Name: development and functional characterization of murine tolerogenic dendritic cells
Uploaded: 2018-05-18T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Development and Functional Characterization of Murine Tolerogenic Dendritic Cells at JoVE.com

Vi takker Reata Pharmaceuticals for at give CDDO-DFPA. Vi anerkender også støtten fra Jane og Lee Seidman stol i Pediatric Cancer Innovation (John Letterio). Dette arbejde blev støttet af Department of Defense [W81XWH-12-1-0452]; Angie Fowler teenager og ung voksen kræft forskningsinitiativ på sag Comprehensive Cancer Center; og Callahan Graduate Scholar Award for Hsi-Ju Wei fra F.J. Callahan Foundation.

Alle undersøgelser blev udført i overensstemmelse med procedurer, der er godkendt af den Case Western Reserve University School of Medicines institutionelle Animal Care og brug udvalget.
1. Forbered knoglemarv-afledte dendritiske celler (BMDCs)
<ol><li>Sterilisere alle kirurgiske instrumenter via autoklavering og udføre eksperimentet i klasse II biologiske sikkerhed kabinet med bevilgede sikkerhedsprocedurer.</li>
	<li>Aflive C57BL/6 mus 8-10 uger gammel ved hjælp af CO2 kamme...

Dette papir beskriver en effektiv protokol, der kan bruges til reproducerbar til at generere iDCs og senere differentiere dem i TolDCs, og vi foreslår, at dette kan anvendes til at vurdere nye molekylære mål agenter evne til at fremkalde TolDC fænotype. Som beskrevet i denne rapport, vi har fulgt en sekvens, hvor vi først analyseres TolDC udtryk af overflade ligander ved flowcytometri, efterfulgt af en vurdering af DC cytokin profilen som målt ved qRT-PCR og ELISA. Endelig blev funktionen immunregulerende af TolDCs...

