Name: modeling osteosarcoma using li-fraumeni syndrome patient-derived induced pluripotent stem cells
Uploaded: 2018-06-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

ر. ز. معتمد من قبل "أوثيالث الابتكار" "السرطان منع التدريب برنامج بريدوكتورال زمالة بحثية" (الوقاية من السرطان ومعهد أبحاث من تكساس منح RP160015). ج. ت. معتمد من قبل البرنامج لين كه الجامعة الأولى التابعة للمستشفى من صن يأت-صن. دال-الباحث كبريت في "أبحاث السرطان" ودعم من المعاهد الوطنية للصحة في الطريق إلى الاستقلال جائزة R00 CA181496 وكبريت جائزة RR160019.

واعتمد هذا العمل بمركز العلوم الصحية في "جامعة تكساس" في هيوستن (أوثيالث) "للجنة رعاية الحيوان". وتجري التجارب يتفق بشكل صارم مع المعايير التي وضعتها في مركز أوثيالث "الطب الحيوانات المختبرية" والرعاية (كلامك) التي معتمدة من قبل "الرابطة الأمريكية" "مختبر رعاية الحيوان" (آآلاك International). البشر ?...

<ol>
	<li>Takahashi, K., Yamanaka, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+mouse+embryonic+and+adult+fibroblast+cultures+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors.</a> Cell. 126 (4), 663-676 (2006).</li><li>Takahashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+adult+human+fibroblasts+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors.</a> Cell. 131 (5), 861-872 (2007).</li><li>Yu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cell+lines+derived+from+human+somatic+cells.">Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells.</a> Science. 318 (5858), 1917-1920 (2007).</li><li>Yagi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+familial+Alzheimer's+disease+with+induced+pluripotent+stem+cells.">Modeling familial Alzheimer's disease with induced pluripotent stem cells.</a> Hum Mol Genet. 20 (23), 4530-4539 (2011).</li><li>Dimos, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells+generated+from+patients+with+ALS+can+be+differentiated+into+motor+neurons.">Induced pluripotent stem cells generated from patients with ALS can be differentiated into motor neurons.</a> Science. 321 (5893), 1218-1221 (2008).</li><li>Moretti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-specific+induced+pluripotent+stem-cell+models+for+long-QT+syndrome.">Patient-specific induced pluripotent stem-cell models for long-QT syndrome.</a> N Engl J Med. 363 (15), 1397-1409 (2010).</li><li>Itzhaki, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+the+long+QT+syndrome+with+induced+pluripotent+stem+cells.">Modelling the long QT syndrome with induced pluripotent stem cells.</a> Nature. 471 (7337), 225-229 (2011).</li><li>Carvajal-Vergara, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-specific+induced+pluripotent+stem-cell-derived+models+of+LEOPARD+syndrome.">Patient-specific induced pluripotent stem-cell-derived models of LEOPARD syndrome.</a> Nature. 465 (7299), 808-812 (2010).</li><li>Lee, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+familial+cancer+with+induced+pluripotent+stem+cells.">Modeling familial cancer with induced pluripotent stem cells.</a> Cell. 161 (2), 240-254 (2015).</li><li>Mulero-Navarro, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloid+Dysregulation+in+a+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cell+Model+of+PTPN11-Associated+Juvenile+Myelomonocytic+Leukemia.">Myeloid Dysregulation in a Human Induced Pluripotent Stem Cell Model of PTPN11-Associated Juvenile Myelomonocytic Leukemia.</a> Cell Rep. 13 (3), 504-515 (2015).</li><li>Kotini, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+a+chromosomal+deletion+associated+with+myelodysplastic+syndromes+using+isogenic+human+induced+pluripotent+stem+cells.">Functional analysis of a chromosomal deletion associated with myelodysplastic syndromes using isogenic human induced pluripotent stem cells.</a> Nat Biotechnol. 33 (6), 646-655 (2015).</li><li>Kotini, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stage-Specific+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cells+Map+the+Progression+of+Myeloid+Transformation+to+Transplantable+Leukemia.">Stage-Specific Human Induced Pluripotent Stem Cells Map the Progression of Myeloid Transformation to Transplantable Leukemia.</a> Cell Stem Cell. 20 (3), 315-328 (2017).</li><li>Crespo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonic+organoids+derived+from+human+induced+pluripotent+stem+cells+for+modeling+colorectal+cancer+and+drug+testing.">Colonic organoids derived from human induced pluripotent stem cells for modeling colorectal cancer and drug testing.</a> Nat Med. 23 (7), 878-884 (2017).</li><li>Gingold, J., Zhou, R., Lemischka, I. R., Lee, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+Cancer+with+Pluripotent+Stem+Cells.">Modeling Cancer with Pluripotent Stem Cells.</a> Trends Cancer. 2 (9), 485-494 (2016).</li><li>Lin, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteosarcoma:+Molecular+Pathogenesis+and+iPSC+Modeling.">Osteosarcoma: Molecular Pathogenesis and iPSC Modeling.</a> Trends Mol Med. 23 (8), 737-755 (2017).</li><li>Zhou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Li-Fraumeni+Syndrome+Disease+Model:+A+Platform+to+Develop+Precision+Cancer+Therapy+Targeting+Oncogenic+p53.">Li-Fraumeni Syndrome Disease Model: A Platform to Develop Precision Cancer Therapy Targeting Oncogenic p53.</a> Trends Pharmacol Sci. 38 (10), 908-927 (2017).</li><li>Lian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivation+of+clinically+compliant+MSCs+from+CD105+,+CD24-+differentiated+human+ESCs.">Derivation of clinically compliant MSCs from CD105+, CD24- differentiated human ESCs.</a> Stem Cells. 25 (2), 425-436 (2007).</li><li>Zhou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+homozygous+p53+R282W+mutant+human+embryonic+stem+cell+line+generated+using+TALEN-mediated+precise+gene+editing.">A homozygous p53 R282W mutant human embryonic stem cell line generated using TALEN-mediated precise gene editing.</a> Stem Cell Res. 27, 131-135 (2018).</li></ol>

