Name: assessment of kidney function in mouse models of glomerular disease
Uploaded: 2018-06-30T14:00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease at JoVE.com

كان يدعمها هذا العمل في مؤسسة القلب البريطانية، ريتشارد برايت VEGF البحوث الثقة، ولجنة نهر الميكونج.

<ol>
	<li>Humtstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+structural+kidney+damage+in+spontaneously+hypertensive+rats.">Development of structural kidney damage in spontaneously hypertensive rats.</a> Journal of Hypertension. 30 (6), 1087-1091 (2012).</li><li>Kitada, M., Ogura, Y., Koya, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+diabetic+nephropathy:+their+utility+and+limitations.">Rodent models of diabetic nephropathy: their utility and limitations.</a> International Journal of Nephrology and Renovascular Disease. 14 (9), 279-290 (2016).</li><li>Tesch, G. H., Lim, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+insights+into+diabetic+renal+injury+form+the+db/db+mouse+model+of+type+2+diabetic+nephropathy.">Recent insights into diabetic renal injury form the db/db mouse model of type 2 diabetic nephropathy.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 300 (2), F301-F310 (2011).</li><li>Fogo, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+FSGS:+lessons+for+pathogenesis+and+treatment.">Animal models of FSGS: lessons for pathogenesis and treatment.</a> Seminars in Nephrology. 23 (2), 161-171 (2003).</li><li>Stevens, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF-A165b+protects+against+proteinuria+in+a+mouse+model+with+progressive+depletion+of+all+endogenous+VEGF-A+splice+isoforms+from+the+kidney.">VEGF-A165b protects against proteinuria in a mouse model with progressive depletion of all endogenous VEGF-A splice isoforms from the kidney.</a> Journal of Physiology. 595 (19), 6281-6298 (2017).</li><li>Cosgrove, D., Kalluri, R., Miner, J. H., Segal, Y., Borza, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+a+mouse+model+to+study+the+molecular+pathobiology+of+Alport+glomerulonephritis.">Choosing a mouse model to study the molecular pathobiology of Alport glomerulonephritis.</a> Kindey International. 71 (7), 615-618 (2007).</li><li>Kujal, P., Vernerova, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=5/6+nephrectomy+as+an+experimental+model+of+chronic+renal+failure+and+adaptation+to+reduced+nephron+number.">5/6 nephrectomy as an experimental model of chronic renal failure and adaptation to reduced nephron number.</a> Ceskoslenska Fysiologuie. 57 (4), 104-109 (2008).</li><li>Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ureteral+obstruction+as+a+model+of+renal+interstitial+fibrosis+and+obstructive+nephropathy.">Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy.</a> Kidney International. 75 (11), 1145-1152 (2009).</li><li>Oltean, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF165b+overexpression+restores+normal+glomerular+water+permeability+in+VEGF164-overexpressing+adult+mice.">VEGF165b overexpression restores normal glomerular water permeability in VEGF164-overexpressing adult mice.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 303 (7), F1026-F1036 (2012).</li><li>Salmon, A. H., Neal, C. R., Bates, D. O., Harper, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor+increases+the+ultrafiltration+coefficient+in+isolated+intact+Wistar+rat+glomeruli.">Vascular endothelial growth factor increases the ultrafiltration coefficient in isolated intact Wistar rat glomeruli.</a> Journal of Physiology. 570 (Pt 1), 141-156 (2006).</li><li>Zheng, F., Striker, G. E., Esposito, C., Lupia, E., Striker, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain+differences+rather+than+hyperglycemia+determine+the+severity+of+glomerulosclerosis+in+mice.">Strain differences rather than hyperglycemia determine the severity of glomerulosclerosis in mice.</a> Kidney International. 54 (6), 1999-2007 (1998).</li><li>Betz, B., Conway, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+update+on+the+use+of+animal+models+in+diabetic+nephropathy+research.">An update on the use of animal models in diabetic nephropathy research.</a> Current Diabetes Reports. 16 (18), (2016).</li><li>Savin, V. J., Terreros, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filtration+in+single+isolated+mammalian+glomeruli.">Filtration in single isolated mammalian glomeruli.