Name: fabrication of gradient nanopattern by thermal nanoimprinting technique and screening of the response of human endothelial colony-forming cells
Uploaded: 2018-07-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Gradient Nanopattern by Thermal Nanoimprinting Technique and Screening of the Response of Human Endothelial Colony-forming Cells at JoVE.com

이 작품은 기본적인 과학 연구 프로그램을 통해 국가 연구 재단의 한국 (NRF)는 교육, 과학 및 기술 (MEST) [NRF-2015R1D1A1A01060397] 및 바이오 의료 기술 개발 자금에 의해 지원 되었다 과학기술부, 정보 통신 및 미래 계획 [NRF-2017M3A9C6029563]에 의해 투자 하는 NRF의 프로그램.

이 연구는 고려 대학교 안 암 병원 (IRB No.에서 기관 검토 위원회에 의해 승인 되었다 ED170495)입니다. 모든 절차는 헬싱키 선언 및 나중의 개정에 따라 실행 되었다.
1. 알루미늄 (Al) 전해 연마에 의해 기판의 준비
주의: 연마 솔루션 부식성 이며 독성이 있습니다. 니트 릴 장갑, 고글 및 실험실 외 투를 포함 한 개인 보호 장비를 착용 하십시오. 증?...

<ol>
	<li>Dalby, M. J., Gadegaard, N., Oreffo, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harnessing+nanotopography+and+integrin-matrix+interactions+to+influence+stem+cell+fate.">Harnessing nanotopography and integrin-matrix interactions to influence stem cell fate.</a> Nature materials. 13 (6), 558-569 (2014).</li><li>Qian, W., Gong, L., Cui, X., Zhang, Z., Bajpai, A., Liu, C., Castillo, A., Teo, J. C., Chen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopographic+Regulation+of+Human+Mesenchymal+Stem+Cell+Osteogenesis.">Nanotopographic Regulation of Human Mesenchymal Stem Cell Osteogenesis.</a> ACS Applied Materials &amp; Interfaces. 9 (48), 41794-41806 (2017).</li><li>Naganuma, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+cell+adhesion+force+activation+on+nano/micro-topographical+surfaces+and+temporal+dependence+of+cell+morphology.">The relationship between cell adhesion force activation on nano/micro-topographical surfaces and temporal dependence of cell morphology.</a> Nanoscale. 9 (35), 13171-13186 (2017).</li><li>Han, J., Lin, K. H., Chew, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+the+regulation+of+focal+adesions+and+cortical+actin+by+matrix+nanotopography+in+3D+environment.">Study on the regulation of focal adesions and cortical actin by matrix nanotopography in 3D environment.</a> Journal of Physics: Condensed Matter. 29 (45), 455101 (2017).</li><li>Liu, X., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+nano-biointerface+as+a+new+platform+for+guiding+cell+fate.">Three-dimensional nano-biointerface as a new platform for guiding cell fate.</a> Chemical Society Reviews. 43 (8), 2385-2401 (2014).</li><li>Turner, L. A., Dalby, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopography-potential+relevance+in+the+stem+cell+niche.">Nanotopography-potential relevance in the stem cell niche.</a> Biomaterials science. 2 (11), 1574-1594 (2014).</li><li>Driscoll, M. K., Sun, X., Guven, C., Fourkas, J. T., Losert, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+contact+guidance+through+dynamic+sensing+of+nanotopography.">Cellular contact guidance through dynamic sensing of nanotopography.</a> ACS nano. 8 (4), 3546-3555 (2014).</li><li>Yim, E. K., Darling, E. M., Kulangara, K., Guilak, F., Leong, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopography-induced+changes+in+focal+adhesions,+cytoskeletal+organization,+and+mechanical+properties+of+human+mesenchymal+stem+cells.">Nanotopography-induced changes in focal adhesions, cytoskeletal organization, and mechanical properties of human mesenchymal stem cells.</a> Biomaterials. 31 (6), 1299-1306 (2010).</li><li>Davis, G. E., Senger, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+extracellular+matrix.">Endothelial extracellular matrix.</a> Circulation research. 97 (11), 1093-1107 (2005).</li><li>Nakayama, K. H., Surya, V. N., Gole, M., Walker, T. W., Yang, W., Lai, E. S., Ostrowski, M. A., Fuller, G. G., Dunn, A. R., Huang, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoscale+patterning+of+extracellular+matrix+alters+endothelial+function+under+shear+stress.">Nanoscale patterning of extracellular matrix alters endothelial function under shear stress.</a> Nano letters. 16 (1), 410-419 (2015).</li><li>Bettinger, C. J., Zhang, Z., Gerecht, S., Borenstein, J. T., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+in+vitro+capillary+tube+formation+by+substrate+nanotopography.">Enhancement of in vitro capillary tube formation by substrate nanotopography.</a> Advanced materials. 20 (1), 99-103 (2008).</li><li>Katz, B. Z., Zamir, E., Bershadsky, A., Kam, Z., Yamada, K. M., Geiger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+state+of+the+extracellular+matrix+regulates+the+structure+and+molecular+composition+of+cell-matrix+adhesions.">Physical state of the extracellular matrix regulates the structure and molecular composition of cell-matrix adhesions.</a> Molecular biology of the cell. 11 (3), 1047-1060 (2000).</li><li>Deanfield, J. E., Halcox, J. P., Rabelink, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+dysfunction.">Endothelial function and dysfunction.</a> Circulation. 115 (10), 1285-1295 (2007).</li><li>Tajima, S., Chu, J., Li, S., Komvopoulos, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+regulation+of+endothelial+cell+adhesion,+spreading,+and+cytoskeleton+on+low-density+polyethylene+by+nanotopography+and+surface+chemistry+modification+induced+by+argon+plasma+treatment.">Differential regulation of endothelial cell adhesion, spreading, and cytoskeleton on low-density polyethylene by nanotopography and surface chemistry modification induced by argon plasma treatment.