لتحقيق مستوى أعلى من الكفاءة التمايز ماجستير، عدة جوانب الحاسمة. واحد هو شرط الثقافة إيبسكس قبل بدء المفاضلة لجنة السلامة البحرية. البروتوكول الواردة في المخطوطة يستند إلى دراسات سابقة 9،17. إيبسكس بحاجة إلى أن يكون مثقف في ميفس لمدة أسبوعين على الأقل. الحفا...

بين عامي 2006 و 2007، أدت نتائج اختراق عدة من مختبرات الدكتور شينيا ياماناكا وألف جيمس تومسون إلى تطوير المستحثة pluripotent الخلايا الجذعية (إيبسكس)1،،من23. بإعادة برمجة خلايا جسدية مع تعريف العوامل النسخي للنموذج إيبسكس، الباحثين وكانت قادرة على توليد خلايا ذات الخصائص الرئيسية هي، بلوريبوتينسي، والتجديد الذاتي، الذي كان يعتقد في السابق فقط موجودة في الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (هيسكس). إيبسكس يمكن أن تتولد من أي فرد أو المريض، ولم يكن يمكن أن تستمد من الأجنة، إلى حد كبير توسيع مرجع الأمراض المتاحة والخلفيات للدراسة. ومنذ ذلك الحين، استخدمت إيبسكس المستمدة من المريض أن الخص النمط الظاهري لمختلف الأمراض البشرية، من مرض الزهايمر4 والتصلب العضلي الجانبي5 إلى طويلة كيو تي متلازمة6،7، 8.
أوجه التقدم هذه في اللجنة التوجيهية للبحث أيضا قد فتحت آفاقاً جديدة لبحوث السرطان. عدة مجموعات مؤخرا استخدمت إيبسكس المريض لنموذج التنمية سرطان تحت خلفية وراثية عرضه9،،من1011، مع التطبيق الناجح أثبتت حتى الآن في أوستيوساركوما9، سرطان الدم10،11،12، و13من سرطان القولون والمستقيم. على الرغم من أن نماذج السرطان المستمدة من اللجنة التوجيهية لا تزال في بداياتها، قد أظهروا إمكانات كبيرة في فينوكوبيينج المرتبطة بأمراض الأورام الخبيثة، توضيح الآليات المرضية، وتحديد المركبات العلاجية14.
متلازمة لي-Fraumeni (الدراسة الاستقصائية) اضطراب جسمية سرطان وراثي السائد الناجم عن الطفرة germline TP53 15. المرضى الذين يعانون من الدراسة الاستقصائية مهيئون لنوع مختلف من الأورام الخبيثة، بما في ذلك أوستيوساركوما، مما يجعل إيبسكس الدراسة الاستقصائية والخلايا المشتقة الخاصة لا سيما مناسبة تماما لدراسة هذا الورم الخبيث16. نموذج osteosarcoma المستندة إلى اللجنة التوجيهية أنشئت أول مرة في عام 2015 في وقت لاحق باستخدام الدراسة الاستقصائية إيبسكس المستمدة من المريض9 متباينة في الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) وثم إلى خلايا الاوستيوبلاستس، التي تنشأ الخلايا من أوستيوساركوما. تلخيص هذه الدراسة الاستقصائية خلايا الاوستيوبلاستس العيوب المرتبطة osteosarcoma osteogenic التمايز وخصائص النمطان، مما يدل على نموذج المحتملة كمنصة "ورم العظام في طبق". التحليلات على نطاق الجينوم الترنسكربيتوم تكشف عن جوانب توقيع osteosarcoma الجينات في خلايا الاوستيوبلاستس الدراسة الاستقصائية من المثير للاهتمام، وأن ملامح هذه الشخصية التعبير الجيني في الدراسة الاستقصائية ترتبط بسوء التشخيص في osteosarcoma9، مشيراً إلى إمكانات الدراسة الاستقصائية إيبسكس المرض نماذج لتكشف عن ملامح أهميتها السريرية.
هذه المخطوطة يوفر وصفاً مفصلاً لكيفية استخدام الدراسة الاستقصائية إيبسكس المستمدة من المريض إلى نموذج أوستيوساركوما. أنها تفاصيل توليد إيبسكس الدراسة الاستقصائية، التفريق بين إيبسكس إلى MSCs ومن ثم إلى خلايا الاوستيوبلاستس، واستخدامها في فيفو إكسينوجرافت نموذج لاستخدام خلايا الاوستيوبلاستس الدراسة الاستقصائية. نموذج المرض الدراسة الاستقصائية وتضم العديد من المزايا، وأبرزها القدرة على توليد خلايا غير محدود في جميع مراحل التنمية osteosarcoma الدراسات الميكانيكية وتحديد العلامات البيولوجية، والمخدرات فرز149،، 16.
وباختصار، يوفر الطراز osteosarcoma المستندة إلى اللجنة التوجيهية الدراسة الاستقصائية نظام تكميلي جذابة للنهوض بالبحوث أوستيوساركوما. كما ينص هذا النظام الأساسي من بين مفهوم إثبات السرطان النمذجة باستخدام إيبسكس المستمدة من المريض. ويمكن تمديد هذه الاستراتيجية الوارد وصفها أدناه سهولة إلى نموذج الأورام الخبيثة المرتبطة مع غيرها من الاضطرابات الوراثية مع الميول السرطان.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:828px;" width="828">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Plastic ware</td>
			<td style="width:157px;"></td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:208px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">100 mm Dish</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">430107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">60 mm Dish</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">430166</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">6-well Plate</td>
			<td style="width:157px;">Falcon</td>
			<td style="width:136px;">353046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">12-well Plate</td>
			<td style="width:157px;">Falcon</td>
			<td style="width:136px;">353043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">48-well Plate</td>
			<td style="width:157px;">Falcon</td>
