Name: molecular analysis of endothelial-mesenchymal transition induced by transforming growth factor-&#946; signaling
Uploaded: 2018-08-03T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-ÃŽÂ² Signaling at JoVE.com

ونحن نشكر بوروك زيا ومييازونو كوهية للاقتراحات في إعداد مخطوطة. H.I.S. ومحمد تدعمها "زمالة أبحاث مؤسسة النصب التذكاري أوهارا"، ويدعمه H.I.S. "أوسامو هايايشى التذكاري المنح الدراسية" "الدراسة في الخارج". وأيد هذا العمل بمنحه من مؤسسة العلوم وتاكيدا (أ. س.).

1-تحريض اندمت
<ol><li>الحفاظ على خلايا مرض التصلب العصبي المتعدد-1 في ظروف الثقافة الموحدة وتجنب كونفلوينسي. مصدرا لخلايا مرض التصلب العصبي المتعدد-1 يرد في الجدول للمواد. لمرض التصلب العصبي المتعدد-1 الخلايا، استخدام "الحد الأدنى الأساسية" المتوسطة-α (MEM-α) مع 10% مصل العجل الجنين (FCS) وا...

<ol>
	<li>Sanchez-Duffhues, G., Garcia de Vinuesa, A., Ten Dijke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-to-mesenchymal+transition+in+cardiovascular+diseases:+Developmental+signaling+pathways+gone+awry.">Endothelial-to-mesenchymal transition in cardiovascular diseases: Developmental signaling pathways gone awry.</a> Developmental Dynamics. , (2017).</li><li>Markwald, R. R., Fitzharris, T. P., Smith, W. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+analysis+of+endocardial+cytodifferentiation.">Structural analysis of endocardial cytodifferentiation.</a> Developmental Biology. 42 (1), 160-180 (1975).</li><li>Eisenberg, L. M., Markwald, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+atrioventricular+valvuloseptal+morphogenesis.">Molecular regulation of atrioventricular valvuloseptal morphogenesis.</a> Circulation Research. 77 (1), 1-6 (1995).</li><li>Chen, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cells+are+progenitors+of+cardiac+pericytes+and+vascular+smooth+muscle+cells.">Endothelial cells are progenitors of cardiac pericytes and vascular smooth muscle cells.</a> Nature Communications. 7, 12422 (2016).</li><li>DeRuiter, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+endothelial+cells+transdifferentiate+into+mesenchymal+cells+expressing+smooth+muscle+actins+in+vivo+and+in+vitro.">Embryonic endothelial cells transdifferentiate into mesenchymal cells expressing smooth muscle actins in vivo and in vitro.</a> Circulation Research. 80 (4), 444-451 (1997).</li><li>Arciniegas, E., Neves, C. Y., Carrillo, L. M., Zambrano, E. A., Ramirez, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-mesenchymal+transition+occurs+during+embryonic+pulmonary+artery+development.">Endothelial-mesenchymal transition occurs during embryonic pulmonary artery development.</a> Endothelium. 12 (4), 193-200 (2005).</li><li>Welch-Reardon, K. M., Wu, N., Hughes, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+partial+endothelial-mesenchymal+transitions+in+angiogenesis.">A role for partial endothelial-mesenchymal transitions in angiogenesis.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (2), 303-308 (2015).</li><li>Zeisberg, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-to-mesenchymal+transition+contributes+to+cardiac+fibrosis.">Endothelial-to-mesenchymal transition contributes to cardiac fibrosis.</a> Nature Medicine. 13 (8), 952-961 (2007).</li><li>Chen, P. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-to-mesenchymal+transition+drives+atherosclerosis+progression.">Endothelial-to-mesenchymal transition drives atherosclerosis progression.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (12), 4514-4528 (2015).</li><li>Bostrom, K. I., Yao, J., Guihard, P. J., Blazquez-Medela, A. M., Yao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-mesenchymal+transition+in+atherosclerotic+lesion+calcification.">Endothelial-mesenchymal transition in atherosclerotic lesion calcification.</a> Atherosclerosis. , 124-127 (2016).</li><li>Qiao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+fate+mapping+in+mice+with+pulmonary+hypertension.">Endothelial fate mapping in mice with pulmonary hypertension.</a> Circulation. 129 (6), 692-703 (2014).</li><li>Ranchoux, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-to-mesenchymal+transition+in+pulmonary+hypertension.">Endothelial-to-mesenchymal transition in pulmonary hypertension.</a> Circulation. 131 (11), 1006-1018 (2015).</li><li>Maddaluno, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EndMT+contributes+to+the+onset+and+progression+of+cerebral+cavernous+malformations.">EndMT contributes to the onset and progression of cerebral cavernous malformations.