Name: induction of nephrotic syndrome in mice by retrobulbar injection of doxorubicin and prevention of volume retention by sustained release aprotinin
Uploaded: 2018-05-06T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin at JoVE.com

Это исследование было поддержано грант от немецкого фонда научных исследований (DFG, AR 1092/2-1).

Все методы были проведены согласно национальных институтов здравоохранения руководство для ухода и использования лабораторных животных и немецкий закон о благополучии животных, и они были одобрены местными властями (Regierungspräsidium Tübingen).
1. индукция экспериментальной нефр?...

<ol>
	<li>Lee, V. W., Harris, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adriamycin+nephropathy:+a+model+of+focal+segmental+glomerulosclerosis.">Adriamycin nephropathy: a model of focal segmental glomerulosclerosis.</a> Nephrology (Carlton). 16 (1), 30-38 (2011).</li><li>Frenk, S., Antonowicz, I., Craig, J. M., Metcoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+nephrotic+syndrome+induced+in+rats+by+aminonucleoside;+renal+lesions+and+body+electrolyte+composition.">Experimental nephrotic syndrome induced in rats by aminonucleoside; renal lesions and body electrolyte composition.</a> Proc Soc Exp Biol Med. 89 (3), 424-427 (1955).</li><li>Ichikawa, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+intrarenal+mechanisms+in+the+impaired+salt+excretion+of+experimental+nephrotic+syndrome.">Role for intrarenal mechanisms in the impaired salt excretion of experimental nephrotic syndrome.</a> J Clin Invest. 71, (1983).</li><li>Deschenes, G., Wittner, M., Stefano, A., Jounier, S., Doucet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collecting+duct+is+a+site+of+sodium+retention+in+PAN+nephrosis:+a+rationale+for+amiloride+therapy.">Collecting duct is a site of sodium retention in PAN nephrosis: a rationale for amiloride therapy.</a> J Am Soc Nephrol. 12 (3), 598-601 (2001).</li><li>Lourdel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperaldosteronemia+and+activation+of+the+epithelial+sodium+channel+are+not+required+for+sodium+retention+in+puromycin-induced+nephrosis.">Hyperaldosteronemia and activation of the epithelial sodium channel are not required for sodium retention in puromycin-induced nephrosis.</a> J Am Soc Nephrol. 16 (12), 3642-3650 (2005).</li><li>Seigneux, S., Kim, S. W., Hemmingsen, S. C., Frokiaer, J., Nielsen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+expression+but+not+targeting+of+ENaC+in+adrenalectomized+rats+with+PAN-induced+nephrotic+syndrome.">Increased expression but not targeting of ENaC in adrenalectomized rats with PAN-induced nephrotic syndrome.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 291 (1), F208-F217 (2006).</li><li>Artunc, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum-+and+glucocorticoid-inducible+kinase+1+in+doxorubicin-induced+nephrotic+syndrome.">Serum- and glucocorticoid-inducible kinase 1 in doxorubicin-induced nephrotic syndrome.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295 (6), F1624-F1634 (2008).</li><li>Zheng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mendelian+locus+on+chromosome+16+determines+susceptibility+to+doxorubicin+nephropathy+in+the+mouse.">A Mendelian locus on chromosome 16 determines susceptibility to doxorubicin nephropathy in the mouse.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (7), 2502-2507 (2005).</li><li>Kimura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstrain+differences+in+murine+daunomycin-induced+nephrosis.">Interstrain differences in murine daunomycin-induced nephrosis.</a> Nephron. 63 (2), 193-198 (1993).</li><li>Wang, Y., Wang, Y. P., Tay, Y. C., Harris, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+adriamycin+nephropathy+in+mice:+sequence+of+histologic+and+immunohistochemical+events.">Progressive adriamycin nephropathy in mice: sequence of histologic and immunohistochemical events.</a> Kidney Int. 58 (4), 1797-1804 (2000).</li><li>Svenningsen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasmin+in+nephrotic+urine+activates+the+epithelial+sodium+channel.">Plasmin in nephrotic urine activates the epithelial sodium channel.</a> Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 20 (2), 299-310 (2009).