			<td style="width:136px;">353078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">1 mL Pipet Tip</td>
			<td style="width:157px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:136px;">1111-2721</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">200 &#181;L Pipet Tip</td>
			<td style="width:157px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:136px;">1111-0706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">10 &#181;L Pipet Tip</td>
			<td style="width:157px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:136px;">1111-3700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">5 mL Serological Pipette</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">86.1253.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">10 mL Serological Pipette</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">86.1254.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">25 mL Serological Pipette</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">86.1685.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">50 mL Tube, PP</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">62.547.100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">15 mL Tube, PP</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">62.554.100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Culture materials and Reagents</td>
			<td style="width:157px;"></td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">CytoTune- iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit</td>
			<td style="width:157px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:136px;">A16517</td>
			<td style="width:208px;">Commercial Sendai virus reprogramming kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Corning hESC-Qualified Matrix</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">354277</td>
			<td style="width:208px;">Basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">CF1 MEFs, irradiated</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">A34180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">DMEM</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">D5671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">DMEM/F12</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">10-090-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#945;MEM</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">10-022-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">StemMACS iPS-Brew XF</td>
			<td style="width:157px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:136px;">130-104-368</td>
			<td>Commercial iPSC medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">KnockOut DMEM/F-12</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">12660012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">FBS Opti-Gold</td>
			<td style="width:157px;">GenDEPOT</td>
			<td style="width:136px;">F0900-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">KnockOut Serum Replacement</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">A3181502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">MEM Nonessential Amino Acids</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">25-025-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">L-Glutamine Solution</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">G7513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">2-Mercaptoethanol</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">M3148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Human FGF-basic (bFGF)</td>
			<td style="width:157px;">PEPROTECH</td>
			<td style="width:136px;">100-18B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Recombinant Human PDGF-AB</td>
			<td style="width:157px;">PEPROTECH</td>
			<td style="width:136px;">100-00AB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">&#946;-Glycerophosphate</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">G9422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Dexamethasone</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">A4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:327px;">Ascorbic Acid</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">A5960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:327px;">Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline, 1x (DPBS)</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">StemMACS Passaging Solution XF</td>
			<td style="width:157px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:136px;">130-104-688</td>
