Name: oral bacterial infection and shedding in drosophila melanogaster
Uploaded: 2018-05-31T14:45:00
Duration: 9 min 32 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Oral Bacterial Infection and Shedding in Drosophila melanogaster at JoVE.com

यह काम केंद्र के लिए प्रतिरक्षा, संक्रमण और विकास के लिए वेलकम ट्रस्ट से एक रणनीतिक पुरस्कार द्वारा समर्थित किया गया था (http://ciie.bio.ed.ac.uk; अनुदान संदर्भ no. ०९५८३१) । PFV एक Branco Weiss फैलोशिप (https://brancoweissfellowship.org/) और एक चांसलर फैलोशिप (जैव विज्ञान के स्कूल, एडिनबर्ग के विश्वविद्यालय) द्वारा समर्थित किया गया था; JASJ एक NERC E3 डीटीपी पीएचडी की छात्रा द्वारा समर्थित किया गया था ।

<ol>
	<li>Hoffmann, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immune+response+of+Drosophila.">The immune response of Drosophila.</a> Nature. 426 (6962), 33-38 (2003).</li><li>Buchon, N., Silverman, N., Cherry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+in+Drosophila+melanogaster+-+from+microbial+recognition+to+whole-organism+physiology.">Immunity in Drosophila melanogaster - from microbial recognition to whole-organism physiology.</a> Nat Rev Immunol. 14 (12), 796-810 (2014).</li><li>Bergman, P., Seyedoleslami Esfahani, S., Engstr&#246;m, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+as+a+Model+for+Human+Diseases-Focus+on+Innate+Immunity+in+Barrier+Epithelia.">Drosophila as a Model for Human Diseases-Focus on Innate Immunity in Barrier Epithelia.</a> Curr Top Dev Biol. 121, 29-81 (2017).</li><li>Apidianakis, Y., Rahme, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+melanogaster+as+a+model+host+for+studying+Pseudomonas+aeruginosa+infection.">Drosophila melanogaster as a model host for studying Pseudomonas aeruginosa infection.</a> Nat Protoc. 4 (9), 1285-1294 (2009).</li><li>Khalil, S., Jacobson, E., Chambers, M. C., Lazzaro, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+Bacterial+Infection+and+Immune+Defense+Phenotypes+in+Drosophila+Melanogaster.">Systemic Bacterial Infection and Immune Defense Phenotypes in Drosophila Melanogaster.</a> JoVE J Vis Exp. (99), e52613-e52613 (2015).</li><li>Neyen, C., Bretscher, A. J., Binggeli, O., Lemaitre, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+to+study+Drosophila+immunity.">Methods to study Drosophila immunity.</a> Methods San Diego Calif. 68 (1), 116-128 (2014).</li><li>Nehme, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Model+of+Bacterial+Intestinal+Infections+in+Drosophila+melanogaster.">A Model of Bacterial Intestinal Infections in Drosophila melanogaster.</a> PLOS Pathog. 3 (11), e173 (2007).</li><li>Bou Sleiman, M. S., Osman, D., Massouras, A., Hoffmann, A. A., Lemaitre, B., Deplancke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic,+molecular+and+physiological+basis+of+variation+in+Drosophila+gut+immunocompetence.">Genetic, molecular and physiological basis of variation in Drosophila gut immunocompetence.</a> Nat Commun. 6, 7829 (2015).</li><li>Buchon, N., Broderick, N. A., Lemaitre, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gut+homeostasis+in+a+microbial+world:+insights+from+Drosophila+melanogaster.">Gut homeostasis in a microbial world: insights from Drosophila melanogaster.</a> Nat Rev Microbiol. 11 (9), 615-626 (2013).</li><li>Kuraishi, T., Hori, A., Kurata, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host-microbe+interactions+in+the+gut+of+Drosophila+melanogaster.">Host-microbe interactions in the gut of Drosophila melanogaster.</a> Front Physiol. 4, (2013).</li><li>Ha, E. -. M., Oh, C. -. T., Bae, Y. S., Lee, W. -. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Direct+Role+for+Dual+Oxidase+in+Drosophila+Gut+Immunity.">A Direct Role for Dual Oxidase in Drosophila Gut Immunity.</a> Science. 310 (5749), 847-850 (2005).</li><li>Limmer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+RhlR+is+required+to+neutralize+the+cellular+immune+response+in+a+Drosophila+melanogaster+oral+infection+model.">Pseudomonas aeruginosa RhlR is required to neutralize the cellular immune response in a Drosophila melanogaster oral infection model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 108 (42), 17378-17383 (2011).</li><li>Apidianakis, Y., Pitsouli, C., Perrimon, N., Rahme, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergy+between+bacterial+infection+and+genetic+predisposition+in+intestinal+dysplasia.">Synergy between bacterial infection and genetic predisposition in intestinal dysplasia.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (49), 20883-20888 (2009).</li><li>Vodovar, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+host+defense+after+oral+infection+by+an+entomopathogenic+Pseudomonas+species.">Drosophila host defense after oral infection by an entomopathogenic Pseudomonas species.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (32), 11414-11419 (2005).</li><li>Chugani, S. A., Whiteley, M., Lee, K. M., D'Argenio, D., Manoil, C., Greenberg, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=QscR,+a+modulator+of+quorum-sensing+signal+synthesis+and+virulence+in+Pseudomonas+aeruginosa.">QscR, a modulator of quorum-sensing signal synthesis and virulence in Pseudomonas aeruginosa.</a> Proc Natl Acad Sci. 98 (5), 2752-2757 (2001).</li><li>Gupta, V., Vasanthakrishnan, R. B., Siva-Jothy, J., Monteith, K. M., Brown, S. P., Vale, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+route+of+infection+determines+Wolbachia+antibacterial+protection+in+Drosophila.">The route of infection determines Wolbachia antibacterial protection in Drosophila.</a> Proc R Soc B. 284 (1856), 20170809 (2017).</li><li>Martins, N. E., Faria, V. G., Teixeira, L., Magalh&#227;es, S., Sucena, &. #. 2. 0. 1. ;. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+Adaptation+Is+Contingent+upon+the+Infection+Route+Taken+by+Pathogens.">Host Adaptation Is Contingent upon the Infection Route Taken by Pathogens.</a> PLoS Pathog. 9 (9), (2013).</li><li>Chambers, M. C., Jacobson, E., Khalil, S., Lazzaro, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thorax+Injury+Lowers+Resistance+to+Infection+in+Drosophila+melanogaster.">Thorax Injury Lowers Resistance to Infection in Drosophila melanogaster.</a> Infect Immun. 