Name: a droplet-based microfluidic approach and microsphere-pcr amplification for single-stranded dna amplicons
Uploaded: 2018-11-14T13:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Droplet-Based Microfluidic Approach and Microsphere-PCR Amplification for Single-Stranded DNA Amplicons at JoVE.com

Это исследование поддерживается проекта под названием «Совместная программа исследований для сельскохозяйственной науки и технологического развития (проект № PJ0011642) «финансируется администрацией сельского развития, Республика Корея. Это исследование было также частично при поддержке гранта (СР 2017R1A2B4012253) основной программы исследований науки через Национальный фонд исследований (NRF) финансируется министерством науки, ИКТ и будущего планирования, Республика Корея. Это исследование было также поддержано Грант (N0000717) программы образования для творческих и промышленные конвергенции, финансируемого министерством торговли, промышленности и энергетики, Республика Корея.

1. Изготовление PDMS Microfluidic платформа
<ol><li>Подготовка 20 мл жидких PDMS форполимера путем смешивания базового полимера и катализатором в том соотношении 10:1. Залейте 10 мл жидкости PDMS на подготовленной прессформы Су-8 на кремниевой пластины для верхней части microfluidic сети. Для нижней равнинной ?...

<ol>
	<li>Smith, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+exonuclease+III+for+preparing+single+stranded+DNA+for+use+as+a+template+in+the+chain+terminator+sequencing+method.">The use of exonuclease III for preparing single stranded DNA for use as a template in the chain terminator sequencing method.</a> Nucleic Acids Research. 6 (3), 831-848 (1979).</li><li>Sekhon, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aptabody-aptatope+interactions+in+aptablotting+assays.">Aptabody-aptatope interactions in aptablotting assays.</a> Nanoscale. 9 (22), 7464-7475 (2017).</li><li>Ng, J. K., Ajikumar, P. K., Stephanopoulos, G., Too, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Profiling+RNA+polymerase-promoter+interaction+by+using+ssDNA-dsDNA+probe+on+a+surface+addressable+microarray.">Profiling RNA polymerase-promoter interaction by using ssDNA-dsDNA probe on a surface addressable microarray.</a> Chembiochem. 8 (14), 1667-1670 (2007).</li><li>Sekhon, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+copper+binding+aptamotif+and+aptamer+integrated+recovery+platform+(AIRP).">Defining the copper binding aptamotif and aptamer integrated recovery platform (AIRP).</a> Nanoscale. 9 (8), 2883-2894 (2017).</li><li>Mikhailov, V. S., Bogenhagen, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Xenopus+laevis+mitochondrial+single-stranded+DNA-binding+protein+on+primer-template+binding+and+3'--&gt;5'+exonuclease+activity+of+DNA+polymerase+gamma.">Effects of Xenopus laevis mitochondrial single-stranded DNA-binding protein on primer-template binding and 3'--&gt;5' exonuclease activity of DNA polymerase gamma.</a> Journal of Biological Chemistry. 271 (31), 18939-18946 (1996).