Name: impact of intracardiac neurons on cardiac electrophysiology and arrhythmogenesis in an ex vivo langendorff system
Uploaded: 2018-05-22T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System at JoVE.com

लेखकों को अपने उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए Hartwig Wieboldt शुक्रिया अदा करना चाहूंगा, और उ्के माइक्रोस्कोपी इमेजिंग सुविधा (ि ऊम्फ) विश्वविद्यालय के चिकित्सा केंद्र हैंबर्ग-माइक्रोस्कोप और समर्थन प्रदान करने के लिए Eppendorf । इस अनुसंधान bythe Förderverein डेस Universitären Herzzentrums हैंबर्ग e.V. और DZHK द्वारा वित्त पोषित किया गया (हृदय अनुसंधान के लिए जर्मन केंद्र) [FKZ 81Z4710141] ।

सभी जानवरों को शामिल प्रक्रियाओं हैंबर्ग के राज्य के स्थानीय अधिकारियों द्वारा अनुमोदित किया गया, हैंबर्ग पशु देखभाल और उपयोग समितियों के विश्वविद्यालय ।
1. Langendorff तंत्र की तैयारी
न...

<ol>
	<li>Bell, R. M., Mocanu, M. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+heart+perfusion:+the+Langendorff+technique+of+isolated+heart+perfusion.">Retrograde heart perfusion: the Langendorff technique of isolated heart perfusion.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 50 (6), 940-950 (2011).</li><li>Sutherland, F. J., Hearse, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+isolated+blood+and+perfusion+fluid+perfused+heart.">The isolated blood and perfusion fluid perfused heart.</a> Pharmacological Research. 41 (6), 613-627 (2000).</li><li>Hearse, D. J., Sutherland, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+for+the+study+of+cardiovascular+function+and+disease.">Experimental models for the study of cardiovascular function and disease.</a> Pharmacological Research. 41 (6), 597-603 (2000).</li><li>Valentin, J. P., Hoffmann, P., De Clerck, F., Hammond, T. G., Hondeghem, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+the+predictive+value+of+the+Langendorff+heart+model+(Screenit+system)+in+assessing+the+proarrhythmic+potential+of+drugs.">Review of the predictive value of the Langendorff heart model (Screenit system) in assessing the proarrhythmic potential of drugs.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 49 (3), 171-181 (2004).</li><li>Skrzypiec-Spring, M., Grotthus, B., Szelag, A., Schulz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolated+heart+perfusion+according+to+Langendorff-still+viable+in+the+new+millennium.">Isolated heart perfusion according to Langendorff-still viable in the new millennium.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 55 (2), 113-126 (2007).</li><li>Langendorff, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+the+living+mammalian+heart.">Investigation of the living mammalian heart.</a> Pfl&#252;gers Archiv. 61, 291-332 (1895).</li><li>Matsumoto-Ida, M., Akao, M., Takeda, T., Kato, M., Kita, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+2-photon+imaging+of+mitochondrial+function+in+perfused+rat+hearts+subjected+to+ischemia/reperfusion.">Real-time 2-photon imaging of mitochondrial function in perfused rat hearts subjected to ischemia/reperfusion.</a> Circulation. 114 (14), 1497-1503 (2006).</li><li>Rassaf, T., Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., Shiva, S., Heusch, G., Kelm, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+nitrite+contributes+to+cardioprotection+by+remote+ischemic+preconditioning.">Circulating nitrite contributes to cardioprotection by remote ischemic preconditioning.</a> Circulation Research. 114 (10), 1601-1610 (2014).</li><li>Schechter, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+isolated+working+heart+system+for+large+animal+models.">An isolated working heart system for large animal models.</a> Journal of Visualized Experiments. 88 (88), 51671 (2014).</li><li>Stockigt, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+beta-adrenoceptor+knockout+slows+conduction+and+reduces+inducible+arrhythmias+in+the+mouse+heart.">Total beta-adrenoceptor knockout slows conduction and reduces inducible arrhythmias in the mouse heart.</a> PLoS One. 7 (11), e49203 (2012).</li><li>Berul, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+phenotyping+in+genetically+engineered+mice.">Electrophysiological phenotyping in genetically engineered mice.</a> Physiological Genomics. 13 (3), 207-216 (2003).