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 84 (3), 828-836 (2008).</li><li>Mohiuddin, M., Pan, H. A., Hung, Y. C., Huang, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+growth+and+inflammatory+response+of+macrophages+and+foam+cells+with+nanotopography.">Control of growth and inflammatory response of macrophages and foam cells with nanotopography.</a> Nanoscale research letters. 7 (1), 394 (2012).</li><li>Kyle, D. J., Oikonomou, A., Hill, E., Bayat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+functional+evaluation+of+biomimetic+silicone+surfaces+with+hierarchical+micro/nano-topographical+features+demonstrates+favourable+in+vitro+foreign+body+response+of+breast-derived+fibroblasts.">Development and functional evaluation of biomimetic silicone surfaces with hierarchical micro/nano-topographical features demonstrates favourable in vitro foreign body response of breast-derived fibroblasts.</a> Biomaterials. 52, 88-102 (2015).</li><li>Seo, H. R., Joo, H. J., Kim, D. H., Cui, L. H., Choi, S. C., Kim, J. H., Cho, S. W., Lee, K. B., Lim, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanopillar+Surface+Topology+Promotes+Cardiomyocyte+Differentiation+through+Cofilin-Mediated+Cytoskeleton+Rearrangement.">Nanopillar Surface Topology Promotes Cardiomyocyte Differentiation through Cofilin-Mediated Cytoskeleton Rearrangement.</a> ACS Applied Materials &amp; Interfaces. 9 (20), 16803-16812 (2017).</li><li>Hwang, J. H., Lee, D. H., Byun, M. R., Kim, A. R., Kim, K. M., Park, J. I., Oh, H. T., Hwang, E. S., Lee, K. B., Hong, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopological+plate+stimulates+osteogenic+differentiation+through+TAZ+activation.">Nanotopological plate stimulates osteogenic differentiation through TAZ activation.</a> Scientific Reports. 7 (1), 3632 (2017).</li><li>Bae, D., Moon, S. H., Park, B. G., Park, S. J., Jung, T., Kim, J. S., Lee, K. B., Chung, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopographical+control+for+maintaining+undifferentiated+human+embryonic+stem+cell+colonies+in+feeder+free+conditions.">Nanotopographical control for maintaining undifferentiated human embryonic stem cell colonies in feeder free conditions.</a> Biomaterials. 35 (3), 916-928 (2014).</li><li>Cui, L. H., Joo, H. J., Kim, D. H., Seo, H. R., Kim, J. S., Choi, S. C., Huang, L. H., Na, J. E., Lim, I. R., Kim, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manipulation+of+the+response+of+human+endothelial+colony-forming+cells+by+focal+adhesion+assembly+using+gradient+nanopattern+plates.">Manipulation of the response of human endothelial colony-forming cells by focal adhesion assembly using gradient nanopattern plates.</a> Acta biomaterialia. 65, 272-282 (2017).</li><li>Lee, W., Park, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porous+anodic+aluminum+oxide:+anodization+and+templated+synthesis+of+functional+nanostructures.">Porous anodic aluminum oxide: anodization and templated synthesis of functional nanostructures.</a> Chemical reviews. 114 (15), 7487-7556 (2014).</li><li>Masuda, H., Fukuda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ordered+metal+nanohole+arrays+made+by+a+two-step+replication+of+honeycomb+structures+of+anodic+alumina.">Ordered metal nanohole arrays made by a two-step replication of honeycomb structures of anodic alumina.</a> science. 268 (5216), 1466 (1995).</li><li>Masuda, H., Satoh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+gold+nanodot+array+using+anodic+porous+alumina+as+an+evaporation+mask.">Fabrication of gold nanodot array using anodic porous alumina as an evaporation mask.</a> Japanese Journal of Applied Physics. 35 (1B), L126 (1996).</li><li>Zaraska, L., Sulka, G. D., Jasku&#322;a, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+n-alcohols+on+porous+anodic+alumina+formed+by+self-organized+two-step+anodizing+of+aluminum+in+phosphoric+acid.">The effect of n-alcohols on porous anodic alumina formed by self-organized two-step anodizing of aluminum in phosphoric acid.</a> Surface and Coatings Technology. 204 (11), 1729-1737 (2010).</li><li>Yang, K. Y., Kim, J. W., Byeon, K. J., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+deposition+of+the+silver+nano-particles+using+patterned+the+hydrophobic+self-assembled+monolayer+patterns+and+zero-residual+nano-imprint+lithography.">Selective deposition of the silver nano-particles using patterned the hydrophobic self-assembled monolayer patterns and zero-residual nano-imprint lithography.</a> Microelectronic engineering. 84 (5), 1552-1555 (2007).</li><li>Park, B. G., Lee, W., Kim, J. S., Lee, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superhydrophobic+fabrication+of+anodic+aluminum+oxide+with+durable+and+pitch-controlled+nanostructure.">Superhydrophobic fabrication of anodic aluminum oxide with durable and pitch-controlled nanostructure.</a> Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects. 370 (1), 15-19 (2010).</li></ol>

