Name: the plant infection test: spray and wound-mediated inoculation with the plant pathogen magnaporthe grisea
Uploaded: 2018-08-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי הפרויקט מחקר מדעי מיוחד של האוניברסיטה לחקלאות של בייג'ינג (YQ201603) ואת הפרויקט המדעי של ועדת חינוך בייג'ינג (KM201610020005).

1. ספריי חיסון עם השעיה של Conidia מ grisea
<ol><li>
תרבות פטרייתי M.grisea
	<ol>
<li>היכונו המדיום תרבות שיבולת שועל אגר (OTA) עגבניות זני פטריות.</li>
		<li>שוקל 30-50 גר' שיבולת שועל, להוסיף את זה לרשימת 800 מ ל מים מזוקקים/יונים (ddH2O), מרתיחים את התערובת למשך 30 דקות בסיר חשמלי.</li>
		<li>סנן את המיץ ...

<ol>
	<li>Li, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+natural+allele+of+a+transcription+factor+in+rice+confers+broad-spectrum+blast+resistance.">A natural allele of a transcription factor in rice confers broad-spectrum blast resistance.</a> Cell. 170 (1), 114-126 (2017).</li><li>Chi, M. H., Park, S. Y., Kim, S., Lee, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+pathogenicity+gene+is+required+in+the+rice+blast+fungus+to+suppress+the+basal+defenses+of+the+host.">A novel pathogenicity gene is required in the rice blast fungus to suppress the basal defenses of the host.</a> PLoS Pathogens. 5 (4), 1000401 (2009).</li><li>Jia, Y., Valent, B., Lee, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+host+responses+to+Magnaporthe+grisea.on+detached+rice+leaves+using+a+spot+inoculation+method.">Determination of host responses to Magnaporthe grisea.on detached rice leaves using a spot inoculation method.</a> Plant Disease. 87 (2), 129-133 (2003).</li><li>Ebbole, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnaporthe+as+a+model+for+understanding+host-pathogen+interactions.">Magnaporthe as a model for understanding host-pathogen interactions.</a> Annual Review of Phytopathology. 45, 437-456 (2007).</li><li>Hamer, J. E., Talbot, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection-related+development+in+the+rice+blast+fungus+Magnaporthe+grisea.">Infection-related development in the rice blast fungus Magnaporthe grisea.</a> Current Opinion in Microbiology. 1 (6), 693-697 (1998).</li><li>Howard, R. J., Valent, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breaking+and+entering:+host+penetration+by+the+fungal+rice+blast+pathogen+Magnaporthe+grisea.">Breaking and entering: host penetration by the fungal rice blast pathogen Magnaporthe grisea.</a> Annual Review of Microbiology. 50, 491-512 (1996).</li><li>Chen, X. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-Glycosylation+of+Effector+Proteins+by+an+&#945;-1,3-+Mannosyltransferase+Is+Required+for+the+Rice+Blast+Fungus+to+Evade+Host+Innate+Immunity.">N-Glycosylation of Effector Proteins by an &#945;-1,3- Mannosyltransferase Is Required for the Rice Blast Fungus to Evade Host Innate Immunity.</a> The Plant Cell. 26 (3), 1360-1376 (2014).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M.ARG1,+MoARG5,6+and+MoARG7+involved+in+arginine+biosynthesis+are+essential+for+growth,+conidiogenesis,+sexual+reproduction,+and+pathogenicity+in+Magnaporthe+oryzae.">M.ARG1, MoARG5,6 and MoARG7 involved in arginine biosynthesis are essential for growth, conidiogenesis, sexual reproduction, and pathogenicity in Magnaporthe oryzae.</a> Microbiological Research. 180, 11-22 (2015).</li><li>Du, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+serine/threonine-protein+phosphatase+PP2A+catalytic+subunit+is+essential+for+asexual+development+and+plant+infection+in+Magnaporthe+oryzae.">A serine/threonine-protein phosphatase PP2A catalytic subunit is essential for asexual development and plant infection in Magnaporthe oryzae.</a> Current Genetics. 59 (1-2), 33-41 (2013).</li><li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+protein+com1+is+required+for+normal+conidium+morphology+and+full+virulence+in+Magnaporthe+oryzae.">A novel protein com1 is required for normal conidium morphology and full virulence in Magnaporthe oryzae.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions. 23 (1), 112-123 (2010).</li><li>Cao, Z. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+ash1-like+protein+MoKMT2H+null+mutant+is+delayed+for+conidium+germination+and+pathogenesis+in+Magnaporthe+oryzae.">An ash1-like protein MoKMT2H null mutant is delayed for conidium germination and pathogenesis in Magnaporthe oryzae.</a> BioMed Research International. 2016, 1575430 (2016).</li><li>Bryan, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+amino+acid+difference+distinguishes+resistant+and+susceptible+alleles+of+the+rice+blast+resistance+gene+Pi-ta.">A single amino acid difference distinguishes resistant and susceptible alleles of the rice blast resistance gene Pi-ta.</a> The Plant Cell. 12 (11), 2033-2045 (2000).</li><li>Zhou, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+pathology:+a+life+and+death+struggle+in+rice+blast+disease.">Plant pathology: a life and death struggle in rice blast disease.</a> Current Biology. 26 (18), 843-845 (2016).</li><li>Guo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MoGrr1,+a+novel+F-box+protein,+is+involved+in+conidiogenesis+and+cell+wall+integrity+and+is+critical+for+the+full+virulence+of+Magnaporthe+oryzae.">MoGrr1, a novel F-box protein, is involved in conidiogenesis and cell wall integrity and is critical for the full virulence of Magnaporthe oryzae.</a> Applied Microbiology and Biotechnology. 99 (19), 8075-8088 (2015).</li><li>Talbot, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+trail+of+a+cereal+killer:+Exploring+the+biology+of+Magnaporthe+grisea.">On the trail of a cereal killer: Exploring the biology of Magnaporthe grisea.</a> Annual Review of Microbiology. 57, 177-202 (2009).</li><li>Wilson, R. A., Talbot, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Under+pressure:+investigating+the+biology+of+plant+infection+by+Magnaporthe+oryzae.">Under pressure: investigating the biology of plant infection by Magnaporthe oryzae.</a> Nature Reviews Microbiology. 7, 185-195 (2009).</li><li>Jia, Y. L., Lee, F. N., McClung, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Resistance+Spectra+of+the+Pi-ta+and+Pi-k+Genes+to+U.S.+Races+of+Magnaporthe+oryzae+Causing+Rice+Blast+in+a+Recombinant+Inbred+Line+Population.">Determination of Resistance Spectra of the Pi-ta and Pi-k Genes to U.S. Races of Magnaporthe oryzae Causing Rice Blast in a Recombinant Inbred Line Population.</a> Plant Disease. 93, 639-644 (2009).</li><li>Peng, Y. L., Shishiyama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+sequence+of+cytological+events+in+rice+leaves+infected+with+Pyricularia+oryzae.">Temporal sequence of cytological events in rice leaves infected with Pyricularia oryzae.</a> Canadian Journal of Botany. 66 (4), 730-735 (1988).</li></ol>

