Name: a flow cytometry-based assay for measuring mitochondrial membrane potential in cardiac myocytes after hypoxia/reoxygenation
Uploaded: 2018-07-13T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation at JoVE.com

Denna studie stöddes av bidrag från den nationella nyckel forskning och utveckling Program i Kina (nr. 2017YFC1700503), nationella grundläggande forskningsprogrammet (973 Program) Kina (No.2012CB518602), den nationella naturvetenskap Foundation i Kina (nr. 81370223 och nr 81573957), och de doktorander innovativa Research Foundation i Peking unionen Medical College (2016-1002-01-02).

1. beredning av reagens och lösningar
<ol><li>Förbereda mänskliga hjärt myocyter (HCMs) komplett medium genom att lägga till 25 mL myocyt odlingsmedium tillägg mix 500 mL myocyt odlingsmedium enligt tillverkarens instruktioner. Förvaras vid 4 ° C och varma till 37 ° C före användning.</li>
	<li>Förbereda Tongxinluo (TXL) lösning genom att lösa TXL ultrafina puder i serum/glukos-free Dulbeccos modifierade örnens medium (DMEM) och justera koncentrationen av TXL till 400 µg/mL genom att lägga till DMEM (f...

<ol>
	<li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Myocardial+Infarction.">Acute Myocardial Infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>Ibanez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation:+The+Task+Force+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation+of+the+European+Society+of+Cardiology+(ESC).">ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation: The Task Force for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC).</a> European Heart Journal. 39 (2), 119-177 (2017).</li><li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+reperfusion+injury.">Myocardial reperfusion injury.</a> New England Journal of Medicine. 357 (11), 1121-1135 (2007).</li><li>Ong, S. B., Samangouei, P., Kalkhoran, S. B., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mitochondrial+permeability+transition+pore+and+its+role+in+myocardial+ischemia+reperfusion+injury.">The mitochondrial permeability transition pore and its role in myocardial ischemia reperfusion injury.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 78, 23-34 (2015).</li><li>Heusch, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+basis+of+cardioprotection:+signal+transduction+in+ischemic+pre-,+post-,+and+remote+conditioning.">Molecular basis of cardioprotection: signal transduction in ischemic pre-, post-, and remote conditioning.</a> Circulation Research. 116 (4), 674-699 (2015).</li><li>Cossarizza, A., Ceccarelli, D., Masini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+heterogeneity+of+an+isolated+mitochondrial+population+revealed+by+cytofluorometric+analysis+at+the+single+organelle+level.">Functional heterogeneity of an isolated mitochondrial population revealed by cytofluorometric analysis at the single organelle level.</a> Experimental Cell Research. 222 (1), 84-94 (1996).</li><li>Ward, M. W., Rego, A. C., Frenguelli, B. G., Nicholls, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+membrane+potential+and+glutamate+excitotoxicity+in+cultured+cerebellar+granule+cells.">Mitochondrial membrane potential and glutamate excitotoxicity in cultured cerebellar granule cells.</a> Journal of Neuroscience. 20 (19), 7208-7219 (2000).</li><li>Perry, S. W., Norman, J. P., Barbieri, J., Brown, E. B., Gelbard, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+membrane+potential+probes+and+the+proton+gradient:+a+practical+usage+guide.">Mitochondrial membrane potential probes and the proton gradient: a practical usage guide.</a> Biotechniques. 50 (2), 98-115 (2011).</li><li>Cossarizza, A., Salvioli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+analysis+of+mitochondrial+membrane+potential+using+JC-1.">Flow cytometric analysis of mitochondrial membrane potential using JC-1.</a> Current Protocols in Cytometry. , 14 (2001).</li><li>Salvioli, S., Ardizzoni, A., Franceschi, C., Cossarizza, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=JC-1,+but+not+DiOC6(3)+or+rhodamine+123,+is+a+reliable+fluorescent+probe+to+assess+delta+psi+changes+in+intact+cells:+implications+for+studies+on+mitochondrial+functionality+during+apoptosis.">JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess delta psi changes in intact cells: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis.</a> FEBS Letters. 411 (1), 77-82 (1997).</li><li>Chen, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+miR-128-3p+by+Tongxinluo+Protects+Human+Cardiomyocytes+from+Ischemia/reperfusion+Injury+via+Upregulation+of+p70s6k1/p-p70s6k1.">Inhibition of miR-128-3p by Tongxinluo Protects Human Cardiomyocytes from Ischemia/reperfusion Injury via Upregulation of p70s6k1/p-p70s6k1.