</a> Nature. 498 (7455), 492-496 (2013).</li><li>Krenning, G., Zeisberg, E. M., Kalluri, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+of+fibroblasts+and+mechanism+of+cardiac+fibrosis.">The origin of fibroblasts and mechanism of cardiac fibrosis.</a> Journal of Cell Physiology. 225 (3), 631-637 (2010).</li><li>Cooley, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-beta+signaling+mediates+endothelial-to-mesenchymal+transition+(EndMT)+during+vein+graft+remodeling.">TGF-beta signaling mediates endothelial-to-mesenchymal transition (EndMT) during vein graft remodeling.</a> Science Translational Medicine. 6 (227), 227ra234 (2014).</li><li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transforming+Growth+Factor-beta1+Induces+Endothelial-to-Mesenchymal+Transition+via+Akt+Signaling+Pathway+in+Renal+Transplant+Recipients+with+Chronic+Allograft+Dysfunction.">Transforming Growth Factor-beta1 Induces Endothelial-to-Mesenchymal Transition via Akt Signaling Pathway in Renal Transplant Recipients with Chronic Allograft Dysfunction.</a> Annals of Transplantation. 21, 775-783 (2016).</li><li>Xu-Dubois, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Markers+of+Endothelial-to-Mesenchymal+Transition:+Evidence+for+Antibody-Endothelium+Interaction+during+Antibody-Mediated+Rejection+in+Kidney+Recipients.">Markers of Endothelial-to-Mesenchymal Transition: Evidence for Antibody-Endothelium Interaction during Antibody-Mediated Rejection in Kidney Recipients.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 27 (1), 324-332 (2016).</li><li>Zeisberg, E. M., Potenta, S., Xie, L., Zeisberg, M., Kalluri, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+endothelial+to+mesenchymal+transition+as+a+source+for+carcinoma-associated+fibroblasts.">Discovery of endothelial to mesenchymal transition as a source for carcinoma-associated fibroblasts.</a> Cancer Research. 67 (21), 10123-10128 (2007).</li><li>Pardali, E., Sanchez-Duffhues, G., Gomez-Puerto, M. C., Ten Dijke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-beta-Induced+Endothelial-Mesenchymal+Transition+in+Fibrotic+Diseases.">TGF-beta-Induced Endothelial-Mesenchymal Transition in Fibrotic Diseases.</a> International Journal of Molecular Sciences. 18 (10), (2017).</li><li>Mihira, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-beta-induced+mesenchymal+transition+of+MS-1+endothelial+cells+requires+Smad-dependent+cooperative+activation+of+Rho+signals+and+MRTF-A.">TGF-beta-induced mesenchymal transition of MS-1 endothelial cells requires Smad-dependent cooperative activation of Rho signals and MRTF-A.</a> Journal of Biochemistry. 151 (2), 145-156 (2012).</li><li>Hashimoto, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-mesenchymal+transition+in+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis.">Endothelial-mesenchymal transition in bleomycin-induced pulmonary fibrosis.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 43 (2), 161-172 (2010).</li><li>Suzuki, H. I., Miyazono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+microRNA+biogenesis:+crosstalk+between+p53+network+and+microRNA+processing+pathway.">Dynamics of microRNA biogenesis: crosstalk between p53 network and microRNA processing pathway.</a> Journal of Molecular Medicine (Berl). 88 (11), 1085-1094 (2010).</li><li>Suzuki, H. I., Miyazono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+complexity+of+microRNA+generation+cascades.">Emerging complexity of microRNA generation cascades.</a> Journal of Biochemistry. 149 (1), 15-25 (2011).</li><li>Nicoloso, M. S., Spizzo, R., Shimizu, M., Rossi, S., Calin, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNAs--the+micro+steering+wheel+of+tumour+metastases.">MicroRNAs--the micro steering wheel of tumour metastases.</a> Nature Reviews Cancer. 9 (4), 293-302 (2009).</li><li>Lagendijk, A. K., Goumans, M. J., Burkhard, S. B., Bakkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-23+restricts+cardiac+valve+formation+by+inhibiting+Has2+and+extracellular+hyaluronic+acid+production.">MicroRNA-23 restricts cardiac valve formation by inhibiting Has2 and extracellular hyaluronic acid production.</a> Circulation Research. 109 (6), 649-657 (2011).</li><li>Katsura, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-31+is+a+positive+modulator+of+endothelial-mesenchymal+transition+and+associated+secretory+phenotype+induced+by+TGF-beta.">MicroRNA-31 is a positive modulator of endothelial-mesenchymal transition and associated secretory phenotype induced by TGF-beta.