</a> Kidney International. 20 (2), 188-197 (1981).</li><li>Neal, C. R., Crook, H., Bell, E., Harper, S. J., Bates, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+reconstruction+of+glomeruli+by+electron+microscopy+reveals+a+distinct+restrictive+urinary+subpodocyte+space.">Three-dimensional reconstruction of glomeruli by electron microscopy reveals a distinct restrictive urinary subpodocyte space.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 16 (5), 1223-1235 (2005).</li><li>Mahmood, T., Yang, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Western+blot:+technique,+theory,+and+trouble+shooting.">Western blot: technique, theory, and trouble shooting.</a> North American Journal of Medicine &amp; Science. 4 (9), 429-434 (2012).</li><li>Chomczynski, P., Sacchi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-step+method+of+RNA+isolation+by+acid+guanidinium+thiocyanate-phenol-chloroform+extraction.">Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.</a> Analytical Biochemistry. 162 (1), 156-159 (1987).</li><li>Adembri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sepsis+induces+albuminuria+and+alterations+in+the+glomerular+filtration+barrier:+a+morphofunctional+study+in+the+rat.">Sepsis induces albuminuria and alterations in the glomerular filtration barrier: a morphofunctional study in the rat.</a> Critical Care. 15 (6), R277 (2011).</li><li>Ma, S. T., Liu, D. L., Deng, J. J., Niu, R., Liu, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+arctiin+on+glomerular+filtration+barrier+damage+in+STZ-induced+diabetic+nephropathy+rats.">Effect of arctiin on glomerular filtration barrier damage in STZ-induced diabetic nephropathy rats.</a> Phytotherapy Research. 27 (10), 1474-1480 (2013).</li><li>Oltean, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor-A165b+is+protective+and+restores+endothelial+glycocalyx+in+diabetic+nephropathy.">Vascular endothelial growth factor-A165b is protective and restores endothelial glycocalyx in diabetic nephropathy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 26 (8), 1889-1904 (2015).</li><li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Podocyte-specific+overexpression+of+GLUT1+surprisingly+reduces+mesangial+matric+expansion+in+diabetic+nephropathy+in+mice.">Podocyte-specific overexpression of GLUT1 surprisingly reduces mesangial matric expansion in diabetic nephropathy in mice.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 299 (1), F91-F98 (2010).</li></ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

ويصف هذا البروتوكول عمل الكلي كامل متابعة التي ينبغي الاضطلاع بها في نماذج الماوس من المرض الكبيبي، تمكين كمية هائلة من المعلومات المتعلقة بالكلى ودالة الكبيبي يمكن الحصول عليها من ماوس واحدة. الخطوات الحاسمة في كل أسلوب يسمح بتحليل الوظيفية والهيكلية والميكانيكية المفصلة للدالة الكبيبي، بما في ذلك تقييم نفاذية الكلي ككل (أواكر والبلازما، كرياتينين القياسات)، النفاذية جلوميرولي الفردية (الكبيبي LpA/Vأنا)، دراسة التعديلات الهيكلية (نظام تقييم الأداء، تريتشرومي الأزرق، وطب الطوارئ)، البروتين التعريب (إذا كان)، والتعبير الجيني الكبيبي (RT-PCR والنشاف الغربية). هذه الأساليب هي المفتاح إلى تقييم كامل للدالة الكبيبي في نماذج الماوس لأمراض الكلي.
عند تقييم نفاذية جفب، اختارت العديد من الدراسات على استخدام معدل إفراز الزلال أواكر أو ح 24 التقليدية ك تدبير فعال17،18. على الرغم من أن هذه التقنيات تسمح بتقييم نفاذية جفب ككل، فإنه لا يسمح بتقييم نفاذية الكبيبي الفردية والتباين بين glomeruli. وقد وجدت الدراسات السابقة قياس الكبيبي LpA/Vi لتكون مقياسا أكثر حساسية للتغيرات إلى5،نفاذية جفب9. في الواقع، في نتائج الممثل أظهر في هذه الورقة، في 14 أسبوعا بعد تحريض "كو فيجفا"، والفئران ب165فيجفا كو X نيف-فيجف-أ أواكر أقل بكثير مقارنة بالفئران "كو فيجفا"؛ غير أن هذه النتيجة لا ينعكس في الكبيبي LpA/Vأنا القياسات، حيث VEGF-أ165ب لا يمنع إلى حد كبير يزيد في جفب النفاذية (الشكل 1 و الشكل 2)5. وهذا يبين أهمية استخدام فحوصات عدة لتقييم نفاذية الكلي ونفاذيه glomeruli الفردية. وعلاوة على ذلك، الكبيبي LpA/الإنزيم أونكوميتريكأنا الخامس تقترح أن نفاذية glomeruli الفردية من نفس الكلي يمكن أن تختلف إلى حد كبير، ونماذج خاصة المرض105،، 19. حد واحد لقياس الكبيبي LpA/Vأنا أنه يمكن فقط أداؤها في نقطة النهاية التجريبية؛ وهكذا، ملزمون بالقياسات أواكر العادية تعطي مؤشرا لنقطة النهاية التجريبية.
