K., Iimura, A., Ono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supraspinal-selective+TRPV1+desensitization+induced+by+intracerebroventricular+treatment+with+resiniferatoxin.">Supraspinal-selective TRPV1 desensitization induced by intracerebroventricular treatment with resiniferatoxin.</a> Scientific reports. 7 (1), 12452 (2017).</li><li>Haley, T. J., McCormick, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+effects+produced+by+intracerebral+injection+of+drugs+in+the+conscious+mouse.">Pharmacological effects produced by intracerebral injection of drugs in the conscious mouse.</a> British journal of pharmacology and chemotherapy. 12 (1), 12-15 (1957).</li><li>Tj&#248;lsen, A., Berge, O. G., Hunskaar, S., Rosland, J. H., Hole, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+formalin+test:+an+evaluation+of+the+method.">The formalin test: an evaluation of the method.</a> Pain. 51 (1), 5-17 (1992).</li><li>Ohsawa, M., Miyabe, Y., Katsu, H., Yamamoto, S., Ono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+sensory+nerve+fiber+responsible+for+lysophosphatidic+acid-induced+allodynia+in+mice.">Identification of the sensory nerve fiber responsible for lysophosphatidic acid-induced allodynia in mice.</a> Neuroscience. 247, 65-74 (2013).</li><li>Tanabe, M., Tokuda, Y., Takasu, K., Ono, K., Honda, M., Ono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+synthetic+TRH+analogue+taltirelin+exerts+modality-specific+antinociceptive+effects+via+distinct+descending+monoaminergic+systems.">The synthetic TRH analogue taltirelin exerts modality-specific antinociceptive effects via distinct descending monoaminergic systems.</a> British journal of pharmacology. 150 (4), 403-414 (2007).</li><li>Ono, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+sympathetic+nerve+activity+as+a+possible+mechanism+for+the+hypothermic+effect+of+oseltamivir,+an+anti-influenza+virus+drug,+in+normal+mice.">Reduction in sympathetic nerve activity as a possible mechanism for the hypothermic effect of oseltamivir, an anti-influenza virus drug, in normal mice.</a> Basic &amp; clinical pharmacology &amp; toxicology. 113 (1), 25-30 (2013).</li><li>Kauer, J. A., Gibson, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hot+flash:+TRPV+channels+in+the+brain.">Hot flash: TRPV channels in the brain.</a> Trends in neurosciences. 32 (4), 215-224 (2009).</li></ol>

Наиболее важным шагом в этих экспериментах является успех инъекций i.c.v. Техника инъекций i.c.v., используемая здесь, довольно проста, но требует некоторой практики. Перед экспериментами рекомендуется практиковаться с красителями (например, 0,5% трипан-голубого солевого раствора). Если инъе...

