Name: protocol to create chronic wounds in diabetic mice
Uploaded: 2019-09-25T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocol to Create Chronic Wounds in Diabetic Mice at JoVE.com

. למחברים אין תודות

כל הניסויים הושלמו בהתאם וציות לתקנות פדרליות ומדיניות ונהלים באוניברסיטת קליפורניה אושרו על ידי אוניברסיטת קליפורניה, ריברסייד IACUC.
1. בעלי חיים
<ol><li>השתמש סוכרת ושמנים B6. BKS (D)-Leprdb/J עכברים עבור מודל הפצע כרונית. אפשרויות הרכישה כוללות גם הטרוזיטים לרבייה או הומ?...

לאחר פציעות כרוניות נוצרות על העכברים, המודל יכול לשמש כדי ללמוד תהליכים ריפוי בפצע לקוי המעורבים בייזום של כותבי. המודל יכול לשמש גם כדי לבדוק את היעילות של מגוון רחב של כימיקלים ותרופות שיכולים להפוך את התפתחות הפצע כרונית וריפוי לקוי ולגרום לסגירת הפצע וריפוי. נקודות זמן שונות לאחר התח...

ריפוי הפצע כרוך תהליכים סלולריים ומולקולריים מורכבים, כי הם זמניות ו מרחב מוסדר, מאורגן בשלבים רציפים וחופפים הכרוכים סוגים רבים של תאים שונים, כולל אך לא מוגבל לתגובה החיסונית ואת כלי הדם מערכת1. מיד לאחר שהעור מקיים פציעה, גורמים ותאי דם מצטברים לאתר הפצע ומפעילים את מדרג קרישת הדם כדי ליצור קריש דם. לאחר הומאוסטזיס מושגת, כלי הדם מתרחבים כדי להכניס את הפצע באתר חמצן, חומרים מזינים, אנזימים, נוגדנים גורמים כימוכאוטקטיק למשוך פולימנוקלציטים כדי לנקות את המיטה הפצע של פסולת זרים להפריש אנזימים פרוטקליפה 2. טסיות מופעל מפרישות מגוון של גורמי גדילה כדי לעורר את keratinocytes בקצה הפצע כדי האפיתל מחדש את האזור הפצוע. מונוולוציטים גויס הפצע באתר להבדיל לתוך מקרופאגים אשר בקטריה phagocytose מתים נויטרופילים להפריש גורמים נוספים כדי לשמור על מתרבים keratinocyte ו פרו-נדידה אותות. בשלב התפשטות, בעוד הרקמה מחדש ממשיכה, רקמת גרטולזה חדש מורכב של פיברופיצוצים, מונוציטים/מקרופאגים, לימפוציטים, ותאי האנדותל להמשיך את תהליך השיקום2. אנגיוגנזה מגורה על ידי קידום התפשטות והגירה של תאי האנדותל, והתוצאה היא פיתוח כלי חדש. אפיתל ושיפוץ של מטריקס החילוץ לבנות מחסום נגד הסביבה. כאשר הפצע מרפא ורקמות הגרטולציות מתפתחת לתוך צלקת, אפופטוזיס מבטלת תאים דלקתיים, פיברותקיעות, ותאי אנדותל מבלי לגרום נזק נוסף לרקמות. חוזק מתיחה של הרקמה מוגברת על ידי שיפוץ מרכיבים שונים של מטריצה החילוץ, כמו קולגן, כך הרקמה החדשה שנוצר הוא כמעט חזק וגמיש כמו עור בלתי מושפע2.
כל סטייה מהתקדמות זו מאוד כלפי הסגר הפצע מוביל לקויי ו/או פצעים כרוניים3. פצעים כרוניים מאופיינים לחץ חמצוני מוגבר, דלקת כרונית, פגום microvascuלטורה, ומטריצה קולגן נורמלי בפצע4. לחץ חמצוני, במיוחד בפצע, יכול לעכב את סגירת הפצע2,5. כאשר, בשלב הראשון של ריפוי הפצע, השלב הדלקתי הופך בלתי מבוקר, הרקמה המארחת מניח נזק נרחב עקב זרם רציף של תאים דלקתיים5 שחרור אנזימים ציטוטוקסיים, עלייה ברדיקלים חופשיים חמצן, ו , מתווכים דלקתיים לא מפוקחים. וכתוצאה מכך מוות תאים6,7
בסביבת מיקרו הרסנית זו, חיידקים יוצרי בקטריה לנצל החומרים המזינים מארחים לתרום לנזק של רקמת המארח2. ביואילאמים אלה קשה לשלוט ולהסיר משום חומרים פולימרים מסירות מתוך המורכב של חלבונים, DNA, RNA, ו פוליסכדים מאפשר חיידקים הרעמנים בתוך להיות סובלני טיפולים אנטיביוטי קונבנציונלי להתחמק ה המארח של הפונדקאי ואת התגובה החיסונית מסתגלת2,8,9.
לימוד פצעים כרוניים הוא חיוני כי הם השפעה ~ 6,500,000 אנשים ועלות ~ $40,000,000,000 בשנה בארה ב בלבד10. חולים עם סוכרת הגדילו את הסיכונים לפיתוח פצעים כרוניים הדורשים קטיעה כדי להכיל את התפשטות הזיהום. למטופלים אלה יש 50% תמותה הסיכון בתוך 5 שנים של קטיעה כי הוא מיוחס מנגנון pathפסיולוגיה של סוכרת11. הקשר בין המערכת החיסונית של המארח לבין מיקרובידום בריפוי הפצע הוא נושא חיוני של מחקר שוטף, כי השלכות של פצעים כרוניים, אם לא מזוהים, כוללים קטיעה ומוות12.
