Name: fabrication of gradient nanopattern by thermal nanoimprinting technique and screening of the response of human endothelial colony-forming cells
Uploaded: 2018-07-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Gradient Nanopattern by Thermal Nanoimprinting Technique and Screening of the Response of Human Endothelial Colony-forming Cells at JoVE.com

Эта работа была поддержана базовой программы исследований науки через национальных исследований фонда из Кореи (NRF) финансируется министерством образования, науки и технологии (MEST) [СР 2015R1D1A1A01060397] и био и медицинской технологии развития Программа финансируется министерством науки, ИКТ и будущего планирования [СР 2017M3A9C6029563] СР НАТО.

Это исследование был одобрен Советом по рассмотрению институциональных больнице Анам университета Кореи (IRB № ED170495). Все процедуры были проведены в соответствии с Хельсинкской декларации и последующих поправок к нему.
1. подготовка субстрата алюминия (Al), электрополировк?...

<ol>
	<li>Dalby, M. J., Gadegaard, N., Oreffo, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harnessing+nanotopography+and+integrin-matrix+interactions+to+influence+stem+cell+fate.">Harnessing nanotopography and integrin-matrix interactions to influence stem cell fate.</a> Nature materials. 13 (6), 558-569 (2014).</li><li>Qian, W., Gong, L., Cui, X., Zhang, Z., Bajpai, A., Liu, C., Castillo, A., Teo, J. C., Chen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopographic+Regulation+of+Human+Mesenchymal+Stem+Cell+Osteogenesis.">Nanotopographic Regulation of Human Mesenchymal Stem Cell Osteogenesis.</a> ACS Applied Materials &amp; Interfaces. 9 (48), 41794-41806 (2017).</li><li>Naganuma, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+cell+adhesion+force+activation+on+nano/micro-topographical+surfaces+and+temporal+dependence+of+cell+morphology.">The relationship between cell adhesion force activation on nano/micro-topographical surfaces and temporal dependence of cell morphology.</a> Nanoscale. 9 (35), 13171-13186 (2017).</li><li>Han, J., Lin, K. H., Chew, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+the+regulation+of+focal+adesions+and+cortical+actin+by+matrix+nanotopography+in+3D+environment.">Study on the regulation of focal adesions and cortical actin by matrix nanotopography in 3D environment.</a> Journal of Physics: Condensed Matter. 29 (45), 455101 (2017).</li><li>Liu, X., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+nano-biointerface+as+a+new+platform+for+guiding+cell+fate.">Three-dimensional nano-biointerface as a new platform for guiding cell fate.</a> Chemical Society Reviews. 43 (8), 2385-2401 (2014).</li><li>Turner, L. A., Dalby, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopography-potential+relevance+in+the+stem+cell+niche.">Nanotopography-potential relevance in the stem cell niche.</a> Biomaterials science. 2 (11), 1574-1594 (2014).</li><li>Driscoll, M. K., Sun, X., Guven, C., Fourkas, J. T., Losert, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+contact+guidance+through+dynamic+sensing+of+nanotopography.">Cellular contact guidance through dynamic sensing of nanotopography.</a> ACS nano. 8 (4), 3546-3555 (2014).</li><li>Yim, E. K., Darling, E. M., Kulangara, K., Guilak, F., Leong, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopography-induced+changes+in+focal+adhesions,+cytoskeletal+organization,+and+mechanical+properties+of+human+mesenchymal+stem+cells.">Nanotopography-induced changes in focal adhesions, cytoskeletal organization, and mechanical properties of human mesenchymal stem cells.</a> Biomaterials. 31 (6), 1299-1306 (2010).</li><li>Davis, G. E., Senger, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+extracellular+matrix.">Endothelial extracellular matrix.</a> Circulation research. 97 (11), 1093-1107 (2005).</li><li>Nakayama, K. H., Surya, V. N., Gole, M., Walker, T. W., Yang, W., Lai, E. S., Ostrowski, M. A., Fuller, G. G., Dunn, A. R., Huang, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoscale+patterning+of+extracellular+matrix+alters+endothelial+function+under+shear+stress.">Nanoscale patterning of extracellular matrix alters endothelial function under shear stress.</a> Nano letters. 16 (1), 410-419 (2015).</li><li>Bettinger, C. J., Zhang, Z., Gerecht, S., Borenstein, J. T., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+in+vitro+capillary+tube+formation+by+substrate+nanotopography.">Enhancement of in vitro capillary tube formation by substrate nanotopography.</a> Advanced materials. 20 (1), 99-103 (2008).</li><li>Katz, B. Z., Zamir, E., Bershadsky, A., Kam, Z., Yamada, K. M., Geiger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+state+of+the+extracellular+matrix+regulates+the+structure+and+molecular+composition+of+cell-matrix+adhesions.">Physical state of the extracellular matrix regulates the structure and molecular composition of cell-matrix adhesions.</a> Molecular biology of the cell. 11 (3), 1047-1060 (2000).</li><li>Deanfield, J. E., Halcox, J. P., Rabelink, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+dysfunction.">Endothelial function and dysfunction.</a> Circulation. 115 (10), 1285-1295 (2007).