Name: detection of heterodimerization of protein isoforms using an in situ proximity ligation assay
Uploaded: 2018-10-20T12:30:00
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最適化と特定のマリア ラドゥとガリーナ Semenova で、このプロトコルの検証に貢献する検査室全体のチャーノフに感謝いたします。また、フォックスチェイスがんセンターの細胞イメージング施設のアンドレイ エフィーモフを感謝いたします。この作品は、JC に NIH (R01 CA148805) からの助成金によって支えられました。

1. 溶液の調製
<ol><li>固定液の準備: 1 × PBS で 4% パラホルムアルデヒド (PFA)。10 mL の 16% の 2.5 mL を取る PFA 7.5 mL の 1x PBS を追加。 の危険性:PFA は、低用量で発がん性があります。ガスや皮膚への接触は危険です。-20 ° C にてストア</li>
	<li>透過ソリューションを準備: 0.1 %1 × PBS でトリトン X-100。溶液 100 mL、100 mL の 1x PBS にトリトン X-100 の 100 μ L を追加します。常温 (RT) を格納...

<ol>
	<li>Zhou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Nore1B/Mst1+complex+restrains+antigen+receptor-induced+proliferation+of+na&#239;ve+T+cells.">The Nore1B/Mst1 complex restrains antigen receptor-induced proliferation of na&#239;ve T cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (51), 20321-20326 (2008).</li><li>Praskova, M., Xia, F., Avruch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MOBKL1A/MOBKL1B+phosphorylation+by+MST1+and+MST2+inhibits+cell+proliferation.">MOBKL1A/MOBKL1B phosphorylation by MST1 and MST2 inhibits cell proliferation.</a> Current Biology. 18 (5), 311-321 (2008).</li><li>Dan, I., Watanabe, N. M., Kusumi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ste20+group+kinases+as+regulators+of+MAP+kinase+cascades.">The Ste20 group kinases as regulators of MAP kinase cascades.</a> Trends in Cell Biology. 11 (5), 220-230 (2001).</li><li>Rawat, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=H-ras+Inhibits+the+Hippo+Pathway+by+Promoting+Mst1/Mst2Heterodimerization.">H-ras Inhibits the Hippo Pathway by Promoting Mst1/Mst2Heterodimerization.</a> Current Biology. 26 (12), 1556-1563 (2016).</li><li>Creasy, C. L., Ambrose, D. M., Chernoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ste20-like+protein+kinase,+Mst1,+dimerizes+and+contains+an+inhibitory+domain.">The Ste20-like protein kinase, Mst1, dimerizes and contains an inhibitory domain.</a> Journal of Biological Chemistry. 271 (35), 21049-21053 (1996).</li><li>Buntru, A., Trepte, P., Klockmeier, K., Schnoegl, S., Wanker, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Approaches+Toward+Quantitative+Mapping+of+the+Interactome.">Current Approaches Toward Quantitative Mapping of the Interactome.</a> Frontiers in Genetics. 74 (7), (2016).</li><li>Greenwood, C., Ruff, D., Kirvell, S., Johnson, G., Dhillon, H. S., Bustin, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proximity+assays+for+sensitive+quantification+of+proteins.">Proximity assays for sensitive quantification of proteins.</a> Biomolecular Detection and Quantification. 4, 10-16 (2015).</li><li>Fredriksson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+detection+using+proximity-dependent+DNA+ligation+assays.">Protein detection using proximity-dependent DNA ligation assays.</a> Nature Biotechnology. 20 (5), 473-477 (2002).</li><li>Leuchowius, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+visualization+of+multiple+protein+complexes+in+individual+cells+in+tumor+tissue.">Parallel visualization of multiple protein complexes in individual cells in tumor tissue.</a> Molecular &amp; Cellular Proteomics. 12 (6), 1563-1571 (2013).</li><li>S&#246;derberg, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+observation+of+individual+endogenous+protein+complexes+in+situ+by+proximity+ligation.">Direct observation of individual endogenous protein complexes in situ by proximity ligation.</a> Nature Methods. 3 (12), 995-1000 (2006).</li></ol>

(14-16) 培養細胞での実験を実行する非常に便利だし、サンプルの顕微鏡分析中にすべての時間を変更する必要はありません、この実験用チャンバー スライド ガラスを使用すると便利だとわかった。抗体との交差汚染のリスクの増大など、いくつかの合併症が発生します。したがって、各ウェルを洗浄することをお勧め、実験の期間の増加にもかかわらずの Coplin jar を使用する代わりに個別に...