גנים עמידות למחלות צמחים תפקיד חיוני במניעת זיהומים על ידי פתוגנים, כולל פתוגנים ופטריות1,12. אורז הפיצוץ שימש כמודל להבין את טבעם של פתוגן האוכלוסייה מבנים, וכן לזיהוי צמח ההתנגדות גנים4. לכן, יש צורך לבחון את המחלה ההתנגדות גנוטיפ ואת avirulence אחר?...

הפיצוץ אורז, הנגרמת על ידי מ grisea, היא אחת המחלות הכי רציני אורז הזנים ברחבי העולם1,2. התהליך שבאמצעותו מ grisea מדביק צמחים פונדקאים כולל ייצור conidia, מצורף משטח, נביטה conidia עם היווצרות appressorium, היווצרות של חדירה פג ובידול hypha זיהומית, ולהפיץ מחלה 3. כל השלבים האלה שכיחים אצל רבים אחרים צמח פתוגניים פטריות, ומונעת, ואכן, מצור. על כל שלב בודד הזיהום של צמחים פונדקאים. בשל החשיבות הכלכלית שלה, גנטי ללקוחות שלנו, מ grisea התפתחה אורגניזם מודל לומד את המנגנונים של צמח-פטריות פתוגניות אינטראקציות1,4. לכן, לימוד הבסיס המולקולרי של אלה שלבים התפתחותיים מ grisea יעזור להבהיר את המנגנונים המולקולריים שבבסיס פטריות פתוגניות וזיהוי של המועמד גנים היעד של ההקרנה, עיצוב הרומן קוטלי פטריות5.
דיווחים אחרונים בנוגע grisea מ זיהום התמקדו המנגנונים המולקולריים של שלבי טרום חדירה, במיוחד את conidiation, היווצרות appressorium, את היתדות חדירה ואת הצמיחה זיהומיות3, 6. לכן חיוני לפתח פרוטוקול מפורט לבדיקת זיהום grisea מ' . במסמך זה, אנו מציגים שיטה מפורטת עבור בדיקת זיהום אשר מנצל מבחני זיהום בתיווך ספריי עם השעיה conidial, את חיסון של פצעים עם תקעים mycelial של grisea מ'. בדו ח זה, הפרוטוקול מתמקד התרבות של זנים, הכנת הפתרון conidiation ריסוס, חיסון בתיווך הכנס mycelial של צמחים עם grisea מ'. שלבים אלה מתוארים פירוט בהמשך, ומבט סכמטית מציג את זרימת העבודה כולו של השיטה, פצע אופייני מוצגות דמויות 1 ו- 2, בהתאמה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:797px;" width="796">
	<tbody>
		<tr height="77">
			<td height="77" style="height:77px;width:216px;">&#160;Agar</td>
			<td style="width:177px;">AOBOX Biotechnology&#65288;China&#65289;</td>
			<td style="width:207px;">01-023</td>
			<td style="width:197px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;">Filter paper</td>
			<td style="width:177px;">GE Healthcare brand(Sweden)&#160;&#160;</td>
			<td>10311387</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">50-mL tube</td>
			<td style="width:177px;">CORNING(Amercia)</td>
			<td style="width:207px;">430290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:177px;">Eppendorf(Amercia)</td>
			<td style="width:207px;">5804R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">Tween-20</td>
			<td style="width:177px;">Coolaber&#65288;China&#65289;</td>
			<td style="width:207px;">CT11551-100ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="50">
			<td height="50" style="height:50px;width:216px;">Culture dish</td>
			<td style="width:177px;">Thermofisher(Amercia)</td>
