Name: a protocol to acquire the degenerative tenocyte from humans
Uploaded: 2018-06-09T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Protocol to Acquire the Degenerative Tenocyte from Humans at JoVE.com

이 연구는 한국 건강 기술 R & D 프로젝트 통해는 한국 보건 산업 개발 연구소 (진흥원), 사역의 건강 및 복지, 한국에 의해 투자 되었다는에서 교부 금에 의해 지원 되었다 (허가 번호: HI16C1559).

프로토콜은 헬싱키의 선언에 따라 실시 하 고 프로토콜 차 분당 병원 기관 검토 위원회에 의해 승인 되었다.
1. 퇴행 성 힘 줄 조직 수확은 환자에서
<ol><li>의료 기록을 신체 검사 결과 사용 하 여 측면 염증 진단: 측면 뼈; 가까이 단 근원 부드러움 손목 관절의 저항된 확장에 의해 갖는 고통.</li>
	<li>다음 포함 기준을 사용 하 여: 18 세 이상; 최소 6 개월;에 대 한 측면 염증의 ?...

<ol>
	<li>Ackermann, P. W., Renstrom, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tendinopathy+in+sport.">Tendinopathy in sport.</a> Sports Health. 4 (3), 193-201 (2012).</li><li>Maffulli, N., Wong, J., Almekinders, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Types+and+epidemiology+of+tendinopathy.">Types and epidemiology of tendinopathy.</a> Clinical Sports Medicine. 22 (4), 675-692 (2003).</li><li>Lui, P. P., Chan, L. S., Fu, S. C., Chan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+sensory+neuropeptides+in+tendon+is+associated+with+failed+healing+and+activity-related+tendon+pain+in+collagenase-induced+tendon+injury.">Expression of sensory neuropeptides in tendon is associated with failed healing and activity-related tendon pain in collagenase-induced tendon injury.</a> American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 757-764 (2010).</li><li>Han, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+corticosteroid+on+the+expressions+of+neuropeptide+and+cytokine+mRNA+and+on+tenocyte+viability+in+lateral+epicondylitis.">Effects of corticosteroid on the expressions of neuropeptide and cytokine mRNA and on tenocyte viability in lateral epicondylitis.</a> Journal of Inflammation (London). 9 (1), 40 (2012).</li><li>Uchio, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+neuropeptides+and+cytokines+at+the+extensor+carpi+radialis+brevis+muscle+origin.">Expression of neuropeptides and cytokines at the extensor carpi radialis brevis muscle origin.</a> Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 11 (6), 570-575 (2002).</li><li>Lieber, R. L., Loren, G. J., Friden, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+human+wrist+extensor+muscle+sarcomere+length+changes.">In vivo measurement of human wrist extensor muscle sarcomere length changes.</a> Journal of Neurophysiology. 71 (3), 874-881 (1994).</li><li>Regan, W., Wold, L. E., Coonrad, R., Morrey, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+histopathology+of+chronic+refractory+lateral+epicondylitis.">Microscopic histopathology of chronic refractory lateral epicondylitis.</a> American Journal of Sports Medicine. 20 (6), 746-749 (1992).</li><li>Sharma, P., Maffulli, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tendon+injury+and+tendinopathy:+healing+and+repair.">Tendon injury and tendinopathy: healing and repair.</a> Journal of Bone and Joint Surgery American volume. 87 (1), 187-202 (2005).</li><li>Lui, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+technology+for+tendon+regeneration:+current+status,+challenges,+and+future+research+directions.">Stem cell technology for tendon regeneration: current status, challenges, and future research directions.</a> Stem Cells Cloning. 8, 163-174 (2015).</li><li>Dahlgren, L. A., van der Meulen, M. C., Bertram, J. E., Starrak, G. S., Nixon, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor-I+improves+cellular+and+molecular+aspects+of+healing+in+a+collagenase-induced+model+of+flexor+tendinitis.">Insulin-like growth factor-I improves cellular and molecular aspects of healing in a collagenase-induced model of flexor tendinitis.</a> Journal of Orthopedic Research. 20 (5), 910-919 (2002).</li><li>Schnabel, L. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+and+insulin-like+growth+factor-I+gene-enhanced+mesenchymal+stem+cells+improve+structural+aspects+of+healing+in+equine+flexor+digitorum+superficialis+tendons.">Mesenchymal stem cells and insulin-like growth factor-I gene-enhanced mesenchymal stem cells improve structural aspects of healing in equine flexor digitorum superficialis tendons.</a> Journal of Orthopedic Research. 27 (10), 1392-1398 (2009).</li><li>Durgam, S. S., Stewart, A. A., Sivaguru, M., Wagoner Johnson, A. J., Stewart, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tendon-derived+progenitor+cells+improve+healing+of+collagenase-induced+flexor+tendinitis.">Tendon-derived progenitor cells improve healing of collagenase-induced flexor tendinitis.</a> Journal of Orthopedic Research. 34 (12), 2162-2171 (2016).</li><li>Titan, A., Andarawis-Puri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tendinopathy:+Investigating+the+Intersection+of+Clinical+and+Animal+Research+to+Identify+Progress+and+Hurdles+in+the+Field.">Tendinopathy: Investigating the Intersection of Clinical and Animal Research to Identify Progress and Hurdles in the Field.</a> Journal of Bone and Joint Surgery Review. 4 (10), (2016).