MST1/カバ シグナリングパスの中断は、発達障害や発癌1に接続されています。哺乳類で MST2 と MST1 キナーゼをアクティブ化 (リン酸化) MOB1 と LATS1/2、後者の場合、廃止し、転写コアクチベーターはい関連タンパク質 (ヤップ)2を不活性化します。アクティブ (ペプタイド) 形式でヤップは発癌性活動は、細胞増殖の遺伝子のトランスクリプションを高める逆に、ヤップはカバ経路による不活化、細胞増殖の抑制し、アポトーシス促進3。体内では、MST1 と MST2 アクティブな homodimers として主に存在しますが、発癌刺激 MST1/MST2 ヘテロのレベルを増やすことができます、このようなヘテロ非アクティブ4。ただし、MST1/MST2 heterodimerization の規制方法の不十分な理解ままです。両方ホモ ・ ヘテロが仲介経由MST1 の C ターミナル コイルド コイル領域と相互 MST2 サラ ドメイン5として知られています。を使用して、その場でPLA は人間シュワン細胞 (HSC) と人間の萌芽期の腎臓の細胞 (HEK 293) に MST1/MST2 ヘテロの存在を示すこの資料で説明します。PLA は、他のタンパク質・ タンパク質相互作用検出方法上の利点を識別して定量化導入遺伝子発現の必要性または epitope の札の使用なしで内因性のタンパク質の相互作用を検出できるので6。
シグナル伝達経路はタンパク質の条件付きの協会によって主制御されます。たとえば、ほとんど受容体チロシンキナーゼの刺激は、ホモまたはヘテロ二量化し追加の細胞内シグナル伝達タンパク質は、自身と後続の協会、さらに錯形成をつながる.PLA 法の目的は、蛋白質がより小さい 30-40 nm 離れて細胞、タンパク質間の距離を可視化することです。タンパク質近接は通常種で発生した適切な一次抗体と細胞を培養して、検出 (e.g、ウサギおよびマウス) 各相互作用の蛋白質に対する種特異的な二次抗体を追加する。短い事前結合 DNA プローブします。DNA プローブは近接、特定リンク DNA のオリゴヌクレオチドの in situ PCR またはローリング サークル メカニズムによって増幅するためのプラットフォームを形成、これらのプローブの両方を同時にバインドできます。増幅反応に追加された蛍光タグにより容易に定量化およびセル7,8,内の特定の領域にローカライズできる蛍光ドットとして表示される相互作用の蛋白質の可視化9,10。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:849px;" width="849">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Chamber slides</td>
			<td style="width:123px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:344px;">178599</td>
			<td style="width:167px;">16 well, glass slide</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PLA probe Anti-Mouse Minus</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>DUO92004</td>
			<td>Contains 1x Blocking solution, 1x antibody Diluent</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PLA Probe Anti-Rabbit PLUS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>DUO92002</td>
			<td>Contains 1x Blocking solution, 1x antibody Diluent</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Wash Buffers, Flurescence</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>DUO82049</td>
			<td>Contains Wash Buffer A and Wash Buffer B</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mounting Medium with DAPI</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>DUO82040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Detection Reagents Red</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>DUO92008</td>
			<td>Contains 5x Ligation, 1x Ligase, 5x Amlification Red, 1x Polymerase</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">p44/42 MAPK (Erk1/2) Antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>9102s</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Phospho-p44/42 MAPK (Erk1) (Tyr204)/(Erk2) (Tyr187)</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>5726s</td>
			<td>pERK antibody</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">MST2 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>3952s</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Krs-2 (RJ-5)</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-100449</td>
			<td>MST1 antibody</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">16% Paraformaldehyde</td>
			<td>Electron microscopy sciences</td>
			<td>15710</td>
			<td>Dilute to 4% PFA in PBS for fixing solution</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Triton x100</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP 151-500</td>
			<td>To prepare 0.1% Triton x-100 in 1xPBS for Permeabilization solution</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Confocal microscopy</td>
			<td>Leica TCS SP8, 63x</td>
			<td></td>
			<td>Image analysis with ImageJ software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of heterodimerization of protein isoforms using an in situ proximity ligation assay