			<td>150326</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">0.5-5 mL pipette</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td style="width:207px;">&#160;4920000105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">100-1000uL pipette</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>4920000083</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Vacuum pump</td>
			<td style="width:177px;">Leybold</td>
			<td style="width:207px;">D25B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Dissection needle</td>
			<td style="width:177px;">FST</td>
			<td style="width:207px;">26000-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Incubator</td>
			<td style="width:177px;">MEMMERT</td>
			<td style="width:207px;">PYX313</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Inoculation ring</td>
			<td style="width:177px;">Greiner Bio One</td>
			<td style="width:207px;">731175</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the plant infection test: spray and wound-mediated inoculation with the plant pathogen magnaporthe grisea

צמחים בעלי מערכת חזקה כדי להגן על עצמם מפני איומים פוטנציאליים על ידי פטריות פתוגניים. בצמחים חשוב בחקלאות, אולם, אמצעים הנוכחי כדי להלחם פתוגנים כאלה הוכיחו שמרן מדי, לכן, לא מספיק יעיל, והם יכול העלול להוות סיכונים סביבתיים. לכן, זה הכרחי מאוד כדי זיהוי המארח-התנגדות גורמים כדי לסייע מחלות השליטה באופן טבעי דרך זיהוי עמיד germplasm, הבידוד, אפיון גנים עמידות ו רבייה מולקולרית של הזנים עמיד. בהקשר זה, יש צורך להקים שיטה מדויקת, מהירה, בקנה מידה גדול חיסון להתרבות ולפתח גנים עמידות צמחים. האורז הפיצוץ תסמיני המחלה חמורה של גורם Magnaporthe grisea פטריות פתוגניות, תשואות הפסדים. לאחרונה, מ grisea התפתחה אורגניזם מודל לומד את המנגנונים של אינטראקציות צמח-פטריות פתוגניות. לפיכך, מדווחים על התפתחות הצמח התקפה אלימה מתודת בדיקה ספציפית עבור grisea מ'. שיטה זו מספקת חיסון בתרסיס עם השעיה conidial וגם ופצעו חיסון עם קוביות תפטיר או טיפות השעיה conidial. השלב מפתח של שיטת חיסון wounding אורז מנותק עלים הוא לעשות פצעים על עלי הצמח, הנמנעת כל הפרעה הנגרמת על ידי המארח חדירה ההתנגדות. זה ספריי ופצעו פרוטוקול תורמת הקרנת מהירה, מדויקת, בקנה מידה גדול pathotypes של grisea מ' מבודד. זה משולב, משיטת ההדבקה צמח שיטתית ישמש נקודת התחלה מצוינת להשגת פרספקטיבה רחבה של סוגיות פתולוגיה.

זרימת העבודה כולו הטכניקה מוצג באיור1. מבחני זיהום הצמח בוצעו על שתילי אורז רגישים בת 14 יום (או סאטיבה cv CO-39) או רגישים שעורה בן יום-7 עלים (מבטיח הזהבמצויה ה cv)7,8,9. לבדיקת זיהום על העלים אורז, השעיה ...

Watch this Scientific Journal Video about The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea at JoVE.com

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

הבדיקה זיהום צמח: ריסוס, בתיווך הפצע חיסון עם הפתוגן של צמח Magnaporthe Grisea

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול כדי לבדוק התקפה אלימה צמח עם המחלה צמח Magnaporthe grisea. דוח זה לתרום הקרנת בקנה מידה גדול pathotypes של פטריות מבודד, לשמש נקודת התחלה מצוינת להבנת מנגנוני עמידות הצמחים במהלך ההתרבות מולקולרית.

