Name: isolation of human endometrial stromal cells for in vitro decidualization
Uploaded: 2018-09-01T12:30:00
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저자는 공개 없다.

세인트 루이스, 산부인과 학과에서 워싱턴 대학에서이 연구를 위해 수집 하는 모든 인간의 endometrium biopsies 달성 했다 고 부인과 기관 검토 위원회 (IRB)를 사용 하 여 서 면된 동의서를 승인.
1입니다. 준비
<ol><li>100 U/mL 페니실린과 100 µ g/mL 스 미디어 포함 병 (HBSS + 매체 추가 참조)에 추가 하 여 1 x 행 크의 균형 소금 솔루션 (HBSS)의 500 mL를 준비 합니다.</li>
	<li>Dulbecco의 수정이 ...

<ol>
	<li>Maruyama, T., Yoshimura, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+cellular+mechanisms+for+differentiation+and+regeneration+of+the+uterine+endometrium.">Molecular and cellular mechanisms for differentiation and regeneration of the uterine endometrium.</a> Endocrine Journal. 55, 795-810 (2008).</li><li>Yu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometrial+Stromal+Decidualization+Responds+Reversibly+to+Hormone+Stimulation+and+Withdrawal.">Endometrial Stromal Decidualization Responds Reversibly to Hormone Stimulation and Withdrawal.</a> Endocrinology. 157, 2432-2446 (2016).</li><li>Ahn, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cAMP-Response+Element-Binding+3-Like+Protein+1+(CREB3L1)+is+Required+for+Decidualization+and+its+Expression+is+Decreased+in+Women+with+Endometriosis.">cAMP-Response Element-Binding 3-Like Protein 1 (CREB3L1) is Required for Decidualization and its Expression is Decreased in Women with Endometriosis.</a> Current Molecular Medicine. 16, 276-287 (2016).</li><li>Gellersen, B., Brosens, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+decidualization+of+the+human+endometrium+in+reproductive+health+and+failure.">Cyclic decidualization of the human endometrium in reproductive health and failure.</a> Endocrine Reviews. 35, 851-905 (2014).</li><li>Telgmann, R., Gellersen, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marker+genes+of+decidualization:+activation+of+the+decidual+prolactin+gene.">Marker genes of decidualization: activation of the decidual prolactin gene.</a> Human Reproduction Update. 4, 472-479 (1998).</li><li>Camden, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+regulation+by+estrogen+in+breast+cancer+1+(GREB1)+is+a+novel+progesterone-responsive+gene+required+for+human+endometrial+stromal+decidualization.">Growth regulation by estrogen in breast cancer 1 (GREB1) is a novel progesterone-responsive gene required for human endometrial stromal decidualization.</a> Molecular Human Reproduction. 23, 646-653 (2017).</li><li>Kommagani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Promyelocytic+Leukemia+Zinc+Finger+Transcription+Factor+Is+Critical+for+Human+Endometrial+Stromal+Cell+Decidualization.">The Promyelocytic Leukemia Zinc Finger Transcription Factor Is Critical for Human Endometrial Stromal Cell Decidualization.</a> PLoS Genetics. 12, e1005937 (2016).</li><li>Large, M. J., DeMayo, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+regulation+of+embryo+implantation+and+endometrial+decidualization+by+progesterone+receptor+signaling.">The regulation of embryo implantation and endometrial decidualization by progesterone receptor signaling.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 358, 155-165 (2012).</li><li>Zhang, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mesenchymal-epithelial+transition+during+in+vitro+decidualization.">The mesenchymal-epithelial transition during in vitro decidualization.</a> Reproductive Sciences. 20, 354-360 (2013).</li><li>Kommagani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acceleration+of+the+glycolytic+flux+by+steroid+receptor+coactivator-2+is+essential+for+endometrial+decidualization.">Acceleration of the glycolytic flux by steroid receptor coactivator-2 is essential for endometrial decidualization.</a> PLoS Genetics. 9, e1003900 (2013).</li><li>Ramathal, C. Y., Bagchi, I. C., Taylor, R. N., Bagchi, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometrial+decidualization:+of+mice+and+men.">Endometrial decidualization: of mice and men.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 28, 17-26 (2010).</li><li>Tamura, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Function+of+a+Transcription+Factor+WT1+in+Regulating+Decidualization+in+Human+Endometrial+Stromal+Cells+and+Its+Molecular+Mechanism.">Novel Function of a Transcription Factor WT1 in Regulating Decidualization in Human Endometrial Stromal Cells and Its Molecular Mechanism.</a> Endocrinology. 158, 3696-3707 (2017).</li><li>Vinketova, K., Mourdjeva, M., Oreshkova, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Decidual+Stromal+Cells+as+a+Component+of+the+Implantation+Niche+and+a+Modulator+of+Maternal+Immunity.">Human Decidual Stromal Cells as a Component of the Implantation Niche and a Modulator of Maternal Immunity.</a> Journal of Pregnancy. , 8689436 (2016).</li><li>Wu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+endometritis+modifies+decidualization+in+human+endometrial+stromal+cells.">Chronic endometritis modifies decidualization in human endometrial stromal cells.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 15, 16 (2017).</li><li>Garcia-Elias, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+quantification+methods+and+optimizing+protocols+for+microarray+hybridization+of+circulating+microRNAs.">Defining quantification methods and optimizing protocols for microarray hybridization of circulating microRNAs.</a> Scientific Reports. 7, 7725 (2017).</li><li>Brosens, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+endometrial+fibroblasts+immortalized+by+simian+virus+40+large+T+antigen+differentiate+in+response+to+a+decidualization+stimulus.">Human endometrial fibroblasts immortalized by simian virus 40 large T antigen differentiate in response to a decidualization stimulus.</a> Endocrinology. 137, 2225-2231 (1996).</li><li>Koukouritaki, S. B., Margioris, A. N., Gravanis, A., Hartig, R., Stournaras, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dexamethasone+induces+rapid+actin+assembly+in+human+endometrial+cells+without+affecting+its+synthesis.">Dexamethasone induces rapid actin assembly in human endometrial cells without affecting its synthesis.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 65, 492-500 (1997).</li></ol>