종종는 AAO의 제조 결함 균열, 모 공, 그리고 굽기의 불규칙 한 형태에서에서 겪고 있다. 이러한 결함에 대 한 주요 이유 알루 되 고 금속 기판의 자연과 전해질21의 저항력에 의해 강하게 영향을 전해 쇠 약을 이라고 합니다. 전해질의 저항력의 온도 따라 다르며, 전극에서 지속적으로 열 제거 이므로 이러한 높은 전압 아노다이징 조건에서 안정적으로 전해질의 locational 온도 유지 ...

최근, 표면 지형의 물리적 자극에 의해 세포의 응답 세포 공학1,2,,34의 분야에서 각광 되어 있다. 따라서, 더 많은 관심은 셀 첨부 파일 표면5에서 3 차원 nanostructures에 집중 되었습니다. Integrin은 세포의 표면 인식 장치, 메카노 변환6ECM의 마이크로-나노 구조에 의해 구동 하는 물리적 자극 전송으로 보고 되었습니다. 이 기계적인 자극 연락처 안내7 셀 동작을 조절 하 고 초점 유착 및 강성8셀 모양을 변경 하려면 cytoskeletal 개편을 유도 한다.
본문에서 인간의 내 피 조상 세포 (hEPCs) 주변 ECM9의 microenvironment와 밀접 하 게 상호 작용합니다. 이 혈액 흐름10에서 파생 된 전단 응력으로 ECM의 물리적 상태 특정 세포-매트릭스 접착 복잡 한 형성을 위한 중요 한 매개 역할을 나타냅니다. 그것은 표면 nanotopography hEPCs11 의 광범위 한 모 세관 튜브 네트워크의 생체 외에서 형성을 강화 하 고 역 기능 기질을 인식 하는 hEPCs를 가능 하 게 하 고 촉진 ECM/바이오 수용 성 요소가 시스템 결합을 보고합니다 상처 치유12,13. 그럼에도 불구 하 고, ECM과 hEPCs 사이의 관계는 명확 하 게 이해 되지 않습니다.
많은 연구 자들은 세포 반응과 다른 기판14,,1516에서 실제 신호 사이의 관계를 명확 하 게 하려고, 이러한 연구는 nanostructure의 고정된 크기에만 사용 또는 nanopatterns nanostructure 및 셀 동작의 크기 사이의 관계를 명료 하 게 하는 제한이 불규칙 한 준비. 여기에 문제 적당 한 도구는 nanostructure의 최적의 크기를 찾습니다 기존의 지루하고 반복적인 접근을 대체할 수 있는 세포 응답을 심사의 부족 이다. 따라서, 간단한 기술은 반복 없이 물리적 stimulations에 셀 반응 검사 필요 합니다.
여기, 우리는 우리의 이전 보고서17,,1819 에 그라데이션 nanopattern 있는 배열된 nanopillars의 직경은 점차적으로 증가 생산 하기 위해 사용 되는 방법을 설명 합니다. 또한, 우리는 또한 배양 세포에 물리적 자극의 효과 결정 하기 위해 그라데이션 nanopattern 접시에 hECFCs의 동작을 분석 하는 방법을 설명 합니다. 온화한 양극, 점진적 에칭, 그리고 반대로 고정 레이어 코팅 방법 그라데이션 AAO 금형 제작에 사용 되었다. 리소 그래피 기술을 각 인 열을 채택 하 여 동일한 폴리스 티 렌 그라데이션 nanopatterns는 비용 효율적이 고 손쉬운 방법으로 생산 되었다. 그라데이션 nanopatterns를 사용 하 여, 그것은 nanostructure의 크기는 셀 동작에 큰 영향을 실험 한 세트에 결정 가능 합니다. 우리는이 그라데이션 nanopattern 혈액 파생 된 hECFC 또는 다른 셀과 nanostructures의 다양 한 크기 간의 상호 작용 메커니즘을 이해에 도움이 될 것입니다 기대 합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Perchloric acid 60%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>6512-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol, absolute 99.9%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>4118-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric acid 85%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>6532-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl alcohol 99.5%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>5558-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromium(VI) oxide</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>2558-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfuric acid 95%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>7781-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide 30%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>4104-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-hexane 95%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>4081-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toluene 99.5%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>8541-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(heptadecafluoro-1,1,2,2,-tetrahydrodecyl)dimethylchlorosilane</td>
			<td>Gelest</td>
			<td>SIH5840.4</td>
			<td>Moisture sensitive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methoxynonafluorobutane 99%</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>464309</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen solution</td>
			<td>Stemcell</td>
			<td>#4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>G1890</td>
			<td>Protein coating solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque</td>
			<td>GE Heathcare</td>
			<td>17-1440-03</td>
			<td>Hydrophilic polysaccharide solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGM-2MV</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-3202</td>
			<td>Endothelial cell expansion medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12483-020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>G5882-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmium tetroxide</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>201030-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexamethyldisilazane</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>440191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>X100-100ML</td>