</a> Genes Cells. 21 (1), 99-116 (2016).</li><li>Suzuki, H. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+TGF-beta-mediated+endothelial-mesenchymal+transition+by+microRNA-27.">Regulation of TGF-beta-mediated endothelial-mesenchymal transition by microRNA-27.</a> Journal of Biochemistry. 161 (5), 417-420 (2017).</li><li>Camenisch, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+and+distinct+TGFbeta+ligand+requirements+during+mouse+and+avian+endocardial+cushion+morphogenesis.">Temporal and distinct TGFbeta ligand requirements during mouse and avian endocardial cushion morphogenesis.</a> Developmental Biology. 248 (1), 170-181 (2002).</li><li>Krenning, G., Moonen, J. R., van Luyn, M. J., Harmsen, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+smooth+muscle+cells+for+use+in+vascular+tissue+engineering+obtained+by+endothelial-to-mesenchymal+transdifferentiation+(EnMT)+on+collagen+matrices.">Vascular smooth muscle cells for use in vascular tissue engineering obtained by endothelial-to-mesenchymal transdifferentiation (EnMT) on collagen matrices.</a> Biomaterials. 29 (27), 3703-3711 (2008).</li><li>Medici, D., Potenta, S., Kalluri, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transforming+growth+factor-beta2+promotes+Snail-mediated+endothelial-mesenchymal+transition+through+convergence+of+Smad-dependent+and+Smad-independent+signalling.">Transforming growth factor-beta2 promotes Snail-mediated endothelial-mesenchymal transition through convergence of Smad-dependent and Smad-independent signalling.</a> Biochemical Journal. 437 (3), 515-520 (2011).</li><li>Krizbai, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial-mesenchymal+transition+of+brain+endothelial+cells:+possible+role+during+metastatic+extravasation.">Endothelial-mesenchymal transition of brain endothelial cells: possible role during metastatic extravasation.</a> PLoS One. 10 (3), e0119655 (2015).</li><li>Arciniegas, E., Sutton, A. B., Allen, T. D., Schor, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transforming+growth+factor+beta+1+promotes+the+differentiation+of+endothelial+cells+into+smooth+muscle-like+cells+in+vitro.">Transforming growth factor beta 1 promotes the differentiation of endothelial cells into smooth muscle-like cells in vitro.</a> Journal of Cell Science. 103 (Pt 2), 521-529 (1992).</li><li>Deissler, H., Deissler, H., Lang, G. K., Lang, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGFbeta+induces+transdifferentiation+of+iBREC+to+alphaSMA-expressing+cells.">TGFbeta induces transdifferentiation of iBREC to alphaSMA-expressing cells.</a> International Journal of Molecular Medicine. 18 (4), 577-582 (2006).</li><li>Paranya, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+valve+endothelial+cells+undergo+transforming+growth+factor-beta-mediated+and+non-transforming+growth+factor-beta-mediated+transdifferentiation+in+vitro.">Aortic valve endothelial cells undergo transforming growth factor-beta-mediated and non-transforming growth factor-beta-mediated transdifferentiation in vitro.</a> American Journal of Pathology. 159 (4), 1335-1343 (2001).</li><li>Maleszewska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-1beta+and+TGFbeta2+synergistically+induce+endothelial+to+mesenchymal+transition+in+an+NFkappaB-dependent+manner.">IL-1beta and TGFbeta2 synergistically induce endothelial to mesenchymal transition in an NFkappaB-dependent manner.</a> Immunobiology. 218 (4), 443-454 (2013).</li><li>Ubil, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal-endothelial+transition+contributes+to+cardiac+neovascularization.">Mesenchymal-endothelial transition contributes to cardiac neovascularization.</a> Nature. 514 (7524), 585-590 (2014).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+balance+of+aberrant+Rasal1+promoter+methylation+and+hydroxymethylation+regulates+cardiac+fibrosis.">Epigenetic balance of aberrant Rasal1 promoter methylation and hydroxymethylation regulates cardiac fibrosis.</a> Cardiovasc Research. 105 (3), 279-291 (2015).</li><li>Xiao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+Endothelial+Cells+with+Distinct+Patterns+of+TGFbeta-Driven+Endothelial-to-Mesenchymal+Transition.">Tumor Endothelial Cells with Distinct Patterns of TGFbeta-Driven Endothelial-to-Mesenchymal Transition.</a> Cancer Research. 75 (7), 1244-1254 (2015).</li></ol>