</li><li>Passero, C. J., Hughey, R. P., Kleyman, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+role+for+plasmin+in+sodium+homeostasis.">New role for plasmin in sodium homeostasis.</a> Curr Opin Nephrol Hypertens. 19 (1), 13-19 (2010).</li><li>Bohnert, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aprotinin+prevents+proteolytic+epithelial+sodium+channel+(ENaC)+activation+and+volume+retention+in+nephrotic+syndrome.">Aprotinin prevents proteolytic epithelial sodium channel (ENaC) activation and volume retention in nephrotic syndrome.</a> Kidney Int. 93 (1), 159-172 (2018).</li><li>Pippin, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+rodent+models+of+acquired+podocyte+diseases.">Inducible rodent models of acquired podocyte diseases.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 296 (2), F213-F229 (2009).</li><li>Bohnert, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+phosphorus+restriction+and+vitamin+D-substitution+on+secondary+hyperparathyroidism+in+a+proteinuric+mouse+model.">Impact of phosphorus restriction and vitamin D-substitution on secondary hyperparathyroidism in a proteinuric mouse model.</a> Kidney Blood Press Res. 40 (2), 153-165 (2015).</li><li>Morton, D. B., Griffiths, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+on+the+recognition+of+pain,+distress+and+discomfort+in+experimental+animals+and+an+hypothesis+for+assessment.">Guidelines on the recognition of pain, distress and discomfort in experimental animals and an hypothesis for assessment.</a> Vet Rec. 116 (16), 431-436 (1985).</li><li>Beath, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+aprotinin+concentrations+during+cardiac+surgery:+full-+versus+half-dose+regimens.">Plasma aprotinin concentrations during cardiac surgery: full- versus half-dose regimens.</a> Anesth Analg. 91 (2), 257-264 (2000).</li><li>Kanter, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+toxicology+study+of+liposome+encapsulated+doxorubicin+(TLC+D-99):+comparison+with+doxorubicin+and+empty+liposomes+in+mice+and+dogs.">Preclinical toxicology study of liposome encapsulated doxorubicin (TLC D-99): comparison with doxorubicin and empty liposomes in mice and dogs.</a> In Vivo. 7 (1), 85-95 (1993).</li><li>Ma, L. J., Fogo, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+of+robust+induction+of+glomerulosclerosis+in+mice:+importance+of+genetic+background.">Model of robust induction of glomerulosclerosis in mice: importance of genetic background.</a> Kidney Int. 64 (1), 350-355 (2003).</li><li>Kren, S., Hostetter, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+course+of+the+remnant+kidney+model+in+mice.">The course of the remnant kidney model in mice.</a> Kidney Int. 56 (1), 333-337 (1999).</li><li>Mizuno-Horikawa, Y., Mizuno, S., Tamura, S., Kurosawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+glomerulosclerosis+is+reversible+in+nephrotic+mice.">Advanced glomerulosclerosis is reversible in nephrotic mice.</a> Biochem Biophys Res Commun. 284 (3), 707-713 (2001).</li><li>Friberger, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromogenic+peptide+substrates.+Their+use+for+the+assay+of+factors+in+the+fibrinolytic+and+the+plasma+kallikrein-kinin+systems.">Chromogenic peptide substrates. Their use for the assay of factors in the fibrinolytic and the plasma kallikrein-kinin systems.</a> Scand J Clin Lab Invest Suppl. 162, 1-298 (1982).</li><li>Haerteis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+kallikrein+activates+the+epithelial+sodium+channel+in+vitro+but+is+not+essential+for+volume+retention+in+nephrotic+mice.">Plasma kallikrein activates the epithelial sodium channel in vitro but is not essential for volume retention in nephrotic mice.</a> Acta Physiologica. , (2018).</li><li>Schork, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+Plasminuria+with+Overhydration+in+Patients+with+CKD.">Association of Plasminuria with Overhydration in Patients with CKD.</a> Clin J Am Soc Nephrol. 11 (5), 761-769 (2016).</li></ol>

Здесь мы демонстрируем, что доксорубицин инъекции через ретробульбарная синуса инъекции индуцирует экспериментальный нефротический синдром в 129S1/SvImJ мышей с протеинурия, задержка натрия, hypoalbumenia и гиперлипидемии. Однако есть два важнейших вопросов, которые должны приниматься во внима...