規制の蛋白質蛋白質の相互作用は多くのシグナル伝達イベントの基本理念と、このようなイベントの検出はそのような経路の編成方法と動作を理解する上で重要な要素。細胞のタンパク質-タンパク質相互作用を検出する多くの方法がありますが、比較的少数は内因性のタンパク質間相互作用を検出する使用できます。そのようなメソッドは、近接結紮アッセイ (PLA) には、その使用をお勧めするいくつか利点があります。タンパク質-タンパク質相互作用解析の他の一般的な方法と比較して、PLA は、比較的高い感度と特異性、最小限の細胞操作と、本明細書に記載されているプロトコルに実行できます、ターゲット固有の唯一の 2 つが必要です。種に由来する抗体 (e.g, マウスおよびウサギから) と 1 つの特殊な試薬: 共有リンク特定のオリゴヌクレオチドは、二次抗体のセット、互いの近くになったときに作成、。in situ PCR やローリング サークル増幅の増幅プラットフォーム。このプレゼンテーションでは、固定細胞における MST1 と MST2 近接の変化を視覚化する PLA 手法を適用する方法を示します。本稿で説明する手法は、細胞のシグナル伝達研究の分析に特に当てはまります。

HEK 293 の iHSC MST1 と MST2 の相互作用をテストするのに PLA の試金を使用しました。セルが固定、グリセリン、および PLA プロトコル (図 1) によるとその場で増幅後、種々 の抗体で染色します。MST1/MST2 heterodimerization のレベルを文書化するには、細胞は MST1 MST2 抗体 (図 1 a、1 C、1 G) で染色しました。肯定的?...

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Detection of Heterodimerization of Protein Isoforms Using an in Situ Proximity Ligation Assay

ここでは、近接結紮の試金 (PLA) を使用して感度が高い固定細胞における MST1/MST2 heterodimerization を視覚化する方法を示します。

その場で近接結紮アッセイを用いたタンパク質アイソ フォームの Heterodimerization の検出

Regulated protein-protein interactions are a guiding principle for many signaling events, and the detection of such events is an important element in ...