여성 생식 생리 주기는 라운드, 상피 같은 분 비 세포3,8에 ESC의 decidualization를 유도 함으로써 상승 luteal 단계 내내 황 체 호르몬 수준에 의해 특징입니다. Decidualization의 개시는 종 의존. 인간에서는, decidualization 발생 합니다 자연 호르몬 농도의 증가 따라 쥐 해야 blastocyst 존재10,11. Decidualization에서의 이러한 불...

Menarche의 단계와 폐 경, 생식 연령의 여성 호르몬 규제 자궁내 막 증식, 차별화, 임신 생리1 이라는 프로세스에 대 한 준비에 후속 흘리기의 월별 주기 받아야 ,2. 인간의 endometrium의 실제 수정 등은 자 궁 벽1에 적절 한 배아 이식 필요 합니다. 난소 스테로이드 호르몬 에스트로겐과 황 체 호르몬 (P4)를 통해 생리 주기 변경 endometrium, 형태학 및 생화학 적인 적응을 포함 하 여의 중재는3,,45. 증식 (follicular) 단계 내 preovulatory 에스트로겐 수준의 증가, endometrium 두껍게 시작. 배 란, 다음 분 비 (또는 luteal) 단계 반올림, 상피 같은 decidual 셀 구와 같은 모습에서 자궁내 막 기질 세포 (ESC)의 형태학 상 변화를 유도 하는 P4 농도에 상당한 증가 촉진 decidualization4,6로 알려진 프로세스. 잘못 된 decidualization 이식 실패와 이후의 초기 태아 유산4,,78에 대 한 근본 원인으로 설립 되었습니다. 따라서, 밑에 decidualization 분자 메커니즘을 이해 진단과 초기 임신 손실의 처리에 유리 하다.
현재, 자궁내 막 기질 세포에서 decidualization의 기본 효과 탐험 여러 방법론 활용 됩니다. Vivo에서, 마우스 궁 기계적 자극 (즉,긁 적)를 통해 decidualization에 대 한 인위적으로 유도 될 수 있다 또는 기름9hormonally 끝났다 자 궁 주입. 다른 인간,이 합성 자극 blastocyst 존재, 설치류10,11decidualization의 개시에 필요한 단계의 모양을 제공 하 여 자 궁 루멘의 분화를 촉진 합니다. 따라서, 동물 모델 및 인간에서 vivo에서 기반 연구를 둘러싼 윤리적 딜레마와 관련 된 변환 합병증으로 인해 decidualization 기반 모델은 가장 성공적으로 공부 생체 외에서.
이 연구에서 과목 두 지역 영어와 스페인어 신문에서 광고의 배치를 통해 채용 됩니다. 과목이이 연구에 대 한 적합 한 후보자로 식별 되는 가져온 연구 코디 네이 터, 잠재적인 위험의 전체 공개 토론 된다와 나. 관련 된 잠재적인 위험에 대 한 완전 한 이해의 확인, 과목의 동의 서 면과 구두 모양에서 달성 했다. 주제 동의 (1) 받을 미래 연구 목적을 위해 그들의 조직의 정 (2) 장기 저장 (3) 수집 된 조직 표본에서의 기본 문화 창조에 동의 하는 권한이 포함 됩니다. 동의 다음 과목 인종/민족성의 비공개에 대 한 권리는 허용 된 자가 식별에 완료 하는 폼을 받는다. 후속 방문 endometrium 생의 생리 주기에 따라 달성 예정 이다. 이 연구에 모집 하는 자원 봉사자로 2012 인구에 의해 문서화 세인트 루이스 수도권의 민족과 인종 인구를 반영 하 고 임산부, 태아, 태아를 포함 하 여 모든 취약 한 주민들의 참여를 포함 하지 않았다 나이, 또는 다른 취약 한 그룹의 18 세 미만 어린이. 생 검 샘플 컬렉션에 참여 하기 위한 자격 요건 포함 (1) 일반 생리 주기 (25-32 일) (3) 현재 임신 이나 호르몬 자궁내 장치 피임약의 사용 하는 데는 데 18-45 년 (2)의 나가 사이 되 고 현재 질 감염이 나 성병 (5) 없는 현재 항생제 치료와 (6) 등록 (4) 전 30 일에 대 한 없음 현재 비정상적인 경부 데.
이 연구에서 인간의 자궁내 막 기질 세포 (HESC) 배양 하 (estradiol (e 2), medroxyprogesterone 아세테이트 (MPA), 및 순환 아데노신 호르몬의 보충을 통해 생체 외에서 decidualization을 인위적으로 유발 monophosphate (캠프)) 매체에. 이 방법에서는, decidualization의 정도 호르몬 치료의 일의 총 수에 따라 변경 됩니다. Cytoskeletal 재배치와 함께, 호르몬 보충 decidual 세포 분 비 같은 자질2,4를 경험 하는 생 화 확 적인 적응을 유도 합니다. Prolactin (PRL)와 인슐린 같은 성장 인자 의무적인 단백질 1 (IGFBP1), 같은 각 인 유전자의 표정은 확인 하 고 계량 HESC decidualization5,12, 의 정도를 이용 될 수 있다 13 , 14. 중요 한 것은,이 프로토콜을 유전자 특정 최저 생존도 시연 했다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:935px;" width="934">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Opti-MEM I (1X) Reduced Serum Medium</td>
			<td style="width:167px;">Gibco</td>
			<td style="width:131px;">31985-070</td>
			<td style="width:271px;">For decidualization media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">DMEM / F12 (1:1) (1X)</td>
			<td style="width:167px;">Gibco</td>
			<td style="width:131px;">11330-032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Trypan Blue Stain (0.4%)</td>
			<td style="width:167px;">Gibco</td>
			<td style="width:131px;">15250-061</td>
			<td>For cell count</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">PureLink RNA Mini Kit</td>
			<td style="width:167px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:131px;">12183018A</td>
			<td>For RNA Isolation/Purification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">TaqMan 2X Universal PCR Master Mix</td>
			<td style="width:167px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:131px;">4304437</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit</td>
			<td style="width:167px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:131px;">4374967</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Eukaryotic 18S rRNA Endogenous Control</td>
			<td style="width:167px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:131px;">4319413E</td>
			<td>For qPCR internal control</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">TaqMan Gene Expression Assay Prolactin Probe</td>
			<td style="width:167px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:131px;">4331182</td>
			<td>For qPCR internal control</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">TaqMan Gene Expression Assay IGFBP1 Probe</td>
			<td style="width:167px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:131px;">4331182</td>
			<td>For qPCR internal control</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Phalloidin-iFluor 488 Reagent - CytoPainter</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td style="width:131px;">ab176753</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Human Prolactin ELISA Kit</td>
			<td style="width:167px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:131px;">EHIAPRL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">16% Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:167px;">Alfa Aesar</td>
			<td style="width:131px;">30525-89-4</td>
			<td>Fixative</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Lipofectamine RNAiMAX</td>
			<td style="width:167px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:131px;">13778150</td>
			<td>Transfection Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">ProLong Gold antifade reagent with DAPI</td>
			<td style="width:167px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:131px;">P36935</td>
			<td>For mounting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">0.25% Trypsin-EDTA (1X)</td>
			<td style="width:167px;">Gibco</td>
			<td style="width:131px;">25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Penicillin Streptomycin</td>
			<td style="width:167px;">Gibco</td>
			<td style="width:131px;">15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Charcoal Stripped Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">F6765-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Sodium Bicarbonate (7.5%)</td>
			<td style="width:167px;">Gibco</td>
			<td style="width:131px;">25080-094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Ficoll-Paque PLUS Reagent</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">45001749</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Collagenase from Clostridium histolyticum</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">C0130-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">DN25-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Medroxyprogesterone 17-acetate</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">M1629-1G</td>