82 (10), 4380-4389 (2014).</li><li>Gupta, V., Stewart, C., Rund, S. S., Monteith, K., Vale, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Costs+and+benefits+of+sublethal+Drosophila+C+virus+infection.">Costs and benefits of sublethal Drosophila C virus infection.</a> J Evol Biol. , (2017).</li><li>Ferreira, &. #. 1. 9. 3. ;. G., Naylor, H., Esteves, S. S., Pais, I. S., Martins, N. E., Teixeira, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Toll-Dorsal+Pathway+Is+Required+for+Resistance+to+Viral+Oral+Infection+in+Drosophila.">The Toll-Dorsal Pathway Is Required for Resistance to Viral Oral Infection in Drosophila.</a> PLoS Pathog. 10 (12), (2014).</li><li>Buchon, N., Broderick, N. A., Poidevin, M., Pradervand, S., Lemaitre, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+Intestinal+Response+to+Bacterial+Infection:+Activation+of+Host+Defense+and+Stem+Cell+Proliferation.">Drosophila Intestinal Response to Bacterial Infection: Activation of Host Defense and Stem Cell Proliferation.</a> Cell Host Microbe. 5 (2), 200-211 (2009).</li><li>Wayland, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spotting+the+differences:+Probing+host/microbiota+interactions+with+a+dedicated+software+tool+for+the+analysis+of+faecal+outputs+in+Drosophila.">Spotting the differences: Probing host/microbiota interactions with a dedicated software tool for the analysis of faecal outputs in Drosophila.</a> J Insect Physiol. 69, 126-135 (2014).</li><li>Hori, A., Kurata, S., Kuraishi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unexpected+role+of+the+IMD+pathway+in+Drosophila+gut+defense+against+Staphylococcus+aureus.">Unexpected role of the IMD pathway in Drosophila gut defense against Staphylococcus aureus.</a> Biochem Biophys Res Commun. 495 (1), 395-400 (2018).</li><li>Ren, C., Webster, P., Finkel, S. E., Tower, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+Internal+and+External+Bacterial+Load+during+Drosophila+Aging+without+Life-Span+Trade-Off.">Increased Internal and External Bacterial Load during Drosophila Aging without Life-Span Trade-Off.</a> Cell Metab. 6 (2), 144-152 (2007).</li><li>Ezenwa, V. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+behaviour-parasite+feedback:+an+essential+link+between+animal+behaviour+and+disease+ecology.">Host behaviour-parasite feedback: an essential link between animal behaviour and disease ecology.</a> Proc R Soc B. 283 (1828), 20153078 (2016).</li><li>McCallum, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breaking+beta:+deconstructing+the+parasite+transmission+function.">Breaking beta: deconstructing the parasite transmission function.</a> Phil Trans R Soc B. 372 (1719), 20160084 (2017).</li><li>Vale, P. F., Choisy, M., Little, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+nutrition+alters+the+variance+in+parasite+transmission+potential.">Host nutrition alters the variance in parasite transmission potential.</a> Biol Lett. 9 (2), 20121145 (2013).</li><li>Mulcahy, H., Sibley, C. D., Surette, M. G., Lewenza, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+melanogaster+as+an+Animal+Model+for+the+Study+of+Pseudomonas+aeruginosa+Biofilm+Infections+In+Vivo.">Drosophila melanogaster as an Animal Model for the Study of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections In Vivo.</a> PLoS Pathog. 7 (10), e1002299 (2011).</li><li>Kuraishi, T., Binggeli, O., Opota, O., Buchon, N., Lemaitre, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+evidence+for+a+protective+role+of+the+peritrophic+matrix+against+intestinal+bacterial+infection+in+Drosophila+melanogaster.">Genetic evidence for a protective role of the peritrophic matrix against intestinal bacterial infection in Drosophila melanogaster.</a> Proc Natl Acad Sci. 108 (38), 15966-15971 (2011).</li><li>Myllym&#228;ki, H., Valanne, S., R&#228;met, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+Imd+Signaling+Pathway.">The Drosophila Imd Signaling Pathway.</a> J Immunol. 192 (8), 3455-3462 (2014).</li><li>Lewis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+standard+food+medium.">A new standard food medium.</a> Cold Spring Harb Protoc. 2014 (9), pdb.rec081414 (2014).</li><li>Bolker, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generalized+linear+mixed+models:+a+practical+guide+for+ecology+and+evolution.">Generalized linear mixed models: a practical guide for ecology and evolution.</a> Trends Ecol Evol. 24 (3), 127-135 (2009).</li><li>R Core Team. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> R: A Language and Environment for Statistical Computing. , (2015).</li><li>Schmittgen, T. D., Livak, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+real-time+PCR+data+by+the+comparative+CT+method.">Analyzing real-time PCR data by the comparative CT method.</a> Nat Protoc. 3 (6), 1101-1108 (2008).</li><li>Kalbfleisch, J. D., Prentice, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Statistical Analysis of Failure Time Data. , (2002).</li><li>. Drosophila melanogaster, drawing.SVG Available from: <a target="_blank" href="https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Drosophila-drawing.svg">https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Drosophila-drawing.svg</a> (2007)</li><li>. Example of a survival curve estimated by Kaplan-Meier method including 95% confidence limits Available from: <a target="_blank" href="https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Kaplan-Meier-sample-plot.svg">https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Kaplan-Meier-sample-plot.svg</a> (2011)</li><li>Susi, H., Vale, P. F., Laine, A. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+Genotype+and+Coinfection+Modify+the+Relationship+of+within+and+between+Host+Transmission.">Host Genotype and Coinfection Modify the Relationship of within and between Host Transmission.</a> Am Nat. 186 (2), 252-263 (2015).</li><li>Fellous, S., Duncan, A. B., Quillery, E., Vale, P. F., Kaltz, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+influence+on+disease+spread+following+arrival+of+infected+carriers.">Genetic influence on disease spread following arrival of infected carriers.</a> Ecol Lett. 15 (3), 186-192 (2012).</li></ol>

