Name: induction of nephrotic syndrome in mice by retrobulbar injection of doxorubicin and prevention of volume retention by sustained release aprotinin
Uploaded: 2018-05-06T15:00:00
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Este estudio fue apoyado por una beca de la Fundación de investigación alemana (DFG, AR 1092/2-1).

Todos los métodos se realizaron según los institutos nacionales de salud guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio y la ley para el bienestar de los animales, y que fueron aprobados por las autoridades locales (Regierungspräsidium Tübingen).
1. inducción del síndrome nefrótico Experimental por doxorrubicina inyectable el seno Retrobulbar
<ol><li>Preparar una jeringa de 0.5 mL con cánula 30G montado por el tope del pistón de la marca.</li>
	<li>Calcular el volumen de iny...

<ol>
	<li>Lee, V. W., Harris, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adriamycin+nephropathy:+a+model+of+focal+segmental+glomerulosclerosis.">Adriamycin nephropathy: a model of focal segmental glomerulosclerosis.</a> Nephrology (Carlton). 16 (1), 30-38 (2011).</li><li>Frenk, S., Antonowicz, I., Craig, J. M., Metcoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+nephrotic+syndrome+induced+in+rats+by+aminonucleoside;+renal+lesions+and+body+electrolyte+composition.">Experimental nephrotic syndrome induced in rats by aminonucleoside; renal lesions and body electrolyte composition.</a> Proc Soc Exp Biol Med. 89 (3), 424-427 (1955).</li><li>Ichikawa, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+intrarenal+mechanisms+in+the+impaired+salt+excretion+of+experimental+nephrotic+syndrome.">Role for intrarenal mechanisms in the impaired salt excretion of experimental nephrotic syndrome.</a> J Clin Invest. 71, (1983).</li><li>Deschenes, G., Wittner, M., Stefano, A., Jounier, S., Doucet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collecting+duct+is+a+site+of+sodium+retention+in+PAN+nephrosis:+a+rationale+for+amiloride+therapy.">Collecting duct is a site of sodium retention in PAN nephrosis: a rationale for amiloride therapy.</a> J Am Soc Nephrol. 12 (3), 598-601 (2001).</li><li>Lourdel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperaldosteronemia+and+activation+of+the+epithelial+sodium+channel+are+not+required+for+sodium+retention+in+puromycin-induced+nephrosis.">Hyperaldosteronemia and activation of the epithelial sodium channel are not required for sodium retention in puromycin-induced nephrosis.</a> J Am Soc Nephrol. 16 (12), 3642-3650 (2005).</li><li>Seigneux, S., Kim, S. W., Hemmingsen, S. C., Frokiaer, J., Nielsen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+expression+but+not+targeting+of+ENaC+in+adrenalectomized+rats+with+PAN-induced+nephrotic+syndrome.">Increased expression but not targeting of ENaC in adrenalectomized rats with PAN-induced nephrotic syndrome.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 291 (1), F208-F217 (2006).</li><li>Artunc, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum-+and+glucocorticoid-inducible+kinase+1+in+doxorubicin-induced+nephrotic+syndrome.">Serum- and glucocorticoid-inducible kinase 1 in doxorubicin-induced nephrotic syndrome.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295 (6), F1624-F1634 (2008).</li><li>Zheng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mendelian+locus+on+chromosome+16+determines+susceptibility+to+doxorubicin+nephropathy+in+the+mouse.">A Mendelian locus on chromosome 16 determines susceptibility to doxorubicin nephropathy in the mouse.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (7), 2502-2507 (2005).</li><li>Kimura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstrain+differences+in+murine+daunomycin-induced+nephrosis.">Interstrain differences in murine daunomycin-induced nephrosis.</a> Nephron. 63 (2), 193-198 (1993).</li><li>Wang, Y., Wang, Y. P., Tay, Y. C., Harris, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+adriamycin+nephropathy+in+mice:+sequence+of+histologic+and+immunohistochemical+events.">Progressive adriamycin nephropathy in mice: sequence of histologic and immunohistochemical events.</a> Kidney Int. 58 (4), 1797-1804 (2000).</li><li>Svenningsen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasmin+in+nephrotic+urine+activates+the+epithelial+sodium+channel.">Plasmin in nephrotic urine activates the epithelial sodium channel.</a> Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 20 (2), 299-310 (2009).