			<td>For EPC Media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Estradiol</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">E1024-1G</td>
			<td>For EPC Media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">cAMP</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">A6885-100MG</td>
			<td>For EPC Media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Fine straight stitch scissors</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:131px;">15396-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">TaqMan Gene Expression Assay NCOA2 Probe</td>
			<td style="width:167px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:131px;">4351372</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Fetal Bovine Serum, heat inactivated</td>
			<td style="width:167px;">Gibco</td>
			<td style="width:131px;">10-082-147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antibiotic-antimycotic</td>
			<td style="width:167px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:131px;">15240062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Hank&#8217;s Balanced Salt Solution&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">21-021-cv</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">50 mL conical polypropylene Falcon tube</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">352098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Dumont #5/45 Forceps</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:131px;">11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">100 x 15 mm Glass Petri dish</td>
			<td style="width:167px;">VWR</td>
			<td style="width:131px;">75845-546</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">40 micron cell strainer</td>
			<td style="width:167px;">Midsci</td>
			<td style="width:131px;">229481</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Isotemp 215 Water bath</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">FS-215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">LSE Centrifuge&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">6755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Human NCOA2 siRNA&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Dharmacon</td>
			<td style="width:131px;">L-020159-00</td>
			<td>Gene specific qPCR probe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Steri-cycle i160 CO2 Incubator&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:131px;">51030301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">NanoDrop 2000</td>
			<td style="width:167px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:131px;">ND-2000</td>
			<td>For RNA quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Phosphate Buffered Saline&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">50146771</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">75 cm Canted Neck Cell Culture flask</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">430641U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">6 well Non-Pyrogenic Cell Culture Plate</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Pipet Controller Ultra</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">4099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Photoshop</td>
			<td style="width:167px;">Adobe</td>
			<td style="width:131px;">19.0.1.334</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">25 cm Canted Neck Cell Culture flask</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">7200876</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">X100-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">15 mL conical polypropylene Falcon tube</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">352099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">10 mL Syringe</td>
			<td style="width:167px;">BD</td>
			<td style="width:131px;">302995</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">1300 Series A2 Biological Safety Hood</td>
			<td style="width:167px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:131px;">1377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">accuspin Micro17 centrifuge</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">13100675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">7500 Fast real time PCR system</td>
			<td style="width:167px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:131px;">3052632</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">EVOS FL Immunofluorescence Microscope</td>
			<td style="width:167px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:131px;">01414-155G-291</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Leica Inverted Light Microscope</td>
			<td style="width:167px;">Leica</td>
			<td style="width:131px;">DMi1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Illrustrator</td>
			<td style="width:167px;">Adobe</td>
			<td style="width:131px;">22.0.1.253</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Excel Spreadsheets</td>
			<td style="width:167px;">Microsoft</td>
			<td style="width:131px;">2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Deckglaser 18 mm cover glasses</td>
			<td style="width:167px;">NeuVitro</td>
			<td style="width:131px;">GG-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Reichert Bright-Line Hemacytometer</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">Z359629-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">2-mercaptoethanol</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Bioreagents</td>
			<td style="width:131px;">BP176-100</td>
			<td>For RNA lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:367px;">1.2mL External Threaded Polypropylene Cryogenic Vial</td>
			<td style="width:167px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">430658</td>
			<td>For freezing HESC cells&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:367px;">Dimethyl Sulfoxide (DMSO)</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:131px;">D2650-100mL</td>
			<td>For freezing media</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of human endometrial stromal cells for in vitro decidualization