وأفيد أن المنشط علاج TGF-β ورأس ح 24 الناجم عن اندمت في خلايا مرض التصلب العصبي المتعدد-1، في حين فشل TGF-β وحدها لحمل اندمت في هذه الفترة القصيرة21. دأبت، لاحظنا أن TGF-β إلى حد كبير التي يسببها اندمت بعد العلاج الطويل (ح 48 – 72) في مرض التصلب العصبي المتعدد-1 خلايا20. اندمت ل?...

الانتقال غشائي الوسيطة (اندمت) هو العملية التي يخضع خلية غشائي متمايزة مجموعة متنوعة من التغيرات الجزيئية، الناتج في خلية مثل تنتجها الخلايا الليفية الوسيطة1. ووصفت اندمت في البداية تحول خلايا غشائي أثناء التطوير من قلب2،3. في قلب التنمية المبكرة، يتألف أنبوب القلب البطانة داخلية وعضلة القلب خارجي. يتم فصل هذه الطبقتين طبقة من المصفوفة خارج الخلية تسمى هلام القلب. الخلايا الجنينية للوفلر، التي تكتسب علامات خلية بطانية، العبور إلى الخلايا الوسيطة وتغزو هلام القلب الكامنة، وتشجيع تشكيل الوسائد القلب، توفر الأساس للصمامات بي وحاجز والصمامات سيميلونار. وعلاوة على ذلك، قد اقترح اندمت لتكون مصادر بيريسيتيس وخلايا العضلات الملساء والأوعية الدموية في نظم الأوعية الدموية الجنينية الأخرى بما في ذلك الأوعية التاجية والشريان الاورطي البطني والشريان الرئوي4،،من56. وبالإضافة إلى ذلك، هو تورط اندمت في الأوعية الفسيولوجية التي تنتشر في7.
تتراكم الأدلة قد اقترح أن اندمت تشارك أيضا في العديد من أمراض القلب والأوعية الدموية وغيرها من الأمراض81،. وتشمل الشروط المرتبطة اندمت تكلس الأوعية الدموية، تصلب الشرايين، وارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي، وتشوه الكهفي، تليف الجهاز، يعيد البناء الابتزاز المنوال، الخلل في allograft في زرع الكلي والسرطان8، 9،10،11،،من1213،،من1415،16،17، 18-وصف تقرير صدر مؤخرا أن عدة علامات اندمت الجزيئية يمكن أن تكون أداة للتنبؤ التشخيص والتكهن بالخلل الوظيفي الكلوي الاختلاس في زرع الكلي17. تعديل مسارات الإشارات الخلوية المتصلة اندمت قد ثبت أن تحسين ظروف المرض عدة بما في ذلك تليف القلب ويعيد البناء الابتزاز المنوال في الحيوان النماذج8،15. ولذلك فهم الآليات الكامنة وراء اندمت هامة لتطوير استراتيجيات تشخيصية وعلاجية تستهدف اندمت.
اندمت تتسم بفقدان تقاطعات خلية خلية، والزيادة في إمكانيات الهجرة، downregulation الجينات غشائي محددة مثل هاء-كادهيرين، و upregulation من الجينات الوسيطة بما في ذلك العضلات الملساء α أكتين (α-SMA). وباﻹضافة إلى ذلك، اندمت والانتقالية الظهارية الوسيطة (EMT)، عملية مماثلة تقوم بتحويل الخلايا الظهارية للخلايا الوسيطة، المرتبطة بالإنتاج المتغيرة لمختلف عناصر المصفوفة خارج الخلية، التي قد تسهم في تطوير أنسجة التليف8،19.
في الآونة الأخيرة، عدة دراسات في المختبر من اندمت قد شرحت تفاصيل الآليات الجزيئية اندمت15،20. اندمت هو الناجمة عن مسارات الإشارات المختلفة بما في ذلك تحويل عامل النمو (TGF)-β، Wnt، وتحقيقها1. فيما بينها، TGF-β يلعب دور محوري في استحثاث EMT واندمت. في اندمت، لفترات طويلة التعرض لنتائج TGF-β في اندمت في خلايا بطانية شتى، في حين يبدو أن التعرض القصير غير كافية21. ونحن هنا وصف بروتوكولا مباشرة لتحريض اندمت، في أي ميل سفين 1 (MS-1) الخضوع للماوس البنكرياس خلايا بطانية microvascular اندمت في المختبر بعد التعرض لفترة طويلة إلى TGF-β20. في هذا النموذج، يمكن إجراء تحليلات متعددة للمتلقين للمعلومات للتحقيق في ملامح مميزة اندمت، بما في ذلك التغييرات الشكلية، downregulation علامات بطانية، upregulation من علامات الوسيطة والجينات التحريضية، سيتوسكيليتال ترتيبات جديدة، وانكماش جل الكولاجين.