</li><li>Yu, X., Cheng, G., Zhou, M. D., Zheng, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On-demand+one-step+synthesis+of+monodisperse+functional+polymeric+microspheres+with+droplet+microfluidics.">On-demand one-step synthesis of monodisperse functional polymeric microspheres with droplet microfluidics.</a> Langmuir. 31 (13), 3982-3992 (2015).</li><li>Akamatsu, K., Kanasugi, S., Nakao, S., Weitz, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane-Integrated+Glass+Capillary+Device+for+Preparing+Small-Sized+Water-in-Oil-in-Water+Emulsion+Droplets.">Membrane-Integrated Glass Capillary Device for Preparing Small-Sized Water-in-Oil-in-Water Emulsion Droplets.</a> Langmuir. 31 (25), 7166-7172 (2015).</li><li>Lee, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On-Flow+Synthesis+of+Co-Polymerizable+Oligo-Microspheres+and+Application+in+ssDNA+Amplification.">On-Flow Synthesis of Co-Polymerizable Oligo-Microspheres and Application in ssDNA Amplification.</a> PLoS One. 11 (7), e0159777 (2016).</li><li>Anna, S. L., Bontoux, N. B., Stone, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+dispersions+using+&amp;#34;flow+focusing&amp;#34;+in+microchannels.">Formation of dispersions using &amp;#34;flow focusing&amp;#34; in microchannels.</a> Applied Physics Letters. 82 (3), 364-366 (2003).</li><li>Gupta, A., Matharoo, H. S., Makkar, D., Kumar, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Droplet+formation+via+squeezing+mechanism+in+a+microfluidic+flow-focusing+device.">Droplet formation via squeezing mechanism in a microfluidic flow-focusing device.</a> Computers &amp; Fluids. 100, 218-226 (2014).</li><li>McDonald, J. C., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly(dimethylsiloxane)+as+a+material+for+fabricating+microfluidic+devices.">Poly(dimethylsiloxane) as a material for fabricating microfluidic devices.</a> Accounts of Chemical Research. 35 (7), 491-499 (2002).</li><li>Haubert, K., Drier, T., Beebe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PDMS+bonding+by+means+of+a+portable,+low-cost+corona+system.">PDMS bonding by means of a portable, low-cost corona system.</a> Lab on a Chip. 6 (12), 1548-1549 (2006).</li><li>Olsen, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+Microfluidic+Selex+Using+Free+Solution+Electrokinetics.">Integrated Microfluidic Selex Using Free Solution Electrokinetics.</a> Journal of the Electrochemical Society. 164 (5), B3122-B3129 (2017).</li><li>Dorris, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodeoxyribonucleotide+probe+accessibility+on+a+three-dimensional+DNA+microarray+surface+and+the+effect+of+hybridization+time+on+the+accuracy+of+expression+ratios.">Oligodeoxyribonucleotide probe accessibility on a three-dimensional DNA microarray surface and the effect of hybridization time on the accuracy of expression ratios.</a> BMC Biotechnology. 3, 6 (2003).</li><li>Heiat, M., Ranjbar, R., Latifi, A. M., Rasaee, M. J., Farnoosh, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+strategies+to+optimize+asymmetric+PCR+conditions+as+a+reliable+method+to+generate+large+amount+of+ssDNA+aptamers.">Essential strategies to optimize asymmetric PCR conditions as a reliable method to generate large amount of ssDNA aptamers.</a> Biotechnology and Applied Biochemistry. 64 (4), 541-548 (2017).</li></ol>

