Name: label-free neutrophil enrichment from patient-derived airway secretion using closed-loop inertial microfluidics
Uploaded: 2018-06-07T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Label-free Neutrophil Enrichment from Patient-derived Airway Secretion Using Closed-loop Inertial Microfluidics at JoVE.com

وأيد هذا العمل المعاهد الوطنية للصحة/نييد (R21AI119042) فضلا عن برنامج الفحص "تجنيب عينة U24 المعاهد الوطنية للصحة" (U24-AI118656).

جمع العينات أقرها مجلس جامعة بيتسبرغ المراجعة المؤسسية (IRB # PRO16060443، PRO10110387). جميع التجارب التي تتم تحت السلامة الأحيائية مجلس الوزراء مع معدات الحماية الشخصية المناسبة.
1-جهاز التصنيع والطباعة الحجرية الناعمة
ملاحظة: استخدمت تقنيات الطباعة الحجرية الناعمة الق...

<ol>
	<li>Hamid, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+of+sputum+processing+for+cell+counts,+immunocytochemistry+and+in+situ+hybridisation.">Methods of sputum processing for cell counts, immunocytochemistry and in situ hybridisation.</a> European Respiratory Journal. 20 (Supplement 37), 19S-23S (2002).</li><li>van Overveld, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+homogenization+of+induced+sputum+by+dithiothreitol+on+polymorphonuclear+cells.">Effects of homogenization of induced sputum by dithiothreitol on polymorphonuclear cells.</a> J Physiol Pharmacol. 56, 143-154 (2005).</li><li>Qiu, D., Tan, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dithiothreitol+has+a+dose-response+effect+on+cell+surface+antigen+expression.">Dithiothreitol has a dose-response effect on cell surface antigen expression.</a> J Allergy Clin Immunol. 103 (5 Pt 1), 873-876 (1999).</li><li>Usher, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+Neutrophil+Apoptosis+by+the+Pseudomonas+aeruginosa+Exotoxin+Pyocyanin:+A+Potential+Mechanism+of+Persistent+Infection.">Induction of Neutrophil Apoptosis by the Pseudomonas aeruginosa Exotoxin Pyocyanin: A Potential Mechanism of Persistent Infection.</a> The Journal of Immunology. 168 (4), 1861-1868 (2002).</li><li>Di Carlo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inertial+microfluidics.">Inertial microfluidics.</a> Lab Chip. 9 (21), 3038-3046 (2009).</li><li>Martel, J. M., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inertial+focusing+dynamics+in+spiral+microchannels.">Inertial focusing dynamics in spiral microchannels.</a> Phys Fluids. 24 (3), 32001 (2012).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundamentals+and+applications+of+inertial+microfluidics:+a+review.">Fundamentals and applications of inertial microfluidics: a review.</a> Lab Chip. 16 (1), 10-34 (2016).</li><li>Hou, H. W., Bhattacharyya, R. P., Hung, D. T., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+detection+and+drug-resistance+profiling+of+bacteremias+using+inertial+microfluidics.">Direct detection and drug-resistance profiling of bacteremias using inertial microfluidics.</a> Lab Chip. 15 (10), 2297-2307 (2015).</li><li>Warkiani, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-fast,+label-free+isolation+of+circulating+tumor+cells+from+blood+using+spiral+microfluidics.">Ultra-fast, label-free isolation of circulating tumor cells from blood using spiral microfluidics.</a> Nat Protoc. 11 (1), 134-148 (2016).</li><li>Warkiani, M. E., Tay, A. K., Guan, G., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane-less+microfiltration+using+inertial+microfluidics.">Membrane-less microfiltration using inertial microfluidics.</a> Sci Rep. 5, 11018 (2015).</li><li>Warkiani, M. E., Wu, L., Tay, A. K., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-Volume+Microfluidic+Cell+Sorting+for+Biomedical+Applications.">Large-Volume Microfluidic Cell Sorting for Biomedical Applications.</a> Annu Rev Biomed Eng. 17, 1-34 (2015).</li><li>Kwon, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+Cell+Retention+Device+for+Perfusion+of+Mammalian+Suspension+Culture.">Microfluidic Cell Retention Device for Perfusion of Mammalian Suspension Culture.</a> Sci Rep. 7 (1), 6703 (2017).</li><li>Wu, L., Guan, G., Hou, H. W., Bhagat, A. A., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+of+leukocytes+from+blood+using+spiral+channel+with+trapezoid+cross-section.">Separation of leukocytes from blood using spiral channel with trapezoid cross-section.