			<td>Commercial passaging solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Accutatse Cell Detachment Solution</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">25-058-CI</td>
			<td>Cell detachment solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Thiazovivin (ROCK Inhibitor)</td>
			<td style="width:157px;">Calbiochem</td>
			<td style="width:136px;">420220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">0.25% Trypsin-EDTA Solution</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Collagenase, Type II&#160;&#160;</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">17101015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Human NANOG Antibody</td>
			<td style="width:157px;">R&#38;D System</td>
			<td style="width:136px;">AF1997</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">OCT4 Antibody (H-134)</td>
			<td style="width:157px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:136px;">sc-9081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Human/Mouse SSEA-4 PE-conjugated Antibody</td>
			<td style="width:157px;">R&#38;D System</td>
			<td style="width:136px;">FAB1435P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Alexa Fluor 555 Mouse Anti-Human TRA-1-81 Antigen</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">560123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Alexa Fluor 488 Donkey Anti-Goat IgG (H+L)</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">705-545-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Alexa Fluor 488 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">111-545-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PE Mouse Anti-Human CD105</td>
			<td style="width:157px;">eBioscience</td>
			<td style="width:136px;">12-1057-42</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">FITC Mouse Anti-Human CD44</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">555478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PE Mouse Anti-Human CD73</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">550257</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PE Mouse Anti-Human CD166</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">560903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">FITC Mouse Anti-Human CD24</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">555427</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Donkey Serum</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">017-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Goat Serum</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">005-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Alkaline Phosphatase Staining Kit II</td>
			<td style="width:157px;">Stemgent</td>
			<td style="width:136px;">00-0055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Alizarin Red S</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">A5533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">TRIzol Reagent</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">15596018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Chloroform</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">C298-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">2-Propanol</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">A416-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Ethanol, Absolute, Molecular Biology Grade</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">BP28184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">DNase I, RNase-free (1 U/&#181;L)</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">EN0521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">iScript cDNA Synthesis Kit</td>
			<td style="width:157px;">BioRad</td>
			<td style="width:136px;">1708891BUN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">iQ SYBR Green Supermix</td>
			<td style="width:157px;">BioRad</td>
			<td style="width:136px;">1708884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Matrigel Matrix High Concentration (HC), Phenol-Red Free</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">354262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">1 mL Slip Tip Syringe, 26 Gauge x 5/8 Inch</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">309597</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling osteosarcoma using li-fraumeni syndrome patient-derived induced pluripotent stem cells