Животные получают различные физические и химические стимулы из окружающей среды с помощью датчиков на периферических нервах. Переходный рецептор потенциальных ваниллоид типа 1 (TRPV1) является одним из термочувствительных, неселективных каналов катионации, которые действуюткак датчики тепла 1,2, и активации и / или модуляции TRPV1, как известно, является ключевым шагом для ноцицепции в нормальных и воспалительныхконтекстах 3. Хотя общая модель выражения является спорным, выражение TRPV1 также было предложено в супраспинальных регионах, будучи вовлеченным в различные виды деятельности мозга (в том числе ноцицепции4,терморегуляция 5,тревога 6, синдром дефицитавнимания и гиперактивности 7, иэпилепсия 8). Кроме того, недавно было высказано предположение, что ацетаминофен, широко используемое обезболивающее, опосредует активацию центрального TRPV1, чтобы вызватьего обезболивающее действие 9,10.
Администрация избыточного агониста TRPV1, включая капсаицин и смолифератоксин (RTX) животным, приводит к смерти TRPV1-положительных нейронов и длительной десенсибилизации агонистов TRPV111,12. В сочетании с местным применением(внутритекалные 13,14, intracisternal15,16,17, и интраганглион18), этот химический подход абляции предоставил альтернативный способ исследовать физиологические функции TRPV1. Недавно мы сообщили, что intracerebroventricular (i.c.v.) инъекция RTX подавляет обезболивающее действие ацетаминофена у мышей, предлагая супраспинно-селективной ДЕСЕНСИТизации19. В этой рукописи мы представляем точный протокол для инъекций i.c.v. и последующих обезболивающих тестов.
Прямая инъекция наркотиков в желудочки головного мозга позволяет изучать их центральные эффекты при одновременном минимуме любых периферических эффектов. Процедура инъекций i.c.v., представленная здесь, является модификацией метода, о которого сообщили Хейли и Маккормик20. Этот метод прост, включающий вставку инъекционной иглы в боковой желудочек через корональный шов и не требует специального оборудования или хирургических процедур для канюляции.
Периферическое местное применение агонистов TRPV1 вызывает жжение и нейрогенное воспаление. Мыши, которые системно обрабатываются RTX, и TRPV1-KO мышей, нечувствительны к этой стимуляции13. Мы провели внутриплантарную инъекцию RTX (тест RTX), чтобы подтвердить сохранение периферического TRPV1 в RTX-i.c.v. Мышей. Этот метод является модификацией обычного формалина тест21.
Сообщалось, что мыши системно обработанные RTX и TRPV1-KO мышей показывают нормальный порог механическихстимулов 11,13,22. Здесь мы представляем процедуру теста давления хвоста для тестирования изменений в обезболивающем эффекте ацетаминофена.
Все эти процедуры являются православными и универсальными, и могут быть применены к исследованиям других препаратов.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="872">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Resiniferatoxin</td>
			<td style="width:191px;">LKT Laboratories</td>
			<td style="width:117px;">R1774</td>
			<td style="width:319px;">used for s.c./i.c.v. pretreatments and the RTX test</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">Acetaminophen</td>
			<td style="width:191px;">IWAKI SEIYAKU</td>
			<td style="width:117px;"></td>
			<td style="width:319px;">gifted from IWAKI SEIYAKU</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">Pentobarbital sodium salt</td>
			<td style="width:191px;">Tokyo Chemical Industry</td>
			<td style="width:117px;">P0776</td>
			<td style="width:319px;">used for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Ethanol (99.5)</td>
			<td style="width:191px;">Wako Pure Chemical Industries</td>
			<td style="width:117px;">057-00456</td>
			<td style="width:319px;">used for dissolving RTX</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monooleate</td>
			<td style="width:191px;">Wako Pure Chemical Industries</td>
			<td style="width:117px;">161-21621</td>
			<td style="width:319px;">used for dissolving RTX</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">25 mL microsyringe</td>
			<td style="width:191px;">Hamilton</td>
			<td style="width:117px;">1702LT</td>
			<td style="width:319px;">used for i.c.v. injection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">100 mL microsyringe</td>
			<td style="width:191px;">Hamilton</td>
			<td style="width:117px;">1710LT</td>
			<td style="width:319px;">used for intraplantar injection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">26-gauge disposable needle</td>
			<td style="width:191px;">TERUMO</td>
			<td style="width:117px;">NN-2613S</td>
			<td style="width:319px;">used for i.c.v. injection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:247px;">30-gauge disposable needle</td>
			<td style="width:191px;">NIPRO</td>
			<td style="width:117px;">01134</td>
			<td style="width:319px;">used for intraplantar injection</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:247px;">Pressure meter</td>
			<td style="width:191px;">Ugo Basile</td>
			<td style="width:117px;">Analgesy-Meter Type 7200</td>
			<td style="width:319px;">used for tail pressure test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intracerebroventricular treatment with resiniferatoxin and pain tests in mice