近接ライゲーションアッセイまたはPLAにおける、タンパク質、貼り付けられた組織、および細胞間の相互作用を検出することができる技術である。タンパク質間の関連は、トランスジェニック発現や追加技術を必要とせずに同定および定量することができる。唯一の要件は、DNAオリゴヌクレオチドで修飾することができる特定の高効率抗体の入手可能性です。組織ではMST1およびMST2は主に活性ホモダイマーとして存在するが、発癌性刺激はMST1 MST2ヘテロ二量体のレベルを増加させることができ、そのようなヘテロ二量体は非活性である。目的のタンパク質に対する特異的プライマー抗体とのインキュベーションに続いて、特殊な特異的二次抗体は、それぞれ、それに結合したユニークで短い、無料のDNA鎖に結合し、一次抗体に結合するためにスロットに添加される。質問中のタンパク質がヘテロ二量体化されている場合、一次抗体とそれらに結合した二次抗体の両方が近接します。この状態では、第2抗体上に付着したDNA鎖は、その後2つの他の2つの円形成DNAオリゴヌクレオチドを添加して相互作用することができる。DNA円の数百倍の複製は、増幅反応後に起こり得、蛍光シグナルは、レベルの高い無料のオリゴヌクレオチドプローブによって生成される。そのため、検出された各信号は、顕微鏡画像に基づいて特定の細胞内の位置に割り当てることができる個々の蛍光ドットとして可視化されます。実験の前日に、マウスラミニンまたはポリLリジンの50〜100マイクロリットルを加えて16の十分にチャンバースライドをコーティングし、摂氏37度でインキュベートします。冷たい溶液を30分除去した後、トリプシンとプレート15,000〜25,000細胞を用いて細胞を16個の十分にチャンバースライドに分割した。加湿した5%の二酸化炭素インキュベーターで37°Cの細胞を24時間インキュベートする。24時間後、ウェルから培地を取り出し、PBSで細胞を静かに洗います。マイクロピペットを使用してサンプルのリスクテイクを最小限に抑え、PBSを吸引し、1ウェルあたり4%PFAの50マイクロリットルを加えて細胞を固定し、攪拌せずに室温で10分間インキュベートします。細胞の剥離をもたらす可能性があるため、溶液を細胞に直接ピペットしないでください。固定後、TBSTで細胞をそれぞれ5分間3回軽い撹拌で洗浄します。次に細胞を透過させ、攪拌することなく室温で10分間インキュベートする。透過性が完了した後、TBSTで細胞を3回洗浄して、1回5分間攪拌します。TBSTを取り外した後、各ウェルにブロッキング溶液の1滴を追加し、摂氏37度で1時間予熱湿度チャンバーにスライドをインキュベートします。希薄な一次抗体。マイクロピペットを使用してブロッキング溶液を取り除きますが、スライドを乾燥させないでください。ボルテックスを適当なウェルに40マイクロリットルの希釈抗体溶液を加え、予熱湿度チャンバーで37°Cで1時間インキュベートします。インキュベーション中に、2つのPLAプローブを抗体希釈剤で希釈します。各サンプルに対して40マイクロリットルのPLAプローブを調製します。1時間のインキュベーションの後、抗体溶液を吸引し、室温でTBSTでスライドを5分間2回洗浄する。スライドからTBSTをそっと取り出し、各ウェルに40マイクロリットルのPLAプローブ溶液を加えます。予熱湿度室でスライドを摂氏37度で1時間インキュベートします。使用直前に高純度水で、結紮ストック1~5の必要量をボルテックスで希釈する。各ウェルに対して40マイクロリットルのライゲーション溶液が必要である。インキュベーション後、スライドからPLA溶液を取り出し、攪拌で室温で5分間TBSTで2回洗浄します。冷凍庫からリガーゼを取り除く場合、細胞に加える直前に凍結ブロックを使用し、結紮溶液で希釈します。スライドからTBSTを取り出し、各ウェルに40マイクロリットルのライゲーションリガーゼ溶液を加えます。予熱湿度室で30分間、摂氏37度でスライドをインキュベートします。インキュベーションの後、溶液を吸引し、攪拌で室温で5分間TBSTで2回洗浄する。試薬は光に敏感なので、明るい光に井戸を露出させないようにしてください。最後の洗浄時に、ボルテックスを使用する直前に高純度水で必要量の増幅液を希釈します。ポリメラーゼを氷の上または冷却ブロックに入れ、細胞の渦に加える直前に、増幅溶液で希釈します。ウェルからTBSTを吸引し、各ウェルに40マイクロリットルの増幅溶液を加えます。暗い予熱湿度室で37°Cで100分間スライドをインキュベートします。インキュベーション後、スライドから増幅ポリメラーゼ溶液を吸引し、室温でTBSTでそれぞれ10分間20分洗浄する。スライドからウェルの周りのチャンバーとシリコーンを完全に取り除きます。シリコーンの残りのビーズをカミソリで削り取ります。スライド上にグリッドを描画し、各ウェルを区切ります。DAPIで約40マイクロリットルの取り付け媒体を加え、カバースリップの下に気泡が引っ掛からないようにします。マニキュアを使用してカバーガラスを固定します。顕微鏡解析は、固定後20分で行うことができますが、実際には、次の日に画像解析を行うことが最も便利です。サンプルを分析するために、Leica SP8構成レーザー走査顕微鏡を使用します。ここに示されているのは、パネルAからDのヒト胚性腎臓細胞におけるMST 1とMST2タンパク質の間の近接を視覚化するその場合の近接ライゲーションアッセイの例であり、パネル H.In E内のヒトシュワン細胞はDAPIによって青色に染色され、赤色点は示されたタンパク質間の近接性に起因する陽性近接ライゲーションアッセイシグナルを示す。パネルAはMST1とMST2の近接性を示し、パネルBは、これらのエピトープが同じタンパク質上にあるため、ERKとホスホエルKの近接性を示す。パネルCは、MST1およびMST2およびパネルDのようなこれらの細胞が互いに近接するとは予想されないMST1およびERKに対する抗体で染色された第2の陰性対照を表すので、陰性対照を表す。パネルEおよびFは、シュワン細胞におけるホスホエルクを有するMST2およびERKとのMST1の近接性を示す。パネルGおよびHは、MST1抗体またはMST1およびERK抗体でのみ染色される陰性対照である。ヘテロダイマーの1つのメンバーのみを認識する必要がある非交差反応性の一次抗体を使用することが不可欠です。また、一次抗体とPLAプローブの交差汚染を避け、ウェルの底部に触れないように、サンプルに直接ピペットを避けるために、異なるヒントを使用することを忘れないでください。このビデオを見た後、固定細胞のタンパク質二量体化を研究するために現場でPLAを使用する方法をよく理解する必要があります。.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Detection of Heterodimerization of Protein Isoforms Using an in Situ Proximity Ligation Assay

Capillary Electrophoresis Separation of Monoclonal Antibody Isoforms Using a Neutral Capillary

ニュートラルキャピラリーを使用したモノクローナル抗体アイソフォームのキャピラリー電気泳動分離

Biotherapeutic proteins, such as monoclonal antibodies (mAbs), are feasible alternatives for the treatment of chronic-degenerative diseases. The ...