</li><li>Dirks, R. C., Warden, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+the+study+of+tendinopathy.">Models for the study of tendinopathy.</a> Journal of Musculoskeletal Neuronal Interaction. 11 (2), 141-149 (2011).</li><li>de Mos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+platelet-rich+plasma+enhance+tendon+repair?+A+cell+culture+study.">Can platelet-rich plasma enhance tendon repair? A cell culture study.</a> American Journal of Sports Medicine. 36 (6), 1171-1178 (2008).</li><li>Scherb, M. B., Han, S. H., Courneya, J. P., Guyton, G. P., Schon, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+bupivacaine+on+cultured+tenocytes.">Effect of bupivacaine on cultured tenocytes.</a> Orthopedics. 32 (1), 26 (2009).</li><li>Wong, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+dexamethasone+on+cultured+human+tenocytes+and+its+reversibility+by+platelet-derived+growth+factor.">Effect of dexamethasone on cultured human tenocytes and its reversibility by platelet-derived growth factor.</a> Journal of Bone and Joint Surgery American Volume. 85 (10), 1914-1920 (2003).</li><li>Tempfer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+crystalline+glucocorticoid+triamcinolone+acetonide+on+cultered+human+supraspinatus+tendon+cells.">Effects of crystalline glucocorticoid triamcinolone acetonide on cultered human supraspinatus tendon cells.</a> Acta Orthopaedics. 80 (3), 357-362 (2009).</li><li>Menon, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+in+extracellular+matrix+remodeling+and+collagen+turnover+related+pathways+in+cultured+human+tenocytes+after+ciprofloxacin+administration.">New insights in extracellular matrix remodeling and collagen turnover related pathways in cultured human tenocytes after ciprofloxacin administration.</a> Muscles Ligaments Tendons J. 3 (3), 122-131 (2013).</li><li>Backman, L. J., Fong, G., Andersson, G., Scott, A., Danielson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Substance+P+is+a+mechanoresponsive,+autocrine+regulator+of+human+tenocyte+proliferation.">Substance P is a mechanoresponsive, autocrine regulator of human tenocyte proliferation.</a> PLoS One. 6 (11), 27209 (2011).</li><li>Backman, L. J., Eriksson, D. E., Danielson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Substance+P+reduces+TNF-alpha-induced+apoptosis+in+human+tenocytes+through+NK-1+receptor+stimulation.">Substance P reduces TNF-alpha-induced apoptosis in human tenocytes through NK-1 receptor stimulation.</a> Britich Journal of Sports Medicine. 48 (19), 1414-1420 (2014).</li><li>Rolf, C. G., Fu, B. S., Pau, A., Wang, W., Chan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+cell+proliferation+and+associated+expression+of+PDGFRbeta+causing+hypercellularity+in+patellar+tendinosis.">Increased cell proliferation and associated expression of PDGFRbeta causing hypercellularity in patellar tendinosis.</a> Rheumatology (Oxford). 40 (3), 256-261 (2001).</li><li>Hoppe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tenocytes+of+chronic+rotator+cuff+tendon+tears+can+be+stimulated+by+platelet-released+growth+factors.">Tenocytes of chronic rotator cuff tendon tears can be stimulated by platelet-released growth factors.</a> Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 22 (3), 340-349 (2013).</li><li>Schipper, O. N., Dunn, J. H., Ochiai, D. H., Donovan, J. S., Nirschl, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nirschl+surgical+technique+for+concomitant+lateral+and+medial+elbow+tendinosis:+a+retrospective+review+of+53+elbows+with+a+mean+follow-up+of+11.7+years.">Nirschl surgical technique for concomitant lateral and medial elbow tendinosis: a retrospective review of 53 elbows with a mean follow-up of 11.7 years.</a> American Journal of Sports Medicine. 39 (5), 972-976 (2011).</li><li>Cook, J. L., Feller, J. A., Bonar, S. F., Khan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+tenocyte+morphology+is+more+prevalent+than+collagen+disruption+in+asymptomatic+athletes'+patellar+tendons.">Abnormal tenocyte morphology is more prevalent than collagen disruption in asymptomatic athletes' patellar tendons.</a> Journal of Orthopedic Research. 22 (2), 334-338 (2004).</li><li>Yuan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creating+an+Animal+Model+of+Tendinopathy+by+Inducing+Chondrogenic+Differentiation+with+Kartogenin.">Creating an Animal Model of Tendinopathy by Inducing Chondrogenic Differentiation with Kartogenin.</a> PLoS One. 11 (2), 0148557 (2016).</li><li>Lui, P. P., Maffulli, N., Rolf, C., Smith, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+are+the+validated+animal+models+for+tendinopathy.">What are the validated animal models for tendinopathy.</a> Scandinavian Journal of Medical Scientific Sports. 21 (1), 3-17 (2011).</li><li>Wilhelm, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+epicondylitis+review+and+current+concepts.">Lateral epicondylitis review and current concepts.</a> Journal of Hand Surgery American Volume. 34 (7), 1359-1360 (2009).</li></ol>