</li><li>Passero, C. J., Hughey, R. P., Kleyman, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+role+for+plasmin+in+sodium+homeostasis.">New role for plasmin in sodium homeostasis.</a> Curr Opin Nephrol Hypertens. 19 (1), 13-19 (2010).</li><li>Bohnert, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aprotinin+prevents+proteolytic+epithelial+sodium+channel+(ENaC)+activation+and+volume+retention+in+nephrotic+syndrome.">Aprotinin prevents proteolytic epithelial sodium channel (ENaC) activation and volume retention in nephrotic syndrome.</a> Kidney Int. 93 (1), 159-172 (2018).</li><li>Pippin, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+rodent+models+of+acquired+podocyte+diseases.">Inducible rodent models of acquired podocyte diseases.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 296 (2), F213-F229 (2009).</li><li>Bohnert, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+phosphorus+restriction+and+vitamin+D-substitution+on+secondary+hyperparathyroidism+in+a+proteinuric+mouse+model.">Impact of phosphorus restriction and vitamin D-substitution on secondary hyperparathyroidism in a proteinuric mouse model.</a> Kidney Blood Press Res. 40 (2), 153-165 (2015).</li><li>Morton, D. B., Griffiths, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+on+the+recognition+of+pain,+distress+and+discomfort+in+experimental+animals+and+an+hypothesis+for+assessment.">Guidelines on the recognition of pain, distress and discomfort in experimental animals and an hypothesis for assessment.</a> Vet Rec. 116 (16), 431-436 (1985).</li><li>Beath, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+aprotinin+concentrations+during+cardiac+surgery:+full-+versus+half-dose+regimens.">Plasma aprotinin concentrations during cardiac surgery: full- versus half-dose regimens.</a> Anesth Analg. 91 (2), 257-264 (2000).</li><li>Kanter, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+toxicology+study+of+liposome+encapsulated+doxorubicin+(TLC+D-99):+comparison+with+doxorubicin+and+empty+liposomes+in+mice+and+dogs.">Preclinical toxicology study of liposome encapsulated doxorubicin (TLC D-99): comparison with doxorubicin and empty liposomes in mice and dogs.</a> In Vivo. 7 (1), 85-95 (1993).</li><li>Ma, L. J., Fogo, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+of+robust+induction+of+glomerulosclerosis+in+mice:+importance+of+genetic+background.">Model of robust induction of glomerulosclerosis in mice: importance of genetic background.</a> Kidney Int. 64 (1), 350-355 (2003).</li><li>Kren, S., Hostetter, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+course+of+the+remnant+kidney+model+in+mice.">The course of the remnant kidney model in mice.</a> Kidney Int. 56 (1), 333-337 (1999).</li><li>Mizuno-Horikawa, Y., Mizuno, S., Tamura, S., Kurosawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+glomerulosclerosis+is+reversible+in+nephrotic+mice.">Advanced glomerulosclerosis is reversible in nephrotic mice.</a> Biochem Biophys Res Commun. 284 (3), 707-713 (2001).</li><li>Friberger, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromogenic+peptide+substrates.+Their+use+for+the+assay+of+factors+in+the+fibrinolytic+and+the+plasma+kallikrein-kinin+systems.">Chromogenic peptide substrates. Their use for the assay of factors in the fibrinolytic and the plasma kallikrein-kinin systems.</a> Scand J Clin Lab Invest Suppl. 162, 1-298 (1982).</li><li>Haerteis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+kallikrein+activates+the+epithelial+sodium+channel+in+vitro+but+is+not+essential+for+volume+retention+in+nephrotic+mice.">Plasma kallikrein activates the epithelial sodium channel in vitro but is not essential for volume retention in nephrotic mice.</a> Acta Physiologica. , (2018).</li><li>Schork, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+Plasminuria+with+Overhydration+in+Patients+with+CKD.">Association of Plasminuria with Overhydration in Patients with CKD.</a> Clin J Am Soc Nephrol. 11 (5), 761-769 (2016).</li></ol>

Aquí, demostramos que la doxorrubicina inyectable vía la inyección retrobulbar del seno induce síndrome nefrótico experimental en ratones 129S1/SvImJ con proteinuria, retención de sodio, hypoalbumenia y la hiperlipidemia. Sin embargo, hay dos cuestiones fundamentales que han de tenerse en cuenta al utilizar este modelo. En primer lugar, la inducción del modelo es estrictamente dependientes de la dosis y desviaciones de la dosis de doxorrubicina tan pequeñas como 0.3 μg/g afectan la respuesta de los ratones<sup c...