ميكرورناس (ميرناس) هي ~ 22 nt الكشف التنظيمية الصغيرة أن المباشرة القمع بوسترانسكريبشونال مختلف مرناً الأهداف22،23. من خلال الاعتراف بالهدف تسلسل بوساطة البذور، ميرناس قمع مئات جينات المستهدفة وتعدل الوظائف الخلوية المتنوعة مثل تمايز الخلايا وانتشارها، وحركية. وهذا هو الحال لتنظيم EMT واندمت أيضا، وأبلغ ميرناس عدة المنظمين من24،EMT واندمت25. يمكن الجمع بين نموذج اندمت قدم في هذا الاستعراض بسهولة مع ميرنا تعديل إجراءات لاختبار أدوار ميرناس في اندمت. هذا الاستعراض يلخص لدينا إجراءات تجريبية للتحقيق اندمت TGF-β-المستحث في خلايا مرض التصلب العصبي المتعدد-1 ويشمل أيضا مقارنة شروط الاستقراء اندمت طريق TGF-β في خلايا بطانية أخرى.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1435px;" width="1434">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:361px;">MS-1 cells</td>
			<td style="width:289px;">American Type Culture Collection</td>
			<td style="width:593px;">CRL-2279</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">MEM-alpha</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:593px;">32571036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">TGF-beta2</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td style="width:593px;">302-B2-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">4 well Lab-Tek II Chamber Slide</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:593px;">154526</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Y-27632&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:593px;">Y0503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Blocking One</td>
			<td style="width:289px;">nacalai tesque</td>
			<td style="width:593px;">03953-95</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">phalloidin-tetramethylrhodamine B isothiocyanate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">TOTO-3 iodide</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:593px;">T3604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">VE cadherin monoclonal antibody (BV13)</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>14-1441-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">alpha-SMA Cy3 monoclonal antibody (1A4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C6198</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Alexa Fluor 488 goat anti-mouse IgG (H+L)</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:593px;">A-11001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Cover slip</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>174934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Collagen solution</td>
			<td style="width:289px;">Nitta gelatin Inc.</td>
			<td>Cellmatrix I-P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:361px;">Collagen dilution buffer</td>
			<td style="width:289px;">Nitta gelatin Inc.</td>
			<td>Cellmatrix I-P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">LNA miRNA inhibitor</td>
			<td>EXIQON&#160;</td>
			<td colspan="2">miRCURY LNAmicroRNA Power Inhibitor (Negative Control B and target miRNA)</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">synthetic miRNA duplex</td>
			<td>Qiagen&#160;</td>
			<td>miScript miRNA Mimic</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lipofectamine RNAiMAX</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:593px;">13778030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lipofectamine 2000</td>
			<td style="width:289px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:593px;">11668027</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