이전 연구의 숫자는 콜라 또는 kartogenin 주입, 실행, 디딜 방 아 등 더 많은26,27다른 절차를 사용 하 여 만성 tendinopathic 동물 모델을 만드는 방법을 보고 있다. 수많은 연구가 동물 모델에 따라 유망한 치료 효과 보여, 비록 인간의 퇴행 성 tenocyte를 사용 하 여 실험 것입니다 중요 한 tendinopathy의 분야에서 치료의 효능을 재생 하기 위하여. 이 문서에서는, 우...

Tendinopathy 신체의 다양 한 부분에서 개발 하 고 만성 퇴행 성 근 골격 계 상태 이다. 최근, tendinopathy의 케이스의 수에 참여 레크리에이션 스포츠 및 증가 평균 수명1,2성장으로 인해 선진국에서 크게 증가 했다. Tendinopathy의 원인 multifactorial 간주 됩니다 및 이러한 원인은 허 혈, 산소 자유 래 디 칼 부상, vasoconstrictor 및 vasodilator innervations, 내부 마이크로-눈물, 그리고 신경 레 귤 레이 션3에 변화 사이의 불균형 포함 ,,45,6,,78. Tendinopathy에 대 한 대부분의 치료만의 증상을 완화. 또한, 조직 재생 없이 치료 재활에 대 한 오랜 시간을 요구 하 고 의사9임상 과제 부과 부상된 힘 줄에서 제한 된 응답 달성.
현재 치료 옵션과 자체에 퇴행 성 힘 줄의 능력의 부족의 무는 대체 치료 전략을 탐구에 관심을 가져 리드 연구원. 최근, 성장 인자를 사용 하 여 tendinopathy 힘 줄의 치료 효능을 향상을 위한 많은 유망한 결과 보고 하는 새로운 연구, 줄기 세포 기반 치료, 그리고 유전자 치료10,,1112.
문학 검토를 통해 우리는 관련 된 연구의 분석 자료를 기반으로 두 가지 범주로 나눌 수 있습니다 발견: 쥐, 마우스, 또는 토끼; 같은 동물 모델 그리고 인간의 모델입니다. 동물 모델에 관해서는 현재 두 개의 인기 있는 기술이 있다 tendinopathy 생성 하: 부상 또는 모델을 오버 로드 하는 기계 화학 유도. 그러나, 각 동물 모델은 복잡 한 인간의 tendinopathy 병리학13,14재현에 제한 되었다.
대부분 논문 인간의 샘플을 사용 하 여 조직학 분석 했다 또는는 생체 외에서 퇴행 성 tenocyte15,16,,1718 대신 건강 한 인간의 tenocyte를 기반으로 하는 실험 , 19 , 20 , 21. 몇 논문만 보고 그들이 인간의 퇴행 성 tenocyte를 사용 하지만 그들은 않았다 하지 자세히 설명 인간의22,23에서 퇴행 성 tenocyte를 얻을 하는 데 사용 하는 프로토콜. 이러한 맥락에서 그것은 지적 되어야 인간의 효능 또는 효과 먹이 지 힘 줄 변성은 복잡 한 과정 때문에 병 인은 동물 모델 또는 건강 한 조직/tenocyte에서 성공적인 결과 반드시 예측 하지 수는 아직도 완전히 이해.
그것은 기증자에 게 부작용을 유발 하지 않고 인간의 조직에서 퇴행 성 tenocyte을 얻기 위한 표준 프로토콜을 설명 하는 데 필요한. 이 문서는 인간의 퇴행 성 tenocyte를 취득 하는 방법에 대 한 프로토콜을 설명 합니다. 프로토콜의 유효성을 검사 하려면 수확된 조직 조직학 분석 되었다. 그런 다음, 교양된 셀 immunocytochemistry (ICC), 정량 실시간 중 합 효소 연쇄 반응 (qRT-PCR), 생존 능력 분석 결과 사용 하 여 퇴행 성 tenocyte로 확인 되었다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:719px;" width="718">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Scalpel</td>
			<td style="width:199px;">Kisanbio</td>
			<td style="width:119px;">KS-Q0306-15</td>
			<td style="width:167px;">No. 15</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Mini-blade</td>
			<td style="width:199px;">Beaver</td>
			<td style="width:119px;">374769</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:235px;">Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium (DMEM)</td>
			<td style="width:199px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">11995065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Collagenase &#8545;</td>
			<td style="width:199px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">C6885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td style="width:119px;">14190250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td style="width:119px;">16000044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">50 mM ascorbic acid-2-phosphate</td>
			<td style="width:199px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">A5960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Antibiotic-Antimycotic solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td style="width:119px;">15240062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">4% formaldehyde</td>
			<td style="width:199px;">Bio-solution</td>
			<td style="width:119px;">BP031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Triton X-100&#160;</td>
			<td style="width:199px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">X100-100ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">BSA</td>
			<td style="width:199px;">Rdtech</td>
			<td style="width:119px;">C0082</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">TWEEN 20</td>
			<td style="width:199px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P9416-100ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">MKX (C-5)</td>
			<td style="width:199px;">Santa cruz biotechnology</td>
			<td style="width:119px;">sc-515878</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Tenomodulin (N-14)</td>
			<td style="width:199px;">Santa cruz biotechnology</td>
			<td style="width:119px;">sc-49325</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Fluorescence Mounting Medium</td>
			<td style="width:199px;">DAKO</td>
			<td style="width:119px;">S3023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:235px;">DAPI (4&#39;,6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride)</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:235px;">WST-1</td>
			<td style="width:199px;">Dojindo Molecular Technologies</td>
			<td style="width:119px;">CK04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">BrdU Cell Proliferation Assay Kit</td>
			<td style="width:199px;">Cell Signaling Technology</td>
			<td style="width:119px;">#6813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:235px;">TRIzol Reagent</td>
			<td style="width:199px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">15596018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:235px;">iScript cDNA Synthesis Kit&#160;</td>