למרות שמאמץ משמעותי הושקע בהבנת האופן שבו מתפתחים פצעים כרוניים בבני אדם, עדיין לא ברור כיצד ומדוע פצעים כרוניים יוצרים. ניסויים לחקר מנגנוני הריפוי לקויי קשה לנהל בבני אדם, והפצע מומחים ריפוי רק לראות חולים עם פצעים כרוניים שכבר הגיעו המתעד במשך שבועות חודשים. לכן, מומחים אינם מסוגלים ללמוד מה התהליכים השתבש להוביל את הפצע להתפתח להיות כרונית2. יש חוסר במודלים של בעלי חיים אשר לכידה של המורכבות של פצעים כרוניים אנושיים. עד שהמודל שלנו פותח, לא היה. מודל למחקרים כרוניים בפצע
מודל הפצע כרונית פותחה בעכברים כי יש מוטציה בקולטן לפטין (db/db-/-)13. עכברים אלה הם שמנים, סוכרתית, יש לקויי ריפוי, אבל לא לפתח פצעים כרוניים14. רמת הגלוקוז בדם בממוצע סביב 200 mg/dL, אבל יכול להיות גבוה כמו 400 mg/dL15. כאשר רמות גבוהות של לחץ חמצוני (OS) ברקמת הפצע הם המושרה מיד לאחר פצעו, הפצע הופך כרונית16. Db/db-/- פצעים נחשבים כרוניים על ידי 20 ימים ונשארים פתוחים במשך 60 ימים או יותר. ביוilm המיוצר על ידי חיידקים ניתן לראות מתפתח מתחיל שלושה ימים לאחר פציעתו; ביוilm בוגר ניתן לראות 20 יום לאחר פציעתו ונמשך עד לסגירת הפצע. החיידק היוצר של הביוilm שאנו מוצאים בעכברים האלה נמצא גם בפצעים כרוניים של האדם.
מתח חמצוני נגרמת על ידי טיפול בפצעים עם שני מעכבי של אנזימים נוגדי חמצון, קטלאז ו peroxidase גלוטתיון, שני אנזימים עם היכולת לשבור חמצן מימן. תחמוצת המימן הוא מינים חמצן תגובתי יכול לגרום נזק הסלולר דרך חמצון של חלבונים, שומנים, ו-DNA. קטלאז מזרז את הפירוק של חמצן מימן לתוך כימיקלים מזיקים פחות חמצן ומים. 3-אמינו -1, 2, 4-triazole (עץ) מעכב קטלאז על ידי קשירה באופן ספציפי ומלא למרכז הפעיל של האנזים, הפעלת אותו17,18,19. עץ שימש כדי לחקור את ההשפעות של לחץ חמצוני הן בתוך מבחנה ב vivo דרך עיכוב של קטלאז20,21,22,23,24. גלוטתיון peroxidase מזרז את הפחתת מי חמצן דרך נוגדי חמצון, גלוטתיון, והוא אנזים חשוב המגן על התא נגד לחץ חמצוני25. חומצה מרקוטוקסינית (מס א) מעכבת גלוטתיון peroxidase על ידי קשירה לאתר הפעיל של האנזים הכולל את האנזימים באמצעות הפעלה זו, שאינה מפעילה26. מס ' א נעשה שימוש כדי ללמוד את ההשפעות של לחץ חמצוני בתוך מבחנה ב vivo כמו גם20,27,28.
זה מודל הרומן של פצעים כרוניים הוא מודל רב עוצמה ללמוד כי זה מניות רבות מאותן תכונות שנצפו בפצעים כרוניים סוכרתית האדם, כולל דלקת ממושכת מערכת הפעלה מוגברת והיווצרות ביוilm טבעי מ-microbiome העור. הפצעים לקויי המגע העורי-באפידרמיס, תצהיר מטריצה חריגה, אנגיוגנזה עני והוא ניזוק. פצעים כרוניים יתפתחו בעכברים זכריים ונקביים, כך שניתן יהיה להשתמש בשני המינים כדי ללמוד פצעים כרוניים. לכן, מודל הפצע הכרוני יכול לתרום באופן משמעותי לקידום ההבנה הבסיסית של אופן התחלת הפצעים. שימוש זה מודל הפצע כרונית יכול לספק תשובות לשאלות בסיסיות על איך המתעד הוא יזם/מושגת באמצעות תרומות מן הפיזיולוגיה של ריפוי פצע לקוי ואת המיקרובידום של המארח.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:795px;" width="794">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:308px;">B6.BKS(D)-Leprdb/J&#160;</td>
			<td style="width:176px;">The Jackson Laboratory&#160;</td>
			<td style="width:107px;">00697</td>
			<td style="width:204px;">Homozygotes and heterozygotes available&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:308px;">Nair Hair Remover Lotion with Soothing Aloe and Lanolin</td>