हम मज़बूती से मौखिक रूप से जीवाणु रोगजनकों के साथ D. melanogaster को संक्रमित करने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं । हम पी. aeruginosa और पी. entomophilaपर ध्यान केंद्रित है, लेकिन इस प्रोटोकॉल को आसानी से अंय जीवाणु प्रजातियों के संक्रमण को सक्षम करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है, जैसे, Serratia marcescens7। इस प्रोटोकॉल के मुख्य पहलुओं बैक्टीरियल प्रजातियों के बीच भिंन होगा । तदनुसार, सबसे कुशल संक्रामक खुराक, इसी डाह, और मेजबान जीनोटाइप संवेदनशीलता सभी पर विचार किया जाना चाहिए और आदर्श पायलट अध्ययन में जांच की । ऑप्टिकल घनत्व की एक सीमा के जीवाणु संस्कृतियों को उजागर मक्खियों और उनके संक्रामक खुराक और अस्तित्व को मापने के नए जीवाणु प्रजातियों के साथ काम कर रहे हैं या लाइनों मक्खी जब एक उचित प्रारंभिक बिंदु है ।
प्रोटोकॉल जैसे मक्खी भुखमरी से पहले खिलाने और 5% सुक्रोज समाधान में बैक्टीरियल छर्रों फिर से सस्पैंड के रूप में कदम मौखिक संक्रमण में आम है और जोखिम के दौरान जीवाणु संक्रमण की विश्वसनीयता में वृद्धि7,8, 9 , 10. हालांकि, यह ध्यान दें कि जोखिम के दौरान महत्वपूर्ण है, मूलतः जीवाणु संस्कृति की सतह पर जीना मक्खियों । इस संस्कृति पर चलने की प्रक्रिया में, बैक्टीरिया मक्खी की सतह पर दर्ज हो जाएगा, विशेष रूप से छल्ली पर या bristles24के आसपास । ये epicuticular बैक्टीरिया, एक सफल प्रवेश संक्रमण को प्रतिबिंबित नहीं करते लेकिन अभी भी मक्खी homogenization और चढ़ाना द्वारा पता लगाया जाएगा । झूठी सकारात्मक के लिए क्षमता को कम करने के लिए, यह करने के लिए 1 मिनट के लिए ७०% इथेनॉल में विसर्जन के माध्यम से मक्खी निष्फल सतह आवश्यक है ।
जब बैक्टीरिया बहा दरों पर विचार, मौखिक संक्रमण आवश्यक है । पर्यावरण में एक मेजबान विज्ञप्ति रोगजनकों की संख्या अक्सर मापने के लिए मुश्किल है और आंतरिक लोड अक्सर संक्रमण की गंभीरता के लिए एक प्रॉक्सी के रूप में लिया जाता है और इसलिए26संचरण,27। बैक्टीरियल छप्पर के साथ बैक्टीरियल लोड मापने रोग गंभीरता और प्रसार के इन दो महत्वपूर्ण घटकों के बीच संबंधों की एक परीक्षा३८की अनुमति देता है । प्रस्तुत विधि की एक सीमा है कि मक्खियों के आंतरिक जीवाणु लोड परख विनाशकारी नमूना की आवश्यकता है । यह एक ही व्यक्ति के भीतर रोगज़नक़ विकास और निकासी की अनुदैर्ध्य प्रवृत्तियों की जांच करने के लिए मुश्किल बना देता है । हालांकि, यह संक्रमण के विभिंन चरणों में व्यक्तियों के विनाशकारी नमूना साथियों द्वारा इस सीमा पर काबू पाने के लिए संभव है, इस धारणा के तहत कि प्रत्येक पलटने में औसत सूक्ष्म जीव लोड अनुदैर्ध्य रोगजनक गतिशीलता के भीतर किसी भी दिया दर्शाता है व्यक्तिगत. बैक्टीरियल छप्पर एक ही सीमाओं से ग्रस्त नहीं है, और हम कैसे छप्पर एक पार में quantified जा सकता है के उदाहरण प्रदान करते हैं, अनुभागीय नमूना, या longitudinally कैसे एक व्यक्ति के भीतर समय में परिवर्तन बहा की जांच करने के लिए ।
कई मेजबान और रोगज़नक़ लक्षण संयुक्त रूप से एक व्यक्ति की प्रवृत्ति को25,26,३९संचारित रोग का निर्धारण । जबकि इन लक्षणों की संभावना की महत्ता मेजबान के बीच बदलता है-रोगज़नक़ प्रणालियों, छप्पर की संभावना मल के एक प्रमुख निर्धारक-मौखिक संचरण है । बैक्टीरियल छप्पर को मापने की क्षमता इस धारणा का परीक्षण करने का अवसर खोलती है. उड़ान लाइनों के एक वांछित पैनल में विशेषता मेजबान-रोगज़नक़ गतिशीलता होने, experimenters मौखिक रूप से व्यक्तियों को संक्रमित कर सकता है, और उन्हें अपने संक्रामक समय के दौरान संक्रमित, अतिसंवेदनशील मेजबान के साथ जगह है । इन ' प्राप्तकर्ता ' मक्खियों तो सीधे संचरण को मापने का एक तरीका के रूप में विभिंन समय बिंदुओं पर आंतरिक बैक्टीरियल लोड के लिए परख सकता है ।