</a> Frontiers in Pharmacology. 8, 775 (2017).</li><li>Cui, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+autophagy+by+Tongxinluo+through+the+MEK/ERK+pathway+protects+human+cardiac+microvascular+endothelial+cells+from+hypoxia/reoxygenation+injury.">Induction of autophagy by Tongxinluo through the MEK/ERK pathway protects human cardiac microvascular endothelial cells from hypoxia/reoxygenation injury.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 64 (2), 180-190 (2014).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lysophosphatidic+acid+protects+mesenchymal+stem+cells+against+hypoxia+and+serum+deprivation-induced+apoptosis.">Lysophosphatidic acid protects mesenchymal stem cells against hypoxia and serum deprivation-induced apoptosis.</a> Stem Cells. 26 (1), 135-145 (2008).</li><li>Chazotte, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labeling+mitochondria+with+JC-1.">Labeling mitochondria with JC-1.</a> Cold Spring Harbor Protocols. (9), (2011).</li><li>Pravdic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic-induced+preconditioning+delays+opening+of+mitochondrial+permeability+transition+pore+via+protein+Kinase+C-epsilon-mediated+pathway.">Anesthetic-induced preconditioning delays opening of mitochondrial permeability transition pore via protein Kinase C-epsilon-mediated pathway.</a> Anesthesiology. 111 (2), 267-274 (2009).</li><li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+Excessive+Histone+Deacetylases+Activity+in+Diabetic+Hearts+Attenuates+Myocardial+Ischemia/Reperfusion+Injury+via+Mitochondria+Apoptosis+Pathway.">Suppression of Excessive Histone Deacetylases Activity in Diabetic Hearts Attenuates Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury via Mitochondria Apoptosis Pathway.</a> Journal of Diabetes Research. 2017, 8208065 (2017).</li><li>Qiu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Curcumin-induced+melanoma+cell+death+is+associated+with+mitochondrial+permeability+transition+pore+(mPTP)+opening.">Curcumin-induced melanoma cell death is associated with mitochondrial permeability transition pore (mPTP) opening.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 448 (1), 15-21 (2014).</li><li>Zhen, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P53+dependent+mitochondrial+permeability+transition+pore+opening+is+required+for+dexamethasone-induced+death+of+osteoblasts.">P53 dependent mitochondrial permeability transition pore opening is required for dexamethasone-induced death of osteoblasts.</a> Journal of Cell Physiology. 229 (10), 1475-1483 (2014).</li><li>Nazarewicz, R. R., Dikalova, A. E., Bikineyeva, A., Dikalov, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nox2+as+a+potential+target+of+mitochondrial+superoxide+and+its+role+in+endothelial+oxidative+stress.">Nox2 as a potential target of mitochondrial superoxide and its role in endothelial oxidative stress.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 305 (8), H1131-H1140 (2013).</li><li>Wang, T., Zhang, Z. X., Xu, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+mitochondrial+KATP+channel+on+voltage-gated+K++channel+in+24+hour-hypoxic+human+pulmonary+artery+smooth+muscle+cells.">Effect of mitochondrial KATP channel on voltage-gated K+ channel in 24 hour-hypoxic human pulmonary artery smooth muscle cells.</a> Chinese Medical Journal (Engl). 118 (1), 12-19 (2005).</li><li>Kuter, N., Aysit-Altuncu, N., Ozturk, G., Ozek, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Neuroprotective+Effects+of+Hypothermia+on+Bilirubin-Induced+Neurotoxicity+in+vitro.">The Neuroprotective Effects of Hypothermia on Bilirubin-Induced Neurotoxicity in vitro.</a> Neonatology. 113 (4), 360-365 (2018).</li><li>Zheng, Y. Y., Wang, M., Shu, X. B., Zheng, P. Y., Ji, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+activation+by+Jiang+Zhi+Granule+protects+against+metabolic+stress-induced+hepatocyte+injury.">Autophagy activation by Jiang Zhi Granule protects against metabolic stress-induced hepatocyte injury.</a> World Journal of Gastroenterology. 24 (9), 992-1003 (2018).</li><li>El Gamal, H., Eid, A. H., Munusamy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renoprotective+Effects+of+Aldose+Reductase+Inhibitor+Epalrestat+against+High+Glucose-Induced+Cellular+Injury.">Renoprotective Effects of Aldose Reductase Inhibitor Epalrestat against High Glucose-Induced Cellular Injury.</a> Biomed Research International. 2017, 5903105 (2017).</li><li>Renault, T. T., Luna-Vargas, M. P., Chipuk, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Liver+Mitochondria+Isolation,+Size+Fractionation,+and+Real-time+MOMP+Measurement.">Mouse Liver Mitochondria Isolation, Size Fractionation, and Real-time MOMP Measurement.</a> Bio-Protocols. 6 (15), (2016).</li></ol>