متلازمة لي-Fraumeni (الدراسة الاستقصائية) اضطراب جسمي سرطان وراثية مهيمنة. المرضى الذين يعانون من الدراسة الاستقصائية مهيئون لنوع مختلف من الأورام، بما في ذلك أوستيوساركوما-واحدة من الأورام الخبيثة غير الدموية الأولية الأكثر شيوعاً في مرحلة الطفولة والمراهقة. ولذلك، تقدم الدراسة الاستقصائية نموذجا مثاليا لدراسة هذا الورم الخبيث. الاستفادة من المنهجيات اللجنة التوجيهية، يمكن أن تكون على غرار osteosarcoma المرتبطة بالدراسة الاستقصائية بنجاح بالتفريق بين الدراسة الاستقصائية إيبسكس المريض للخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs)، ومن ثم إلى خلايا الاوستيوبلاستس-خلايا المنشأ ل osteosarcomas. هذه الدراسة الاستقصائية خلايا الاوستيوبلاستس الخص النمطان خصائص osteosarcoma، توفير نظام نموذج جذاب لتحديد الآلية المرضية أوستيوساركوما. يوضح هذه المخطوطة على بروتوكول لتوليد إيبسكس من الدراسة الاستقصائية المريض الليفية، التفريق بين إيبسكس إلى MSCs، التفريق بين MSCs إلى خلايا الاوستيوبلاستس، و في فيفو tumorigenesis باستخدام خلايا الاوستيوبلاستس الدراسة الاستقصائية. ويمكن تمديد هذا النموذج المرض اللجنة التوجيهية لتحديد المؤشرات الحيوية المحتملة أو الأهداف العلاجية ل osteosarcoma المرتبطة بالدراسة الاستقصائية.