			<td style="width:176px;">Nair</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;">a chemical depilatory</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:308px;">Buprenex (buprenorphine HCl)</td>
			<td style="width:176px;">Henry Stein Animal Health</td>
			<td style="width:107px;">059122</td>
			<td style="width:204px;">0.3 mg/ml, Class 3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">3-Amino-1,2,4-triazole (ATZ)</td>
			<td style="width:176px;">TCI</td>
			<td style="width:107px;">A0432</td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Mercaptosuccinic acid (MSA)</td>
			<td style="width:176px;">Aldrich</td>
			<td style="width:107px;">88460</td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Phosphate buffer solution (PBS)</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;">autoclave steriled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:308px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:176px;">Henry Schein Animal Health</td>
			<td style="width:107px;">029405</td>
			<td style="width:204px;">NDC 11695-6776-2</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:308px;">Oxygen</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;">Tank must be compatible with vaporizing system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Isoflurane vaporizer</td>
			<td style="width:176px;">JA Baulch &#38; Associates&#160;</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Wahl hair clipper</td>
			<td style="width:176px;">Wahl</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;">Lithium Ion Pro</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Acu Punch 7mm skin biopsy punches</td>
			<td style="width:176px;">Acuderm Inc.</td>
			<td style="width:107px;">P750</td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:308px;">Tegaderm&#160;</td>
			<td style="width:176px;">3M</td>
			<td style="width:107px;">Ref: 1624W</td>
			<td style="width:204px;">Transparent film dressing (6 cm x 7 cm)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Heating pad</td>
			<td style="width:176px;">Conair</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;">Moist Dry Heating Pad</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:308px;">Insulin syringes</td>
			<td style="width:176px;">BD</td>
			<td style="width:107px;">329461</td>
			<td style="width:204px;">0.35 mm (28G) x 12.7 mm (1/2&#34;)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">70% ethanol</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Kimwipes</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Tweezers</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Sharp surgical scissors</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Thin metal spatula</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Tubing</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Mouse nose cone</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Gloves</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">small plastic containers</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:204px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protocol to create chronic wounds in diabetic mice