Переходный рецептор потенциальных ваниллоид типа 1 (TRPV1), термочувствительный канал катиона, как известно, вызывают боль в периферических нервов. В дополнение к своей периферической функции, его участие в функции мозга также было предложено. Известно, что рецифератоксин (RTX), ультрапотентный агонист TRPV1, вызывает долгосрочную десенсибилизацию TRPV1, и эта десенсибилизация является альтернативным подходом для изучения физиологической значимости клеток, выражаюющих TRPV1. Здесь мы описываем протокол для intracerebroventricular (i.c.v.) обработки с RTX в мышах. Процедуры описаны для тестирования ноцицепции периферической стимуляции TRPV1 (тест RTX) и механической стимуляции (тест давления хвоста), а затем следовать. Хотя ноцицептивные реакции мышей, которые вводились RTX i.c.v. были сопоставимы с ответами контрольных групп, RTX-i.c.v.-administered мышей были нечувствительны к обезболивающему эффекту ацетаминофена, предполагая, что лечение i.c.v. RTX может вызвать супрастинал-селективную десенсибилизацию TRPV1. Эта модель мыши может быть использована в качестве удобной экспериментальной системы для изучения роли TRPV1 в мозге / супраспинальной функции. Эти методы также могут быть применены к исследованиям центральных действий других препаратов.

I.c.v.-обработанные мыши не показывают никаких явных отклонений в их внешнем виде, спонтаннойдеятельности, массе тела 19 и температуре тела ядра (группа, обработанная транспортным средством, 38,4 и 0,3 градуса по Цельсию, n No 6; Группа, обработанная RTX, 38,7 и 0,2 градус...

Watch this Scientific Journal Video about Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice at JoVE.com

Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice

Переходный рецептор потенциальных ваниллоид типа 1 (TRPV1) в надспинной области было предложено играть определенную роль в функции мозга. Описано здесь протокол для интрацеребровентрикулярной инъекции смолифератоксина для супраспинальной десенсибилизации TRPV1 у мышей. Процедуры для некоторых обезболивающих тестов также представлены.

Интрацеребровентрикулярное лечение с помощью рецифератоксина и обезболивающих тестов у мышей

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), a thermosensitive cation channel, is known to trigger pain in the peripheral nerves. In ...

Общая цель этой предварительной обработки заключается в создании мышей и что каналы TRPV1 десенсибилизированы в супраспинальных регионах. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в нейрофармацевтической области. Основным преимуществом этого метода является то, что надспинаальная селективная десенсибилизация TRPV1 может быть вызвана довольно простым способом.Чтобы начать эту процедуру, анестезировать мышь с пентобарбитальным натрием intraperitoneally и проверить на потерю правого рефлекса. Для подкожного лечения ввимит RTX по 20 микрограмм на миллилитр в заднюю часть шеи при объеме 0,1 миллилитра на 10 граммов массы тела. Для контрольной группы, вводить транспортное средство таким же образом.Пройдите одноразовые 27 калибровочных игл через металлическую трубку, чтобы разоблачить от 3 до 3,5 миллиметра кончик иглы. Затем держите сквамосальные кости мыши крепко пальцами. Переместите иглу боковой на кожу головы и найти sagittal шов, как кончик иглы зацепили на шве.Перемести кончик примерно на один миллиметр вправо, а затем перемести кончик ростральным, чтобы найти корональный шов. После этого вставьте иглу медленно и вертикально. Ввись решение RTX в течение 10 секунд и удерживайте его еще 10 секунд после этого.Затем медленно свямите иглу и верните мышь в домашнюю клетку. Через неделю после инъекции RTX, по крайней мере за 60 минут до теста, перенесите мышь в испытательный зал. По крайней мере за 30 минут до теста поместите мышь в клетку из плексигласа, чтобы она акклиматизировалась к окружающей среде.Затем за 20 минут до теста, управлять ацетаминофен на 300 миллиграммов на килограмм мыши intraperitoneally. Держите мышь свободно в небольшой мешок ткани и вставьте 30 калибровочных иглы в пятку правой задней лапы. Предварительно иглы подкожно вблизи пешеходной площадки и ввести 20 микролитров раствора RTX на 0,05 микрограмма на миллилитр.Впоследствии, измерить период лизать и кусаться поведение в глабрузной области пораженной лапы в каждом пятиминутном блоке. Через неделю после инъекции RTX перенесите мышь в испытательный зал. Поместите мышь в клетку из плексигласа.Отметь пятна на уровне 1,5 и 2,5 сантиметра от основания хвоста. Затем держите мышь свободно в небольшой мешок ткани и оказать давление на пятна с тупым зондом. Обратите внимание, что давление отсечения 250 грамм налагается, чтобы избежать повреждения тканей.Определите давление, необходимое для получения поведения побега и вычислить ноцицептивный порог путем усреднения давления, определяемого в двух точках. Повторяйте процедуры каждые 15 минут. После получения базовой линии, управлять ацетаминофен на 300 микрограмм на килограмм мыши intraperitoneally, а затем повторить тест давления хвоста каждые 15 минут, пока не достигнет 90 минут.Эти две цифры показывают отзывчивость SC или ICV лечение мышей к внутриплантационной инъекции RTX. Лизание и кусаться поведение транспортных средств обработанных мышей было замечательно в первые 10 минут. Хотя SC предварительно обработавших мышей не показывают лизать и кусаться поведение на всех, ICV предварительно обработанной мышей обычно ответил на подошвенной инъекции RTX.Кроме того, внутриперитонеальной администрации ацетаминофена снижение лизать и кусаться поведение транспортного средства ICV лечение мышей, но не в RTX ICV лечение мышей. На этом графике показаны анальгетики эффекты ацетаминофена на 300 микрограмм на килограмм в тесте давления хвоста. Ацетаминофен снижение ноцицептивной реакции транспортного средства предварительной лечили мышей в обоих тестах, но анальгетики эффекты ацетаминофен были ингибированы у мышей, которые были предварительно обработанные ICV с RTX.После освоения, этот метод инъекции ICV может быть применен для других препаратов. Не забывайте, что работа с Resiniferatoxin может быть чрезвычайно опасным и убедитесь, что использовать резиновые перчатки и очки для защиты при обработке.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

