Name: a flow cytometry-based assay for measuring mitochondrial membrane potential in cardiac myocytes after hypoxia/reoxygenation
Uploaded: 2018-07-13T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation at JoVE.com

هذه الدراسة كانت تدعمها المنح "البحوث الوطنية بالمفتاح" وبرنامج التنمية في الصين (رقم 2017YFC1700503)، "البرنامج الوطني للبحوث الأساسية" (برنامج 973) الصين (No.2012CB518602)، "مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية" (رقم 81370223 ورقم 81573957)، ومؤسسة البحوث الابتكارية لطلاب الدراسات العليا من كلية طب الاتحاد بكين (2016-1002-01-02).

1-إعداد الكواشف والحلول
<ol><li>إعداد متوسطة كاملة myocytes القلب البشري (الموطن) بإضافة 25 مل مزيج الملحق "ميوسيتي النمو المتوسطة" إلى 500 مل من "ميوسيتي النمو المتوسطة" وفقا لإرشادات الشركة المصنعة. مخزن في 4 درجات مئوية والحارة إلى 37 درجة مئوية قبل استخدام.</li>
	<li>إعداد حل تونجكسينلو (TXL) بإذابة مسحو?...

<ol>
	<li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Myocardial+Infarction.">Acute Myocardial Infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>Ibanez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation:+The+Task+Force+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation+of+the+European+Society+of+Cardiology+(ESC).">ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation: The Task Force for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC).</a> European Heart Journal. 39 (2), 119-177 (2017).</li><li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+reperfusion+injury.">Myocardial reperfusion injury.</a> New England Journal of Medicine. 357 (11), 1121-1135 (2007).</li><li>Ong, S. B., Samangouei, P., Kalkhoran, S. B., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mitochondrial+permeability+transition+pore+and+its+role+in+myocardial+ischemia+reperfusion+injury.">The mitochondrial permeability transition pore and its role in myocardial ischemia reperfusion injury.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 78, 23-34 (2015).</li><li>Heusch, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+basis+of+cardioprotection:+signal+transduction+in+ischemic+pre-,+post-,+and+remote+conditioning.">Molecular basis of cardioprotection: signal transduction in ischemic pre-, post-, and remote conditioning.</a> Circulation Research. 116 (4), 674-699 (2015).</li><li>Cossarizza, A., Ceccarelli, D., Masini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+heterogeneity+of+an+isolated+mitochondrial+population+revealed+by+cytofluorometric+analysis+at+the+single+organelle+level.">Functional heterogeneity of an isolated mitochondrial population revealed by cytofluorometric analysis at the single organelle level.</a> Experimental Cell Research. 222 (1), 84-94 (1996).</li><li>Ward, M. W., Rego, A. C., Frenguelli, B. G., Nicholls, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+membrane+potential+and+glutamate+excitotoxicity+in+cultured+cerebellar+granule+cells.">Mitochondrial membrane potential and glutamate excitotoxicity in cultured cerebellar granule cells.</a> Journal of Neuroscience. 20 (19), 7208-7219 (2000).</li><li>Perry, S. W., Norman, J. P., Barbieri, J., Brown, E. B., Gelbard, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+membrane+potential+probes+and+the+proton+gradient:+a+practical+usage+guide.">Mitochondrial membrane potential probes and the proton gradient: a practical usage guide.</a> Biotechniques. 50 (2), 98-115 (2011).</li><li>Cossarizza, A., Salvioli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+analysis+of+mitochondrial+membrane+potential+using+JC-1.">Flow cytometric analysis of mitochondrial membrane potential using JC-1.</a> Current Protocols in Cytometry. , 14 (2001).</li><li>Salvioli, S., Ardizzoni, A., Franceschi, C., Cossarizza, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=JC-1,+but+not+DiOC6(3)+or+rhodamine+123,+is+a+reliable+fluorescent+probe+to+assess+delta+psi+changes+in+intact+cells:+implications+for+studies+on+mitochondrial+functionality+during+apoptosis.">JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess delta psi changes in intact cells: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis.</a> FEBS Letters. 411 (1), 77-82 (1997).</li><li>Chen, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+miR-128-3p+by+Tongxinluo+Protects+Human+Cardiomyocytes+from+Ischemia/reperfusion+Injury+via+Upregulation+of+p70s6k1/p-p70s6k1.">Inhibition of miR-128-3p by Tongxinluo Protects Human Cardiomyocytes from Ischemia/reperfusion Injury via Upregulation of p70s6k1/p-p70s6k1.</a> Frontiers in Pharmacology. 8, 775 (2017).