</li><li>Curtis, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Lambeth+Conventions+(II):+guidelines+for+the+study+of+animal+and+human+ventricular+and+supraventricular+arrhythmias.">The Lambeth Conventions (II): guidelines for the study of animal and human ventricular and supraventricular arrhythmias.</a> Pharmacology &amp; Therapeutics. 139 (2), 213-248 (2013).</li><li>Schrickel, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+heterogeneity+of+myocardial+conduction+and+severe+cardiac+electrical+instability+in+annexin+A7-deficient+mice.">Enhanced heterogeneity of myocardial conduction and severe cardiac electrical instability in annexin A7-deficient mice.</a> Cardiovascular Research. 76 (2), 257-268 (2007).</li><li>Rudolph, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloperoxidase+acts+as+a+profibrotic+mediator+of+atrial+fibrillation.">Myeloperoxidase acts as a profibrotic mediator of atrial fibrillation.</a> Nature Medicine. 16 (4), 470-474 (2010).</li><li>Jungen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+cardiac+cholinergic+neurons+enhances+susceptibility+to+ventricular+arrhythmias.">Disruption of cardiac cholinergic neurons enhances susceptibility to ventricular arrhythmias.</a> Nature Communications. 8, 14155 (2017).</li><li>Calebiro, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+cAMP-signals+triggered+by+internalized+G-protein-coupled+receptors.">Persistent cAMP-signals triggered by internalized G-protein-coupled receptors.</a> PLoS Biology. 7 (8), e1000172 (2009).</li><li>Sprenger, J. U., Perera, R. K., G&#246;tz, K. R., Nikolaev, V. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FRET+microscopy+for+real-time+monitoring+of+signaling+events+in+live+cells+using+unimolecular+biosensors.">FRET microscopy for real-time monitoring of signaling events in live cells using unimolecular biosensors.</a> Journal of Visualized Experiments. (66), e4081 (2012).</li><li>Alanentalo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tomographic+molecular+imaging+and+3D+quantification+within+adult+mouse+organs.">Tomographic molecular imaging and 3D quantification within adult mouse organs.</a> Nature Methods. 4 (1), 31-33 (2007).</li><li>Whittington, N. C., Wray, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+red+blood+cell+autofluorescence+for+immunocytochemistry+on+fixed+embryonic+mouse+tissue.">Suppression of red blood cell autofluorescence for immunocytochemistry on fixed embryonic mouse tissue.</a> Current Protocols in Neuroscience. 81, 2.28.1-2.28.12 (2017).</li><li>Fukuda, K., Kanazawa, H., Aizawa, Y., Ardell, J. L., Shivkumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+innervation+and+sudden+cardiac+death.">Cardiac innervation and sudden cardiac death.</a> Circulation Research. 116 (12), 2005-2019 (2015).</li><li>Wengrowski, A. M., Wang, X., Tapa, S., Posnack, N. G., Mendelowitz, D., Kay, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optogenetic+release+of+norepinephrine+from+cardiac+sympathetic+neurons+alters+mechanical+and+electrical+function.">Optogenetic release of norepinephrine from cardiac sympathetic neurons alters mechanical and electrical function.</a> Cardiovascular Research. 105 (2), 143-150 (2015).</li><li>Rivinius, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+cardiac+chronotropic+function+in+patients+after+heart+transplantation:+effects+of+ivabradine+and+metoprolol+succinate+on+resting+heart+rate+in+the+denervated+heart.">Control of cardiac chronotropic function in patients after heart transplantation: effects of ivabradine and metoprolol succinate on resting heart rate in the denervated heart.</a> Clinical Research in Cardiology. , (2017).</li><li>Ajijola, O. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Augmentation+of+cardiac+sympathetic+tone+by+percutaneous+low-level+stellate+ganglion+stimulation+in+humans:+a+feasibility+study.">Augmentation of cardiac sympathetic tone by percutaneous low-level stellate ganglion stimulation in humans: a feasibility study.</a> Physiological Reports. 3 (3), e12328 (2015).</li></ol>

इस पांडुलिपि में, प्रसिद्ध Langendorff पूर्व vivo हार्ट छिड़काव प्रणाली हृदय इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और arrhythmogenesis पर intracardiac न्यूरॉन्स के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक उपकरण के रूप में प्रस्तुत किया जाता है विभिन्?...