फल मक्खी (भी सिरका मक्खी के रूप में जाना जाता है), डी melanogaster, बड़े पैमाने पर रोगजनकों की एक किस्म के खिलाफ संक्रमण और प्रतिरक्षा के लिए एक मॉडल जीव के रूप में इस्तेमाल किया गया है1,2. इस काम के संक्रमण के शारीरिक परिणामों में मौलिक अंतर्दृष्टि की पेशकश की है और भी परजीवी, बैक्टीरियल, कवक, और वायरल संक्रमण के खिलाफ मेजबान प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया अंतर्निहित आणविक रास्ते जानने में अग्रणी था । यह ज्ञान केवल कीड़ों और अन्य अकशेरूकीय के सहज प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को समझने के लिए उपयोगी नहीं है, लेकिन क्योंकि प्रतिरक्षा तंत्र के कई कीड़े और स्तनधारियों के बीच संरक्षित evolutionarily हैं, Drosophila भी खोज प्रेरित है स्तनधारियों में प्रमुख प्रतिरक्षा तंत्र की, मनुष्यों सहित3।
Drosophila संक्रमण और उन्मुक्ति पर अधिकांश काम प्रणालीगत संक्रमण पर ध्यान केंद्रित किया है, टीका तरीकों का उपयोग करते हुए कि रोगजनकों के शरीर में सीधे चुभन या इंजेक्शन4,5,6द्वारा उद्धार । एक नियंत्रित संक्रामक खुराक के वितरण की अनुमति में इन तरीकों का लाभ स्पष्ट है और प्रणालीगत संक्रमण पर काम का एक बड़ा शरीर द्वारा समर्थित है । हालांकि, कई स्वाभाविक रूप से होने वाली बैक्टीरियल रोगज़नक़ों D. melanogaster के माध्यम से अधिग्रहीत कर रहे हैं पर खिला कार्बनिक बात है जहां आंत immunocompetence मेजबान रक्षा7में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है,8, 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15. प्रयोगों है कि प्रणालीगत संक्रमण को रोजगार इन गढ़ बाईपास, और इसलिए, कैसे कीड़ों प्राकृतिक रोगजनकों के खिलाफ सुरक्षा माउंट के एक पूरी तरह अलग तस्वीर प्रदान करते हैं । यह विशेष रूप से प्रासंगिक है अगर काम का उद्देश्य पारिस्थितिकी और संक्रमण के विकास, जहां प्राकृतिक रोगजनकों और संक्रमण के मार्गों के उपयोग के बारे में भविष्यवाणी का परीक्षण करने के लिए महत्वपूर्ण है16,17। हाल ही में काम पर प्रकाश डाला गया है कैसे रोगजनकों द्वारा उठाए गए मार्ग काफी प्रभावित करता है रोग के परिणाम18,19, विशिष्ट प्रतिरक्षा रास्ते20,21, के सुरक्षात्मक प्रभाव निर्धारित कर सकते हैं । विरासत endosymbionts16, और भी मेजबान सुरक्षा17के विकास में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकता है ।
संक्रमण के मौखिक मार्गों को रोजगार के लिए एक और कारण यह है कि यह रोगज़नक़ संचरण में भिन्नता की जांच मौखिक संक्रमण के बाद मल उत्सर्जन के दौरान जीवाणु बहा को मापने के द्वारा की अनुमति देता है22,23, 24. रोग संचरण में मेजबान विविधता के सूत्रों को समझना प्राकृतिक आबादी25,26में चुनौतीपूर्ण है, लेकिन संचरण के घटकों को मापने, जैसे रोगज़नक़ बहा, नियंत्रित प्रयोगशाला के अंतर्गत शर्तों के एक उपयोगी वैकल्पिक दृष्टिकोण27प्रदान करता है । खिला मक्खियों बैक्टीरिया और मापने बैक्टीरियल और पर्यावरण संदर्भों की एक किस्म के तहत नियंत्रित प्रयोगात्मक स्थितियों में जीवाणु बहा द्वारा, यह मेजबान के बीच संचरण में भिंनता के स्रोतों की पहचान संभव है ।
यहां, हम एक प्रोटोकॉल का वर्णन मौखिक रूप से जीवाणु रोगजनकों के साथ D. melanogaster संक्रमण के लिए, और जीवाणु विकास और छप्पर कि इस प्रकार (चित्रा 1) को बढ़ाता है । हम दो Pseudomonas बैक्टीरिया पर इस प्रोटोकॉल का वर्णन: अवसरवादी रोगज़नक़ पी aeruginosa (PA14) के एक विषमय तनाव, और प्राकृतिक मक्खी रोगज़नक़ पी. विषमयके एक कम entomophila तनाव । Pseudomonads आम ग्राम हैं-एक व्यापक मेजबान रेंज के साथ नकारात्मक जीवाणु, कीड़े, सूत्रकृमि, पौधों, और रीढ़ को संक्रमित, और सबसे वातावरण में पाए जाते हैं4,6. p aeruginosa और p. entomophila द्वारा Drosophila का प्रवेशन संक्रमण आंतों epithelia12,13,14,15, 28. जब तक हम इन दो जीवाणु रोगजनकों पर ध्यान केंद्रित, तरीकों यहां वर्णित सिद्धांत में मामूली संशोधनों के साथ ब्याज की किसी भी जीवाणु रोगज़नक़ के लिए लागू किया जा सकता है । मौखिक जोखिम के बाद, हम उपाय के बाद संक्रमण अस्तित्व, और व्यक्तिगत मक्खियों और व्यवहार्य रोगाणुओं के भीतर सूक्ष्म जीव लोड उपाय पर्यावरण में बहाया, कॉलोनी बनाने इकाइयों (CFUs) में व्यक्त की । अंत में, क्योंकि उपकला बाधा और विनोदी प्रतिक्रियाओं का एक संयोजन से आंत immunocompetence परिणाम, हम भी मक्खी लाइनों जहां इन गढ़ बाधित कर रहे हैं के अस्तित्व को मापने. विशेष रूप से, Drosocrystallin (Dcy) म्यूटेंट पहले से अधिक मौखिक जीवाणु संक्रमण के लिए अतिसंवेदनशील29आंत में एक घट peritrophic मैट्रिक्स के कारण दिखाया गया है । हम यह भी एक स्वाद (रिलायंस एनर्जी) उत्परिवर्ती जो ग्राम के खिलाफ रोगाणुरोधी पेप्टाइड्स उत्पादन से बाधित है में अस्तित्व उपाय-आईएमडी मार्ग के माध्यम से नकारात्मक बैक्टीरिया30।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Vials</td>
			<td>Sarstedt Ltd.</td>
			<td>58.490</td>
			<td>Polystyrene flat base tube 75mm x 23.5mm, 23ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7002</td>
			<td>Agar, ash 2.0-4.5%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brown sugar</td>
			<td>Bidvest</td>
			<td>66032</td>
			<td>Light brown soft sugar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Maize</td>
			<td>Dove&#39;s Farm</td>
			<td></td>
			<td>Organic maize flour</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fermipan yeast</td>
			<td>Bidvest</td>
			<td>96360</td>
			<td>Dry, instant yeast</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl-4-hydroxybenzoate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H5501</td>
			<td>&#62;=99.0%, crystalline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>84097</td>
			<td>Sucrose BioUltra, for molecular biology, &#62;=99.5% (HPLC)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher Scientific UK Ltd.</td>
			<td>15788517</td>
			<td>X600 Petri Dish 90 X 16.2MM Sterile Triple Vent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon tubes (50ml)</td>
			<td>Greiner Bio-one Inc</td>
			<td>210261</td>
			<td>Centrifuge tube, 50ml, skirted, bagged, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tube (0.5ml)</td>
			<td>Sarstedt Ltd.</td>
			<td>72.699</td>
