Name: modeling osteosarcoma using li-fraumeni syndrome patient-derived induced pluripotent stem cells
Uploaded: 2018-06-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

Р. з. поддерживается UTHealth инновации для Pre-Doctoral рака профилактики исследований подготовки программы стипендий (профилактика рака и исследовательский институт штата Техас Грант RP160015). Ярно Трулли поддерживается программой КЭ Лин первый аффилированным больница из Sun Yat-sen University. D.-ф.л. CPRIT ученый в области исследований рака и поддерживается NIH путь к независимости премии R00 CA181496 и RR160019 CPRIT премии.

Эта работа была утверждена центра науки здоровья университета Техаса в Комитете Благосостояние животных Хьюстон (UTHealth). Эксперименты проводятся в строгом соответствии с нормами, установленными в UTHealth центре для лабораторных животных медицина и уход (CLAMC) которая аккредитована америка...

<ol>
	<li>Takahashi, K., Yamanaka, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+mouse+embryonic+and+adult+fibroblast+cultures+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors.</a> Cell. 126 (4), 663-676 (2006).</li><li>Takahashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+adult+human+fibroblasts+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors.</a> Cell. 131 (5), 861-872 (2007).</li><li>Yu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cell+lines+derived+from+human+somatic+cells.">Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells.</a> Science. 318 (5858), 1917-1920 (2007).</li><li>Yagi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+familial+Alzheimer's+disease+with+induced+pluripotent+stem+cells.">Modeling familial Alzheimer's disease with induced pluripotent stem cells.</a> Hum Mol Genet. 20 (23), 4530-4539 (2011).</li><li>Dimos, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells+generated+from+patients+with+ALS+can+be+differentiated+into+motor+neurons.">Induced pluripotent stem cells generated from patients with ALS can be differentiated into motor neurons.</a> Science. 321 (5893), 1218-1221 (2008).</li><li>Moretti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-specific+induced+pluripotent+stem-cell+models+for+long-QT+syndrome.">Patient-specific induced pluripotent stem-cell models for long-QT syndrome.</a> N Engl J Med. 363 (15), 1397-1409 (2010).</li><li>Itzhaki, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+the+long+QT+syndrome+with+induced+pluripotent+stem+cells.">Modelling the long QT syndrome with induced pluripotent stem cells.</a> Nature. 471 (7337), 225-229 (2011).</li><li>Carvajal-Vergara, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-specific+induced+pluripotent+stem-cell-derived+models+of+LEOPARD+syndrome.">Patient-specific induced pluripotent stem-cell-derived models of LEOPARD syndrome.</a> Nature. 465 (7299), 808-812 (2010).</li><li>Lee, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+familial+cancer+with+induced+pluripotent+stem+cells.">Modeling familial cancer with induced pluripotent stem cells.</a> Cell. 161 (2), 240-254 (2015).</li><li>Mulero-Navarro, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloid+Dysregulation+in+a+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cell+Model+of+PTPN11-Associated+Juvenile+Myelomonocytic+Leukemia.">Myeloid Dysregulation in a Human Induced Pluripotent Stem Cell Model of PTPN11-Associated Juvenile Myelomonocytic Leukemia.</a> Cell Rep. 13 (3), 504-515 (2015).</li><li>Kotini, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+a+chromosomal+deletion+associated+with+myelodysplastic+syndromes+using+isogenic+human+induced+pluripotent+stem+cells.">Functional analysis of a chromosomal deletion associated with myelodysplastic syndromes using isogenic human induced pluripotent stem cells.</a> Nat Biotechnol. 33 (6), 646-655 (2015).</li><li>Kotini, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stage-Specific+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cells+Map+the+Progression+of+Myeloid+Transformation+to+Transplantable+Leukemia.">Stage-Specific Human Induced Pluripotent Stem Cells Map the Progression of Myeloid Transformation to Transplantable Leukemia.</a> Cell Stem Cell. 20 (3), 315-328 (2017).</li><li>Crespo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonic+organoids+derived+from+human+induced+pluripotent+stem+cells+for+modeling+colorectal+cancer+and+drug+testing.">Colonic organoids derived from human induced pluripotent stem cells for modeling colorectal cancer and drug testing.</a> Nat Med. 23 (7), 878-884 (2017).</li><li>Gingold, J., Zhou, R., Lemischka, I. R., Lee, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+Cancer+with+Pluripotent+Stem+Cells.">Modeling Cancer with Pluripotent Stem Cells.</a> Trends Cancer. 2 (9), 485-494 (2016).</li><li>Lin, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteosarcoma:+Molecular+Pathogenesis+and+iPSC+Modeling.">Osteosarcoma: Molecular Pathogenesis and iPSC Modeling.</a> Trends Mol Med. 23 (8), 737-755 (2017).</li><li>Zhou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Li-Fraumeni+Syndrome+Disease+Model:+A+Platform+to+Develop+Precision+Cancer+Therapy+Targeting+Oncogenic+p53.">Li-Fraumeni Syndrome Disease Model: A Platform to Develop Precision Cancer Therapy Targeting Oncogenic p53.</a> Trends Pharmacol Sci. 38 (10), 908-927 (2017).</li><li>Lian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivation+of+clinically+compliant+MSCs+from+CD105+,+CD24-+differentiated+human+ESCs.">Derivation of clinically compliant MSCs from CD105+, CD24- differentiated human ESCs.</a> Stem Cells. 25 (2), 425-436 (2007).</li><li>Zhou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+homozygous+p53+R282W+mutant+human+embryonic+stem+cell+line+generated+using+TALEN-mediated+precise+gene+editing.">A homozygous p53 R282W mutant human embryonic stem cell line generated using TALEN-mediated precise gene editing.</a> Stem Cell Res. 27, 131-135 (2018).</li></ol>