Langendorff पूर्व vivo हार्ट छिड़काव प्रणाली शारीरिक, जैव रासायनिक, रूपात्मक, और केंद्रीय denervated दिल1में औषधीय अध्ययन के एक व्यापक स्पेक्ट्रम प्रदर्शन के लिए एक प्रासंगिक उपकरण होना जारी है,2 ,3,4,5 देर से 19वीं सदी6में अपने आविष्कारकेबाद से । तारीख करने के लिए, इस प्रणाली को अभी भी व्यापक रूप से विभिंन विषयों के लिए प्रयोग किया जाता है (उदा, ischemia reperfusion) या हृदय औषधीय प्रभाव का अध्ययन करने के लिए7,8, और हृदय अनुसंधान में एक बुनियादी उपकरण है । कई फायदों से इस विधि के परिणाम की दीर्घायु (उदा, माप केंद्रीय तंत्रिका तंत्र या अन्य अंगों, प्रणालीगत संचलन, या घूम हार्मोन के प्रभाव के बिना प्रदर्शन कर रहे हैं) । यदि आवश्यक हो, फार्मास्यूटिकल्स छिड़काव बफर करने के लिए एक नियंत्रित तरीके से जोड़ा जा सकता है या सीधे विशिष्ट संरचनाओं के लिए लागू किया । प्रयोग reproducible हैं, और एक अपेक्षाकृत उच्च संख्या में प्रयोगों के समय की एक छोटी अवधि में किया जा सकता है । (भाग में) सेटअप के खुले प्रकृति के तापमान विनियमन मुश्किल कर सकते है और ध्यान में रखा जाना चाहिए । हालांकि Langendorff प्रणाली भी बड़ी प्रजातियों में प्रयोग किया जाता है9, छोटे जानवरों को मुख्य रूप से प्रयोगात्मक सेटअप कम जटिल है के रूप में इस्तेमाल किया जाता है, और एक बड़ा जैविक परिवर्तनशीलता (उदा., ट्रांसजेनिक माउस मॉडल) इस्तेमाल किया जा सकता है ।
इस प्रोटोकॉल के प्रायोगिक सेटअप में, बुनियादी electrophysiological मानकों पर intracardiac स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के प्रभाव, वेंट्रिकुलर arrhythmogenesis, epicardial आचरण, और चक्रीय adenosine मोनोफोस्फेट (शिविर) गतिशीलता है मूल्यांकन. intracardiac गैंग्लिया की एक बड़ी संख्या है, जो मुख्य रूप से अलिंद वसा पैड में स्थित है और अब अच्छी तरह से केंद्रीय तंत्रिका नियंत्रण से स्वतंत्र हृदय इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी नियंत्रण के लिए जाना जाता है, या तो बरकरार छोड़ दिया या मैंयुअल रूप से सावधान यांत्रिक के साथ हटा रहे है विच्छेदन. स्वायत्त तंत्रिका तंत्र का एक औषधीय मॉडुलन या तो दुनिया भर में छिड़काव बफर या स्थानीय स्तर पर अलिंद गैंग्लिया के लक्षित मॉडुलन द्वारा फार्मास्यूटिकल्स जोड़कर किया जाता है । प्रयोगों के बाद, दिल एक immunohistological आकलन के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है के रूप में सभी रक्त कोशिकाओं को निरंतर छिड़काव के कारण हटा दिया गया है, जो धुंधला की गुणवत्ता में वृद्धि कर सकते हैं ।
वर्णित तकनीकों का समग्र लक्ष्य है माउस हृदय में कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और arrhythmogenesis पर स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के प्रभाव के संबंध में विस्तृत अध्ययन के लिए उपन्यास परिप्रेक्ष्य प्रस्तुत करना. इस तकनीक का उपयोग करने के लिए एक कारण यह है कि यह अध्ययन और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के प्रभाव के बिना स्वायत्त तंत्रिका तंत्र में परिवर्तन करने के लिए संभव है । एक प्रमुख लाभ औषधीय प्रयोगों, जिसमें संभावित समर्थक या पुराने और नए एजेंटों के antiarrhythmic गुण का परीक्षण किया जा सकता है की आसान रोजगार है । इसके अलावा, विभिंन हृदय रोगों के ट्रांसजेनिक और पीटा माउस मॉडलों के लिए अंतर्निहित ताल विकारों, दिल की विफलता, या चयापचय रोगों तंत्र की जांच करने के लिए उपलब्ध हैं । इस दृष्टिकोण कैसे अलिंद स्तर पर स्वायत्त तंत्रिका तंत्र वेंट्रिकुलर कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और ताल विकारों के प्रेरण प्रभाव कर सकते हैं की हमारी समझ में वृद्धि हुई है ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S3014</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydrogencarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>401676</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5405</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5655</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate heptahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M1880</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C7902</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5767</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvate bioXtra</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8574</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbogen (95% O2 / 5% CO2)</td>
			<td colspan="2">SOL-Group, TMG Technische und Medizinische Gas GmbH, Krefeld, Gersthofen, Germany</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile filter steritop-GP 0.22</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>SCGPT05RE</td>
			<td>Modified Krebs-Henleit solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine sulfate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A0257</td>
			<td>Neuromodulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexamethonium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H2138</td>
			<td>Neuromodulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotine free base 98-100%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N3876</td>
			<td>Neuromodulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin solution neutral buffered 10%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT501128</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris(hydroxymethyl)aminomethane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>252859</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>34860</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution 30% (w/w) in H2O</td>
			<td>Merck, KGA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>H1009</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Merck, KGA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>D8418</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline tablets</td>
			<td>Gibco / Invitrogen</td>
			<td>18912-014</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton-x-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Albumin bovine fraction V</td>
			<td>Biomol, Hamburg, Germany</td>