Загрязнители dsDNA являются серьезной проблемой в ssDNA амплификации. Он по-прежнему трудно свести к минимуму dsDNA амплификации в обычных Асимметричное PCR амплификация15. Кроме того хотя технические усовершенствования для генерации ssDNA позволили нам увеличить эффективность обр?...

Одноцепочечной ДНК (ssDNA) широко рассматривается как элемент молекулярного распознавания (MRE) из-за его внутренние свойства для ДНК-ДНК гибридизации1,2. Разработка ssDNA синтетических систем может привести к биологических приложений, таких как ДНК microarrays3, oligotherapeutics, диагностика и комплексной молекулярной зондирования на основе взаимодополняющих взаимодействия4,5.
На сегодняшний день, Микрометр шкала полимерные частицы были успешно продемонстрированы используя microfluidic приборы. Несколько методов microfluidic доказали быть мощным для производства весьма однородной микросфер на непрерывный поток в микроканальные среды6,7.
В исследовании Lee et al. 8, на основе капелька microfluidic платформа для microfluidic синтеза copolymerizable oligo микросферы и ssDNA амплификации было сообщено. Microfluidic платформа состоит из двух слоев PDMS (полидиметилсилоксан): Верхняя часть с microfluidic канала сети для генерации микросфер и дно плоской части. Они состоят из трех видов PDMS аэрогидродинамических каналов: 1) поток канал для поколения капелька, 2) серпантином канал для смешивания двух решений и 3) последовательных полимеризации канал для микросфер затвердевания. После того, как в один канал аэрогидродинамических PDMS вводятся две Несмешивающиеся потоков, потоков может быть принужден через узкие отверстия структуру. Потока поведения, таких как канал геометрии, скорость потока и вязкость влияет на размер и морфология микросфер. Таким образом основной поток жидкости можно подразделить микромасштабной monospheres9,10.
Здесь подробные микросферы ПЦР протокола предоставляется для амплификации ssDNA. Во-первых описан процесс проектирования устройств на базе капелька microfluidic. Затем объясняется способ, в котором полиакриламида микросферы можно функционализированных с случайных ДНК шаблон на взаимодополняющей основе. Наконец показана микросферы ПЦР протокола для усиления ssDNA.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>liquid polydimethylsiloxane, PDMS</td>
			<td>Dow Corning Inc.</td>
			<td>Sylgard 184</td>
			<td>Components of chip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40% Acrylamide:bis solution (19:1)</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>1610140</td>
			<td>Components of Copolymerizable oligo-microsphere</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium persulfate, APS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A3678</td>
			<td>Hardener of acrylamide:bis solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N,N&#8242;,N&#8242;-Tetramethylethylenediamine, TEMED</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T9281</td>
			<td>Catalyst of ammonium persulfate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M5904</td>
			<td>Table 1. Solution III. Component of microsphere reagents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cy3 labeled complementary oligonucleotide probes</td>
			<td>Bioneer</td>
			<td>synthesized</td>
			<td>Table 3. Sequence information&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ssDNA acrydite labeled probe</td>
			<td>Bioneer</td>
			<td>synthesized</td>
			<td>Table 1. Solution I. Component of microsphere reagents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Biosesang</td>
			<td>&#160;T1016</td>
			<td>Components of TE buffer, pH buffer solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>EDS</td>
			<td>Components of TE buffer, removal of ion (Ca2+)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ex taq</td>
			<td>Takara</td>
			<td>RR001A</td>
			<td>ssDNA amplification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope&#160;</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>LSM 510</td>
			<td>Identifying oligonucleotides expossure of microsphere surface</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light Microscope</td>
			<td>Nikon Instruments Inc.</td>
			<td>eclipse 80i</td>
			<td>Caculating number of microspheres</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T100 Thermal Cycler</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>1861096</td>
			<td>ssDNA amplification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hand-held Corona Treater</td>
			<td>Electro-Technic</td>
			<td>BD-20AC Laboratory Corona Treater</td>
			<td>Hydrophilic surface treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate</td>
			<td>As one</td>
			<td>HI-1000</td>
			<td>heating plate for curing of liquid PDMS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>kd Scientific</td>
			<td>78-1100</td>
			<td>Uniform flow of Solution I and Solution II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compressor</td>
			<td>Kohands</td>
			<td>KC-250A</td>
			<td>Flow control of Solution III</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bright-Line Hemacytometer</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>Z359629</td>
			<td>Caculating number of microspheres</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a droplet-based microfluidic approach and microsphere-pcr amplification for single-stranded dna amplicons

На основе капелька микрофлюидика возможность надежного производства однородных микросфер в канале microfluidic, предоставляя контролируемый размер и морфология полученные микросфер. Микросфера Сополимеризованная с acrydite ДНК-зонд был успешно сфабрикованы. Различные методы, такие как асимметричное PCR, при exonuclease пищеварение и изоляции на стрептавидина покрытием магнитные бусы может использоваться для синтеза ДНК одноцепочечной (ssDNA). Однако эти методы не могут эффективно использовать большие объемы высокоочищенных ssDNA. Здесь мы описываем микросферы ПЦР протокола, детализируя как ssDNA можно эффективно усиливается и отделены от dsDNA просто дозирование из трубки реакции PCR. Амплификация ssDNA может применяться как потенциальные реагенты для microarray ДНК и ДНК-SELEX (систематической эволюции лигандов на экспоненциальное обогащения) процессов.