ويقدم هذا البروتوكول الإجراءات بما في ذلك الدراسة الاستقصائية جيل اللجنة التوجيهية ولجنة السلامة البحرية التمايز والتمايز osteoblast و في فيفو مقايسة tumorigenesis باستخدام خلايا الاوستيوبلاستس المستمدة من الدراسة الاستقصائية لجنة السلامة البحرية.
<p class="jove_content" fo:keep-together....

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells

هنا، نقدم بروتوكولا لتوليد المستحثة pluripotent الخلايا الجذعية (إيبسكس) من متلازمة لي-Fraumeni (الدراسة الاستقصائية) الليفية المشتقة المريض، التفريق بين إيبسكس عبر الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) إلى خلايا الاوستيوبلاستس، والنمذجة في فيفو توموريجينيسيس باستخدام خلايا الاوستيوبلاستس المستمدة من المريض في الدراسة الاستقصائية.

Osteosarcoma متلازمة لي-Fraumeni الخلايا الجذعية Pluripotent المستحث المستمدة من المريض باستخدام النمذجة

Li-Fraumeni syndrome (LFS) is an autosomal dominant hereditary cancer disorder. Patients with LFS are predisposed to a various type of tumors, including ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures from Human Conventional Osteosarcoma

إنشاء السرطان الجذعية الثقافات خلية من ساركوما العظام التقليدية الإنسان

The current improvements in therapy against osteosarcoma (OS) have prolonged the lives of cancer patients, but the survival rate of five years remains ...

A Preclinical Mouse Model of Osteosarcoma to Define the Extracellular Vesicle-mediated Communication Between Tumor and Mesenchymal Stem Cells

نموذج ماوس الإكلينيكية من أوستيوساركوما لتعريف الاتصال خارج الخلية حويصلة بوساطة بين الورم والخلايا الجذعية الوسيطة

Within the tumor microenvironment, resident or recruited mesenchymal stem cells (MSCs) contribute to malignant progression in multiple cancer types. Under ...

Flow Cytometry to Estimate Leukemia Stem Cells in Primary Acute Myeloid Leukemia and in Patient-derived-xenografts, at Diagnosis and Follow Up

التدفق الخلوي لتقدير لوكيميا الخلايا الجذعية في الابتدائي سرطان الدم النقوي الحاد والمريض-المشتقة-تكثيفها، في التشخيص والمتابعة حتى

Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous, and if not treated, fatal disease. It is the most common cause of leukemia-associated mortality in ...

Isolation and Characterization of Tumor-initiating Cells from Sarcoma Patient-derived Xenografts

عزل وتوصيف الخلايا التي تبدأ الورم من الساركوما المستمدة من المرضى Xenografts

The existence and importance of tumor-initiating cells (TICs) have been supported by increasing evidence during the past decade. These TICs have been ...

A Melanoma Patient-Derived Xenograft Model

نموذج Xenograft مشتق من سرطان الجلد

Accumulating evidence suggests that molecular and biological properties differ in melanoma cells grown in traditional two-dimensional tissue culture ...

Physiologic Patient Derived 3D Spheroids for Anti-neoplastic Drug Screening to Target Cancer Stem Cells

الفيزيولوجيالمريض المستمدة 3D Spheroids لفحص المخدرات المضادة للأورام لاستهداف الخلايا الجذعية السرطان

In this protocol, we outline the procedure for generation of tumor spheroids within 384-well hanging droplets to allow for high-throughput screening of ...

Using Human Induced Pluripotent Stem Cells for the Generation of Tumor Antigen-specific T Cells

باستخدام الإنسان المستحثة الخلايا الجذعية مستحث لتوليد خلايا T الأورام مستضد محدده

The generation and expansion of functional T cells in vitro can lead to a broad range of clinical applications. One such use is for the treatment of ...

Testing Targeted Therapies in Cancer using Structural DNA Alteration Analysis and Patient-Derived Xenografts

اختبار العلاجات المستهدفة في السرطان باستخدام تحليل تعديل الحمض النووي الهيكلي وXenografts المستمدة من المريض

We present here an integrative approach for testing efficacy of targeted therapies that combines the next generation sequencing technolo-gies, therapeutic ...

Combined Conditional Knockdown and Adapted Sphere Formation Assay to Study a Stemness-Associated Gene of Patient-derived Gastric Cancer Stem Cells

مجتمعة الضربة القاضية المشروطة وتكييف المجال تشكيل الفحص لدراسة جين الجذعية المرتبطة بالخلايا الجذعية سرطان المعدة المستمدة من المريض

Cancer stem cells (CSCs) are implicated in tumor initiation, development and recurrence after treatment, and have become the center of attention of many ...

A Rapid Screening Workflow to Identify Potential Combination Therapy for GBM using Patient-Derived Glioma Stem Cells

سير عمل الفحص السريع لتحديد العلاج المركب المحتمل ل GBM باستخدام الخلايا الجذعية الدبقي المشتقة من المريض

The glioma stem cells (GSCs) are a small fraction of cancer cells which play essential roles in tumor initiation, angiogenesis, and drug resistance in ...