			<td>11924.03</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chicken anti neurofilament</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>AB5539</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti tyrosine hydroxylase</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>AB152</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti choline acetyltransferase</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>AP144P</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey &#945; rabbit IgG Alexa 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A21206</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey &#945; goat IgG Alexa 568</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A11057</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey &#945; chicken IgY Alexa 647</td>
			<td>Merck, KGA, Darmstadt, Germany</td>
			<td>AP194SA6</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin-conjugated donkey &#945; rabbit igG</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>AP182B</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin-conjugated donkey &#945; goat igG</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>AP192P</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin-conjugated goat &#945; chicken igY</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>BAD010</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectashield mounting medium</td>
			<td>Vector laboratories, Burlingame, CA, USA</td>
			<td>H-1000</td>
			<td>Immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectastain ABC kit</td>
			<td>Vector laboratories, Burlingame, CA, USA</td>
			<td>PK-4000</td>
			<td>Immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steady DAB/Plus</td>
			<td>Abcam plc, Cambridge, UK</td>
			<td>ab103723</td>
			<td>Whole mount staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HistoClear</td>
			<td>DiaTec, Bamberg, Germany</td>
			<td>HS2002</td>
			<td>Immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BisBenzimide H33342 trihydrochloride (Hoechst)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>B2261</td>
			<td>Immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectashield HardSet mounting medium</td>
			<td>Vector laboratories, Burlingame, CA, USA</td>
			<td>VEC-H-1400</td>
			<td>Immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion system</td>
			<td>HUGO SACHS ELEKTRONIK - HARVARD APPARATUS GmbH, March-Hugstetten, Germany</td>
			<td>&#160;73-4343</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition system and corresponding software for catheter and physiological parameter</td>
			<td>Powerlab 8/30 &#38; Labchart, ADInstruments, Dunedin, New Zealand</td>
			<td>PL3508 PowerLab 8/35</td>
			<td>Langendorff setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octapolar catheter</td>
			<td>CIB&#8217;ER Mouse, NuMed Inc., Hopkinton, NY, USA</td>
			<td>custom</td>
			<td>Langendorff setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulus generator</td>
			<td>STG4002, Multi Channel Systems, Reutlingen, Germany</td>
			<td>STG4002-160&#181;A</td>
			<td>Stimulation setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulation software</td>
			<td>Multi Channel Systems, Reutlingen, Germany</td>
			<td>MC_Stimulus II</td>
			<td>Stimulation setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition system and corresponding software for epicardial electrograms</td>
			<td>ME128-FAI-MPA-System, Multi Channel Systems, Reutlingen, Germany</td>
			<td>USB-ME128-System</td>
			<td>MEA setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-electrode array</td>
			<td>MEA, EcoFlexMEA36, Multi Channel Systems, Reutlingen, Germany</td>
			<td>EcoFlexMEA36</td>
			<td>MEA setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-electrode array recording software</td>
			<td>Multi Channel Systems, Reutlingen, Germany</td>
			<td>MC_Rack</td>
			<td>MEA setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>15003-08</td>
			<td>Heart Preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Strabismus Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>14575-09</td>
			<td>Heart Preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>14110-15</td>
			<td>Heart Preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont SS Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>11203-25</td>
			<td>Heart Preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>London Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>11080-02</td>
			<td>Heart Preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Narrow Pattern Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>11003-13</td>
			<td>Heart Preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Wrap</td>
			<td>Parafilm M, Bemis NA, based in Neenah, WI, United States</td>
			<td></td>
			<td>Consumable Materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica M165FC; Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Germany</td>
			<td></td>
			<td>FRET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED</td>
			<td>CoolLED, Andover, UK</td>
			<td>pE-100</td>
			<td>FRET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DualView</td>
			<td>Photometrics, Tucson, AZ, USA</td>
			<td>DV2-SYS</td>
			<td>FRET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DualView filter set</td>
			<td>Photometrics, Tucson, AZ, USA</td>
			<td>05-EM</td>
			<td>FRET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>optiMOS scientific CMOS camera</td>
			<td>Qimaging, Surrey, BC, Canada</td>
			<td>01-OPTIMOS-R-M-16-C</td>
			<td>FRET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging software &#160;</td>
			<td>Micro-Manager; Vale Lab, University of California San Francisco, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>FRET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analysis Software</td>
			<td>Image J software; Public Domain, NIH, USA</td>
			<td></td>
			<td>FRET</td>
		</tr>
	</tbody>
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impact of intracardiac neurons on cardiac electrophysiology and arrhythmogenesis in an ex vivo langendorff system