Для достижения более высокой эффективности MSC дифференциации, некоторые аспекты имеют решающее значение. Один является состояние культуры iPSCs перед началом MSC дифференциации. Протокол, представленный в рукописи основан на предыдущих исследований 9,17. iPSCs...

Между 2006 и 2007 годах несколько прорыв результаты из лабораторий Drs. Синъя Яманака и Джеймс а. Томсон привели к развитию индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPSCs)1,2,3. Перепрограммирование соматические клетки с определенными транскрипционный анализ факторов формы iPSCs, исследователи смогли генерировать клетки с ключевыми характеристиками, а именно, плюрипотентности и самообновления, которое ранее считалось только существуют в человеческих эмбриональных стволовых клеток (ЭСК). iPSCs могут быть получены из любого лица или пациента и не должны быть получены из эмбрионов, значительно расширяет репертуар имеющихся заболеваний и стола для изучения. С тех пор пациент производные iPSCs были использованы для пилки фенотип различных заболеваний человека, от болезни Альцгеймера4 и боковой амиотрофический склероз5 длинные QT синдром6,7, 8.
Эти достижения в iPSC исследованиях также открыли новые возможности для исследований рака. Несколько групп недавно использовали пациента iPSCs модель развития рака под восприимчивы генетический фон9,10,11, с успешным применением продемонстрировал на сегодняшний день в9остеосаркома, лейкемии10,11,12и13колоректального рака. Хотя рак iPSC производные модели все еще находятся в зачаточном, они продемонстрировали большой потенциал в phenocopying заболевание связанные злокачественных опухолей, изучение патологических механизмов и выявления терапевтических соединений14.
Синдром ли-Фраумени (ОРС) является расстройством аутосомно-доминирующей наследственного рака, вызванных TP53 герминальных мутаций15. У больных с ОРС предрасположены к различных типов злокачественных опухолей, включая остеосаркома, делая LFS iPSCs и их производные клетки особенно хорошо подходит для изучения этого злокачественного16. Модель на основе iPSC остеосаркома был впервые создан в 2015 году, впоследствии с помощью ОРС пациента производные iPSCs9 дифференцированных в мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и затем для остеобластов, возникновение клетки из остеосаркома. Эти LFS остеобластов пилки связанные остеосаркома Остеогенные дифференциация дефектов и Онкогенные свойства, демонстрируя потенциал как «опухоль кости в блюдо» платформа модель. Интересно, что анализ генома общесистемной транскриптом выявить аспекты остеосаркома геном подписи в LFS остеобластов и что функции данного профиля выражение гена ОРС связаны с плохой прогноз в9остеосаркома, указывающее потенциал модели заболеванием iPSCs LFS раскрыть особенности клинической значимости.
Эта рукопись содержит подробное описание о том, как использовать LFS пациента производные iPSCs для модели остеосаркома. В нем подробно поколения LFS iPSCs, дифференциации iPSCs MSCs, а затем, чтобы остеобластов и использование в vivo ксенотрансплантата модели с помощью ОРС остеобластов. LFS болезни модель включает в себя ряд преимуществ, прежде всего способность генерировать неограниченные клетки на всех стадиях развития остеосаркома механистический исследований, биомаркер идентификации и наркотиков скрининг9,14, 16.
Таким образом модель на основе iPSC остеосаркома LFS предлагает привлекательные дополнительные системы для продвижения остеосаркома исследований. Эта платформа также обеспечивает доказательства в концепция для рака моделирования с помощью пациент производные iPSCs. Эта стратегия, описанные ниже может легко распространяться на модель злокачественных опухолей, связанных с другими генетических расстройств с раком предрасположенности.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:828px;" width="828">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Plastic ware</td>
			<td style="width:157px;"></td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:208px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">100 mm Dish</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">430107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">60 mm Dish</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">430166</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">6-well Plate</td>
			<td style="width:157px;">Falcon</td>
			<td style="width:136px;">353046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">12-well Plate</td>
			<td style="width:157px;">Falcon</td>
			<td style="width:136px;">353043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">48-well Plate</td>
			<td style="width:157px;">Falcon</td>
			<td style="width:136px;">353078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">1 mL Pipet Tip</td>
			<td style="width:157px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:136px;">1111-2721</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">200 &#181;L Pipet Tip</td>
			<td style="width:157px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:136px;">1111-0706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">10 &#181;L Pipet Tip</td>
			<td style="width:157px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:136px;">1111-3700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">5 mL Serological Pipette</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">86.1253.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">10 mL Serological Pipette</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">86.1254.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">25 mL Serological Pipette</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">86.1685.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">50 mL Tube, PP</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">62.547.100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">15 mL Tube, PP</td>
			<td style="width:157px;">SARSTEDT</td>
			<td style="width:136px;">62.554.100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Culture materials and Reagents</td>
			<td style="width:157px;"></td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">CytoTune- iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit</td>
			<td style="width:157px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:136px;">A16517</td>
			<td style="width:208px;">Commercial Sendai virus reprogramming kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Corning hESC-Qualified Matrix</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">354277</td>
			<td style="width:208px;">Basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">CF1 MEFs, irradiated</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">A34180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">DMEM</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">D5671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">DMEM/F12</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">10-090-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#945;MEM</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">10-022-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">StemMACS iPS-Brew XF</td>