Готовых полимерных на основе капелька microfluidic платформа состоит из двух слоев PDMS (рис. 1a). Три вида microfluidic канала сети используются для генерации микросферы: 1) потока упором геометрии, как показано на рис. 1b, 2) серпантином канал для смешив?...

Watch this Scientific Journal Video about A Droplet-Based Microfluidic Approach and Microsphere-PCR Amplification for Single-Stranded DNA Amplicons at JoVE.com

A Droplet-Based Microfluidic Approach and Microsphere-PCR Amplification for Single-Stranded DNA Amplicons

Эта работа предоставляет метод для изготовления на основе капелька microfluidic платформ и применение полиакриламида микросферы для микросфер ПЦР-амплификации. Микросфера PCR метод делает возможным получить одноцепочечной ДНК ампликонов без разделения двуцепочечной ДНК.

Подход, основанный на капельки Microfluidic и микросферы ПЦР-амплификации для одноцепочечной ДНК ампликонов

Droplet-based microfluidics enable the reliable production of homogeneous microspheres in the microfluidic channel, providing controlled size and ...

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в комбинаторной технике микрофлюидной системы и молекулярной биотехнологической области, таких как микрофлюидные устройства и асимметричный метод ПЦР. Основными преимуществами этой техники являются эффективное генерация высоко гомогенизированных микросфер и выработка одноявленной ДНК без каких-либо дополнительных шагов разделения. Последствия этого метода распространяются на диагностику или терапию различных заболеваний.Поскольку генерация однонитной ДНК является ключом к анализу ap-ta-mo-sis, она может быть использована для обнаружения и лечения. Хотя этот метод может дать представление о трехмерной микрофлюидной системе в MEMS, он также может быть применен к другим системам, используемым для обнаружения и лечения заболеваний. Как правило, лица, новые для этого метода будет бороться, чтобы должным образом контролировать жидкости из течет в обратном направлении.Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение для наблюдения за образованием микросферы в геометрии, фокусировкой потока и затвердевание генерируемых микросфер. Во-первых, подготовить 20 миллилитров жидкого PDMS пре-полимера путем смешивания базового полимера и катализатора в соотношении 10 к одному. Налейте 10 миллилитров жидкой PDMS на подготовленную форму СУ-8 на кремниевой пластине для верхней части микрофлюидной сети.Для нижней плоской части, залить тот же объем жидкости PDMS на кремниевой пластины без формы структуры. Поместите две кремниевые пластины, покрытые жидким PDMS предварительно полимера на разогретой плите и вылечить при 75 градусов по Цельсию в течение 30 минут. После этого вручную снимите вылеченный слой PDMS с формы СУ-8.Выровнять 1,5 миллиметра диаметром круглое отверстие штамповки инструмент для нефтяного порта на реплицированных микрофлюидной сети для межфакторных микрон-масштаба каналов потока с макро-жидкости образцов. Затем вручную пробить через отверстие. После повторения процесса штамповки три раза, выполнить гидрофильные обработки поверхности как на верхних и нижних слоев PDMS с помощью портативного лечения короны в течение нескольких секунд на образец.Стек двух плазменных слоев PDMS и тепла при температуре 90 градусов по Цельсию в течение 30 минут на плите для ПРОЦЕССА связи PDMS-к-PDMS. Vortex и кратко центрифуга стандартный однолистный ДНК акридит помечены зонд и 19-к-одному акриламид бис фондовый раствор. Подготовь решение одно, смешивая 25 микролитров раствора 40%акриламидных бисов, 10 микролитров однопутной ДНК, 10 микролитров буфера 5X TBE и пять микролитров воды.Приготовьте раствор два с 50 микролитров 20%аммония persulfate. Подготовь два шприца, индивидуально заполненные раствором один и два раствора, и смонтировать их на шприц-насос, чтобы внедрить раствор, вливый в микрофлюидную платформу. Подготовка минерального масла, смешанного с 0,4%TEMED для поверхностной затвердевания микросферы.После заполнения стеклянной бутылки с минеральным маслом, вставьте две трубки в пневматические и жидкие порты в крышке стеклянной бутылки в качестве микрофлюидного резервуара. Соедините трубки между стеклянной бутылкой и масляным портом в микрофлюидном устройстве. Подключите трубки к двум портам раствора в микрофлюидных устройствах, чтобы поставлять два раствора из шприц-насосов.Затем вставьте трубки в выходной порт для переноса генерируемой микросферы в стакан. Затем установите скорость потока шприц-насоса до 0,4-0,7 миллилитров в час. Отрегулируйте давление сжатого воздуха компрессора с помощью регулятора.