			<td style="width:199px;">Bio-Rad</td>
			<td style="width:119px;">170-8891</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:235px;">TaqMan Gene Expression Master Mix</td>
			<td style="width:199px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:119px;">4369016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">GAPDH</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs02786624_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">COL3A1</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs00943809_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">ACTA2</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs00426835_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">TAC1</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs00243225_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">TACR1</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs00185530_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">PTGS2</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs00153133_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">ACTB</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs99999903_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Cell Strainers (100 &#181;m)&#160;</td>
			<td style="width:199px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">352360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">100mm culture dish</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">8188207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">8-well Chamber Slide</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">154534</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:235px;">96 Well Clear Flat Bottom Polystyrene TC-Treated Microplates</td>
			<td style="width:199px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Nikon Eclipse 50i Microscope&#160;</td>
			<td style="width:199px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;">VERSA max microplate reader&#160;</td>
			<td style="width:199px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:235px;">CFX96 Real-Time PCR Detection System</td>
			<td style="width:199px;">Bio-Rad</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:235px;">Formalin solution, neutral buffered, 10%</td>
			<td style="width:199px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Paraffins</td>
			<td style="width:199px;">Leica Biosystems</td>
			<td style="width:119px;">3801340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Ethanol</td>
			<td style="width:199px;">JUNSEI CHEMICAL</td>
			<td style="width:119px;">90303-2185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Hematoxylin</td>
			<td style="width:199px;">DAKO</td>
			<td style="width:119px;">CS70030-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Eosin</td>
			<td style="width:199px;">DAKO</td>
			<td style="width:119px;">CS70130-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Alcian blue</td>
			<td style="width:199px;">DAKO</td>
			<td style="width:119px;">AR16011-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Citric acid</td>
			<td style="width:199px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">251275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Xylene</td>
			<td style="width:199px;">JUNSEI CHEMICAL</td>
			<td style="width:119px;">25165-0430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Endogenous peroxidases&#160;</td>
			<td style="width:199px;">DAKO</td>
			<td style="width:119px;">S200380-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Canada balsam</td>
			<td style="width:199px;">JUNSEI CHEMICAL</td>
			<td style="width:119px;">23255-1210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Microtome Blade</td>
			<td style="width:199px;">FEATHER</td>
			<td style="width:119px;">A35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Slide glass</td>
			<td style="width:199px;">SUPERIOR</td>
			<td style="width:119px;">1000612</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Cover glass</td>
			<td style="width:199px;">Marienfeld-Superior</td>
			<td style="width:119px;">101050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">VEGF</td>
			<td style="width:199px;">Santa cruz biotechnology</td>
			<td style="width:119px;">sc-7269</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">SPSS Software</td>
			<td style="width:199px;">IBM</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Ver. 18.0</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Multi-purpose Centrifuge</td>
			<td style="width:199px;">LABOGENE</td>
			<td style="width:119px;">1248R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol to acquire the degenerative tenocyte from humans