			<td style="width:157px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:136px;">130-104-368</td>
			<td>Commercial iPSC medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">KnockOut DMEM/F-12</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">12660012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">FBS Opti-Gold</td>
			<td style="width:157px;">GenDEPOT</td>
			<td style="width:136px;">F0900-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">KnockOut Serum Replacement</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">A3181502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">MEM Nonessential Amino Acids</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">25-025-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">L-Glutamine Solution</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">G7513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">2-Mercaptoethanol</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">M3148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Human FGF-basic (bFGF)</td>
			<td style="width:157px;">PEPROTECH</td>
			<td style="width:136px;">100-18B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Recombinant Human PDGF-AB</td>
			<td style="width:157px;">PEPROTECH</td>
			<td style="width:136px;">100-00AB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">&#946;-Glycerophosphate</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">G9422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Dexamethasone</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">A4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:327px;">Ascorbic Acid</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">A5960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:327px;">Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline, 1x (DPBS)</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">StemMACS Passaging Solution XF</td>
			<td style="width:157px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:136px;">130-104-688</td>
			<td>Commercial passaging solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Accutatse Cell Detachment Solution</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">25-058-CI</td>
			<td>Cell detachment solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Thiazovivin (ROCK Inhibitor)</td>
			<td style="width:157px;">Calbiochem</td>
			<td style="width:136px;">420220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">0.25% Trypsin-EDTA Solution</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Collagenase, Type II&#160;&#160;</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">17101015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Human NANOG Antibody</td>
			<td style="width:157px;">R&#38;D System</td>
			<td style="width:136px;">AF1997</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">OCT4 Antibody (H-134)</td>
			<td style="width:157px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:136px;">sc-9081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Human/Mouse SSEA-4 PE-conjugated Antibody</td>
			<td style="width:157px;">R&#38;D System</td>
			<td style="width:136px;">FAB1435P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Alexa Fluor 555 Mouse Anti-Human TRA-1-81 Antigen</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">560123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Alexa Fluor 488 Donkey Anti-Goat IgG (H+L)</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">705-545-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Alexa Fluor 488 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">111-545-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PE Mouse Anti-Human CD105</td>
			<td style="width:157px;">eBioscience</td>
			<td style="width:136px;">12-1057-42</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">FITC Mouse Anti-Human CD44</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">555478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PE Mouse Anti-Human CD73</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">550257</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PE Mouse Anti-Human CD166</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">560903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">FITC Mouse Anti-Human CD24</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">555427</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Donkey Serum</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">017-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Goat Serum</td>
			<td style="width:157px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:136px;">005-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Alkaline Phosphatase Staining Kit II</td>
			<td style="width:157px;">Stemgent</td>
			<td style="width:136px;">00-0055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Alizarin Red S</td>
			<td style="width:157px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:136px;">A5533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">TRIzol Reagent</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">15596018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Chloroform</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">C298-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">2-Propanol</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">A416-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Ethanol, Absolute, Molecular Biology Grade</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">BP28184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">DNase I, RNase-free (1 U/&#181;L)</td>
			<td style="width:157px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:136px;">EN0521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">iScript cDNA Synthesis Kit</td>
			<td style="width:157px;">BioRad</td>
			<td style="width:136px;">1708891BUN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">iQ SYBR Green Supermix</td>
			<td style="width:157px;">BioRad</td>
			<td style="width:136px;">1708884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Matrigel Matrix High Concentration (HC), Phenol-Red Free</td>
			<td style="width:157px;">Corning</td>
			<td style="width:136px;">354262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">1 mL Slip Tip Syringe, 26 Gauge x 5/8 Inch</td>
			<td style="width:157px;">DB Biosciences</td>
			<td style="width:136px;">309597</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling osteosarcoma using li-fraumeni syndrome patient-derived induced pluripotent stem cells