</a> Anal Chem. 84 (21), 9324-9331 (2012).</li><li>Guan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spiral+microchannel+with+rectangular+and+trapezoidal+cross-sections+for+size+based+particle+separation.">Spiral microchannel with rectangular and trapezoidal cross-sections for size based particle separation.</a> Sci Rep. 3, 1475 (2013).</li><li>Kotz, K., Cheng, X., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PDMS+Device+Fabrication+and+Surface+Modification.">PDMS Device Fabrication and Surface Modification.</a> J Vis Exp. (8), e319 (2007).</li><li>Duffy, D. C., McDonald, J. C., Schueller, O. J. A., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Prototyping+of+Microfluidic+Systems+in+Poly(dimethylsiloxane).">Rapid Prototyping of Microfluidic Systems in Poly(dimethylsiloxane).</a> Analytical Chemistry. 70 (23), 4974-4984 (1998).</li><li>Ryu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-Derived+Airway+Secretion+Dissociation+Technique+To+Isolate+and+Concentrate+Immune+Cells+Using+Closed-Loop+Inertial+Microfluidics.">Patient-Derived Airway Secretion Dissociation Technique To Isolate and Concentrate Immune Cells Using Closed-Loop Inertial Microfluidics.</a> Anal Chem. 89 (10), 5549-5556 (2017).</li><li>Mach, A. J., Di Carlo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+scalable+blood+filtration+device+using+inertial+microfluidics.">Continuous scalable blood filtration device using inertial microfluidics.</a> Biotechnol Bioeng. 107 (2), 302-311 (2010).</li><li>Di Carlo, D., Irimia, D., Tompkins, R. G., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+inertial+focusing,+ordering,+and+separation+of+particles+in+microchannels.">Continuous inertial focusing, ordering, and separation of particles in microchannels.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (48), 18892-18897 (2007).</li><li>Xiang, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundamentals+of+elasto-inertial+particle+focusing+in+curved+microfluidic+channels.">Fundamentals of elasto-inertial particle focusing in curved microfluidic channels.</a> Lab Chip. 16 (14), 2626-2635 (2016).</li><li>Lotvall, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asthma+endotypes:+a+new+approach+to+classification+of+disease+entities+within+the+asthma+syndrome.">Asthma endotypes: a new approach to classification of disease entities within the asthma syndrome.</a> J Allergy Clin Immunol. 127 (2), 355-360 (2011).</li><li>Houston, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sputum+neutrophils+in+cystic+fibrosis+patients+display+a+reduced+respiratory+burst.">Sputum neutrophils in cystic fibrosis patients display a reduced respiratory burst.</a> J Cyst Fibros. 12 (4), 352-362 (2013).</li><li>Janoff, A., Scherer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mediators+of+inflammation+in+leukocyte+lysosomes.+IX.+Elastinolytic+activity+in+granules+of+human+polymorphonuclear+leukocytes.">Mediators of inflammation in leukocyte lysosomes. IX. Elastinolytic activity in granules of human polymorphonuclear leukocytes.</a> J Exp Med. 128 (5), 1137-1155 (1968).</li><li>Kawabata, K., Hagio, T., Matsuoka, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+neutrophil+elastase+in+acute+lung+injury.">The role of neutrophil elastase in acute lung injury.</a> Eur J Pharmacol. 451 (1), 1-10 (2002).</li><li>Rubin, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plastic+Bronchitis.">Plastic Bronchitis.</a> Clin Chest Med. 37 (3), 405-408 (2016).</li><li>Kokot, K., Teschner, M., Schaefer, R. M., Heidland, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+and+inhibition+of+elastase+release+from+human+neutrophils+dependent+on+the+calcium+messenger+system.">Stimulation and inhibition of elastase release from human neutrophils dependent on the calcium messenger system.</a> Miner Electrolyte Metab. 13 (2), 133-140 (1987).</li></ol>

في ميكروفلويديكس القصور الذاتي، تعريب الخلايا والجسيمات في موقف معين جانبية في الدقيقة-قناة استناداً على حجم5،18،،من1920. بسبب التأثير المشترك للعميد سحب قوة وقوة رفع القصور الذاتي في microchannel المنحنية أو الجسيمات الكبير?...