증가 신체 활동 및 더 긴 수명으로 인해 선진국에서 증가 Tendinopathy, 힘 줄 변성에 대 한 응답에서을 개발 하 고 고통 스러운 상태 이다. 그것의 증가 보급에도 불구 하 고 기본 병 인 아직도 불분명 하 게, 남아 있다 그리고 치료는 일반적으로 증상을 보인다. 최근, 성장 인자, 줄기 세포 및 유전자 치료 등 다양 한 치료 옵션은 퇴행 성 힘 줄의 치료 효능을 향상을 위해 조사 되었다. 그러나, 이러한 연구의 대부분은 동물 모델 또는 건강 한 인간 tenocytes에만 실시 되었다. 병 적인 tenocytes를 사용 하 여 일부 연구에도 불구 하 고 우리의 지식 최선을 다 해 현재는 인간의 퇴행 성 tenocytes을 구하는 방법을 설명 하는 아무 프로토콜. 이 연구의 목적은 인간의 퇴행 성 tenocytes 획득을 위한 표준 프로토콜을 설명 하는 것입니다. 처음에, 힘 줄 조직은 수술 하는 동안 측면 염증 환자에서 수확 했다. 다음 생 샘플 해당 수술 시 관찰 하는 구조적인 변화 하 신 근 피 radialis brevis 힘에서 촬영 됐다. 수확된 힘 줄의 모든 지루한, 회색, 어렵다면, 등장 하 고, edematous는 그들이 만든 건강 한 사람에서 시각적으로 뚜렷한. Tenocytes 배양 하 고 실험을 위해 사용 했다. 한편, 수확 조직의 절반 조직학, 분석 되었다 그리고 tendinopathy angiofibroblastic 형성 (증식) 같은 주요 기능을 공유 하는 그들은 보였다. Immunocytochemistry에 의해 2 차 분석 확인 배양된 세포 모호크와 tenomodulin 단백질에 대 한 긍정적인 얼룩을 갖는 셀의 대다수와 가진 tenocytes 했다. Tenocytes의 퇴행 성 자연의 자질 다음 확산 분석 결과 또는 qRT-PCR를 사용 하 여 건강 한 컨트롤 셀 비교 하 여 결정 했다. 퇴행 성 tenocyte 더 높은 확산 속도 일치 하는 이전 보고서 tendinopathy의 유사한 유전자 표현 패턴 표시. 전반적으로,이 새로운 프로토콜 tendinopathy의 미래 연구에 대 한 유용한 도구를 제공할 수 있습니다.