			<td>Octylphenol ethoxylate&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>26050-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-human vinculin primary antibody&#160;</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>V9131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F-actin probe</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Fluorescence-conjugated phalloidin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488-conjugated anti-mouse&#160;IgG antibody</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A11001</td>
			<td>Fluorescence-conjugated secondary antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#39;,6-diamidino-2-phenylindole&#160;</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>D9542</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>S3023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-human vWF primary antibody&#160;</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>A0082</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-human&#160;CD144 primary antibody&#160;</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>#555661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eponate 12&#8482; Embedding Kit, with BDMA</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>18012</td>
			<td>Epoxy resin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uranyl Acetate, 25g</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>19481</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lead Citrate, Trihydrate, 10g</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>19312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra pure aluminum plate</td>
			<td>Goodfellow</td>
			<td>26050-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polystyrene sheet</td>
			<td>Goodfellow</td>
			<td>ST313120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8.0&#34; silicon wafer</td>
			<td>Siltron</td>
			<td>29-01024-03</td>
			<td>Single side polished, 725 &#181;m thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum desiccator, 4.4 L</td>
			<td>Kartell</td>
			<td>KA.230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum pump</td>
			<td>Vacuumer</td>
			<td>V3.VOP100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power supply</td>
			<td>Unicorntech</td>
			<td>UDP-3003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer</td>
			<td>Daihan scientific</td>
			<td>SL.SMS03022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Overhead stirrer</td>
			<td>Daihan scientific</td>
			<td>HT120DX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circulator</td>
			<td>Daihan scientific</td>
			<td>WCR-P12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Linear moving stage</td>
			<td>Zaber</td>
			<td>A-LSQ300A-E01-KT07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angle bracket, 90 degrees</td>
			<td>Zaber</td>
			<td>AB90M</td>
			<td>Accessory of the linear moving stage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMP forcep, 145 mm</td>
			<td>Vitlab</td>
			<td>67995</td>
			<td>Nonmetallic tweezer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PTFE beaker, 250 mL</td>
			<td>Cowie</td>
			<td>CW007.25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>Branson</td>
			<td>B2510MTH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCB cutter</td>
			<td>Hozan Tool Industrial</td>
			<td>K-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoimprint device</td>
			<td>Nanonex</td>
			<td>NX-2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen plasma generator</td>
			<td>Femto Science</td>
			<td>CUTE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low temperature sterilizer</td>
			<td>Lowtem</td>
			<td>Crystal 50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Incubator</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MCO-18AC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confoal laser scanning microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>LSM700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning electron microscope</td>
			<td>JEOL</td>
			<td>JSM6701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transmission electron microscope</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>H-7500</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fabrication of gradient nanopattern by thermal nanoimprinting technique and screening of the response of human endothelial colony-forming cells