Visualization of Protein-protein Interaction in Nuclear and Cytoplasmic Fractions by Co-immunoprecipitation and In Situ Proximity Ligation Assay

Visualization of Protein-protein Interaction in Nuclear and Cytoplasmic Fractions by Co-immunoprecipitation and In Situ Proximity Ligation Assay

共免疫沈降により核および細胞質画分中のタンパク質間相互作用の可視化と<em&gt;その場で</em&gt;近接ライゲーションアッセイ

Protein-protein interactions are involved in thousands of cellular processes and occur in distinct spatial context. Traditionally, co-immunoprecipitation ...

Detection and Visualization of DNA Damage-induced Protein Complexes in Suspension Cell Cultures Using the Proximity Ligation Assay

近接ライゲーションアッセイを用いた懸濁細胞培養におけるDNA損傷誘発タンパク質複合体の検出と可視化

The DNA damage response orchestrates the repair of DNA lesions that occur spontaneously, are caused by genotoxic stress, or appear in the context of ...

Force Spectroscopy of Single Protein Molecules Using an Atomic Force Microscope

原子間力顕微鏡を用いた単一タンパク質分子の力分光法

The determination of the folding process of proteins from their amino acid sequence to their native 3D structure is an important problem in biology. ...

Highly Sensitive and Quantitative Detection of Proteins and Their Isoforms by Capillary Isoelectric Focusing Method

タンパク質キャピラリー等電点焦点法によるアイソ フォームの高感度・定量的検出

Immunoblotting has become a routine technique in many laboratories for protein characterization from biological samples. The following protocol provides ...

Growing Protein Crystals with Distinct Dimensions Using Automated Crystallization Coupled with In Situ Dynamic Light Scattering

Growing Protein Crystals with Distinct Dimensions Using Automated Crystallization Coupled with In Situ Dynamic Light Scattering

タンパク質結晶の成長を使用して異なる寸法自動結晶化その場の動的光散乱と相まって

The automated crystallization device is a patented technique1 especially developed for monitoring protein crystallization experiments with the aim to ...

Detection of Small GTPase Prenylation and GTP Binding Using Membrane Fractionation and  GTPase-linked Immunosorbent Assay

小さい gtp アーゼ プレニル化および分子量 GTP 結合を使用して膜分画と gtp アーゼ抗体法の検出

The Rho GTPase family belongs to the Ras superfamily and includes approximately 20 members in humans. Rho GTPases are important in the regulation of ...

High Sensitivity Measurement of Transcription Factor-DNA Binding Affinities by Competitive Titration Using Fluorescence Microscopy

蛍光顕微鏡を使用して競争力のある滴定による転写因子の DNA 結合親和性の高感度測定

Accurate quantification of transcription factor (TF)-DNA interactions is essential for understanding the regulation of gene expression. Since existing ...

Analysis of Protein Folding, Transport, and Degradation in Living Cells by Radioactive Pulse Chase

タンパク質の折り畳み、トランスポート、および放射性パルス追跡による生体細胞の劣化の解析

Radioactive pulse-chase labeling is a powerful tool for studying the conformational maturation, the transport to their functional cellular location, and ...

Evaluation of Protein&#8211;Protein Interactions using an On-Membrane Digestion Technique

Evaluation of ProteinÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â‚¬Å“Protein Interactions using an On-Membrane Digestion Technique

膜上消化技術を用いてのタンパク質・タンパク質相互作用の評価

Numerous intracellular proteins physically interact in accordance with their intracellular and extracellular circumstances. Indeed, cellular functions ...

その場で近接結紮アッセイを用いたタンパク質アイソ フォームの Heterodimerization の検出

その場で近接結紮アッセイを用いたタンパク質アイソフォームの Heterodimerization の検出