Dendritiske celler (DCs) blev er en integreret del af det medfødte immunforsvar og først opdaget og præget af Ralph Steinman og Zanvil Cohn i 1973 som primære professionelle antigen præsentere celler1. DCs har vist sig at spille en vigtig rolle i immun aktivering ved at præsentere forarbejdede antigener til T-celler og B-celler via store histocompatibility komplekser (MHC) i den sekundære lymfoide organer til at sammenkæde de medfødte og adaptive immunforsvar2. I pattedyr immunsystemet findes der mindst to kategorier af DCs, som er blevet beskrevet som myeloid DCs og plasmacytoid DCs (fremdaterede)3. Myeloid DCs, også kendt som konventionel DCs (cDCs), er karakteriseret ved udtryk for CD11c og kan differentieres som umodne DCs (iDCs) in vitro fra knoglemarv stamceller eller perifert blod monocytter ved hjælp af granulocyt-makrofag-koloni-stimulerende faktor (GM-CSF) og IL-4 i murine eller menneskelige arter, henholdsvis4.
Aktivering 'fare' signaler, såsom patogen-associeret molekylære mønstre (PAMP) eller skade-associeret molekylære mønstre (FUGTIG), vil drive iDCs modning mod immunogen DCs som modne DCs (mDCs) via bindende forskellige mønster anerkendelse receptorer DC overflade5. Immunogen DCs yderligere prime naive T-celle spredning og differentiering gennem opregulering af MHCII2, costimulatory ligander (CD80, CD86 og CD40)6, cytokiner og andre opløselige mæglere7. En kaskade af pro-inflammatoriske mediator produktion fra immunogen DCs er afgørende for cytokin-medieret T-Celledifferentiering. For eksempel, både IFN-γ og IL-12 er nødvendige for Th1 differentiering8 og IL-1, IL-6 og IL-23 er kritisk for naive T-celle polarisering mod Th17 celler9. Selv om modne DCs reagere på udenlandske antigener, kan ukontrolleret DC aktivering af selv-antigener forårsage tolerance ablation og fremme udviklingen af autoimmune sygdomme ved at generere autoreactive T celler hvis aktivering fører til væv destruktion10 .
Nylige rapporter har fastsat klare beviser for DC plasticitet, eksemplificeret af deres evne til at interagere med forskellige signaler i deres væv mikromiljø og differentiere i særskilte effektor/suppressor DC undersæt. De anti-inflammatoriske mediatorer, IL-1011, TGF-β12og HO-113 har vist sig at spille en vigtig rolle i immunsuppression ved at inducere tolerogenic DCs (TolDCs). Disse TolDCs erhverve myndighedsopgaver og undertrykke T-celle spredning14. Desuden, manglen fælles stimulation af DCs og produktion af anti-inflammatoriske mediatorer fra TolDCs både bidrage til induktion af regulerende T-celler (Tregs) og også effektivt hæmmer både Th1 og Th17 differentiering og ekspansion15. I sidste to årtier, er den terapeutiske potentiale af TolDCs blevet rapporteret af flere efterforskere. I disse undersøgelser, administration af ex-vivo genereret TolDCs ikke kun forbedret patologiske symptomer i forskellige prækliniske modeller af autoimmune sygdomme16 men også ført til udviklingen af immuntolerance i patienter17 ,18. Interessant, i dag TolDCs terapi har været betragtet som et alternativ eller tillægsbehandling tilgang til autoimmune sygdomme i adskillige kliniske forsøg, herunder type 1 diabetes mellitus19, reumatoid arthritis20, 21, multipel sklerose (MS)22,23,24, og Crohns sygdom25.
Der er en række protokoller, der har været ansat til at udvikle TolDCs og flere laboratorier har rapporteret metoder til generation og fænotypiske karakterisering af TolDCs. Disse metoder kan anvendes, reproducerbar generere TolDCs i vitro fra hæmatopoietisk ophav og stabilt fastholde dem i en tolerogenic tilstand i vivo26,27,28,29. IDCs kan omregnes til TolDCs ved udsættelse for forskellige immunmodulerende farmakologiske midler eller anti-inflammatoriske cytokiner. For eksempel, er D3-Vitamin en velkendt farmakologiske agent kendt at forøge IL-10 produktion og undertrykke IL-12 sekretion fra DCs og dermed styrke deres immunosuppressive funktion30. Desuden, når DCs udsættes for potent inflammatoriske stimuli, såsom lipopolysaccharides (LPS), flere farmakologiske stoffer såsom dexamethason31, rapamycin32og kortikosteroider33 har vist sig at fremkalde den TolDC fænotype ved at nedsætte DC overflade udtryk for CD40, CD80, CD86 og MHCII34. IL-10 og TGF-β er de mest studerede anti-inflammatoriske cytokiner fremkalde DC tolerance35 og samtidig eksponering for begge disse cytokiner har vist sig at fremkalde en tolerogenic fænotype i DCs36.
Siden tolerogenic DC er defineret af funktionelle kendetegn, snarere end af fænotypiske markører, der er et stort behov at udvikle en konsekvent metode for cellulære og funktionel karakterisering af TolDCs. Desuden en streng og konsekvent protokol skal fastsættes for ensartet vurdering og karakterisering af tolerogenic DC fænotype, hvis vi skal effektivt og reproducerbar sammenligne nye agenser evne til at fremkalde TolDC fænotype i den laboratorium. Her give vi en detaljeret protokol med trinvise metoder til at isolere iDCs fra hæmatopoietisk stamfaderen til mus og efterfølgende analysere effekten af nye agenter under evaluering for deres evne til at konvertere iDCs i TolDCs, giver en robust funktionel og fænotypiske karakterisering af TolDCs både in vitro- og in vivo. Denne beskrivelse indeholder en omfattende metode til at karakterisere TolDCs af deres overflade ligander, cytokin-profil og immunosuppressive funktioner i vitro. Vi tilbyder også et eksempel på en metode til at udforske den potentielle terapeutiske anvendelse af disse TolDCs i en præ-klinisk model af MS, eksperimentelle autoimmune encephalomyelitis (EAE). Denne etableret protokol vil hjælpe efterforskere at evaluere nye agenser evne til at fremme induktion af TolDCs og vil lette indsatsen for at udvide anvendelsesområdet for TolDC terapeutiske udvikling.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>CDDO-DFPA (RTA-408)</td>
			<td>Reata Pharmaceuticals</td>
			<td>in house synthesis</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse GM-CSF</td>
			<td>Peprotech Inc.</td>
			<td>315-03</td>
			<td>BMDC differentiation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-4</td>
			<td>Peprotech Inc.</td>
			<td>214-14</td>
			<td>BMDC differentiation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharides (LPS)</td>
			<td>Sigma Aldrich Inc.</td>
			<td>L2880</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma Aldrich Inc.</td>
			<td>516732</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pertussis toxin (PTX)</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>3097</td>
			<td>EAE induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MOG (35&#8211;55) peptide</td>
			<td>21stCentury Biochemicals</td>
			<td>in house synthesis</td>
			<td>EAE induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>15250-061</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 plus L-glutamine</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11875-093</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-essential amino acid (100X)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11140050</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15630080</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td>Cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#956;m cell strainer</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352340</td>
			<td>Cell isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-conjugated CD80</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557227</td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-conjugated CD86</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555665</td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-conjugated PD-L1</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>124307</td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC-conjugated MHCII</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-112-388</td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC-conjugated CD11c</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>340544</td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotype matched PE</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-091-835</td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotype matched APC</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-091-836</td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CFSE</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>423801</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pan dendritic cell isolation kit</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-100-875</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FcR Blocking Reagent</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-100-875</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pan Dendritic Cell Biotin-Antibody Cocktail</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-100-875</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Biotin MicroBeads</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-100-875</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD4+ T cell isolation kit</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-104-454</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD4+ T cell Biotin-Antibody Cocktail</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-104-454</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Biotin MicroBeads</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-104-454</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK lysing buffer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1049201</td>
			<td>BMDC differentiation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>309626</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 ml syringe</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>309588</td>
			<td>BMDC differentiation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G needle</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>309626</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23G needle</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>309588</td>
			<td>BMDC differentiation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma Aldrich Inc.</td>
			<td>A2058</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15575020</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LS Column</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-042-401</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pre-Separation Filter</td>
			<td>Miltenyi Biotec Inc.</td>
			<td>130-095-823</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>collagenase D</td>
			<td>Sigma Aldrich Inc.</td>
			<td>11088858001</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>14025076</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ovalbumin (OVA) peptide 323&#8211;329</td>
			<td>Sigma Aldrich Inc.</td>
			<td>O1641</td>
			<td>T cell proliferation assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IFN-&#947; TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm01168134_m1</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-12a TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm00434165</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-12 p70 DuoSet ELISA</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>DY419-05</td>
			<td>ELISA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse EDN-1 ELISA</td>
			<td>RayBiotech</td>
			<td>ELM-EDN1-1</td>
			<td>ELISA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TNF-&#945; TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm00443258</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse TNF-&#945; Quantikine ELISA Kit</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>MTA00B</td>
			<td>ELISA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6 TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm00446190</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-6 Quantikine ELISA Kit</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>M6000B</td>
			<td>ELISA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-23a TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm01160011</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-23 DuoSet ELISA</td>
			<td>R&#38;D systems</td>
			<td>DY1887-05</td>
			<td>ELISA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-4 TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm99999154_m1</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-10 TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm01288386_m1</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TGF-&#946; TaqMan probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Mm01178820_m1</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Heme Oxygenase 1 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab13248</td>
			<td>Western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946;-actin antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab8226</td>
			<td>Western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System</td>
			<td>Bio-Rad Inc.</td>
			<td></td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSCalibur Cell Analyzer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td>Flow cytometry</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development and functional characterization of murine tolerogenic dendritic cells