देर से 19वीं सदी में अपने आविष्कार के बाद से, Langendorff पूर्व vivo हार्ट छिड़काव प्रणाली शारीरिक, जैव रासायनिक, रूपात्मक, और औषधीय मापदंडों का एक व्यापक स्पेक्ट्रम का अध्ययन करने के लिए एक प्रासंगिक उपकरण के लिए जारी है मध्ये denervated दिल. यहां, हम intracardiac स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के मॉडुलन और बुनियादी इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी, arrhythmogenesis, और चक्रीय adenosine मोनोफोस्फेट (शिविर) गतिशीलता पर अपने प्रभाव के आकलन के लिए एक सेटअप का वर्णन । intracardiac स्वायत्त तंत्रिका तंत्र अलिंद वसा पैड के यांत्रिक विच्छेदन द्वारा संग्राहक है-जिसमें murine गैंग्लिया मुख्य रूप से स्थित हैं-या वैश्विक के उपयोग के रूप में के रूप में अच्छी तरह से लक्षित औषधीय हस्तक्षेप । एक octapolar electrophysiological कैथेटर सही atrium और सही निलय में पेश किया गया है, और उच्च संकल्प मानचित्रण के लिए epicardial-रखा मल्टी इलेक्ट्रोड सरणियों (मेे) कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और arrhythmogenesis निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है । Förster अनुनाद ऊर्जा स्थानांतरण (झल्लाहट) इमेजिंग विभिन्न कार्डियक क्षेत्रों में शिविर के स्तर के वास्तविक समय की निगरानी के लिए किया जाता है । Neuromorphology एंटीबॉडी के माध्यम से अध्ययन किया है-पूरे दिल के धुंधला आधारित ंयूरॉंस मार्कर का उपयोग करने की पहचान और प्रदर्शन अध्ययन में intracardiac स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के विशिष्ट लक्ष्यों के मॉडुलन गाइड । पूर्व vivo Langendorff सेटअप कम समय में reproducible प्रयोगों की एक उच्च संख्या के लिए अनुमति देता है । फिर भी, सेटअप के आंशिक रूप से खुला प्रकृति (जैसे, मेे माप के दौरान) लगातार तापमान नियंत्रण मुश्किल बनाता है और एक ंयूनतम करने के लिए रखा जाना चाहिए । यह वर्णित विधि का विश्लेषण करने के लिए और विकेन्द्रीकृत दिलों में intracardiac स्वायत्त तंत्रिका तंत्र को मिलाना संभव बनाता है.