			<td>Sarstedt Micro Tube Conical Base Push Cap 0.5ml Standard Neutral</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tube (1.5ml)</td>
			<td>Sarstedt Ltd.</td>
			<td>72.690.001</td>
			<td>Sarstedt Micro Tube Conical Base Push Cap 1.5ml Standard Neutral</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR International Ltd.</td>
			<td>20821.33</td>
			<td>ETHANOL ABSOLUTE ANALAR NP ACS/R.PE - Analytical Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 L Conical Flask</td>
			<td>VWR International Ltd.</td>
			<td>214-0038</td>
			<td>Narrow neck, 2 L Erlenmeyer flask</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile filter paper</td>
			<td>Fisher Scientific UK Ltd.</td>
			<td>1001-020</td>
			<td>Plain circle and sheets; Particle Retention: greater than11um; Filtration speed: 150 herzberg; Air flow: 10.5s/100mL/in2; Medium porosity; Smooth surface; Grade 1; Type: circle; Dia: 20mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bijou sample container</td>
			<td>Fisher Scientific UK Ltd.</td>
			<td>129A</td>
			<td>7ml polystyrene sample container</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudomonas isolation agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>17208</td>
			<td>Contains agar 13.6 g/L, magnesium chloride 1.4 g/L, peptic digest of animal tissue 20g/L, potassium sulfate 10g/L, triclosan 0.025g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB broth, Miller</td>
			<td>Fisher Scientific UK Ltd.</td>
			<td>BP1426</td>
			<td>Contains 10g tryptone, 5g yeast extract, 10g sodium chloride per litre</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Embryo Collection Cages</td>
			<td>Scientific Laboratory Supplies Ltd.</td>
			<td>59-101</td>
			<td>Flystuff- fits 100mm petri dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRI reagent solution</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>AM9738</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well microplate</td>
			<td>Scientific Laboratory Supplies Ltd.</td>
			<td>353072</td>
			<td>Falcon 96 Well Clear Flat Bottom TC-Treated Polystyrene Cell Culture Microplate with Lid Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pestle</td>
			<td>Fisher Scientific UK Ltd</td>
			<td>12649595</td>
			<td>Pestle, Presterilized; Axygen; Tissue grinder; Blue; Inert polypropylene construction; Fits 1.5 and 2.0mL centrifuge tubes; Individually wrapped; 100/Pk</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Scientific Laboratory Supplies Ltd.</td>
			<td>CHE2068</td>
			<td>Glycerol A.R. 99.5% 2.5 L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton wool- non absorbent</td>
			<td>Cowens Ltd</td>
			<td>ABL</td>
			<td>Non Absorbent Large quantity 20 bags x 500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton wool- absorbent</td>
			<td>Cowens Ltd</td>
			<td>ABS</td>
			<td>BP small quantity 20 bags x 500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td></td>
			<td>Whirlimixer 75W 50-6-Hz 220-240V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital incubator</td>
			<td>Gallenkamp</td>
			<td>INR-200-010V</td>
			<td>220 V, 50 Hz, 5 A. Nominal temperature: 70&#186;C. Shaking frequency: 0...400 rpm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorbance Microplate Reader</td>
			<td>Biotek Instruments Ltd</td>
			<td></td>
			<td>ELx808&#8482; Absorbance Microplate Reader</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gen 5 Microplate Reader and Imager Software</td>
			<td>Biotek Instruments Ltd</td>
			<td></td>
			<td>For Absorbance Microplate Reader</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>392304</td>
			<td>Allegra X-12R Benchtop Centrifuge, refridgerated 50Hz 230V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Step One Plus Real Time qPCR System</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>4376600</td>
			<td>Applied biosystems Step One Plus real time qPCR system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Step One Software 2.3</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>For Stepone and SteponePlus real time qPCR systems</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R Statistical Software</td>
			<td>https://cran.r-project.org/</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L pipette tips</td>
			<td>Greiner Bio-one Inc</td>
			<td>741015</td>
			<td>Easlyload gilson-style. Graduated, clear, refill, 960 pcs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L pipette tips</td>
			<td>Greiner Bio-one Inc</td>
			<td>741065</td>
			<td>Easlyload gilson-style. Graduated, clear, refill, 960 pcs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L pipette tips</td>
			<td>Greiner Bio-one Inc</td>
			<td>741045</td>
			<td>Easlyload gilson-style. Graduated, clear, refill, 960 pcs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 &#181;L filtered pipette tips</td>
			<td>Greiner Bio-one Inc</td>
			<td>774288</td>
			<td>Filter tip gilson-style. Clear, rack blue, single packed, R/Dnase free, 10 racks of 96pcs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L filtered pipette tips</td>
			<td>Greiner Bio-one Inc</td>
			<td>739288</td>
			<td>Filter tip gilson-style. Clear, rack blue, single packed, R/Dnase free, 10 racks of 96pcs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L filtered pipette tips</td>
			<td>Greiner Bio-one Inc</td>
			<td>740288</td>
			<td>Filter tip gilson-style. Clear, rack blue, single packed, R/Dnase free, 10 racks of 60pcs</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