El síndrome nefrótico se caracteriza por hiperlipemia, hipoalbuminemia, edema y proteinuria pesado y puede considerarse como la manifestación más extrema de la enfermedad renal proteinúrica. En roedores, el síndrome nefrótico experimental puede ser inducido por una inyección de antraciclinas o puromicina que conduce al daño Podocito y se asemeja a la enfermedad humana cambios mínimos y glomerulosclerosis segmentario focal (FSGS)1. Después de su primera descripción en 1955 por Frenk et al. 2, nefrosis de nucleósido puromicina (PAN) en ratas se ha convertido en un modelo estándar para investigar la fisiopatología del síndrome nefrótico en numerosos estudios3,4,5,6. En ratones, el modelo puede ser inducido por la antraciclina doxorrubicina7. Sin embargo, hay una fuerte dependencia de cepa que está genéticamente determinada por al menos dos loci genéticos8. Además, existen diferencias en la respuesta de proteinuria y el curso del síndrome nefrótico9,10. Usando ratones 129S1/SvImJ y la inyección intravenosa rápida de doxorrubicina vía el seno retrobulbar, respuestas de proteinuria alcanzan valores que son suficientes para inducir las características típicas del síndrome nefrótico, especialmente retención de volumen caracterizado por ascitis y casi libre de sodio orina7. Retención de sodio en el síndrome nefrótico experimental ha sido presumida para ser el resultado de la activación del canal epitelial del sodio (ENaC) en el túbulo distal por las proteasas de serina aberrantemente filtrada como plasmina causa proteólisis de la subunidad γ4 ,11,12. Recientemente, este concepto fue probado en ratones nefróticos que estaban protegidos de proteolytic activación de ENaC y la retención de sodio por el tratamiento con la aprotinina de inhibidor de proteasa de serina que era igualmente eficaz como el ENaC bloqueador amilorida13. Para asegurar la continua entrega a los túbulos distales, aprotinina fue administrada mediante pellets de liberación sostenida por vía subcutánea implantado. Se necesitan estudios futuros para identificar las proteasas de serina que son responsables de la activación proteolítica de ENaC en el síndrome nefrótico que se cree que la situación humana en paralelo. Para ello, el síndrome nefrótico inducida por la doxorrubicina es un modelo valioso que puede ser utilizado en los ratones de tipo salvaje o ampliado a ratones modificados genéticamente. Sus ventajas incluyen bajo costo de la droga, menor complejidad de la gestión y buena reproducibilidad14.
En este artículo, nos demuestran la inducción del síndrome nefrótico experimental por inyección intravenosa rápida de la doxorrubicina al sino retrobulbar y la implantación de pellets de liberación sostenida que contienen aprotinina para inhibir la proteasa de serina urinaria actividad medida con un ensayo cromogénico.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>supplies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Micro FINE + U-40 (0.30 mm x 8 mm)</td>
			<td>BD Deutschland GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>PZN: 07468060</td>
			<td>syring</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm)</td>
			<td>Johnson&#38;Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany)</td>
			<td>EH7823H</td>
			<td>suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aprotinin (6000 KIU/mg)</td>
			<td>LOXO, Heidelberg, Germany</td>
			<td>CAS 9087-70-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen, Augen- und Nasensalbe</td>
			<td>Bayer Vital GmbH, Leverkusen, Germany</td>
			<td>PZN: 1578681</td>
			<td>ointment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromogenix S-2251</td>
			<td>HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Germany</td>
			<td>82 0332 39</td>
			<td>chromogenic substrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>doxorubicin (2.0 &#181;g/&#181;L)</td>
			<td>Cell Pharm, Bad Vilbel, Germany</td>
			<td>CAS 25316-40-9</td>
			<td>doxorubicin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluran CP (1 mL/mL)</td>
			<td>CP-Pharma, Burgdorf, Germany</td>
			<td>CAS 26675-46-7</td>
			<td>isofluran</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pellets with matrix-driven sustained release (custom-made)</td>
			<td>Innovative Research of America, Sarasota, FL</td>
			<td>X-999</td>
			<td>pellet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELx808 Absorbance Mikroplate Reader</td>
			<td>BioTek, Bad Friedrichshall, Germany</td>
			<td>ELx808</td>
			<td>microplate reader</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MICROSTERIL - 436</td>
			<td>B.M.S., Trescore Balneario, Italy</td>
			<td>GAL/436</td>
			<td>sterilizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hybridization oven/shaker</td>
			<td>GE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, UK</td>
			<td>RPN 2511</td>
			<td>heat chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo MAT Pro 10 W, 15x25 cm, Lucky Reptile</td>
			<td>Import Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Germany</td>
			<td>61201</td>
			<td>mouse warming device</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of nephrotic syndrome in mice by retrobulbar injection of doxorubicin and prevention of volume retention by sustained release aprotinin