حيث يتم تغليف الخلايا في كمية كبيرة من المخاط في مجرى الهواء إفرازات، وعرقل الوظيفية تقييم الكريات البيضاء بفحص في المختبر . ديثيوثريتول (DTT) هو الأكثر شيوعاً تحلل المخزن المؤقت أيوناتها وتجانسه البلغم لتحليل الخلوية والكشف عن الوسطاء مع توفير السلامة مقبولة للخلايا المعزولة1،2. ومع ذلك، القيمة يمكن أن تتداخل مع المستضدات السطحية زمنياً من العَدلات مجرى الهواء، أدى إلى تعطيل وظيفة العَدلات مثل الستسي وميلوبيروكسيداسي (الخطة الرئيسية للعمليات) الإصدار2،3. ولذلك، أجريت دراسات قليلة من وظيفة العَدلات مجرى الهواء البشرية مع العَدلات الدم المحيطية، التي قد لا تكشف عن الخصائص الفسيولوجية ل الرئة4. وفي الوقت نفسه، ميكروفلويديكس القصور الذاتي قد أحرزت تقدما في عزل الخلايا من مختلف بيوماتريسيس المريض5،6. التوازن بين القوى رفع القصور الذاتي واسحب عميد يحاذي الجسيمات/الخلية وفقا لحجمها، مما يسمح للجسيمات خالية من تسمية الفصل7. عرض مجموعتنا سابقا طريقة إعداد نموذج لتعميم ورم الخلايا8،9، العوامل الممرضة في الدم8خلايا من تعليق ثقافة10،11، 12، والكريات البيض النوى (بمنس) من الدم13،14.
نقدم لك هنا، وضع بروتوكول لإعداد الخلايا المناعية من إفرازات مجرى الهواء للمريض استخدام حلقة مغلقة ميكروفلويديكس القصور الذاتي للمتلقين للمعلومات في المختبر مقايسة، مثل المقايسة elastase العَدلات (شمال شرق). يوفر هذا الأسلوب التركيز العالي والانتعاش، ولا سيما عندما يكون هناك تداخل كبير في الاتجاه الأفقي الخلية/الجسيمات منه الخلية/الجسيمات من الفائدة المراد إزالتها، الذي يتم الاحتفال به عادة في العينات السريرية. بتعميم الجدار الداخلية (IW)-تركز الجزيئات الكبيرة أو الخلايا إلى أنبوب العينة الإدخال، والجسيمات أو مركزات الخلية من الفائدة في الخزان الأصلي، بينما يمر السوائل الخلفية مع المجاميع الصغيرة الميوسين خزان النفايات. على الرغم من خصائص العينات السريرية فلويديك غير المتجانسة، يسترد الأسلوب المقترح استمرار أعلاه 95% العَدلات من عينات إفراز مجرى الهواء التي هي تضعف 1,000-fold مع المحلول الملحي نظيفة (~ 1 مل). على النقيض من ذلك، يعرض طريقة تحلل طائفة واسعة من بمنس معدلات الاسترداد استناداً الشرط الذي عينة. يلتقط البروتوكول المقترح الكريات البيضاء بطريقة خالية من التسمية مع لا اضطراب الفيزيائية أو الكيميائية، التي توفر إمكانية لحصاد الخلايا الحساسة من تحدي سريرياً القياسات الحيوية مع إجراءات كسبها.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>PDMS precursor</td>
			<td>Dow corning</td>
			<td>184 SIL ELAST KIT 3.9KG</td>
			<td>10:1 ratio of base and curing agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR gravity convection oven</td>
			<td>VWR</td>
			<td>414005-128</td>
			<td>PDMS precursor to be cured in 90 deg.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100mm petri dish</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89000-324</td>
			<td>Fabrication of PDMS Supporting layer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harris Uni-core puncher</td>
			<td>Sigma-aldrich</td>
			<td>WHAWB100076</td>
			<td>2mm diameter or other depending on the tubing size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Air plasma machine</td>
			<td>Femto Science</td>
			<td>Cute</td>
			<td>Surface plasma treatment for PDMS device to bottom base.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2&#8221; x 3&#8221; glass slide</td>
			<td>TED PELLA, INC.</td>
			<td>2195</td>
			<td>To support PDMS device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masterflex spooled platinum-cured silicone tubing, L/S 14</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>EW-96410-14</td>
			<td>Tubing for microfluidics and peristlatic pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/16 inch Luer connector, male</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>PC2 72-1443</td>
			<td>Connector for fluid guide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL Falcon tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21008-940</td>
			<td>sample collection &#38; preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-Buffered Saline, 1X Without Calcium and Magnesium</td>
			<td>Corning</td>
			<td>45000-446&#160;</td>
			<td>Buffer solution to dilute sample</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halyard Closed suction Catheter, Elbow, 14F/ channel 4.67mm</td>
			<td>HALYARD HEALTH</td>
			<td>22113</td>
			<td>Tracheal seceation suction catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% Sterile Normal saline, 10mL pre-filled syringe</td>
			<td>BD PosiFlush</td>
			<td>NHRIC: 8290-306547</td>
			<td>For tracheal seceation collection from the patients</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SecurTainer&#8482; III Specimen Containers, 20mL</td>
			<td>Simport</td>
			<td>1176R36</td>
			<td>Sterile sputum (airway secretion) collection container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe with Luer-Lok Tip, 10mL</td>
			<td>BD</td>
			<td>BD309604</td>
			<td>To pipette homogenize the mucus sample and reach the bottom of sample tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD&#160; Blunt Fill Needle, with BD Luer-Lok&#160; Tip</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td>To pipette homogenize the mucus sample and reach the bottom of sample tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40&#181;m nylon cell strainer&#160;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>21008-949</td>
			<td>To remove large chunk or blood clots, which can block the microfluidics access hole or the channel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic pump (Masterflex L/S Digital Drive)</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>HV-07522-30</td>
			<td>operation of microfluidics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD LSR II flow cytometer</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>LSR II flow cytometer</td>
			<td>Quantification of cell recovery ratio</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein isothiocyanate (FITC)-conjugated mouse anti-human CD66b monoclonal antibody</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>561927</td>
			<td>Immunostaining of neutrophils for Flow cytometer analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allophycocyanin (APC)-conjugated mouse anti-human CD45 monoclonal antibody</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>561864</td>
			<td>Immunostaining of neutrophils for Flow cytometer analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plate reader</td>
			<td>Thermo Fisher scientific</td>
			<td>Varioskan</td>
			<td>Plate reader for neutrophil elastase assay, ex485/em525</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutrophil elastase assay kit</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>600610</td>
			<td>Neutrophil functionality assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite YG Microspheres 10.0&#181;m</td>
			<td>PolyScience, Inc.</td>
			<td>18140-2</td>
			<td>Fluorescent particles to express white blood cell trajectory in microfluidics</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