인간의 자궁내 막 기질 세포 (HESC) 분 비 decidua에 구와 같은 모습에서의 분화는 어머니 자 궁의 자 궁 내벽에 배아 이식에 필요한 변환입니다. 잘못 된 decidualization 이식 실패와 이후의 초기 태아 유산에 대 한 근본 원인으로 설립 되었습니다. 따라서, 밑에 decidualization 분자 메커니즘을 이해 성공적인 출생의 속도 향상에 유리 하다. Vivo에서 기반 인공 decidualization의 연구는 종종 동물 모델에서 변환 합병증 뿐 아니라 인간의 연구와 관련 된 윤리적 딜레마 때문 제한 됩니다. 결과적으로, 기본 세포 배양을 통해 분석 실험 체 외에 호르몬을 통해 decidualization의 변조를 탐험 자주 활용 됩니다. 이 연구는 HESC 고립과 자란 보통 호르몬의 보충을 통해 후속 인공 decidualization에 대 한 상세한 프로토콜을 제공합니다. 또한,이 연구 하면 잘 설계 된 최저에 관심사의 어떤 유전자 지질 기반 siRNA transfections를 활용 하 여 있습니다. 이 프로토콜 허용 기본 decidualization, 및의 후속 정량화 하는 분자 메커니즘을 이해 하는 신뢰할 수 있는 방법으로이 모델을 활용 하는 능력을 극대화 함으로써 제품의 수율 뿐 아니라 문화 순도의 최적화 decidualized 자궁내 막 기질 세포에 의해 분 비 대리인입니다.