조직학 분석 공개 측면 염증에서 수확된 조직 tendinopathic 힘 줄의 특성을 했다. H & E 섹션 tendinopathy 퇴행 성 힘 줄의 극성 및 좋은 직선, 강하게 포장 병렬 섬유 구조 손실 무질서 콜라겐 번들을 밝혔다. 조직학 징후 높은 cellularity 등 전형적인 스핀 들 모양 없이 확대 핵 변성의 암시 샘플에서 일반적 이었다. 또한, 퇴 화 한 힘 줄의 콜라겐 번들 상대적으로 약한 오신 H & E 스?...

Watch this Scientific Journal Video about A Protocol to Acquire the Degenerative Tenocyte from Humans at JoVE.com

A Protocol to Acquire the Degenerative Tenocyte from Humans

Tendinopathy에 새로운 치료의 효능을 조사할 때 퇴행 성 tenocytes의 생체 외에서 사용은 필수적입니다. 그러나, 대부분의 연구 연구 동물 모델 또는 건강 한 tenocyte를 사용합니다. 우리는 수술 하는 동안 인간의 퇴행 성 tenocytes를 분리 하는 다음 프로토콜을 제안 합니다.

인간에서 퇴행 성 Tenocyte를 취득 하는 프로토콜

Tendinopathy, a painful condition that develops in response to tendon degeneration, is on the rise in the developed world due to increasing physical ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Intra-Operative Behavioral Tasks in Awake Humans Undergoing Deep Brain Stimulation Surgery

딥 뇌 자극 수술을받은 깨어 인간 내부 수술 행동 작업

Deep brain stimulation (DBS) is a surgical procedure that directs chronic, high frequency electrical stimulation to specific targets in the brain through ...

연구

의학

The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

심리적 스트레스를 유발을위한 모금 사회 스트레스 테스트 프로토콜

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

Spectral Karyotyping to Study Chromosome Abnormalities in Humans and Mice with Polycystic Kidney Disease

Polycystic 신장 질환과 함께 인간과 마우스의 염색체 이상을 공부하는 스펙트럼 Karyotyping

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Model to Simulate Clinically Relevant Hypoxia in Humans

A 모델은 인간의 임상 관련 저산소증을 시뮬레이션하기

In case of apnea, arterial partial pressure of oxygen (pO2) decreases, while partial pressure of carbon dioxide (pCO2) increases. To avoid damage to ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

비경구 영양을 위한 올리브 오일 기반 3챔버 백의 안전성, 효능 및 전달을 평가하는 임상 시험

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Conducting Maximal and Submaximal Endurance Exercise Testing to Measure Physiological and Biological Responses to Acute Exercise in Humans

최대한 하 고 Submaximal 지구력 운동 인간에서 급성 운동 생리 및 생물학 응답을 측정 하기 위해 테스트를 실시

Regular physical activity has a positive effect on human health, but the mechanisms controlling these effects remain unclear. The physiologic and biologic ...

A Proinflammatory, Degenerative Organ Culture Model to Simulate Early-Stage Intervertebral Disc Disease.

초기 단계 무척추 디스크 질환을 시뮬레이션하는 선동적이고 퇴행성 장기 문화 모델.

Symptomatic intervertebral disc (IVD) degeneration (IDD) is a major socioeconomic burden and is characterized by inflammation and tissue degradation. Due ...

Retinal Pigment Epithelium Transplantation in a Non-human Primate Model for Degenerative Retinal Diseases

퇴행성 망막 질병을 위한 비인간 영장류 모형에 있는 망막 안료 상피 이식

Retinal pigment epithelial (RPE) transplantation holds great promise for the treatment of inherited and acquired retinal degenerative diseases. These ...

Quantification of Optic Nerve Cross Sectional Area on MRI: A Novel Protocol using Fiji Software

MRI에 시신경 단면 영역의 정량화: 피지 소프트웨어를 사용 하 여 새로운 프로토콜

Optic nerve assessment is an important aspect of glaucoma diagnosis and follow-up. This project describes a protocol for a unified methodology of optic ...