label-free neutrophil enrichment from patient-derived airway secretion using closed-loop inertial microfluidics

مجرى الهواء إفرازات تحتوي على عدد كبير من الخلايا المتصلة بجهاز المناعة، مثلاً، العَدلات، الضامة، والخلايا الليمفاوية، التي يمكن استخدامها كمورد رئيسي لتقييم مجموعة متنوعة من الأمراض الرئوية، سواء بالنسبة للبحوث والأغراض السريرية. ومع ذلك، نظراً للطبيعة غير المتجانسة ولزوجة المخاط المريض، يوجد حاليا أي أسلوب الانفصال الموثوق بها التي لا تضر بالخلايا المناعية المضيف في إفراز مجرى الهواء المريض. في هذا البحث، علينا الأخذ بأسلوب إعداد نموذج يستخدم ميكروفلويديكس القصور الذاتي للتقييم المناعي للمريض. بغض النظر عن خصائص العينات السريرية فلويديك غير المتجانسة، يستعيد الطريقة المقترحة أكثر من 95 في المائة العَدلات من عينات إفراز مجرى الهواء التي هي المخفف 1,000-fold مع ملليلتر من المحلول الملحي نظيفة. وترد بتعميم دفق الإخراج المركزة إلى خزان عينة أولية، تركيزات عالية والانتعاش والنقاء من الخلايا المناعية؛ ويعتبر إعادة تدوير مفاضلة لتشغيل المستندة إلى حقنه واحدة تديرها ميكروفلويديكس القصور الذاتي. وتقدم العملية حلقة مغلقة من دوامة ميكروفلويديكس الكريات البيضاء دون اضطراب الفيزيائية أو الكيميائية، كما يتبين من phorbol 12-ميريستاتي 13-خلات (سلطة النقد الفلسطينية)-الناجم عن إطلاق سراح elastase العَدلات تم فرزها.

لقد حققنا معلقات الخلايا المناعية شفافة مع كلا DTT موكوليسيس وميكروفلويديكس الانفصال (الشكل 3A). ميكروفلويديكس تفارق جمعت 4.40 × 105 بمنس في المتوسط (2.1 × 104 إلى 5، 60 × 105 بمنس، n = 6) من مجرى الهواء إفراز عينات المخفف 1,000-fold (الحجم الإجمالي 50 مل) في 1 ?...