oral bacterial infection and shedding in drosophila melanogaster

फल मक्खी Drosophila melanogaster संक्रमण और जन्मजात उन्मुक्ति का सबसे अच्छा विकसित मॉडल प्रणालियों में से एक है । जबकि अधिकांश काम प्रणालीगत संक्रमण पर ध्यान केंद्रित किया है, वहां आंत immunocompetence के तंत्र में ब्याज की हाल ही में वृद्धि हुई है रोगजनकों, जो मौखिक रूप से संक्रमित मक्खियों के लिए तरीकों की आवश्यकता है । यहां हम मौखिक रूप से एक अवसरवादी जीवाणु रोगज़नक़ (Pseudomonas aeruginosa) और डी. melanogaster (Pseudomonas entomophila) के एक प्राकृतिक जीवाणु रोगज़नक़ के लिए व्यक्तिगत मक्खियों बेनकाब करने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं । इस प्रोटोकॉल का लक्ष्य इन रोगजनकों के लिए पुरुष और मादा मक्खियों को बेनकाब करने के लिए एक मजबूत तरीका प्रदान करना है । हम प्रतिनिधि अस्तित्व phenotypes, सूक्ष्म जीव लोड दिखा परिणाम प्रदान करते हैं, और जीवाणु बहा, जो रोगज़नक़ संचरण में विविधता के अध्ययन के लिए प्रासंगिक है । अंत में, हम पुष्टि करते है कि Dcy म्यूटेंट (आंत उपकला में सुरक्षात्मक peritrophic मैट्रिक्स की कमी) और म्यूटेंट स्वाद (एक कार्यात्मक प्रतिरक्षा की कमी (आईएमडी) मार्ग की कमी), जीवाणु मौखिक संक्रमण के लिए वृद्धि की संवेदनशीलता दिखा. इस प्रोटोकॉल, इसलिए, संक्रमण के मौखिक मार्ग का उपयोग कर मक्खियों को संक्रमित करने के लिए एक मजबूत तरीका का वर्णन करता है, जो आंत संक्रमण परिणामों और जीवाणु संचरण में भिन्नता के एक किस्म आनुवंशिक और पर्यावरणीय स्रोतों के अध्ययन के लिए बढ़ाया जा सकता है.