Här presenterar vi ett protokoll som använder JC-1 färgämne för att bedöma MMP celler efter att utsättas för H/R. upptäcks av JC-1 assay, MMP av celler är oberoende av faktorer såsom mitokondriell storlek, form och densitet som kan påverka single-komponent fluorescens signaler14. Följaktligen är resultaten av JC-1 analysen relativt tillförlitliga. Dessutom är det praktiskt och tidsbesparande att utföra JC-1 analysen. Denna analys har låga krav på material och reagenser, och gene...

Kranskärlssjukdom är den ledande dödsorsaken i världen. Behandling av valet är för att minska ischemisk skada och begränsa infarct storlek hos patienter med ST-segmentet förhöjda hjärtinfarkt lägligt och effektivt myokardischemi reperfusion via primär perkutan koronar intervention (PCI)1, 2. Men orsakar reperfusion ytterligare skador, som kan stå för upp till 30 procent av det slutliga infarct storlek3. Det är allmänt erkänt att mitokondriell permeabilitet övergången pore (mPTP) inte är bara centrala i mitokondriell skada och cell död under ischemi/reperfusion (jag / R), men är också ett konvergerande mål av hjärtskyddande signalering4 , 5. som mPTP öppningen skulle medföra depolarisation av inre mitokondriella membranet potential (MMP)4, vi upptäckt mPTP öppning använder 5, 5 ', 6, 6 '-Tetrachloro-1, 1′, 3, 3 '-tetraethyl-imidacarbocyanineiodide (JC-1) analys.
JC-1 analysen är en cytofluorimetric metod som är både kvalitativa och kvantitativa, och den ytterligare har verifierats genom att analysera MMP i nivå med en enda mitokondrier6. JC-1 finns som aggregerad form, vilket ger en röd-orange färgade utsläpp (590 ± 17,5 nm) i matrisen av mitokondrier med normala MMP; med förlusten av MMP konverteras JC-1 till monomera form som ger grön fluorescens med utsläpp av 530 ± 15 nm. Därför en minskning i förhållandet röd/grön fluorescens intensitet kan tyda på en minskning av MMP i villkor såsom ischemi/reperfusion (jag / R).
Förutom JC-1, har MMP också undersökts med membran-permeable lipofila katjoner såsom rodamin 123 och 3, 3 '-dihexyloxadicarbocyanine jodid [DiOC6(3)]. Men är jämfört med dessa två sonder, JC-1 mer tillförlitlig för att analysera MMP. Rodamin 123 har relativt dålig känslighet (speciellt i snabbkylning läge7,8) och dålig specificitet. Förskjutningen i rodamin 123 är ibland så liten att det är svårt för forskare eller utrustning att observera/upptäcka. Förutom, i en enda cell, det finns olika mitokondrien bindningsställen för rodamin 123 och så att det kan ha olika fluorescens utsläpp9. DiOC6(3) rekommenderas inte för att upptäcka MMP antingen som det reagerar känsligt på depolarisation av plasmamembranet10.
Därför, här använder vi JC-1 analysen för att bedöma de MMP av HCMs efter att utsättas för hypoxi/reoxygenation med eller utan en skyddande agent.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="970">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:293px;">Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1</td>
			<td style="width:307px;">Beyodtime, China</td>
			<td style="width:80px;">C2006</td>
			<td style="width:291px;">In the kit there are JC-1 stock solution (200&#215;), stock staining buffer (5&#215;) and CCCP(10mM)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tongxinluo ultrafine powder</td>