Immunforsvaret fungerer ved at fastholde en stram balance mellem koordinerende svar mod udenlandske antigener og opretholde en tilstand af selv-antigener samt antigener stammer fra commensal organismer. Afbrydelse af denne immun homøostase kan føre til kronisk betændelse og udviklingen af autoimmunitet. Dendritiske celler (DCs) er de professionelle antigen-præsenterer celler af den medfødte immunsystem involveret i aktivering naive T-celler til at indlede en immunrespons mod fremmede antigener. DCs kan imidlertid også opdeles i TolDCs, der fungerer til at opretholde og fremme T-celle tolerance og til at undertrykke effektor celler bidrager til udviklingen af enten autoimmun eller kronisk inflammation betingelser. Den seneste avancement i forståelsen af TolDCs antyder, at DC tolerance kan opnås ved at modulere deres differentiering betingelser. Dette fænomen har ført til enorme vækst i udviklingen af TolDC terapier for talrige immune lidelser forårsaget grund til at bryde i immuntolerance. Vellykket undersøgelser i prækliniske autoimmunitet murine modeller har yderligere valideres den immunterapeutisk nytte af TolDCs i behandlingen af autoimmune sygdomme. I dag er blevet TolDCs en lovende immunterapeutisk værktøj i klinik for genindsætte immuntolerance i forskellige immune lidelser ved at målrette patogene autoimmune reaktioner mens beskyttende immunitet intakte. Selv om en bred vifte af strategier er blevet foreslået af flere laboratorier til at fremkalde TolDCs, er der ingen konsistens i kendetegner den cellulære og funktionelle Fænotypen af disse celler. Denne protokol indeholder en trinvis vejledning til udvikling af knoglemarv-afledte DCs i stort tal, en unik metode til at differentiere dem i TolDCs med et syntetisk triterpenoid 2-cyano-3,12-dioxooleana-1,9-dien-28-oic syre-difluoro-propyl-AMID (CDDO-DFPA), og de teknikker, der anvendes til at bekræfte deres fænotype, herunder analyser af væsentlige molekylære signaturer af TolDCs. Endelig viser vi en metode til at vurdere TolDC funktion ved at teste deres immunosuppressive svar i vitro og vivo i prækliniske model af multipel sklerose.