</li><li>Cui, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+autophagy+by+Tongxinluo+through+the+MEK/ERK+pathway+protects+human+cardiac+microvascular+endothelial+cells+from+hypoxia/reoxygenation+injury.">Induction of autophagy by Tongxinluo through the MEK/ERK pathway protects human cardiac microvascular endothelial cells from hypoxia/reoxygenation injury.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 64 (2), 180-190 (2014).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lysophosphatidic+acid+protects+mesenchymal+stem+cells+against+hypoxia+and+serum+deprivation-induced+apoptosis.">Lysophosphatidic acid protects mesenchymal stem cells against hypoxia and serum deprivation-induced apoptosis.</a> Stem Cells. 26 (1), 135-145 (2008).</li><li>Chazotte, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labeling+mitochondria+with+JC-1.">Labeling mitochondria with JC-1.</a> Cold Spring Harbor Protocols. (9), (2011).</li><li>Pravdic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic-induced+preconditioning+delays+opening+of+mitochondrial+permeability+transition+pore+via+protein+Kinase+C-epsilon-mediated+pathway.">Anesthetic-induced preconditioning delays opening of mitochondrial permeability transition pore via protein Kinase C-epsilon-mediated pathway.</a> Anesthesiology. 111 (2), 267-274 (2009).</li><li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+Excessive+Histone+Deacetylases+Activity+in+Diabetic+Hearts+Attenuates+Myocardial+Ischemia/Reperfusion+Injury+via+Mitochondria+Apoptosis+Pathway.">Suppression of Excessive Histone Deacetylases Activity in Diabetic Hearts Attenuates Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury via Mitochondria Apoptosis Pathway.</a> Journal of Diabetes Research. 2017, 8208065 (2017).</li><li>Qiu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Curcumin-induced+melanoma+cell+death+is+associated+with+mitochondrial+permeability+transition+pore+(mPTP)+opening.">Curcumin-induced melanoma cell death is associated with mitochondrial permeability transition pore (mPTP) opening.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 448 (1), 15-21 (2014).</li><li>Zhen, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P53+dependent+mitochondrial+permeability+transition+pore+opening+is+required+for+dexamethasone-induced+death+of+osteoblasts.">P53 dependent mitochondrial permeability transition pore opening is required for dexamethasone-induced death of osteoblasts.</a> Journal of Cell Physiology. 229 (10), 1475-1483 (2014).</li><li>Nazarewicz, R. R., Dikalova, A. E., Bikineyeva, A., Dikalov, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nox2+as+a+potential+target+of+mitochondrial+superoxide+and+its+role+in+endothelial+oxidative+stress.">Nox2 as a potential target of mitochondrial superoxide and its role in endothelial oxidative stress.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 305 (8), H1131-H1140 (2013).</li><li>Wang, T., Zhang, Z. X., Xu, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+mitochondrial+KATP+channel+on+voltage-gated+K++channel+in+24+hour-hypoxic+human+pulmonary+artery+smooth+muscle+cells.">Effect of mitochondrial KATP channel on voltage-gated K+ channel in 24 hour-hypoxic human pulmonary artery smooth muscle cells.</a> Chinese Medical Journal (Engl). 118 (1), 12-19 (2005).</li><li>Kuter, N., Aysit-Altuncu, N., Ozturk, G., Ozek, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Neuroprotective+Effects+of+Hypothermia+on+Bilirubin-Induced+Neurotoxicity+in+vitro.">The Neuroprotective Effects of Hypothermia on Bilirubin-Induced Neurotoxicity in vitro.</a> Neonatology. 113 (4), 360-365 (2018).</li><li>Zheng, Y. Y., Wang, M., Shu, X. B., Zheng, P. Y., Ji, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+activation+by+Jiang+Zhi+Granule+protects+against+metabolic+stress-induced+hepatocyte+injury.">Autophagy activation by Jiang Zhi Granule protects against metabolic stress-induced hepatocyte injury.</a> World Journal of Gastroenterology. 24 (9), 992-1003 (2018).</li><li>El Gamal, H., Eid, A. H., Munusamy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renoprotective+Effects+of+Aldose+Reductase+Inhibitor+Epalrestat+against+High+Glucose-Induced+Cellular+Injury.">Renoprotective Effects of Aldose Reductase Inhibitor Epalrestat against High Glucose-Induced Cellular Injury.</a> Biomed Research International. 2017, 5903105 (2017).</li><li>Renault, T. T., Luna-Vargas, M. P., Chipuk, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Liver+Mitochondria+Isolation,+Size+Fractionation,+and+Real-time+MOMP+Measurement.">Mouse Liver Mitochondria Isolation, Size Fractionation, and Real-time MOMP Measurement.</a> Bio-Protocols. 6 (15), (2016).</li></ol>