Nanotopography 다양 한 세포 외 매트릭스 (ECMs) 몸 주위에서 찾을 수 있습니다 그리고 세포 반응에 중요 한 규제 조치를 알려져 있습니다. 그러나,는 nanostructure의 크기와 적절 한 검사 도구의 부족으로 인하여 세포의 응답 사이의 관계를 결정 하기가 어렵습니다. 여기, 우리가 세포 응답의 조작에 대 한 재현 가능 하 고 비용 효율적인 그라데이션 nanopattern 번호판의 개발을 보여줍니다. 마스터 금형, 증가 직경 범위 [120-200 nm (GP 120/200), 200-280 nm (GP 200/280), 280-360 nm (GP 280/360)]의 nanopillars 그라데이션 nanopattern 접시로 양극 알루미늄 산화물 (AAO)을 사용 하 여 열 기술을 각 인에 의해 조작 했다. 이 그라데이션 nanopattern 번호판 nanotopography ECM에서의 다양 한 크기를 모방 하도록 설계 되었습니다 그리고 인간 내 피 식민지 형성 세포 (hECFCs)의 응답에 사용 되었다. 이 프로토콜에서 우리 세포 공학, 인간 주변 혈액에서 hECFCs를 재배 하 고 hECFCs nanopattern 접시에 배양의 기술에 대 한 그라데이션 nanopattern 번호판 조작의 단계별 절차를 설명 합니다.