פצעים כרוניים מתפתחים כתוצאה מרגולציה פגומה בתהליכים סלולריים ומולקולריים מורכבים, המעורבים בריפוי נאות. הם משפיעים על ~ 6.5 M אנשים ועלות ~ $40B/שנה בארה ב בלבד. למרות שמאמץ משמעותי הושקע בהבנת האופן שבו מתפתחים פצעים כרוניים בבני אדם, שאלות עקרוניות נותרו ללא מענה. לאחרונה, פיתחנו מודל העכבר הרומן עבור פצעים כרוניים סוכרתית שיש להם מאפיינים רבים של פצעים כרוניים אנושית. באמצעות db/db-/- עכברים, אנחנו יכולים ליצור פצעים כרוניים על ידי גרימת רמות גבוהות של מתח חמצוני (OS) ברקמת הפצע מיד לאחר פצעו, באמצעות טיפול חד פעמי עם מעכבי ספציפיים אנזימים נוגדי חמצון הקטלאז ו peroxidase גלוטתיון. פצעים אלה יש רמות גבוהות של מערכת ההפעלה, לפתח באופן טבעי ביוilm, להיות כרונית לחלוטין בתוך 20 ימים לאחר הטיפול יכול להישאר פתוח יותר עבור יותר מ 60 ימים. מודל זה הרומן יש תכונות רבות של פצעים כרוניים סוכרתית בבני אדם ולכן יכול לתרום באופן משמעותי כדי לקדם את ההבנה הבסיסית של איך פצעים הופכים כרוניים. זוהי פריצת דרך גדולה כי פצעים כרוניים בבני אדם לגרום לכאב ומצוקה משמעותיים לחולים והתוצאה קטיעה אם לא פתורות. כמו-כן, פצעים אלה יקרים מאוד וצורכים זמן רב לטיפול, ומובילים לאובדן משמעותי של הכנסה אישית למטופלים. התקדמויות בתחום זה של המחקר באמצעות השימוש במודל הפצע הכרוני שלנו יכול לשפר באופן משמעותי את טיפול בריאות עבור מיליונים הסובלים תחת מצב זה מתישה. בפרוטוקול זה, אנו מתארים בפירוט רב את ההליך לגרום פצעים חריפה להיות כרונית, אשר לא נעשה בעבר.