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current ...

Research

JoVE Journal

Environment

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

שיטות לביצוע צלבים ב<em&gt; Setaria viridis</em&gt;, מערכת דגם חדש לעשבים

Setaria viridis is an emerging model system for C4 grasses. It is closely related to the bioenergy feed stock switchgrass and the grain crop foxtail ...

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

שיטה מהירה ויעילה להערכת פתוגניות של מיאדי אוסטילגו על קווי תירס וטוסינטה

Maize is a major cereal crop worldwide. However, susceptibility to biotrophic pathogens is the primary constraint to increasing productivity. U. maydis is ...

Single-plant, Sterile Microcosms for Nodulation and Growth of the Legume Plant Medicago truncatula with the Rhizobial Symbiont Sinorhizobium meliloti

Single-plant, Sterile Microcosms for Nodulation and Growth of the Legume Plant Medicago truncatula with the Rhizobial Symbiont Sinorhizobium meliloti

Single-צמח, סטרילי מיקרוקוסמוס לNodulation וצמיחה של צמח הקטניות<em&gt; Medicago truncatula</em&gt; עם סימביונט Rhizobial<em&gt; Sinorhizobium meliloti</em

Rhizobial  bacteria form symbiotic, nitrogen-fixing nodules on the roots of compatible host  legume plants.  One  of the most well-developed model systems ...

Transcript and Metabolite Profiling for the Evaluation of Tobacco Tree and Poplar as Feedstock for the Bio-based Industry

תמליל והמטבוליט Profiling להערכת של טבק ועץ צפצפה כחומר גלם לתעשייה המבוססת על ביו

The global demand for food, feed, energy, and water poses extraordinary challenges for future generations. It is evident that robust platforms for the ...

Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

יישום של קרדית העכביש הבחין-Two<em&gt; Tetranychus urticae</em&gt; לאינטראקצית צמח-מזיקים ללימודים

The two-spotted spider mite, Tetranychus urticae, is a ubiquitous polyphagous arthropod herbivore that feeds on a remarkably broad array of species, with ...

The Use of High-resolution Infrared Thermography (HRIT) for the Study of Ice Nucleation and Ice Propagation in Plants

The Use of High-resolution Infrared Thermography HRIT for the Study of Ice Nucleation and Ice Propagation in Plants

השימוש ברזולוציה גבוהה אינפרא אדום תרמוגרפיה (HRIT) לחקר הקרח נוקלאציה וקרח רביה בצמחים

Freezing events that occur when plants are actively growing can be a lethal event, particularly if the plant has no freezing tolerance. Such frost events ...

A New Application of the Electrical Penetration Graph (EPG) for Acquiring and Measuring Electrical Signals in Phloem Sieve Elements

A New Application of the Electrical Penetration Graph EPG for Acquiring and Measuring Electrical Signals in Phloem Sieve Elements

יישום חדש של החשמל חדירה הגרף (EPG) לרכישה ומדידת אותות חשמליים שביפים מסננת אלמנטים

Electrophysiological properties of cells are often studied in vitro, after dissociating them from their native environments. However, the study of ...

Operation of a 25 KWth Calcium Looping Pilot-plant with High Oxygen Concentrations in the Calciner

Operation of a 25 KWth Calcium Looping Pilot-plant with High Oxygen Concentrations in the Calciner

הפעולה של 25 KWth סידן לולאה טייס-צמח עם ריכוז חמצן גבוהה ב- Calciner

Calcium looping (CaL) is a post-combustion CO2 capture technology that is suitable for retrofitting existing power plants. The CaL process uses limestone ...

Adherence of Bacteria to Plant Surfaces Measured in the Laboratory

דבקותה של חיידקים לשתול משטחים הנמדדים במעבדה

This manuscript describes a method to measure bacterial binding to axenic plant surfaces in the light microscope and through the use of viable cell ...

Specific and Accurate Detection of the Citrus Greening Pathogen Candidatus liberibacter spp. Using Conventional PCR on Citrus Leaf Tissue Samples

Specific and Accurate Detection of the Citrus Greening Pathogen Candidatus liberibacter  spp. Using Conventional PCR on Citrus Leaf Tissue Samples

ספציפית, איתור מדויק של spp. הפתוגן ירוק הדרים Candidatus liberibacter באמצעות PCR המקובלת על דגימות רקמה עלה הדרים

Citrus greening, also known as huanglongbing, is a destructive citrus disease ravaging citrus farms globally. This disease causes asymmetrical yellow leaf ...