यहां, हम प्रयोगों से उदाहरणात्मक परिणाम प्रस्तुत करते हैं जहां D. melanogaster p. aeruginosa या p. entomophilaसे मौखिक रूप से संक्रमित था । चित्रा 2 ६०० = 25 और १०० p. aeruginosa (चित्रा 2a) और पी. entomophila के लिए एक 12 एच या 24 के जीवाणु संस्कृतियों के लिए एच जोखिम अवधि के बाद मक्खियों के सफल मौखिक संक्रमण को दर्शाता है (आंकड़ा बी 2 , ग) क्रमशः । चित्रा बी पी entomophila के एक और अधिक केंद्रित संस्कृति का उपयोग कर के महत्व को दिखाता है, जीवाणु लोड में वृद्धि के द्वारा दिखाया गया है जब मक्खियों को अधिक से अधिक ऑप्टिकल घनत्व के जीवाणु संस्कृतियों को उजागर कर रहे हैं । पुरुष और महिला ओरेगन आर (ओरर) एक ही दर (चित्रा 3) में स्पष्ट पी. aeruginosa संक्रमण मक्खियों और पी. aeruginosa CFUs (चित्रा 4a) के एक ही नंबर शेड । जब पी entomophila से संक्रमित हालांकि, पुरुष और मादा ओरर मक्खियों बैक्टीरिया की संख्या में अलग शेड, एक तरह से है कि समय के साथ परिवर्तन (चित्रा 4B) । नर और मादा पी aeruginosa (चित्रा 5) और entomophila (चित्रा 5B) से अलग दरों पर मर जाते हैं । हम यह भी देखते है कि Dcy म्यूटेंट (जो आंत उपकला में सुरक्षात्मक peritrophic मैट्रिक्स कमी) और म्यूटेंट स्वाद (जो एक कार्यात्मक आईएमडी प्रतिरक्षा मार्ग की कमी), शो कम अस्तित्व के बाद पी entomophila और पी aeruginosa ओरल इंफेक्शन (फिगर 5C).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57676/57676fig1.jpg"> चित्रा 1: जीवन रक्षा, छप्पर, और आंतरिक बैक्टीरियल लोड को मापने के लिए प्रोटोकॉल का योजनाबद्ध सिंहावलोकन Drosophila melanogasterमें मौखिक संक्रमण के बाद. D. melanogasterके ओरल संक्रमण के बाद 3 संभावित प्रयोगों का चित्रण । शीशियों और उनके संक्रमित उम्र रिकॉर्डिंग करने के लिए एकल मक्खियों स्थानांतरित करके ' अस्तित्व ' को मापने. १.५ मिलीलीटर microcentrifuge ट्यूबों के लिए एक मक्खियों को स्थानांतरित करके ' उपाय बहा ' टोपी में लुईस मध्यम के ५० µ एल के साथ । ट्यूब में 24 घंटे के बाद, मक्खी हटाने और 1x पंजाब के १०० µ एल के साथ ट्यूब भंवर । निकालें और प्लेट पौंड पोषक पर इस समाधान के जीवाणु छप्पर की गणना करने के लिए आगर । एक ही मक्खी longitudinally में छप्पर को मापने, 24 घंटे के बाद टोपी में लुईस माध्यम के साथ ताजा ट्यूबों के लिए मक्खियों को स्थानांतरित करके, और धोने और अब दूषित ट्यूब चढ़ाना । एक मक्खी ' आंतरिक लोड ' एक संक्रमित मक्खी, सतह यह निष्फल लेने के द्वारा मापा जा सकता है, और यह अंत में पौंड पोषक तत्व आगर पर homogenate चढ़ाना इससे पहले अनुमन्य । यह बहा के बाद किया जा सकता है की गणना कैसे ' आंतरिक ' लोड और बहा सहसंबंधी बनाना मापा गया है । मक्खी इस आंकड़े में प्रयुक्त चित्रण मूल रूप से Nuhanen३६द्वारा तैयार किया गया था । लेखकों ने इसे उदाहरण कापलान-Meier वक्र के साथ संशोधित किया है जो विकिमीडिया कॉमन्स३७से लिया गया है । अंय सभी चित्र मूल हैं । <a href="/files/ftp_upload/57676/57676fig1large.jpg" target="_blank">कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57676/57676fig2.jpg"> चित्रा 2: मौखिक संक्रमण के बाद बैक्टीरिया की संक्रामक खुराक. (क) नर और मादा ओरेगन-आर की संक्रामक खुराक एक P. aeruginosa संस्कृति (आयुध डिपो६०० = 25) के लिए 12 एच के लिए जोखिम के बाद मक्खियों मतलब और एसई 3 पुरुषों और 3 महिलाओं से गणना की गई । (ख) एक चार पी. entomophila संस्कृतियों (आयुध डिपो६०० = १००, ७५, ५०, और 25) या नियंत्रण के लिए 5% सुक्रोज समाधान के लिए जोखिम के बाद पार जंगली प्रकार महिलाओं की संक्रामक खुराक 24 एच । के सांख्यिकीय अंतर (F3, 76 = १८.५६७, p < 0.001) जोखिम उपचार के बीच संक्रामक खुराक में सलाखों के ऊपर अलग अक्षरों से चिह्नित है । मतलब 5 मक्खियों से आयुध डिपो के लिए गणना की गई६०० = 0 खुराक, और अंय सभी खुराकों के लिए 18-20 । (ग) पुरुष और महिला ओरेगन-आर की संक्रामक खुराक P. entomophila संस्कृति (आयुध डिपो६०० = १००) के लिए 24 एच के लिए जोखिम के बाद मक्खियों । मतलब और एसई 20 पुरुषों और 20 महिलाओं से गणना की गई । <a href="/files/ftp_upload/57676/57676fig2large.jpg" target="_blank">कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57676/57676fig3.jpg"> चित्रा 3: आंतरिक पी. aeruginosa मौखिक संक्रमण के बाद मक्खियों में लोड । पुरुष और महिला ओरेगन-आर के जीवाणु लोड मतलब ± P aeruginosa (आयुध डिपो६०० = 25) के साथ मौखिक संक्रमण के बाद १६८ एच के लिए संक्रमण के बाद मक्खियों । मतलब है और हर समय बिंदु के एसई 3 व्यक्तियों से गणना कर रहे हैं । एक मक्खी के आंतरिक बैक्टीरियल लोड समय के साथ काफी बदलता है (p < 0.001) । <a href="/files/ftp_upload/57676/57676fig3large.jpg" target="_blank">कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57676/57676fig4.jpg"> चित्रा 4: मौखिक संक्रमण के बाद जीवाणु बहा । (A) P. aeruginosa द्वारा बहाए गए चित्रा 3, १२० ज के बाद संक्रमण में प्रयुक्त मक्खियों । मतलब और एसई 3 पुरुषों और 3 महिलाओं से गणना की गई । (ख) पी. entomophila पुरुष और महिला ओरेगन-R द्वारा शेड p entomophila (आयुध डिपो६०० = १००) के साथ मौखिक संक्रमण के बाद १२० एच के लिए संक्रमण के बाद मक्खियों । मतलब और एसई ३४ पुरुषों और ३८ महिलाओं से गणना की गई । p. aeruginosa और p. entomophilaदोनों के लिए, एक मक्खी द्वारा शेड CFUs की संख्या समय के साथ काफी परिवर्तन (P < 0.001) । <a href="/files/ftp_upload/57676/57676fig4large.jpg" target="_blank">कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57676/57676fig5.jpg"> चित्रा 5: जीवाणु मौखिक संक्रमण के बाद मक्खियों का अस्तित्व । कापलान-Meier (किमी) के जीवन रक्षा curves (क) ओरेगन-R पुरुष और महिला पी aeruginosa (आयुध डिपो६०० = 25) या नियंत्रण 5% सुक्रोज समाधान के साथ मौखिक संक्रमण के बाद मक्खियों । किमी उत्तरजीविता वक्र उपचार समूह के अनुसार 20 मक्खियों की 4 शीशियों से गणना की गई थी । (ख) ओरर नर और मादा मक्खियों के साथ मौखिक संक्रमण के बाद P entomophila (OD६०० = १००). किमी जीवन रक्षा वक्र 4 एकल नियंत्रण मक्खियों और दोनों पुरुषों और महिलाओं के लिए ३४ संक्रमित मक्खियों से गणना की गई थी । (ग) प्रतिरक्षा म्यूटेंट: Dcy (Drosocrystallin-peritrophic मैट्रिक्स उत्परिवर्ती) और रिलायंस एनर्जी (स्वाद-आईएमडी उत्परिवर्ती), पी. entomophila (पीई), पी. aeruginosa (Pa14), या एक नियंत्रण 5% सुक्रोज हल करने के लिए उजागर । सभी संक्रमित समूह नियंत्रण मक्खियों (p < 0.001) की तुलना में काफी तेज़ी से मरते हैं । <a href="/files/ftp_upload/57676/57676fig5large.jpg" target="_blank">कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।</a>