Den differentiering og udvælgelse af BMDCs:
Knoglemarv stamceller var kulturperler i komplet RPMI medium tilstedeværelse af GM-CSF og IL-4 til at differentiere i iDCs i 7 dage (figur 1A). På dag 1, celler var små i størrelse og viste sfæriske morfologi. Vask med PBS, før udskiftning af frisk medium på dag 3 hjalp celler til form klynger og også øget befolkningen i CD11c<su...

Watch this Scientific Journal Video about Development and Functional Characterization of Murine Tolerogenic Dendritic Cells at JoVE.com

Development and Functional Characterization of Murine Tolerogenic Dendritic Cells

Vi præsenterer her, en protokol for at udvikle og karakterisere tolerogenic dendritiske celler (TolDCs) og evaluere deres immunterapeutisk nytte.

Udvikling og funktionel karakterisering af Murine Tolerogenic dendritiske celler

The immune system operates by maintaining a tight balance between coordinating responses against foreign antigens and maintaining an unresponsive state ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Udvikling af obliterativ bronchiolitis i en musemodel for Orthotopisk lungetransplantation

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolation, karakterisering og sammenlignende differentiering af humane Dental Pulp stamceller fra blivende tænder ved hjælp af to forskellige metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Patient Afledt Cellekultur og isolering af CD133<sup&gt; +</sup&gt; Formodede kræftstamceller fra melanom

Despite improved treatments options for melanoma available today, patients with advanced malignant melanoma still have a poor prognosis for ...

Quantitative Analysis and Characterization of Atherosclerotic Lesions in the Murine Aortic Sinus

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have ...

Isolation and Functional Characterization of Human Ventricular Cardiomyocytes from Fresh Surgical Samples

Isolering og funktionel karakterisering af human Ventrikulær kardiomyocytter fra Fresh Kirurgiske Prøver

Cardiomyocytes from diseased hearts are subjected to complex remodeling processes involving changes in cell structure, excitation contraction coupling and ...

Assessment of Ovarian Cancer Spheroid Attachment and Invasion of Mesothelial Cells in Real Time

Vurdering af kræft i æggestokkene Sfæroide Attachment og invasion af mesotelceller i Real Time

Ovarian cancers metastasize by shedding into the peritoneal fluid and dispersing to distal sites within the peritoneum. Monolayer cultures do not ...

High Throughput Characterization of Adult Stem Cells Engineered for Delivery of Therapeutic Factors for Neuroprotective Strategies

Højt gennemløb Karakterisering af voksne stamceller udviklet til levering af terapeutiske faktorer for Neurobeskyttende Strategies

Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow are a powerful cellular resource and have been used in numerous studies as potential candidates to ...

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro Funktionel karakterisering af Mouse Colorectal Afferent Endings

This video demonstrates in detail an in vitro single-fiber electrophysiological recording protocol using a mouse colorectum-nerve preparation. The ...

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

fremstilling og<em&gt; In vitro</em&gt; Karakterisering af Magnetized miR-modificerede endotelceller

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Murine Drinking Models in the Development of Pharmacotherapies for Alcoholism: Drinking in the Dark and Two-bottle Choice

Murine drikke modeller i udviklingen af Pharmacotherapies for alkoholisme: drikker i den mørke og to-flaske valg

Alcohol Use Disorder (AUD) is a major problem with more than an estimated 76 million people worldwide meeting the diagnostic criteria. Current treatments ...