</li><li>Tajima, S., Chu, J., Li, S., Komvopoulos, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+regulation+of+endothelial+cell+adhesion,+spreading,+and+cytoskeleton+on+low-density+polyethylene+by+nanotopography+and+surface+chemistry+modification+induced+by+argon+plasma+treatment.">Differential regulation of endothelial cell adhesion, spreading, and cytoskeleton on low-density polyethylene by nanotopography and surface chemistry modification induced by argon plasma treatment.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 84 (3), 828-836 (2008).</li><li>Mohiuddin, M., Pan, H. A., Hung, Y. C., Huang, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+growth+and+inflammatory+response+of+macrophages+and+foam+cells+with+nanotopography.">Control of growth and inflammatory response of macrophages and foam cells with nanotopography.</a> Nanoscale research letters. 7 (1), 394 (2012).</li><li>Kyle, D. J., Oikonomou, A., Hill, E., Bayat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+functional+evaluation+of+biomimetic+silicone+surfaces+with+hierarchical+micro/nano-topographical+features+demonstrates+favourable+in+vitro+foreign+body+response+of+breast-derived+fibroblasts.">Development and functional evaluation of biomimetic silicone surfaces with hierarchical micro/nano-topographical features demonstrates favourable in vitro foreign body response of breast-derived fibroblasts.</a> Biomaterials. 52, 88-102 (2015).</li><li>Seo, H. R., Joo, H. J., Kim, D. H., Cui, L. H., Choi, S. C., Kim, J. H., Cho, S. W., Lee, K. B., Lim, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanopillar+Surface+Topology+Promotes+Cardiomyocyte+Differentiation+through+Cofilin-Mediated+Cytoskeleton+Rearrangement.">Nanopillar Surface Topology Promotes Cardiomyocyte Differentiation through Cofilin-Mediated Cytoskeleton Rearrangement.</a> ACS Applied Materials &amp; Interfaces. 9 (20), 16803-16812 (2017).</li><li>Hwang, J. H., Lee, D. H., Byun, M. R., Kim, A. R., Kim, K. M., Park, J. I., Oh, H. T., Hwang, E. S., Lee, K. B., Hong, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopological+plate+stimulates+osteogenic+differentiation+through+TAZ+activation.">Nanotopological plate stimulates osteogenic differentiation through TAZ activation.</a> Scientific Reports. 7 (1), 3632 (2017).</li><li>Bae, D., Moon, S. H., Park, B. G., Park, S. J., Jung, T., Kim, J. S., Lee, K. B., Chung, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotopographical+control+for+maintaining+undifferentiated+human+embryonic+stem+cell+colonies+in+feeder+free+conditions.">Nanotopographical control for maintaining undifferentiated human embryonic stem cell colonies in feeder free conditions.</a> Biomaterials. 35 (3), 916-928 (2014).</li><li>Cui, L. H., Joo, H. J., Kim, D. H., Seo, H. R., Kim, J. S., Choi, S. C., Huang, L. H., Na, J. E., Lim, I. R., Kim, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manipulation+of+the+response+of+human+endothelial+colony-forming+cells+by+focal+adhesion+assembly+using+gradient+nanopattern+plates.">Manipulation of the response of human endothelial colony-forming cells by focal adhesion assembly using gradient nanopattern plates.</a> Acta biomaterialia. 65, 272-282 (2017).</li><li>Lee, W., Park, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porous+anodic+aluminum+oxide:+anodization+and+templated+synthesis+of+functional+nanostructures.">Porous anodic aluminum oxide: anodization and templated synthesis of functional nanostructures.</a> Chemical reviews. 114 (15), 7487-7556 (2014).</li><li>Masuda, H., Fukuda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ordered+metal+nanohole+arrays+made+by+a+two-step+replication+of+honeycomb+structures+of+anodic+alumina.">Ordered metal nanohole arrays made by a two-step replication of honeycomb structures of anodic alumina.</a> science. 268 (5216), 1466 (1995).</li><li>Masuda, H., Satoh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+gold+nanodot+array+using+anodic+porous+alumina+as+an+evaporation+mask.">Fabrication of gold nanodot array using anodic porous alumina as an evaporation mask.</a> Japanese Journal of Applied Physics. 35 (1B), L126 (1996).</li><li>Zaraska, L., Sulka, G. D., Jasku&#322;a, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+n-alcohols+on+porous+anodic+alumina+formed+by+self-organized+two-step+anodizing+of+aluminum+in+phosphoric+acid.">The effect of n-alcohols on porous anodic alumina formed by self-organized two-step anodizing of aluminum in phosphoric acid.</a> Surface and Coatings Technology. 204 (11), 1729-1737 (2010).</li><li>Yang, K. Y., Kim, J. W., Byeon, K. J., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+deposition+of+the+silver+nano-particles+using+patterned+the+hydrophobic+self-assembled+monolayer+patterns+and+zero-residual+nano-imprint+lithography.">Selective deposition of the silver nano-particles using patterned the hydrophobic self-assembled monolayer patterns and zero-residual nano-imprint lithography.</a> Microelectronic engineering. 84 (5), 1552-1555 (2007).</li><li>Park, B. G., Lee, W., Kim, J. S., Lee, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superhydrophobic+fabrication+of+anodic+aluminum+oxide+with+durable+and+pitch-controlled+nanostructure.">Superhydrophobic fabrication of anodic aluminum oxide with durable and pitch-controlled nanostructure.</a> Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects. 370 (1), 15-19 (2010).</li></ol>