그림 1 에서는 그들의 형식 및 위치에 따라 조작된 그라데이션 AAO 금형의 SEM 이미지. 그림 2 는 일반 둥근 nanopillars와 그라데이션 nanopattern 플레이트의 SEM 이미지 이며 그림 3 nanopillar 직경의 정량화 데이터. 표 1 조작된 nanopillars의 특성을 나열합니다.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-pa...

Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Gradient Nanopattern by Thermal Nanoimprinting Technique and Screening of the Response of Human Endothelial Colony-forming Cells at JoVE.com

Fabrication of Gradient Nanopattern by Thermal Nanoimprinting Technique and Screening of the Response of Human Endothelial Colony-forming Cells

여기, 우리는 열 nanoimprinting 통해 그라데이션 nanopattern 판의 제조와는 nanostructures 인간의 내 피 조상 세포의 응답을 검사 하는 방법에 대 한 프로토콜을 제시. 설명 된 기술을 사용 하 여 물리적 자극에 의해 셀 동작을 조작할 수 있는 비 계를 생산 가능 하다.

열 Nanoimprinting 기술과 인간의 내 피 식민지 형성 세포의 응답의 심사에 의해 그라데이션 Nanopattern의 제조

Nanotopography can be found in various extracellular matrices (ECMs) around the body and is known to have important regulatory actions upon cellular ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Fabrication of Micro-tissues using Modules of Collagen Gel Containing Cells

콜라겐의 모듈을 사용하여 미세 조직의 제조가 포함 세포를 젤

This protocol describes the fabrication of a type of micro-tissues called modules.  The module approach generates uniform, scalable and vascularized ...

연구

생체공학

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

입체 잉크젯 인쇄 기술을 사용하여 인간의 연골 조직 제작

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Polymeric Microneedle Array Fabrication by Photolithography

포토 리소그래피에 의해 고분자 미세 바늘 어레이 제작

This manuscript describes the fabrication of polymeric microneedle (MN) arrays by photolithography. It involves a simple mold-free process by using a ...

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method

용매를 이용한 지질 이중층 (SALB) 방법에 의해 생체막 제작

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Fabrication of Decellularized Cartilage-derived Matrix Scaffolds

Decellularized 연골 파생 매트릭스 건설 기계 제조

Osteochondral defects lack sufficient intrinsic repair capacity to regenerate functionally sound bone and cartilage tissue. To this extent, cartilage ...

Standardized and Scalable Assay to Study Perfused 3D Angiogenic Sprouting of iPSC-derived Endothelial Cells In Vitro

iPSC 유래 내피 세포의 퍼퓨비드 3D 혈관신생 발아연구를 위한 표준화 및 확장 성 분석

Pre-clinical drug research of vascular diseases requires in vitro models of vasculature that are amendable to high-throughput screening. However, current ...

Applications for Open Source Microplate-Compatible Illumination Panels

오픈 소스 마이크로플레이트 호환 조명 패널용 애플리케이션

Microplates are commonly used in the modern laboratory environment for a wide variety of tasks both in small-scale laboratory benchtop operations as well ...

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

생체 재료 멤브레인에 인간과 양 각막 내피 세포 층의 성장

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Preclinical Cardiac Electrophysiology Assessment by Dual Voltage and Calcium Optical Mapping of Human Organotypic Cardiac Slices

인간 조직형 심장 슬라이스의 이중 전압 및 칼슘 광학 매핑에 의한 전임상 심장 전극생리학 평가

Human cardiac slice preparations have recently been developed as a platform for human physiology studies and therapy testing to bridge the gap between ...

Scalable Generation of Mature Cerebellar Organoids from Human Pluripotent Stem Cells and Characterization by Immunostaining

인간 다능성 줄기 세포에서 성숙한 소뇌 오르가노이드의 확장 가능한 생성 및 면역 염색에 의한 특성화

The cerebellum plays a critical role in the maintenance of balance and motor coordination, and a functional defect in different cerebellar neurons can ...