			<td>Shijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co., China</td>
			<td>071201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:293px;">Annexin V-FITC/PI Kit</td>
			<td>Becton-Dickinson, USA</td>
			<td>556547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DMEM</td>
			<td>Life Technologies, Grand Island Biological Company, USA</td>
			<td>11966-025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Human cardiac myocyte</td>
			<td>Promocell, Germany</td>
			<td>C-12810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:293px;">Myocyte Growth Medium 
			(SupplementMix)</td>
			<td>Promocell, Germany</td>
			<td>C-39275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Myocyte Growth Medium (Ready-to-use)</td>
			<td>Promocell, Germany</td>
			<td>C-22070</td>
			<td>used with Myocyte Growth Medium SupplementMix</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">GENbox</td>
			<td>BioM&#233;rieux, Marcy l&#8217;Etoile, France</td>
			<td>96127</td>
			<td>2.5L</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Catalyst (AnaeroPack)</td>
			<td>MITSUBISHI GAS CHEMICAL&#160;COMPANY, INC.&#160;, Japan</td>
			<td>&#160;C-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Anaerobic indicator</td>
			<td>BioM&#233;rieux, Marcy l&#8217;Etoile, France</td>
			<td>96118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Flow cytometer</td>
			<td>Becton-Dickinson, USA</td>
			<td>FACSAria 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">BD FACSDiva Software</td>
			<td>Becton-Dickinson, USA</td>
			<td></td>
			<td>Version8.0.1</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sample tube</td>
			<td>Corning science, USA</td>
			<td>352054</td>
			<td>12*75mm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PBS</td>
			<td>Hyclone, USA</td>
			<td>SH30256.01</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a flow cytometry-based assay for measuring mitochondrial membrane potential in cardiac myocytes after hypoxia/reoxygenation

Snabbt och effektivt reperfusion av ockluderad kranskärl är den bästa strategin för att minska hjärtinfarkt storlek hos patienter med en ST-segmentet förhöjda hjärtinfarkt. Reperfusion i sig. dock kan leda till ytterligare hjärtmuskelcellen döden, ett fenomen som kallas reperfusionsskada. Öppnandet av mitokondriell permeabilitet övergången pore (mPTP), med minskning av den mitokondriella membranpotentialen (MMP) eller mitokondrie depolarisation, är allmänt erkänd som det sista steget av reperfusionsskada och ansvarar för mitokondriella och hjärtmuskelcellen död. JC-1 är en lipofila katjonaktiva färgen som ackumuleras i mitokondrier beroende på MMP värde. Ju högre MMP är, desto mer JC-1 ackumuleras i mitokondrierna. De ökande mängder JC-1 i mitokondrier kan reflekteras av en fluorescens utsläpp övergång från green (~ 530 nm) till rött (~ 590 nm). Därför, minskning av röd/grön fluorescens intensitet förhållandet kan indikera depolarisation av mitokondrier. Här, tar vi fördel av JC-1 att mäta MMP eller öppnandet av mPTP i mänskliga hjärt myocyter efter hypoxi/reoxygenation, upptäcks av flödescytometri.