Watch this Scientific Journal Video about Label-free Neutrophil Enrichment from Patient-derived Airway Secretion Using Closed-loop Inertial Microfluidics at JoVE.com

Label-free Neutrophil Enrichment from Patient-derived Airway Secretion Using Closed-loop Inertial Microfluidics

في هذا البحث، نبدي طريقة فصل خالية من تسمية العَدلات من إفرازات السريرية مجرى الهواء باستخدام عملية مغلقة من دوامة القصور الذاتي ميكروفلويديكس. الطريقة المقترحة ستوسع فحوصات سريرية في المختبر لأمراض الجهاز التنفسي المختلفة.

تخصيب خالية من تسمية العَدلات من إفراز مجرى الهواء المستمدة من المريض استخدام حلقة مغلقة ميكروفلويديكس القصور الذاتي

Airway secretions contain a large number of immune-related cells, e.g., neutrophils, macrophages, and lymphocytes, which can be used as a major resource ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

على المدى الطويل المزمن<em&gt; الزائفة الزنجارية</em&gt; عدوى مجرى الهواء في الفئران

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Detection of Human Leukocyte Antigen Biomarkers in Breast Cancer Utilizing Label-free Biosensor Technology

الكشف عن خلايا الدم البيضاء الإنسان مستضد المؤشرات الحيوية في سرطان الثدي الاستفادة تسمية خالية جهاز الاستشعار البيولوجي تقنية

According to the American Cancer Society, more than 200,000 women will be diagnosed with invasive breast cancer each year and approximately 40,000 will ...

Intravital Imaging of Neutrophil Priming Using IL-1&#946; Promoter-driven DsRed Reporter Mice

Intravital Imaging of Neutrophil Priming Using IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² Promoter-driven DsRed Reporter Mice

التصوير حيوي داخلي من العدلات الاشعال عن طريق IL-1β يحركها المروج عن dsRed الفئران مراسل

Neutrophils are the most abundant leukocytes in human blood circulation and are quickly recruited to inflammatory sites. Priming is a critical event that ...

Imaging the Neutrophil Phagosome and Cytoplasm Using a Ratiometric pH Indicator

تصوير العدلات يبلوع والسيتوبلازم باستخدام الرقم الهيدروجيني المؤشر Ratiometric

Neutrophils are crucial to host innate defense and, consequently, constitute an important area of medical research. The phagosome, the intracellular ...

An All-on-chip Method for Rapid Neutrophil Chemotaxis Analysis Directly from a Drop of Blood

طريقة الكل على رقاقة للتحليل الكيميائي العدلات السريعة مباشرة من قطرة الدم

Neutrophil migration and chemotaxis are critical for our body's immune system. Microfluidic devices are increasingly used for investigating neutrophil ...

Label-Free Identification of Lymphocyte Subtypes Using Three-Dimensional Quantitative Phase Imaging and Machine Learning

تحديد أنواع فرعية اللمفاويات باستخدام التصوير ثلاثي الأبعاد الكمية المرحلة خالية من التسمية وآله التعلم

We describe here a protocol for the label-free identification of lymphocyte subtypes using quantitative phase imaging and machine learning. Identification ...

Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT

التلقائي القائم علي الصورة الكمية من الفخاخ العدلات خارج الخلية باستخدام NETQUANT

Neutrophil extracellular traps (NETs) are web-like antimicrobial structures consisting of DNA and granule derived antimicrobial proteins. ...

Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy

تحديد الفخاخ نيوتروفيل خارج الخلية في البارافين جزءا لا يتجزأ من الخيط الشرياني Thrombi باستخدام المجهر Immunofluorescence

Neutrophil extracellular traps (NETs), composed of cell-free DNA (cfDNA) and proteins like histones and neutrophil elastase (NE), are released by ...

Label-Free Quantitative Proteomics Workflow for Discovery-Driven Host-Pathogen Interactions

خالية من التسمية تدفق عمل البروتوميات الكمية للتفاعلات المُضيفة-الممرضة مدفوعة بالإكتشاف

The technological achievements of mass spectrometry (MS)-based quantitative proteomics opens many undiscovered avenues for analyzing an organism&#8217;s ...

Quantifying Myeloperoxidase-DNA and Neutrophil Elastase-DNA Complexes from Neutrophil Extracellular Traps by Using a Modified Sandwich ELISA

القياس الكمي لمعقدات الميلوبيروكسيديز - الحمض النووي و Neutrophil Elastase-DNA من مصائد العدلات خارج الخلية باستخدام شطيرة ELISA المعدلة

Certain stimuli, such as microorganisms, cause neutrophils to release neutrophil extracellular traps (NETs), which are basically web-like structures ...