Нефротический синдром характеризуется тяжелыми протеинурия, Гипоальбуминемия, отек и гиперлипидемии и может рассматриваться как крайнее проявление протеинурией почек. Грызунов экспериментальный нефротический синдром может быть вызвана одной инъекции антрациклины или puromycin, которая приводит к повреждению Подоцит и напоминает человека минимальные изменения болезни и фокуса сегментарный гломерулосклероза (FSGS)1. После своего первого описания в 1955 году Френк и др. 2, puromycin нуклеозидов нефроз (PAN) в крыс стала стандартной модели для изучения патофизиологии нефротический синдром в многочисленных исследований3,4,5,6. В мышей соответствующая модель может быть вызвана антрациклиновой доксорубицин7. Однако существует сильное напряжение зависимость, которая генетически определяется по меньшей мере два генетических локусов8. Кроме того существуют различия в ответ протеинурией и курс нефротический синдром9,10. С помощью мыши 129S1/SvImJ и быстрого внутривенного введения доксорубицина через ретробульбарная синуса, протеинурия ответы достигать значения, которые являются достаточно, чтобы побудить характерные черты нефротический синдром, особенно объем удержания характеризуется асцит и почти без натрия мочи7. Задержка натрия в экспериментальной нефротический синдром исходил в результате активации эпителиальных натрия канала (ENaC) в дистальных канальцах, необычно отфильтрованных сериновые протеазы например плазмин, вызывая протеолиза ее γ-субъединица4 ,,1112. Недавно эта концепция была доказана в нефротическим мышей, которые были защищены от активации протеолитических ENaC и натрия удержания путем обращения с сериновые протеазы ингибитор Апротинин, который был столь же эффективным, как ENaC блокатор Амилорид13. Для обеспечения непрерывной поставки в дистальных канальцах, Апротинин осуществлялось через подкожно имплантированных устойчивый выпуска пеллет. Будущие исследования необходимы для идентификации сериновые протеазы, которые отвечают за протеолитических ENaC активации в нефротический синдром, который считается параллельно человеческой ситуации. Для этой цели доксорубицин индуцированной нефротический синдром является ценным модель, которая может быть использована в мышах одичал тип или расширен до генной инженерии мышей. Его преимущества включают в себя низкой стоимости препарата, Нижняя сложности управления и хорошая воспроизводимость14.
В этой статье мы демонстрируем индукции экспериментальной нефротический синдром быстрого внутривенного введения доксорубицина ретробульбарная синуса и имплантации устойчивый релиз гранулы, содержащие Апротинин подавлять мочи сериновые протеазы деятельность как измеряется с хромогенных assay.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>supplies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Micro FINE + U-40 (0.30 mm x 8 mm)</td>
			<td>BD Deutschland GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>PZN: 07468060</td>
			<td>syring</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm)</td>
			<td>Johnson&#38;Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany)</td>
			<td>EH7823H</td>
			<td>suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aprotinin (6000 KIU/mg)</td>
			<td>LOXO, Heidelberg, Germany</td>
			<td>CAS 9087-70-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen, Augen- und Nasensalbe</td>
			<td>Bayer Vital GmbH, Leverkusen, Germany</td>
			<td>PZN: 1578681</td>
			<td>ointment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromogenix S-2251</td>
			<td>HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Germany</td>
			<td>82 0332 39</td>
			<td>chromogenic substrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>doxorubicin (2.0 &#181;g/&#181;L)</td>
			<td>Cell Pharm, Bad Vilbel, Germany</td>
			<td>CAS 25316-40-9</td>
			<td>doxorubicin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluran CP (1 mL/mL)</td>
			<td>CP-Pharma, Burgdorf, Germany</td>
			<td>CAS 26675-46-7</td>
			<td>isofluran</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pellets with matrix-driven sustained release (custom-made)</td>
			<td>Innovative Research of America, Sarasota, FL</td>
			<td>X-999</td>
			<td>pellet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELx808 Absorbance Mikroplate Reader</td>
			<td>BioTek, Bad Friedrichshall, Germany</td>
			<td>ELx808</td>
			<td>microplate reader</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MICROSTERIL - 436</td>
			<td>B.M.S., Trescore Balneario, Italy</td>
			<td>GAL/436</td>
			<td>sterilizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hybridization oven/shaker</td>
			<td>GE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, UK</td>
			<td>RPN 2511</td>
			<td>heat chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo MAT Pro 10 W, 15x25 cm, Lucky Reptile</td>
			<td>Import Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Germany</td>
			<td>61201</td>
			<td>mouse warming device</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of nephrotic syndrome in mice by retrobulbar injection of doxorubicin and prevention of volume retention by sustained release aprotinin