Watch this Scientific Journal Video about Oral Bacterial Infection and Shedding in Drosophila melanogaster at JoVE.com

Oral Bacterial Infection and Shedding in Drosophila melanogaster

इस प्रोटोकॉल को मौखिक रूप से बेनकाब और बैक्टीरिया रोगजनकों के साथ फल फ्लाई Drosophila melanogasteआर संक्रमित करने के लिए तरीकों का वर्णन है, और संक्रामक बैक्टीरिया की संख्या को मापने के लिए पेट संक्रमण के बाद बहाया. हम आगे मक्खी पर प्रतिरक्षा म्यूटेंट के प्रभाव का वर्णन मौखिक जीवाणु संक्रमण के बाद अस्तित्व ।

ओरल बैक्टीरियल इंफेक्शन और छप्पर में Drosophila melanogaster

The fruit fly Drosophila melanogaster is one of the best developed model systems of infection and innate immunity. While most work has focused on systemic ...

Research

JoVE Journal

Biology

Oral Bacterial Infection and Shedding in Drosophila melanogaster

Dissection of Larval CNS in Drosophila Melanogaster

ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में लारवल सीएनएस के विच्छेदन

The central nervous system (CNS) of Drosophila larvae is complex and poorly understood.  One way to investigate the CNS is to use immunohistochemistry to ...

Wolbachia Bacterial Infection in Drosophila

Wolbachia ड्रोसोफिला में बैक्टीरियल संक्रमण

High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

उच्च संकल्प प्रौढ़ ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में हरकत की वीडियो ट्रैकिंग

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

Live Imaging Of Drosophila melanogaster Embryonic Hemocyte Migrations

Live Imaging Of Drosophila melanogaster Embryonic Hemocyte Migrations

के लाइव इमेजिंग ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर भ्रूण Hemocyte migrations

Many studies address cell migration using in vitro methods, whereas the physiologically relevant environment is that of the organism itself. Here we ...

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

वयस्क से Oenocytes के विच्छेदन ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

In Drosophila melanogaster, as in other insects, a waxy layer on the outer surface of the cuticle, composed primarily of hydrocarbon compounds, provides ...

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

के अलगाव ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर Testes

The testes of Drosophila melanogaster provide an important model for the study of stem cell maintenance and differentiation, meiosis, and soma-germline ...

Insulin Injection and Hemolymph Extraction to Measure Insulin Sensitivity in Adult Drosophila melanogaster

Insulin Injection and Hemolymph Extraction to Measure Insulin Sensitivity in Adult Drosophila melanogaster

इंसुलिन इंजेक्शन और Hemolymph निकालना वयस्क में इंसुलिन संवेदनशीलता उपाय ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Conserved nutrient sensing mechanisms exist between mammal and fruit fly where peptides resembling mammalian insulin and glucagon, respectively function ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

उम्र के मापन में<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

Maintenance of a Drosophila melanogaster Population Cage

Maintenance of a Drosophila melanogaster Population Cage

एक का रखरखाव<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em&gt; जनसंख्या केज

Large quantities of DNA, RNA, proteins and other cellular components are often required for biochemistry and molecular biology experiments. The short life ...

Visualizing and Tracking Endogenous mRNAs in Live Drosophila melanogaster Egg Chambers

Visualizing and Tracking Endogenous mRNAs in Live Drosophila melanogaster Egg Chambers

दृश्य और ट्रैकिंग अंतर्जात MRNAs में लाइव Drosophila मेलेनोगैस्टर अंडे मंडलों

Fluorescence-based imaging techniques, in combination with developments in light microscopy, have revolutionized how cell biologists conduct live cell ...