Вермишель и тесты Capellini Обращение: Простые количественные показатели ловкие функции передней лапы у крыс и мышей

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Измерение спинного пресинаптического торможения у мышей, спинных потенциального записи<em&gt; В Vivo</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

Интрацеребровентрикулярное Вирусный Инъекция по неонатологии мозга мыши для устойчив и распространен нейронов трансдукции

With the pace of scientific advancement accelerating rapidly, new methods are needed for experimental neuroscience to quickly and easily manipulate gene ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Простой и недорогой метод для определения холодную чувствительность и адаптация в мышах

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Intracerebroventricular Injection of Amyloid-&#946; Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits

Intracerebroventricular Injection of Amyloid-ÃƒÅ½Ã‚Â² Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits

Интрацеребровентрикулярное инъекция амилоид-бета пептидов у нормальных мышей с болезнью Альцгеймера Остро индуцируют подобные когнитивные дефициты

Amyloid-&#946; (A&#946;) is a major pathological mediator of both familial and sporadic Alzheimer's disease (AD). In the brains of AD patients, ...

Intracranial Pharmacotherapy and Pain Assays in Rodents

Внутричерепных фармакотерапии и боль Assays грызунов

Pain is a salient sensory experience with affective and cognitive dimensions. However, central mechanisms for pain remain poorly understood, hindering the ...

Comprehensive Autopsy Program for Individuals with Multiple Sclerosis

Комплексная программа вскрытия для лиц с рассеянным склерозом

We describe a rapid tissue donation program for individuals with multiple sclerosis (MS) that requires scientists and technicians to be on-call 24/7, 365 ...

Burn Injury-Induced Pain and Depression-Like Behavior in Mice

Боль, вызванная ожоговой травмой, и депрессивное поведение у мышей

Scalding water is the most common cause of burn injury in both elderly and young populations. It is one of the major clinical challenges because of the ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Дуральная стимуляция и периорбитальное тестирование фон Фрея на мышах как доклиническая модель головной боли

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

Mechanical Conflict-Avoidance Assay to Measure Pain Behavior in Mice

Механический анализ избегания конфликтов для измерения болевого поведения у мышей

Pain comprises of both sensory (nociceptive) and affective (unpleasant) dimensions. In preclinical models, pain has traditionally been assessed using ...