HESC 문화 decidualization
절연, 다음 인간 자궁내 막 기질 세포 80-90 %confluency 단층 형성에 교양 있었다 및 10 nM E2, MPA, 1 개의 µ M, 50 µ M 캠프와 치료에 의해 생체 외에서 decidualization에 대 한 유발 (EPC). 생체 외에서 decidualization와 관련 된 형태학 변화 그림 1A에서 구상 했다. Decidualization...

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Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

이 연구는 분리와 decidualization 분석 결과 생체 외에서 실시 하 인간의 자궁내 막 기질 세포의 문화에 대 한 검증 및 최적화 절차를 선물 한다. 또한,이 연구를 효율적으로 최저의 자세한 방법을 siRNAs를 사용 하 여 인간의 자궁내 막 기질 세포에서 특정 유전자를 제공 한다.

생체 외에서 Decidualization에 대 한 인간의 자궁내 막 기질 세포의 고립

The differentiation of human endometrial stromal cells (HESC) from fibroblast-like appearance into secretory decidua is a transformation required for ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

Isolation and Enrichment of Human Adipose-derived Stromal Cells for Enhanced Osteogenesis

분리 및 인간의 농축 향상된 골 연장술에 대한 기질 세포를 지방이 유래

Bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (BM-MSCs) are considered the gold standard for stem cell-based tissue engineering applications. However, the ...

연구

발생학

Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue

인간 태반 조직에서 추출 분리 및 중간 엽 줄기의 확장 / 기질 세포

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) are promising candidates for use in cell-based therapies. In most cases, therapeutic response appears to be cell-dose ...

Rapid Isolation of BMPR-IB+ Adipose-Derived Stromal Cells for Use in a Calvarial Defect Healing Model

BMPR-IB +의 신속한 격리 두개골 결함 치유 모델에서 사용을위한 기질 세포를 지방이는 유래

Invasive cancers, major injuries, and infection can cause bone defects that are too large to be reconstructed with preexisting bone from the patient's own ...

Isolation of Mouse Endometrial Epithelial and Stromal Cells for In Vitro Decidualization

Isolation of Mouse Endometrial Epithelial and Stromal Cells for In Vitro Decidualization

마우스 자궁 내막 상피와 기질 세포의 분리에 대한<em&gt; 체외</em&gt; 탈락

Decidualization is a progesterone-dependent differentiation process of endometrial stromal cells and is a prerequisite for successful embryo implantation. ...

Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta

인간 제대혈 및 태아 태반에서 중간 엽 기질 세포의 분리 및 특성

The human umbilical cord (UC) and placenta are non-invasive, primitive and abundant sources of mesenchymal stromal cells (MSCs) that have increasingly ...

In Vitro Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Trophoblastic Cells

In Vitro Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Trophoblastic Cells

인간 다 능성의 체외 분화에서 융모 세포로 줄기 세포

The placenta is the first organ to develop during embryogenesis and is required for the survival of the developing embryo. The placenta is comprised of ...

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

생체 외에서 기능 Cardiomyocyte-같은 세포로 인간 중간 엽 줄기 세포의 분화

Myocardial infarction and the subsequent ischemic cascade result in the extensive loss of cardiomyocytes, leading to congestive heart failure, the leading ...

Corneal Tissue Engineering: An In Vitro Model of the Stromal-nerve Interactions of the Human Cornea

Corneal Tissue Engineering: An In Vitro Model of the Stromal-nerve Interactions of the Human Cornea

각 막 조직 공학:는 생체 외에서 의 모델 인간 각 막의 실질 신경 상호 작용

Tissue engineering has gained substantial recognition due to the high demand for human cornea replacements with an estimated 10 million people worldwide ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

인간 유도에서 Somite 파생 상품의 체 외 발생에서 만능 줄기 세포

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...

Generation of Multicellular Human Primary Endometrial Organoids

다세포 인간 1 차 자궁 내막 오르가노이드의 생성

The human endometrium is one of the most hormonally responsive tissues in the body and is essential for the establishment of pregnancy. This tissue can ...