هنا، نقدم هو بروتوكول يستخدم صبغ جيمي كارتر-1 لتقييم نظام التمثيل التناسبي المختلط الخلايا بعد التعرض "الكشف عن" ر. ح بمقايسة جيمي كارتر-1، ونظام التمثيل التناسبي المختلط خلايا مستقلة عن عوامل مثل حجم الميتوكوندريا والشكل والكثافة التي قد تؤثر على الأسفار مكون واحد إشارات14. ون...

أمراض القلب والشرايين هو السبب الرئيسي للوفاة في العالم. العلاج الأمثل للحد من الإصابات الدماغية، والحد من حجم احتشاء في المرضى الذين يعانون من ش-الجزء رفع احتشاء عضلة القلب يتم ضخه احتشاء عضلة القلب في الوقت المناسب والفعال عن طريق التدخل التاجي عن طريق الجلد الأولية (PCI)1، 2. ومع ذلك، ضخه تسبب ضررا إضافيا، التي يمكن أن تصل إلى 30 في المئة من حجم احتشاء النهائي3. من المسلم به عالمياً أن المسام الانتقال نفاذية المتقدرية (mPTP) ليس فقط المركزية في المتقدرية الأضرار وخلية الموت أثناء الاسكيمية/ضخه (أنا/R)، بل أيضا هدف متقاربة من كارديوبروتيكتيفي مما يشير إلى4 , 5-كما سوف يحقق افتتاح mPTP depolarization غشاء الميتوكوندريا الداخلية المحتملة (MMP)4، اكتشفنا افتتاح mPTP استخدام 5، 5، 6، 6-تيتراتشلورو-1، 1، 3، المقايسة 3-إيثيل-إيميداكاربوسيانينيوديدي (JC-1).
والرزن جيمي كارتر-1 هو طريقة سيتوفلوريميتريك أن النوعية والكمية على حد سواء، وأنه تم التحقق من المزيد من خلال تحليل نظام التمثيل التناسبي المختلط على مستوى الميتوكوندريا واحدة6. جيمي كارتر-1 موجود كشكل تجميعي، تدر حمراء للانبعاثات الملونة البرتقالي (590 ± 17.5 nm) في المصفوفة من الميتوكوندريا مع MMP العادي؛ مع فقدان نظام التمثيل التناسبي المختلط، جيمي كارتر-1 يتم تحويلها إلى شكل أحادي التي تعطي ومضان أخضر مع انبعاثات من 530 ± 15 نانومتر. ولذلك، انخفاضا في نسبة كثافة fluorescence الحمر/الخضر يمكن أن تشير إلى الحد من نظام التمثيل التناسبي المختلط في ظروف مثل الاسكيمية/ضخه (أنا/R).
بالإضافة إلى JC-1، درست أيضا نظام التمثيل التناسبي المختلط مع الكاتيونات محبتين نفاذية الغشاء مثل 123 والرودامين و 3, 3-ديهيكسيلوكساديكاربوسيانيني يوديد [DiOC6(3)]. ومع ذلك، بالمقارنة مع هذه المسابر اثنين، جيمي كارتر-1 أكثر موثوقية لتحليل نظام التمثيل التناسبي المختلط. وقد والرودامين 123 حساسية ضعيفة نسبيا (لا سيما في تبريد الوضع7،8) وخصوصية الفقراء. في بعض الأحيان التحول في والرودامين 123 صغيرة جداً لدرجة أنه من الصعب للباحثين أو معدات لمراقبة/كشف. وإلى جانب ذلك، في خلية واحدة، هناك مواقع الربط ميتوكندريا مختلفة والرودامين 123 وحتى أنه قد يكون للأسفار المختلفة الانبعاثات9. لا ينصح DiOC6(3) للكشف عن نظام التمثيل التناسبي المختلط أما كما أنه يتفاعل depolarization غشاء البلازما10مع إحساس مرهف.
ولذلك، هنا نستخدم المقايسة جيمي كارتر-1 لتقييم "نظام التمثيل التناسبي المختلط الموطن" بعد تعرضهم لنقص/ريوكسيجينيشن مع أو بدون عامل واقية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="970">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:293px;">Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1</td>
			<td style="width:307px;">Beyodtime, China</td>
			<td style="width:80px;">C2006</td>
			<td style="width:291px;">In the kit there are JC-1 stock solution (200&#215;), stock staining buffer (5&#215;) and CCCP(10mM)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tongxinluo ultrafine powder</td>
			<td>Shijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co., China</td>
			<td>071201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:293px;">Annexin V-FITC/PI Kit</td>
			<td>Becton-Dickinson, USA</td>
			<td>556547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DMEM</td>
			<td>Life Technologies, Grand Island Biological Company, USA</td>
			<td>11966-025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Human cardiac myocyte</td>
			<td>Promocell, Germany</td>
			<td>C-12810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:293px;">Myocyte Growth Medium 
			(SupplementMix)</td>
			<td>Promocell, Germany</td>
			<td>C-39275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Myocyte Growth Medium (Ready-to-use)</td>
			<td>Promocell, Germany</td>
			<td>C-22070</td>
			<td>used with Myocyte Growth Medium SupplementMix</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">GENbox</td>
			<td>BioM&#233;rieux, Marcy l&#8217;Etoile, France</td>
			<td>96127</td>
			<td>2.5L</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Catalyst (AnaeroPack)</td>
			<td>MITSUBISHI GAS CHEMICAL&#160;COMPANY, INC.&#160;, Japan</td>
			<td>&#160;C-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Anaerobic indicator</td>
			<td>BioM&#233;rieux, Marcy l&#8217;Etoile, France</td>
			<td>96118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Flow cytometer</td>
			<td>Becton-Dickinson, USA</td>
			<td>FACSAria 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">BD FACSDiva Software</td>
			<td>Becton-Dickinson, USA</td>
			<td></td>
			<td>Version8.0.1</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sample tube</td>
			<td>Corning science, USA</td>
			<td>352054</td>
			<td>12*75mm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PBS</td>
			<td>Hyclone, USA</td>
			<td>SH30256.01</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a flow cytometry-based assay for measuring mitochondrial membrane potential in cardiac myocytes after hypoxia/reoxygenation