El síndrome nefrótico es la manifestación más extrema de la enfermedad renal proteinuria y caracterizada por proteinuria pesado, hipoalbuminemia y edema por retención de sodio y la hiperlipidemia. Para estudiar la fisiopatología de este síndrome, roedor han desarrollado modelos basados en la inyección de sustancias tóxicas como la doxorrubicina causando daño Podocito. En los ratones, sólo algunas cepas son susceptibles a este modelo. En los ratones de tipo salvaje 129S1/SvImJ, la administración de doxorubicina por inyección intravenosa rápida en el seno de retrobulbar induce síndrome nefrótico experimental que presenta todos los síntomas de las enfermedades humanas, incluyendo edema y retención de sodio. Después de la aparición de proteinuria, exposición de ratones aumentó actividad de proteasa de serina urinaria que conduce a la activación del canal epitelial del sodio (ENaC) y retención de sodio. Inhibición farmacológica de las proteasas de serina urinaria por el tratamiento con aprotinina de liberación sostenida abroga la activación de ENaC y evita la retención de sodio. Este modelo es ideal para el estudio de la fisiopatología de la proteasuria, es decir., la excreción de las proteasas de serina activa que causa la activación de ENaC por la proteolisis de la subunidad γ. Esto puede considerarse como el mecanismo primario de activación de ENaC y la retención de sodio en enfermedad renal proteinúrica.

Después de la inducción de la narcosis de isoflurano, doxorrubicina se inyectó rápidamente vía el seno izquierdo retrobulbar. El volumen total de 7.25 μl/g bw inyectó sin ninguna resistencia y extravasación demostrando corrigen intravenosa localización de la cánula. El ratón de narcosis se recuperó rápidamente y no tenía ningún deterioro en ese día y después de eso. Particularmente, no había señal de daño en el ojo izquierdo. Después de doxorrubicina inyección, comid...

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Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin

Aquí, describimos la inducción del síndrome nefrótico experimental en ratones 129S1/SvImJ por inyección retrobulbar rápido de doxorrubicina. También tratamos ratones nefróticos con gránulos de liberación prolongada que contiene aprotinina para inhibir la actividad de la proteasa de serina urinaria y prevenir la retención de sodio.

Inducción del síndrome nefrótico en ratones por la inyección Retrobulbar de la doxorrubicina y la prevención de la retención de volumen por la aprotinina de liberación sostenida

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Prueba de esfuerzo cardíaco inducida por dobutamina y supervisado por cateterismo cardíaco en ratones

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Investigación

Medicina

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Desprendimiento de Retina modelo en roedores por inyección subretiniana de Hialuronato de Sodio

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Experimental glaucoma inducido por inyección ocular de microesferas magnéticas

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Bile Duct Ligation in Mice: Induction of Inflammatory Liver Injury and Fibrosis by Obstructive Cholestasis

Ligadura del conducto biliar en los ratones: Inducción de la injuria hepática inflamatoria y fibrosis por colestasis obstructiva

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Inducción de la Aterosclerosis Acelerada en Ratones: El Modelo de "Lesiones por Alambre"

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Análisis en tiempo real de presión-volumen del infarto agudo de miocardio en ratones

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

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Evaluación de la función respiratoria en ratones conscientes por Pletismografía de doble cámara

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Un modelo de Glaucoma inducido por sutura de Circumlimbal en ratas y ratones

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