molecular analysis of endothelial-mesenchymal transition induced by transforming growth factor-&#946; signaling

اللدونة المظهرية من خلايا بطانية يكمن وراء تطوير نظام القلب والأوعية الدموية، وأمراض القلب والأوعية الدموية، ومختلف الشروط المرتبطة بالتليف الجهاز. في ظل هذه الظروف، يكتسب خلايا بطانية المتباينة تعمل الوسيطة مثل. هذه العملية يسمى الانتقال غشائي الوسيطة (اندمت) ويتسم ب downregulation علامات بطانية، upregulation من علامات الوسيطة، والتغييرات الشكلية. اندمت هو الناجمة عن مسارات إشارات عدة، بما في ذلك تحويل عامل النمو (TGF)-β، Wnt، والدرجة، وينظمها الجزيئية آليات مماثلة لتلك التي الانتقالية الظهارية الوسيطة (EMT) هام ل gastrulation، تليف الأنسجة، و سرطان خبيث. فهم آليات اندمت مهم لوضع نهج التشخيصية والعلاجية التي تستهدف اندمت. تحريض قوي اندمت في المختبر مفيد لتميز التوقيعات تعبير الجينات المشتركة، وتحديد الآليات الجزيئية دروجابل وشاشة المغيرون اندمت. وهنا يصف لنا أسلوب في المختبر لتحريض اندمت. خلايا بطانية microvascular البنكرياس الماوس MS-1 الخضوع اندمت بعد التعرض لفترة طويلة إلى TGF-β وإظهار upregulation من علامات الوسيطة والتغييرات الشكلية وكذلك تحريض السيتوكينات والمستقطبات التهابات متعددة. أساليب لتحليل ميكرورنا (ميرنا) التحوير مدرجة أيضا. هذه الأساليب توفير منبر للتحقيق في الآليات الكامنة وراء اندمت والمساهمة من ميرناس إلى اندمت.

TGF-β محفز قوي اندمت في مختلف خلايا بطانية. بعد العلاج 24 ساعة مع TGF-β في خلايا مرض التصلب العصبي المتعدد-1، يظهر تلطيخ أكتين و إعادة تنظيم أكتين إجهاد الألياف (الشكل 1A)20. المعالجة المسبقة مع مثبط روك Y-27632 يحول دون تنظيم دورات تعريفية ل إعادة تنظيم ?...