איור 5 מתאר דוגמה של פצע ללא טיפול מעכבי מתקדם לעבר סגירת הפצע פציעה עם טיפול מעכבי מתקדם לקראת הכרובית. החבישה השקופה נותרה במקומה על הפצע הכרוני, כך שניתן יהיה לראות את הצטברות הנוזלים וההצטברות.
טקס חניכה כרונית מתרחש ב?...

Watch this Scientific Journal Video about Protocol to Create Chronic Wounds in Diabetic Mice at JoVE.com

Protocol to Create Chronic Wounds in Diabetic Mice

פצעים כרוניים מפותחים פציעות חריפה על מודל עכבר סוכרתית על ידי גרימת רמות גבוהות של לחץ חמצוני לאחר פצע מלאה בעובי עורית. הפצע מטופל במעכבי לקטלאז ולperoxidase גלוטתיון, והתוצאה היא ריפוי לקוי ופיתוח של ביו, על ידי חיידקים המצויים במיקרובידום העור.

פרוטוקול יצירת פצעים כרוניים עכברים סוכרתית

Chronic wounds develop as a result of defective regulation in one or more complex cellular and molecular processes involved in proper healing. They impact ...

מודל עכבר זה יכול לעזור לענות על שאלות בתחום הרפואי של כרוניקה פצע. היתרון העיקרי של מודל זה הוא שהפצעים הכרוניים בעכברים מחקים היבטים רבים של הפצעים הכרוניים בבני אדם. כדי להתחיל, למקם את העכבר על משטח נקי ולהחזיק אותו במקום על ידי צביטת הבסיס של הזנב שלה.ואז להכין את קוצץ השיער להיות מוכן למשוך אותם במהירות משם אם העכבר עושה תנועות פתאומיות. לגלח את כל הגב מהצוואר לזנב כולל סביב הזנב. הפעל קלות את הלהב כנגד כיוון צמיחת השיער עבור החתך היעיל ביותר.אין ללחוץ על קוצץ עמוק לתוך העור כמו זה יכול חבורה או לחתוך. לאחר מכן, להכין את העור ליישום של דלפילטור. מרטבים את העור במגבת נייר ספוגה במים כדי למנוע כוויות כימיות.לחץ קלות עם מספיק לחץ כדי להרטיב את השיער לחתוך כלפי מטה על העור. לאחר מכן, בעוד העור רטוב, לשפשף גוש קטן של קרם depilatory לאזור מגולח במשך 15 עד 20 שניות. לאחר החלת, תן את החלקם להגיב עם העור במשך 20 עד 45 שניות.לפני שטיפה את ההקרבה, קלות לנגב קצת קצת תיבה במקומות שונים כדי לבדוק את התגובה. אם העור ורוד וחסר שיער, התגובה הושלמה. לאחר מכן, אחז בעכבר כדי לשטוף אותו.באמצעות היד הלא דומיננטית עם האגודל לחץ לאורך בסיס הזנב שלה על כף היד ולסגור את האצבעות האחרות. ואז עם האף של העכבר למעלה והתרחק מהמים, תן למים לדרוס את גבו של החיה. ואז במהירות, אבל בעדינות, לשפשף את החלק האחורי של העכבר עם היד השנייה כדי לשטוף את החלק.לאחר הסרת כל קרם depilatory, לייבש את העור עם מגבת נייר. חשוב לא להחיל תיבה על האוזניים, הזנב, או בכל מקום ליד הפנים. אם זה צריך לקרות, מיד לנגב את קרם עם מגבת רטובה ולאחר מכן להפעיל מים על העכבר כדי למנוע נזק לאזורים אלה.אם כל כתמים כהים הם הבחינו לאחר השימוש קרם, להחיל מחדש את השמנת לאזורים אלה. כתמי העור הכהים יגדלו שיער מהר יותר לאורך כל הניסוי. אז תקצר את השיער כל שלושה עד חמישה ימים כשצריך.תיקון או שניים כי הם לא מעל אתר הפציעה מקובל, אבל אם החלק האחורי של העכבר יש כתמים כהים יותר, לא להשתמש בו עבור מודל פצע כרוני. לאחר הסרת השיער, בית העכבר לבד לפחות יום אחד לפני הפציעה כי העור יהיה רגיש מדי מן החלקם depilatory. 30 דקות לפני הניתוח, להזריק לעכבר עם 120 microliters של buprenorphine תוך-אפית PBS סטרילי.כל אמצעי האחסון בהליך זה מניחים עכבר של 60 גרם. 20 דקות לפני הניתוח, להזריק את העכבר עם 480 microliters של ATZ תוך-אפית PBS סטרילי. לפצל את הנפח משני צדי הבטן.לאחר מתן ATZ, מניחים את העכבר במיכל פלסטיק קטן על גבי כרית חימום חם עד הניתוח מתחיל. מכסים את המיכל הקטן במגבת נייר כדי לעזור להכיל את החום. העכבר צריך להירגע כשהוא מתחמם.לאחר אישור מצב הרדמה, להמשיך עם הפציעה. כדי להתחיל את הליך הפציעה, לרסס מגבון כימי עם 70% אתנול כדי לנגב את החלק האחורי של העכבר כדי לנקות את אתר הפצע ואת פני העור. אין לנגב יתר על המידה או שיהיה סיכון להרוג את החיידקים הקיימים על העור.ההצלחה של מודל הפצע הכרוני מסתמכת על מצבים לא סטריליים. עכברים אלה אינם נקיים מחיידקים ושוהים בויבריום קונבנציונלי. המיקרוביום החיידקי השוכן על העור חיוני לייזום ופיתוח של פצעים כרוניים לאחר הטיפול במעכבים של אנזימים נוגדי חמצון.עכשיו תשקול איפה המקום הפצע. באופן אידיאלי, להשתמש בצד הגבי של העכבר מרוכז הרחק כתמים כהים של העור. עכשיו לבצע את הפציעה להליך ההלבשה ב 30 עד 45 שניות.תחילה לחץ קלות על אגרוף ביופסיה של עור באורך שבעה מילימטרים אל אתר הפצע הרצוי וסובב את האגרוף עמוק מספיק כדי להשאיר רושם של האגרוף. ואז להוציא את העור קווי המתאר על ידי משיכת את מרכז האגרוף עם פינצטה וחיתוך לאורך קווי המתאר עם מספריים כירורגיים. לאחר השלמת, לכסות את הפצע בחוזקה עם חצי חתיכת פיסת סרט שקוף ההלבשה.בתוך 10 דקות של פציעה, להחיל aliquot 60 microliter של MSA ב PBS סטרילי ולהפקיד MSA topically על הפצע. מאוחר יותר, שש שעות לאחר הניתוח, לנהל עוד עושה של buprenorphine. מינונים נוספים עשויים להינתן לפי הצורך.חניכת פצע כרונית מתרחשת בפחות משש שעות ושולי הפצע משתנים בעליל מלחץ חמצוני. פצע כרוני הוא פצע שנותר פתוח, מוגדל בהשוואה לפצע הראשוני ומכיל ביופילם. לאחר 20 יום, הפצע הוא כרוני לחלוטין.ביופילם יוצר חיידקים השולטים באתר הפצע כוללים פסאודומונס aeruginosa, Cloacae Enterobacter, מינים שונים Staphylococcus ו Corynebacterium. חיידקים אלה נמצאים גם בפצעים כרוניים אנושיים. לאחר צפייה בסרטון זה אתה צריך הבנה טובה של איך ליצור פצעים כרוניים בעכברים.לאחר הקמת פצעים כרוניים אלה, אז אתה יכול להשתמש בהם כדי לחקור רבים של מנגנונים מולקולריים הסלולר מעורב בייזום כרוניקה פצע.