Синдром ли-Фраумени (ОРС) является расстройством аутосомно-доминирующей Наследственный рак. У больных с ОРС предрасположены к различных типов опухолей, в том числе остеосаркома--один из наиболее частых первичной не гематологических злокачественных новообразований в детство и юность. Таким образом LFS обеспечивает идеальную модель для изучения этой злокачественности. Воспользовавшись iPSC методологий, LFS-связанные остеосаркомы может успешно моделируется дифференциации LFS пациента iPSCs мезенхимальных стволовых клеток (МСК), а затем остеобластов--клетки происхождения для osteosarcomas. Эти LFS остеобластов пилки Онкогенные свойства остеосаркома, предоставляя привлекательные модели системы для разграничения патогенеза остеосаркома. Эта рукопись демонстрирует протокол для генерации iPSCs от ОРС пациента фибробластов, дифференциация iPSCs до MSCs, дифференциация MSCs остеобластов, и в естественных условиях опухолей с помощью ОРС остеобластов. Эта модель iPSC болезни может быть продлен для выявления потенциальных биомаркеров или терапевтических целей ОРС связанные остеосаркома.

Этот протокол представляет процедур, включая iPSC поколение LFS, дифференциация MSC, остеобластов дифференциации и в естественных условиях tumorigenesis Пробирная использованием LFS MSC-производные остеобластов.
Схема для поколения LFS iPSCs от ф?...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells

Здесь мы представляем протокол для поколения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPSCs) от синдром ли-Фраумени (LFS) пациента производных фибробластов, дифференциация iPSCs через мезенхимальных стволовых клеток (МСК) остеобластов и моделирование в естественных условиях опухолей с помощью ОРС пациента производные остеобластов.