Watch this Scientific Journal Video about Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-ÃŽÂ² Signaling at JoVE.com

Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² Signaling

ويرد وصف بروتوكول لتحريض في المختبر الانتقال غشائي الوسيطة (اندمت)، ومفيدة للتحقيق في مسارات الإشارات الخلوية المشتركة في اندمت،. في هذا النموذج التجريبي، هو اندمت الناجمة عن المعاملة مع TGF-β في خلايا بطانية 1 مللي ثانية.

التحليل الجزيئي غشائي الوسيطة الانتقالية الناجمة عن تحويل الإشارات عامل النمو-β

Phenotypic plasticity of endothelial cells underlies cardiovascular system development, cardiovascular diseases, and various conditions associated with ...

Research

JoVE Journal

Biology

Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-&#946; Signaling

Identification of Growth Inhibition Phenotypes Induced by Expression of Bacterial Type III Effectors in Yeast

تحديد الظواهر المستحثة بواسطة تثبيط النمو البكتيري نوع من التعبير المستجيبات الثالث في الخميرة

Many Gram-negative pathogenic bacteria use a type III secretion system to translocate a suite of effector proteins into the cytosol of host cells. Within ...

Video Bioinformatics Analysis of Human Embryonic Stem Cell Colony Growth

الفيديو المعلوماتية الحيوية تحليل النمو البشري الخلية الجذعية الجنينية كولوني

Because video data are complex and are comprised of many images, mining information from video material is difficult to do without the aid of computer ...

Herbivore-induced Blueberry Volatiles and Intra-plant Signaling

عاشب متطايرة بفعل العنبية واشارة الى داخل المصنع

Herbivore-induced plant volatiles (HIPVs) are commonly emitted from plants after herbivore attack1,2.  These HIPVs are mainly regulated by the defensive ...

In Vitro Analysis of PDZ-dependent CFTR Macromolecular Signaling Complexes

In Vitro Analysis of PDZ-dependent CFTR Macromolecular Signaling Complexes

في تحليل المختبر من PDZ التي تعتمد على المجمعات ضخم الجزيئات CFTR اشارة

Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR), a chloride channel located primarily at the apical membranes of epithelial cells, plays a ...

Mechanical Stimulation-induced Calcium Wave Propagation in Cell Monolayers: The Example of Bovine Corneal Endothelial Cells

تحفيز الميكانيكية التي يسببها الكالسيوم انتشار الموجات في الخلية monolayers: مثال من الأبقار الخلايا البطانية القرنية

Intercellular communication is essential for the coordination of physiological processes between cells in a variety of organs and tissues, including the ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

الاستقراء وتحليل الظهارية الوسيطة الانتقالية ل

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Metabolic Labeling and Membrane Fractionation for Comparative Proteomic Analysis of Arabidopsis thaliana Suspension Cell Cultures

Metabolic Labeling and Membrane Fractionation for Comparative Proteomic Analysis of Arabidopsis thaliana Suspension Cell Cultures

الأيضية وصفها وغشاء التقطير للالمقارن تحليل البروتين من<em&gt; نبات الأرابيدوبسيس thaliana</em&gt; الثقافات تعليق خلية

Plasma membrane microdomains are features based on the physical properties of the lipid and sterol environment and have particular roles in signaling ...

Tracking Drug-induced Changes in Receptor Post-internalization Trafficking by Colocalizational Analysis

تتبع التغييرات الناجمة عن المخدرات في مستقبلات بعد استيعاب الاتجار عن طريق تحليل Colocalizational

The intracellular trafficking of receptors is a collection of complex and highly controlled processes. Receptor trafficking modulates signaling and ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

برازي تحليل جلايكورتيكود: رصد الغدة الكظرية غير الغازية في الخيليات

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Identification of Intracellular Signaling Events Induced in Viable Cells by Interaction with Neighboring Cells Undergoing Apoptotic Cell Death

تحديد بين الخلايا اشارة الأحداث المستحثة في خلايا قابلة للحياة من خلال التفاعل مع المجاورة الخلايا التي تمر أفكارك موت الخلية

Cells dying by apoptosis, also referred to as regulated cell death, acquire multiple new activities that enable them to influence the function of adjacent ...