Поместите стеклянный стакан с магнитной панелью перемешать на hotplate и установить скорость вращения. Работайте шприц-насосом и поставь сжатый воздух, генерируемый внешним компрессором, в стеклянную бутылку с помощью выключенного управления электромагнитным клапаном. Используя цифровой микроскоп, наблюдайте за образованием микросфер в геометрии, фокусировкой потока и затвердевание генерируемых микросфер в стеклянном стакане.Наблюдение за образованием микросфер является одним из наиболее важных шагов, поскольку это основной процесс в данном исследовании для производства микросфер и микрофлюидной системы. После этого перенесите 100 микролитров микросфер в 1,5 миллилитровую микро центрифугу. Затем удалите супернатант через нежные центрифугирования и трубопроводов.Повторное использование бесплатного зонда-модифицированного цианина-3 с использованием 100 микролитров буфера 1X TE для достижения окончательной концентрации 100 микромолей. Далее добавьте 100 микромолей дополнительного зонда-модифицированного цианина-3 к стерильной микро центрифуге на 1,5 миллилитра, содержащей кополимерные микросферы AP. Нажмите трубку несколько раз, чтобы смешать и инкубировать при комнатной температуре в темноте в течение одного часа.После инкубации отбросьте супернатант и удалите остаточный буфер через трубу. Затем трижды промыть 500 микролитров буфера TE. Поместите микросферы на стеклянную горку 75 на 50 миллиметров и накройте алюминиевой фольгой перед визуализацией.Получить около 25 микросфер с помощью микроскопического подсчета с помощью светового микроскопа с 40X увеличение. После этого объедините все реагенты, описанные в текстовом протоколе. Поместите образцы в термоциклер и запустите асимметричный ПЦР при соответствующих условиях.Сбор супернатанта после асимметричного ПЦР является одним из наиболее важных этапов, поскольку он является основным процессом генерации однотяговой ДНК с микросферой. После усиления добавьте восемь микролитров буфера загрузки 6X в каждый образец. Загрузите 15 микролитров каждого образца в 2%agarose гель.Затем выполняте электрофорез на 100 вольт в течение 35 минут в буфере 1X TAE. Поместите гибридизированные микросферы в держатель и прикрепите держатель к стадии конфокального микроскопа. Выберите лазер и включите его в лазерном управлении.Выберите объектив цели в управлении микроскопом. Затем выберите нужный фильтр для цианина-3 и канал в управлении конфигурацией. Наконец, начните эксперимент и наблюдайте за образцом.Изготовленная полимерная капельная микрофлюидная платформа состоит из двух слоев PDMS. Для генерации микросфер используются три вида микрофлюидных сетей, которые являются геометрией, фокусирующей поток, серпантинным каналом для смешивания решений один и два, и каналом полимеризации для микросферной затвердевания. Для генерации микросфер в микрофлюидной платформе использовалась лабораторная пневматическая система контроля непрерывного потока минерального масла и два шприц-насоса для потока раствора.Если микросферы правильно функционируют с помощью пяти-премьер-акридитного ДНК-зонда, они должны привести к охвату флуоресцентной активности на поверхности во время эксперимента по гибридизации, как показано на этих флуоресцентных изображениях. Если кополимеризация происходит неправильно, оптическое изображение микросферы будет проявлять внутреннее загрязнение внутри микросфер. Манипулирование 3D-поверхностью микросфер с помощью олиго-зонда ДНК является гораздо более быстрым процессом, и платформа синтеза микросферы на потоке может стать инструментом для однопутного усиления и очистки ДНК.Первоначально copolymerized пять премьер AP обеспечивает три премьер гидроксила конец для полимеризации ДНК после annealing к его дополнительным шаблоном. В асимметричном эксперименте ПЦР наблюдались двойные загрязняющие вещества ДНК. Полученная однострувочная ДНК, накопленная из микросферного ПЦР, была продемонстрирована по сравнению с маркерами синтетического размера с помощью анализа электрофореза геля.При попытке этой процедуры, важно помнить, что предварительное знание протоколов и корректировок, которые обычно необходимы для оптимизации экспериментов ПЦР, необходимы для получения цикла усиления, температуры аннеаля и последовательности зонда в этом методе. После своего развития, этот метод проложил путь для исследователей в области диагностики и терапии для подключения двух регионов в молекулярной биотехнологии и биомедицины. Не забывайте, что работа с раствором акриламида может быть опасной и такие меры предосторожности, как ношение перчаток и лабораторных пальто всегда должны быть приняты при выполнении этой процедуры.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Microfluidic-based Hydrodynamic Trap for Single Particles