Innan du utför JC-1 analysen för att utvärdera ändringarna av MMP, rekommenderas det starkt att försök utföras för att bekräfta villkoren framgångsrikt som forskarna. Som framgår av flöde flödescytometri resultaten (figur 2), jämfört med den normala gruppen, hypoxi/reoxygenation (H/R) betydligt inducerad apoptos i HCMs (Annexin V + /PI±), som anger att vi hade etablerat en cell-baserad modell av I / R (45.00 ± 2.13% vs. 11.50 ± 0,18% i norma...

Watch this Scientific Journal Video about A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation at JoVE.com

A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation

Här presenterar vi ett protokoll som använder JC-1 färgämne för att utvärdera mitokondriella membranet potential celler efter att utsättas för hypoxi/reoxygenation med eller utan en skyddande agent.

Ett flöde flödescytometri-baserad analys för att mäta mitokondriella membranet Potential i hjärt myocyter efter hypoxi/Reoxygenation

Timely and efficient reperfusion of the occluded coronary artery is the best strategy for decreasing myocardial infarct size in patients with a ST-segment ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Measuring Cardiac Autonomic Nervous System (ANS) Activity in Children

Measuring Cardiac Autonomic Nervous System ANS Activity in Children

Mätning Hjärt autonoma nervsystemet (ANS) aktivitet hos barn

The autonomic nervous system (ANS) controls mainly automatic bodily functions that are engaged in homeostasis, like heart rate, digestion, respiratory ...

Collecting Saliva and Measuring Salivary Cortisol and Alpha-amylase in Frail Community Residing Older Adults via Family Caregivers

Salivary measures have emerged in bio-behavioral research  that are easy-to-collect, minimally invasive, and relatively inexpensive  biologic markers of ...

Imaging- and Flow Cytometry-based Analysis of Cell Position and the Cell Cycle in 3D Melanoma Spheroids

Imaging- och flödescytometri-baserad analys av cell Position och cellcykeln i 3D Melanom Sfäroider

Three-dimensional (3D) tumor spheroids are utilized in cancer research as a more accurate model of the in vivo tumor microenvironment, compared to ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Fosfor-31-magnetisk resonansspektroskopi: ett verktyg för att mäta<em&gt; In Vivo</em&gt; Mitochondrial oxidativ fosforylering Kapacitet i human skelettmuskel

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Healthy Volunteers and Their Migratory Potential Influenced by Serum Samples After Cardiac Surgery

Isolering av Endothelial stamceller från friska frivilliga och flyttning Potential Influenser serumprover efter hjärtkirurgi

Endothelial progenitor cells (EPCs) are recruited from the bone marrow under pathological conditions like hypoxia and are crucially involved in the ...

Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference (NPD)

Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference NPD

Standardiserad mätning av näsans membran Transepithelial Potential skillnad (NPD)

We describe a standardized measurement of nasal potential difference (NPD). In this technique, cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) ...

Implantation of hiPSC-derived Cardiac-muscle Patches after Myocardial Injury in a Guinea Pig Model

Implantation av hiPSC-derived hjärtmuskulatur fläckar efter Myokardskada i marsvin modell

Due to the limited regeneration capacity of the heart in adult mammals, myocardial infarction results in an irreversible loss of cardiomyocytes. This loss ...

Isolation of Atrial Myocytes from Adult Mice

Isolering av Förmaksmyocyter från vuxna möss

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents ...

Hemocompatibility Testing of Blood-Contacting Implants in a Flow Loop Model Mimicking Human Blood Flow

Hemocompatibility Testning av blod-kontaktimplantat i en Flow Loop Modell Härma humant blodflöde

The growing use of medical devices (e.g., vascular grafts, stents, and cardiac catheters) for temporary or permanent purposes that remain in the ...

In vitro Assessment of Myocardial Protection following Hypothermia-Preconditioning in a Human Cardiac Myocytes Model

In vitro-bedömning av myokardskydd efter hypotermiförkonditionering i en human hjärt myocytmodell

Ischemia/reperfusion-derived myocardial dysfunction is a common clinical scenario in patients after cardiac surgery. In particular, the sensitivity of ...