Нефротический синдром является самым крайним проявлением протеинурией почек и характеризуется тяжелыми протеинурия, Гипоальбуминемия и отек из-за удержания натрия и гиперлипидемии. Для изучения патофизиологии этого синдрома, грызунов, которые были разработаны модели основаны на инъекции токсичных веществ, таких как доксорубицин, причинив ущерб Подоцит. В мышей только несколько штаммов чувствительны к этой модели. В wildtype 129S1/SvImJ мышей администрация доксорубицин путем быстрого внутривенного введения ретробульбарная синуса индуцирует экспериментальный нефротический синдром имеет все симптомы болезней человека, включая сохранение натрия и отек. После начала протеинурия экспонат мышей увеличилась мочевыводящих сериновые протеазы деятельность, которая приводит к активации эпителиальных натриевых каналов (ENaC) и натрия удержания. Фармакологических ингибирование мочевыводящих сериновые протеазы обращения с устойчивый выпуска Апротинин аннулирует ENaC активации и предотвращает сохранение натрия. Эта модель идеально подходит для изучения патофизиологии proteasuria, т.е., выведение активных сериновые протеазы, которые вызывают ENaC активации по протеолиза ее γ-Субблок. Это может рассматриваться как основного механизма ENaC активации и задержке натрия в протеинурией почек.

После индукции наркоза изофлюрановая доксорубицин был быстро вводят через левый ретробульбарная синуса. Весь объем 7,25 мкл/г bw вводили без любого сопротивления и кровоподтек доказав исправить внутривенного расположения канюли. Мышь быстро оправился от наркоза и имел...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin at JoVE.com

Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin

Здесь мы описываем индукции экспериментальной нефротический синдром в 129S1/SvImJ мышей впрыской быстрого ретробульбарная доксорубицина. Мы также лечить нефротическим мышей с устойчивый выпуска гранулы, содержащие Апротинин подавлять мочи сериновые протеазы активность и предотвратить задержку натрия.

Индукция нефротический синдром у мышей ретробульбарная инъекций доксорубицина и предотвращения объем удержания устойчивый выпуска Апротинин

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Сердечная стресс-тест индуцированный Dobutamine и контролируется катетеризации сердца у мышей

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Отслойки Модель в Грызуны по субретинальной инжекции гиалуронат натрия

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Экспериментальная Глаукома индуцированная глазной инъекций магнитных микросфер

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Bile Duct Ligation in Mice: Induction of Inflammatory Liver Injury and Fibrosis by Obstructive Cholestasis

Желчного протока Лигирование у мышей Индукция воспалительного печени травматизма и фиброза обструктивной холестаза

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Индукция ускоренного атеросклероза у мышей: модель "Wire-Injury"

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Анализ реального времени давления объем острого инфаркта миокарда у мышей

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Оценка функции внешнего дыхания в сознательных мышей, двухкамерный плетизмографии

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Модель глаукомы, индуцированных Circumlimbal шва у крыс и мышей

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...