ضخه في الوقت المناسب والفعال للشريان التاجي المغطى أفضل استراتيجية لتقليل حجم احتشاء عضلة القلب في المرضى الذين يعانون من قطعة ST مرتفعة احتشاء عضلة القلب. ومع ذلك، ضخه في حد ذاته يمكن أن يؤدي إلى الوفاة كارديوميوسيتي كذلك، ظاهرة المعروفة باسم الإصابة ضخه. فتح المسام الانتقال نفاذية المتقدرية (mPTP)، مع انخفاض للغشاء الميتوكوندريا المحتملة (MMP)، أو depolarization الميتوكوندريا، معترف به عالمياً كخطوة نهائية للإصابة ضخه وهي المسؤولة عن الميتوكوندريا والموت كارديوميوسيتي. جيمي كارتر-1 هو صبغة محبتين الموجبة التي تتراكم في الميتوكوندريا استناداً إلى قيمة نظام التمثيل التناسبي المختلط. أعلى نظام التمثيل التناسبي المختلط، كلما تتراكم JC-1 في الميتوكوندريا. يمكن أن تنعكس كميات متزايدة من JC-1 في الميتوكوندريا بانتقال انبعاث الأسفار من الأخضر (~ 530 نانومتر) إلى اللون الأحمر (~ 590 nm). ولذلك، يمكن أن تشير إلى الحد نسبة كثافة ومضان أحمر/أخضر ديبولاريزيشن الميتوكوندريا. ونحن هنا، نلقي الاستفادة من JC-1 لقياس نظام التمثيل التناسبي المختلط، أو فتح mPTP في myocytes القلب البشري بعد نقص/ريوكسيجينيشن، تم الكشف عن طريق التدفق الخلوي.