Изготовление AAO часто страдает от такие дефекты, как трещины, неправильной формы поры, и горения. Основная причина этих дефектов называется электролитической пробоя, которая сильно зависит от характера металлические субстраты анодированный и сопротивление электролита21. ?...

Недавно реакция клеток по физической стимуляции топографии поверхности была освещена в поле ячейки инженерных1,2,3,4. Таким образом больше внимания было уделено трехмерной наноструктур на поверхности клеток вложений5. Сообщается, что Интегрин, который является устройством поверхности признание ячейки, передает физический раздражитель, управляемый микро нано составами ECM-механо трансдукция6. Это механическая стимуляция регулирует поведение клеток через контакт руководство7 и индуцирует цитоскелета реорганизации менять форму, помимо координационных спаек и жесткость8клеток.
Человека эндотелиальной прародитель клеток (hEPCs) в организме тесно взаимодействуют с микроокружения окружающих ECM9. Это означает, что физическое состояние ECM действует как важный параметр для конкретных ячеек матрица адгезии комплекс формирования как касательное напряжение, полученных из крови поток10. Сообщается, что поверхности нанотопографии повышает в vitro создание сетей обширной капиллярной трубки hEPCs11 и растворимых факторов ECM/био комбинированная система позволяет hEPCs признать неблагополучных субстратов и способствует ранение исцеления12,13. Тем не менее отношения между ECM и hEPCs не четко понимать.
Хотя многие исследователи пытались прояснить взаимосвязь между клеток ответов и физические сигналы от различных субстратов14,,1516, эти исследования используются только фиксированный размер наноструктурированных или nanopatterns с неправомерных механизмов, которые имеют ограничение для прояснения взаимосвязи между размер поведения наноструктур и клеток. Проблема здесь является отсутствие подходящих инструментов для скрининга клеточных реакций, которые могут заменить существующие утомительной и итеративный подходы к найти оптимальный размер наноструктур. Таким образом простой метод не требуется для скрининга реакциях на физической стимуляции без повторения.
Здесь мы описываем метод, используемый в наших предыдущих докладов17,18,19 производить градиента nanopattern, в котором постепенно увеличивается диаметр аранжированное nanopillars. Кроме того мы также описал, как обрабатывать и анализировать поведение hECFCs на градиент nanopattern пластины для определения влияния физических раздражителей на клетки. Мягкий анодирование, постепенно травления и против прилипания слой покрытия методом были использованы для изготовления градиента ААО плесень. Приняв тепловой импринтинга технике литографии, идентичные полистирола градиента nanopatterns были произведены в экономически эффективным и легким способом. Использование градиента nanopatterns, представляется возможным определить, какой размер наноструктурированных имеет большое влияние на поведение ячейки в одном наборе эксперимента. Мы ожидаем, что этот градиент nanopattern будет полезным для понимания механизмов взаимодействия между крови производные hECFC или другие клетки и различных размеров наноструктур.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Perchloric acid 60%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>6512-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol, absolute 99.9%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>4118-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric acid 85%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>6532-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl alcohol 99.5%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>5558-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromium(VI) oxide</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>2558-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfuric acid 95%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>7781-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide 30%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>4104-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-hexane 95%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>4081-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toluene 99.5%</td>
			<td>Daejung Chemicals &#38; Metals</td>
			<td>8541-4400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(heptadecafluoro-1,1,2,2,-tetrahydrodecyl)dimethylchlorosilane</td>
			<td>Gelest</td>
			<td>SIH5840.4</td>
			<td>Moisture sensitive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methoxynonafluorobutane 99%</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>464309</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen solution</td>
			<td>Stemcell</td>
			<td>#4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>G1890</td>
			<td>Protein coating solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque</td>
			<td>GE Heathcare</td>
			<td>17-1440-03</td>