चित्रा 1 2 बहु इलेक्ट्रोड सरणियों (रहत) सहित Langendorff सेटअप की एक छवि से पता चलता है. प्रयोग करने से पहले, intracardiac कैथेटर प्रवेशनी के करीब तैनात है सही atrium में एक त्वरित और आसान प्रविष्टि की ?...

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Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

यहां, हम intracardiac स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के मॉडुलन और बुनियादी इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी, arrhythmogenesis, और शिविर गतिशीलता पर एक पूर्व vivo Langendorff सेटअप का उपयोग कर अपने प्रभाव के आकलन के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं ।

एक पूर्व Vivo Langendorff प्रणाली में कार्डियक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और Arrhythmogenesis पर Intracardiac न्यूरॉन्स का प्रभाव

Since its invention in the late 19th century, the Langendorff ex vivo heart perfusion system continues to be a relevant tool for studying a broad spectrum ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

An Investigation of the Effects of Sports-related Concussion in Youth Using Functional Magnetic Resonance Imaging and the Head Impact Telemetry System

कार्यात्मक चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग और प्रमुख प्रभाव टेलीमेटरी प्रणाली का प्रयोग युवा में खेल से संबंधित संघट्टन के प्रभाव की एक जांच

One of the most commonly reported injuries in children who participate in sports is concussion or mild traumatic brain injury (mTBI)1. Children and youth ...

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कार्डिएक इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी प्रक्रियाओं में सटीक, वास्तविक समय कैथेटर पोजिशनिंग और एबलेशन के लिए रिमोट चुंबकीय नेविगेशन

New remote navigation systems have been developed to improve current limitations of conventional manually guided catheter ablation in complex cardiac ...

Direct Pressure Monitoring Accurately Predicts Pulmonary Vein Occlusion During Cryoballoon Ablation

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Cryoballoon  ablation (CBA) is an established therapy for atrial fibrillation (AF).  Pulmonary vein (PV) occlusion is essential for achieving antral ...

A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice

चूहे में व्यायाम क्षमता और कार्डिएक अनुकूलन पर रासायनिक प्रेरित डिम्बग्रंथि विफलता के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक विधि

The risk of cardiovascular disease (CVD) increases in post-menopausal women, yet, the role of exercise, as a preventative measure for CVD risk in ...

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एक<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; मॉडल मानव स्तन में हार्मोन लड़ाई अध्ययन करने के लिए

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

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Breast Milk Enhances Growth of Enteroids: An Ex Vivo Model of Cell Proliferation

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Human small intestinal enteroids are derived from the crypts and when grown in a stem cell niche contain all of the epithelial cell types. The ability to ...

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An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

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Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...