قبل إجراء الفحص JC-1 لتقييم التغييرات في نظام التمثيل التناسبي المختلط، ينصح بشدة أن التجارب تجري إلى تأكيد الشروط بنجاح مجموعة من الباحثين. كما هو موضح بالتدفق الخلوي النتائج (الشكل 2)، بالمقارنة مع مجموعة طبيعية، ونقص/ريوكسيجينيشن (H/R) إلى حد كبير التي يسب...

Watch this Scientific Journal Video about A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation at JoVE.com

A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation

نقدم هنا، هو بروتوكول يستخدم صبغ جيمي كارتر-1 لتقييم إمكانات غشاء الميتوكوندريا في الخلايا بعد التعرض لنقص/ريوكسيجينيشن مع أو بدون عامل واقية.

فحص الخلوي على أساس تدفق لقياس إمكانات غشاء الميتوكوندريا في Myocytes القلب بعد نقص/ريوكسيجينيشن

Timely and efficient reperfusion of the occluded coronary artery is the best strategy for decreasing myocardial infarct size in patients with a ST-segment ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Measuring Cardiac Autonomic Nervous System (ANS) Activity in Children

Measuring Cardiac Autonomic Nervous System ANS Activity in Children

قياس القلب العصبي المستقل نظام (ANS) نشاط في الأطفال

The autonomic nervous system (ANS) controls mainly automatic bodily functions that are engaged in homeostasis, like heart rate, digestion, respiratory ...

Collecting Saliva and Measuring Salivary Cortisol and Alpha-amylase in Frail Community Residing Older Adults via Family Caregivers

Salivary measures have emerged in bio-behavioral research  that are easy-to-collect, minimally invasive, and relatively inexpensive  biologic markers of ...

Imaging- and Flow Cytometry-based Analysis of Cell Position and the Cell Cycle in 3D Melanoma Spheroids

تحليل يستند الخلوي-Imaging- وتدفق الوظيفة خلية ودورة الخلية في 3D الميلانوما الأجسام الشبه الكروية

Three-dimensional (3D) tumor spheroids are utilized in cancer research as a more accurate model of the in vivo tumor microenvironment, compared to ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

الفوسفور 31 الرنين المغناطيسي الطيفي: أداة لقياس<em&gt; في فيفو</em&gt; القدرة الميتوكوندريا الفسفرة التأكسدية في العضلات الهيكلية البشرية

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Healthy Volunteers and Their Migratory Potential Influenced by Serum Samples After Cardiac Surgery

عزل الخلايا البطانية السلف من المتطوعين الأصحاء وإمكاناتهم الكثيرة تأثر عينات المصل بعد جراحة القلب

Endothelial progenitor cells (EPCs) are recruited from the bone marrow under pathological conditions like hypoxia and are crucially involved in the ...

Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference (NPD)

Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference NPD

قياس موحد لغشاء الآنف ترانسيبيثيليال إمكانات الفرق (NPD)

We describe a standardized measurement of nasal potential difference (NPD). In this technique, cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) ...

Implantation of hiPSC-derived Cardiac-muscle Patches after Myocardial Injury in a Guinea Pig Model

غرس المستمدة من هيبسك بقع عضلة القلب بعد "إصابة احتشاء عضلة القلب" في "نموذج خنزير غينيا"

Due to the limited regeneration capacity of the heart in adult mammals, myocardial infarction results in an irreversible loss of cardiomyocytes. This loss ...

Isolation of Atrial Myocytes from Adult Mice

عزل الخلايا الماية الأذينية من الفئران البالغة

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents ...

Hemocompatibility Testing of Blood-Contacting Implants in a Flow Loop Model Mimicking Human Blood Flow

اختبار توافق الدم من زرع الدم الاتصال في نموذج حلقة تدفق محاكاة تدفق الدم البشري

The growing use of medical devices (e.g., vascular grafts, stents, and cardiac catheters) for temporary or permanent purposes that remain in the ...

In vitro Assessment of Myocardial Protection following Hypothermia-Preconditioning in a Human Cardiac Myocytes Model

في المختبر تقييم حماية عضلة القلب بعد انخفاض حرارة الجسم- الشروط المسبقة في نموذج الخلايا العضلية القلب البشري

Ischemia/reperfusion-derived myocardial dysfunction is a common clinical scenario in patients after cardiac surgery. In particular, the sensitivity of ...