			<td>Hydrophilic polysaccharide solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGM-2MV</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-3202</td>
			<td>Endothelial cell expansion medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12483-020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>G5882-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmium tetroxide</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>201030-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexamethyldisilazane</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>440191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>X100-100ML</td>
			<td>Octylphenol ethoxylate&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>26050-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-human vinculin primary antibody&#160;</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>V9131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F-actin probe</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Fluorescence-conjugated phalloidin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488-conjugated anti-mouse&#160;IgG antibody</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A11001</td>
			<td>Fluorescence-conjugated secondary antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#39;,6-diamidino-2-phenylindole&#160;</td>
			<td>Sigma aldrich</td>
			<td>D9542</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>S3023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-human vWF primary antibody&#160;</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>A0082</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-human&#160;CD144 primary antibody&#160;</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>#555661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eponate 12&#8482; Embedding Kit, with BDMA</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>18012</td>
			<td>Epoxy resin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uranyl Acetate, 25g</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>19481</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lead Citrate, Trihydrate, 10g</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>19312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra pure aluminum plate</td>
			<td>Goodfellow</td>
			<td>26050-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polystyrene sheet</td>
			<td>Goodfellow</td>
			<td>ST313120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8.0&#34; silicon wafer</td>
			<td>Siltron</td>
			<td>29-01024-03</td>
			<td>Single side polished, 725 &#181;m thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum desiccator, 4.4 L</td>
			<td>Kartell</td>
			<td>KA.230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum pump</td>
			<td>Vacuumer</td>
			<td>V3.VOP100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power supply</td>
			<td>Unicorntech</td>
			<td>UDP-3003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer</td>
			<td>Daihan scientific</td>
			<td>SL.SMS03022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Overhead stirrer</td>
			<td>Daihan scientific</td>
			<td>HT120DX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circulator</td>
			<td>Daihan scientific</td>
			<td>WCR-P12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Linear moving stage</td>
			<td>Zaber</td>
			<td>A-LSQ300A-E01-KT07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angle bracket, 90 degrees</td>
			<td>Zaber</td>
			<td>AB90M</td>
			<td>Accessory of the linear moving stage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMP forcep, 145 mm</td>
			<td>Vitlab</td>
			<td>67995</td>
			<td>Nonmetallic tweezer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PTFE beaker, 250 mL</td>
			<td>Cowie</td>
			<td>CW007.25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>Branson</td>
			<td>B2510MTH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCB cutter</td>
			<td>Hozan Tool Industrial</td>
			<td>K-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoimprint device</td>
			<td>Nanonex</td>
			<td>NX-2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen plasma generator</td>
			<td>Femto Science</td>
			<td>CUTE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low temperature sterilizer</td>
			<td>Lowtem</td>
			<td>Crystal 50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Incubator</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MCO-18AC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confoal laser scanning microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>LSM700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning electron microscope</td>
			<td>JEOL</td>
			<td>JSM6701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transmission electron microscope</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>H-7500</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fabrication of gradient nanopattern by thermal nanoimprinting technique and screening of the response of human endothelial colony-forming cells