Микрожидкостных основе гидродинамической Ловушка для одиночных частиц

The ability to confine and manipulate single particles in free solution is a key enabling technology for fundamental and applied science.  Methods for ...

Microfluidic Mixers for Studying Protein Folding

Микрофлюидных Смесители для изучения сворачивания белков

The process by which a protein folds into its native conformation is highly relevant to biology and human health yet still poorly understood. One reason ...

A Microfluidic Device for Studying Multiple Distinct Strains

Микрофлюидных устройство для изучения нескольких различных штаммов

The study of cell responses to environmental changes poses many experimental challenges: cells need to be imaged under changing conditions, often in a ...

Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery

Кожа Татуировка как новый подход для доставки ДНК-вакцин

Nucleic acid-based vaccination is a topic of growing interest, especially plasmid DNA (pDNA) encoding immunologically important antigens. After the ...

Microfluidic Fabrication of Polymeric and Biohybrid Fibers with Predesigned Size and Shape

Микрофлюидное изготовление полимерных и биогибридных волокон с заранее разработанным размером и формой

A &#8220;sheath&#8221; fluid passing through a microfluidic channel at low Reynolds number can be directed around another &#8220;core&#8221; stream and ...

A Microfluidic-based Electrochemical Biochip for Label-free DNA Hybridization Analysis

Микрожидкостных основе Электрохимический Биочип для этикеток без анализа ДНК-гибридизации

Miniaturization of analytical benchtop procedures into the micro-scale provides significant advantages in regards to reaction time, cost, and integration ...

A Microfluidic Chip for ICPMS Sample Introduction

Микрожидкостных чип для МСПМС ввода пробы

This protocol discusses the fabrication and usage of a disposable low cost microfluidic chip as sample introduction system for inductively coupled plasma ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

Микрожидком Платформа с высокой пропускной способностью изоляции одноклеточные и культуры

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

Multi-step Variable Height Photolithography for Valved Multilayer Microfluidic Devices

Многоступенчатая переменной высоты фотолитографии для Valved Многослойные микрожидком устройств

Microfluidic systems have enabled powerful new approaches to high-throughput biochemical and biological analysis. However, there remains a barrier to ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Микрожидкостных Платформа с уплотненными электронным детектором для пространственного слежения частиц

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...