Моделирование остеосаркома, используя синдром ли Фраумени, которую пациент производные индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

Li-Fraumeni syndrome (LFS) is an autosomal dominant hereditary cancer disorder. Patients with LFS are predisposed to a various type of tumors, including ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures from Human Conventional Osteosarcoma

Создание рака стволовых клеточных культур от человека обычного остеосаркомы

The current improvements in therapy against osteosarcoma (OS) have prolonged the lives of cancer patients, but the survival rate of five years remains ...

A Preclinical Mouse Model of Osteosarcoma to Define the Extracellular Vesicle-mediated Communication Between Tumor and Mesenchymal Stem Cells

Доклинические мыши модель остеосаркома определить внеклеточного везикул опосредованной коммуникации между опухоли и мезенхимальных стволовых клеток

Within the tumor microenvironment, resident or recruited mesenchymal stem cells (MSCs) contribute to malignant progression in multiple cancer types. Under ...

Flow Cytometry to Estimate Leukemia Stem Cells in Primary Acute Myeloid Leukemia and in Patient-derived-xenografts, at Diagnosis and Follow Up

Проточная цитометрия оценить стволовых клеток лейкемии в первичных острый миелолейкоз и пациент производные ксенотрасплантатов, диагностики и последующей вверх

Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous, and if not treated, fatal disease. It is the most common cause of leukemia-associated mortality in ...

Isolation and Characterization of Tumor-initiating Cells from Sarcoma Patient-derived Xenografts

Изоляция и характеристика опухолевых клеток от саркомы пациента полученных Xenografts

The existence and importance of tumor-initiating cells (TICs) have been supported by increasing evidence during the past decade. These TICs have been ...

A Melanoma Patient-Derived Xenograft Model

Меланома пациента-производные Ксенотрансплантат Модель

Accumulating evidence suggests that molecular and biological properties differ in melanoma cells grown in traditional two-dimensional tissue culture ...

Physiologic Patient Derived 3D Spheroids for Anti-neoplastic Drug Screening to Target Cancer Stem Cells

Физиологические пациент выведенных 3D сфероидов для анти-неопластических наркотиков скрининга целевой рак стволовых клеток

In this protocol, we outline the procedure for generation of tumor spheroids within 384-well hanging droplets to allow for high-throughput screening of ...

Using Human Induced Pluripotent Stem Cells for the Generation of Tumor Antigen-specific T Cells

Использование человека индуцированных плюрипотентных стволовых клеток для поколения опухолевых антигенов конкретных Т-клеток

The generation and expansion of functional T cells in vitro can lead to a broad range of clinical applications. One such use is for the treatment of ...

Testing Targeted Therapies in Cancer using Structural DNA Alteration Analysis and Patient-Derived Xenografts

Тестирование целевых методов лечения рака с использованием структурных анализа изменения ДНК и пациентов, полученных Xenografts

We present here an integrative approach for testing efficacy of targeted therapies that combines the next generation sequencing technolo-gies, therapeutic ...

Combined Conditional Knockdown and Adapted Sphere Formation Assay to Study a Stemness-Associated Gene of Patient-derived Gastric Cancer Stem Cells

Комбинированные Условный Нокдаун и Адаптированные Сфера Формирование Анализ для изучения Stemness-Ассоциированный ген пациента полученных стволовых клеток рака желудка

Cancer stem cells (CSCs) are implicated in tumor initiation, development and recurrence after treatment, and have become the center of attention of many ...

A Rapid Screening Workflow to Identify Potential Combination Therapy for GBM using Patient-Derived Glioma Stem Cells

Быстрый процесс скрининга для определения потенциальной комбинированной терапии GBM с использованием стволовых клеток глиомы, полученных от пациента

The glioma stem cells (GSCs) are a small fraction of cancer cells which play essential roles in tumor initiation, angiogenesis, and drug resistance in ...