Нанотопографии могут быть найдены в различных внеклеточной матрицы (ECMs) вокруг тела и как известно, имеют важные регламентационных на клеточных реакций. Однако трудно определить связь между размером наноструктур и реакции клеток из-за отсутствия надлежащей проверки инструментов. Здесь мы покажем развития воспроизводимых и экономически градиента nanopattern пластин для манипуляции клеточных реакций. Использование анодного оксида алюминия (ААО) в качестве главной формы, градиент nanopattern плиты с nanopillars хребтов увеличения диаметра [120-200 Нм (GP 120/200), 200-280 Нм (GP 200/280) и 280-360 Нм (GP 280/360)] были сфабрикованы тепловой импринтинга технику. Эти пластины градиента nanopattern были разработаны для имитации различных размеров нанотопографии в ECM и были использованы для экран ответов человека эндотелиальных образуя колонии клеток (hECFCs). В этом протоколе опишем шаг за шагом процедура изготовления градиента nanopattern пластины для ячейки, инженерия, технологии выращивания hECFCs из периферической крови человека и культивирования hECFCs на nanopattern пластины.

Рисунок 1 показывает SEM изображения изготовлены формы градиента ААО согласно их тип и расположение. Рисунок 2 показывает изображения SEM градиента nanopattern плит с регулярными округлые nanopillars, и на рисунке 3 приведена колич?...

Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Gradient Nanopattern by Thermal Nanoimprinting Technique and Screening of the Response of Human Endothelial Colony-forming Cells at JoVE.com

Fabrication of Gradient Nanopattern by Thermal Nanoimprinting Technique and Screening of the Response of Human Endothelial Colony-forming Cells

Здесь мы представляем протокол для изготовления пластин градиента nanopattern через тепловые nanoimprinting и метод скрининга ответы клеток человека эндотелиальной прародитель наноструктур. С помощью описанных технологий, можно производить эшафот, что можно управлять поведение клеток, физические раздражители.

Изготовление градиента Nanopattern тепловой Nanoimprinting техникой и проверка реакции человека эндотелиальные клетки, образуя колонии

Nanotopography can be found in various extracellular matrices (ECMs) around the body and is known to have important regulatory actions upon cellular ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Fabrication of Micro-tissues using Modules of Collagen Gel Containing Cells

Изготовление Micro-тканей с использованием модулей Коллаген гель, содержащий клетки

This protocol describes the fabrication of a type of micro-tissues called modules.  The module approach generates uniform, scalable and vascularized ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Человека хрящевой ткани Изготовление с использованием трехмерных струйных технологии печати

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Polymeric Microneedle Array Fabrication by Photolithography

Полимерные микроиглы массив Изготовление по фотолитографии

This manuscript describes the fabrication of polymeric microneedle (MN) arrays by photolithography. It involves a simple mold-free process by using a ...

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method

Биомембрана Изготовление растворителем-помощь липидного бислоя (SALB) метод

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Fabrication of Decellularized Cartilage-derived Matrix Scaffolds

Изготовление подмостей Decellularized хряща производные матрица

Osteochondral defects lack sufficient intrinsic repair capacity to regenerate functionally sound bone and cartilage tissue. To this extent, cartilage ...

Standardized and Scalable Assay to Study Perfused 3D Angiogenic Sprouting of iPSC-derived Endothelial Cells In Vitro

Стандартизированные и масштабируемые анализ для изучения Перфированный 3D ангиогенной прорастания iPSC полученных эндотелиальных клеток в Vitro

Pre-clinical drug research of vascular diseases requires in vitro models of vasculature that are amendable to high-throughput screening. However, current ...

Applications for Open Source Microplate-Compatible Illumination Panels

Приложения для microplate-совместимых панелей для освещения с открытым исходным кодом

Microplates are commonly used in the modern laboratory environment for a wide variety of tasks both in small-scale laboratory benchtop operations as well ...

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

Рост человеческих и овец Корнель Эндотелиальных клеточных слоев на биоматериальных Мембранах

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Preclinical Cardiac Electrophysiology Assessment by Dual Voltage and Calcium Optical Mapping of Human Organotypic Cardiac Slices

Доклиническая кардиологическая электрофизиология по двойному напряжению и оптическому картированию кальция органов человеческого сердца

Human cardiac slice preparations have recently been developed as a platform for human physiology studies and therapy testing to bridge the gap between ...

Scalable Generation of Mature Cerebellar Organoids from Human Pluripotent Stem Cells and Characterization by Immunostaining

Масштабируемое поколение зрелых мозжечковых органоидов из плюрипотентных стволовых клеток человека и характеристика иммуностимулированием

The cerebellum plays a critical role in the maintenance of balance and motor coordination, and a functional defect in different cerebellar neurons can ...