Research

JoVE Journal

Medicine

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

פרוטוקול ליפרתרמיה הארוכה משך כל גוף בעכברים

Hyperthermia is a general term used to define the increase in core body temperature above normal. It is often used to describe the increased core body ...

Neo-Islet Formation in Liver of Diabetic Mice by Helper-dependent Adenoviral Vector-Mediated Gene Transfer

כינון ניאו איילט בכבד של עכברים סוכרתיים על ידי העברת גני Helper תלוי adenoviral וקטור בתיווך

Type 1 diabetes is caused by T cell-mediated autoimmune destruction of insulin-producing cells in the pancreas. Until now insulin replacement is still the ...

Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds

איסוף ומדידת מגשרי ביוכימיים Exudate פצע בפצעי ניתוח

We describe a methodology by which we are able to collect and measure biochemical inflammatory and nociceptive mediators at the surgical wound site. ...

Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

הערכה של ריקון קיבה בעכברים סוכרתיים ללא שימוש בשמנים [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-octanoic בדיקת נשימת חומצה

Gastric emptying studies in mice have been limited by the inability to follow gastric emptying changes in the same animal since the most commonly used ...

Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol

Parabiosis בעכברים: פרוטוקול מפורט

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

תגובות שתן בשלפוחית ​​השתן ההתנפחות העוררת Visceromotor כמודל לשלפוחית ​​שתן כאב בעכברים

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

משלוח שחרור איטי תרופות דרך Elvax 40W לרשתית העכברוש: ​​השלכות לטיפול במצבים כרוניים

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

A Simple Mechanical Procedure to Create Limbal Stem Cell Deficiency in Mouse

נוהל מכני פשוט ליצור מחסור בתאי גזע limbal עכבר

Limbal stem cell deficiency (LSCD) is a state of malfunction or loss of limbal epithelial stem cells, after which the corneal epithelium is replaced with ...

Two Techniques to Create Hypoparathyroid Mice: Parathyroidectomy Using GFP Glands and Diphtheria-Toxin-Mediated Parathyroid Ablation

שתי טכניקות כדי ליצור עכברים Hypoparathyroid: Parathyroidectomy שימוש בלוטות GFP ודיפטריה-רעלן בתיווך יותרת התריס אבלציה

Hypoparathyroidism (HP) is a disorder characterized by low levels of PTH which lead to hypocalcemia, hyperphosphatemia, and low bone turnover. The most ...

Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure

דור של מחלת ריאות חסימתית כרונית מודל בעכברים על ידי חשיפה חוזרת ונשנית האוזון

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is characterized by persistent airflow limitation and lung parenchymal destruction. It has a very high ...