وبالإضافة إلى تقييم النمط الظاهري الوظيفية، تشجع الأسلوب الحالي أيضا تقييم النمط الظاهري الهيكلية و ultrastructural. يمكن أن يتم ذلك باستخدام مجموعة مختارة من البقع مثل نظام تقييم الأداء، تريتشرومي، والبقع الفضية؛ كل منهما لتقييم الجوانب المختلفة مورفولوجية الكبيبي. في نماذج الحادة من مرض الكبيبي، الذي غالباً ما يكون الحال في نماذج الماوس، يمكن أن يكون من الصعب على الكشف عن أي شذوذ هيكلية كبرى استخدام هذه البقع إلا إذا كنت أخصائي الكلي مدربين. ولذلك، يقترح إجراء م لتقييم أولتراستروكتوري جفب، مما يسمح القياس الكمي للمعلمات مثل الخليج للحاسبات الآلية، وحجم فينسترا بطانية وعدد وخصائص بودوسيتي. يتطلب الحد الأدنى من التدريب لأداء هذه القياسات وتمكن المحقق لتحديد الخلية-الأنواع/الهياكل المتضررة في نموذج مرض. في المثال المعروض في نتائج تمثيلية، تم العثور على الماوس "فيجفا كو" يكون نموذج معتدل للمرض الكبيبي، وهكذا، لا شذوذ هيكلية رئيسية حاضرين عند تلطيخ PAS. بيد الخاصة بودوسيتي "فيجفا كو" تحدث تغييرات إلى الخليج للحاسبات الآلية، بودوسيتيس، وخلايا بطانية عند دراسة هيكل الترا الكبيبي5. ولسوء الحظ، لا يمكن إعداد الكلي م الموصوفة في الأسلوب الحالي للكشف عن جليكوكاليكس بطانية، ومن المعروف أيضا أن تكون لها آثار على نفاذية جفب19. ولقياس عمق جليكوكاليكس بدقة، ينبغي الكلي نتخلل-ثابتة مع 2.5 ٪ glutaraldehyde مع 1% السيان الأزرق لوضع العلامات جليكوكاليكس بطانية، كما هو موضح في أولتين وآخرون19.
مرة واحدة وقد قسمت النمط الظاهري الوظيفية والهيكلية، يمكن تقييم أنماط التعبير/تفعيل جينات مختلفة ومسارات ثم على وجه التحديد في glomeruli. تقييم هيكلية فائقة مسبق يمكن أن يعطي بعض المعلومات فيما يتعلق بالخلية الكبيبي/أنواع الهياكل المعنية، التي تشير إلى ما إذا كان ينبغي دراسة الجينات/مسارات محددة بودوسيتي أو بطانية. على سبيل المثال، في نتائج تمثيلية من الفئران "فيجفا كو"، لوحظ انخفاضا في عدد fenestrae غشائي (3D الشكل)؛ ولذلك، كان بحث تعبير البروتين الكبيبي علامة غشائي المعروفة للمشاركة في مسار VEGF-أ؛ فيجفر-2 (الشكل 4)5. بالإضافة إلى التعبير عن البروتينات في جلوميرولي، الترجمة يمكن أيضا تصور استخدام إذا. في دراسة أجرتها تشانغ وآخرون20، أكدت الخاصة بودوسيتي overexpression من GLUT1 في بودوسيتيس إذا شارك تعريب GLUT1 زيادة مع بودسين.
بالمقارنة مع طرق بديلة عرضت في الأدب لتقييم دالة الكبيبي، يتيح استخدام الطريقة المبينة في هذه الورقة لتقييم وظائف الكلي في نماذج الماوس من المرض الكبيبي النمط الظاهري الكبيبي تقييمه بشكل كامل من جوانب متعددة. باستخدام هذا الأسلوب، الباحث قادراً على تحديد النمط الظاهري الكلي للنموذج وتقييم الآلية بشأن لماذا يتطور النمط الظاهري. هذه المعلومات الحيوية عن الآلية المرض مطلوب عند دراسة السبل العلاجية المحتملة في هذه النماذج. يمكن تطبيق هذا الأسلوب بسهولة للتحقيقات مستقبلا في وظيفة الكبيبي سواء في التقييم تعمل المرض والعلاجات المحتملة.
وفي الختام، يصف هذا البروتوكول عام وقابلة للتكيف الكلي كامل عمل الهاتفي لنماذج الماوس من المرض الكبيبي، تمكين كمية هائلة من المعلومات المتعلقة بالكلى ودالة الكبيبي يمكن الحصول عليها من ماوس واحدة. الأساليب التي يسمح بإجراء تحليل الوظيفية والهيكلية والميكانيكية مفصلة وظيفة الكبيبي، والتي يمكن تطبيقها على جميع نماذج الماوس من المرض الكبيبي.

استخدام نماذج مورين لتقليد أمراض الكلي البشرية أصبحت شائعة بشكل متزايد. وتشمل هذه النماذج مورين نماذج عفوية مثل تلقائياً ارتفاع ضغط الدم الفئران (باستفاض)1، بالستريبتوزوتوسين (STZ)-التي يسببها السكري الجرذان والفئران2، واكتب db/db الثاني الفئران السكري3، نماذج المهندسة وراثيا مثل النماذج الأولية الخاصة بودوسيتي التنسيق القطاعي الكبيبي التصلب (FSGS)4، خاصة بودوسيتي الأوعية الدموية غشائي عامل النمو (فيجف-A) المغلوب (فيجفا كو) نموذج5، وألبرت متلازمة نماذج6، واكتسبت نموذج نماذج مثل استئصال 5/67 وانسداد الحالب الانفرادية (أو)8. وبغية تقييم الجوانب المختلفة للدالة الكبيبي في هذه النماذج، تتوفر عدة تقنيات. والغرض من هذه الورقة الأسلوب هو إثبات شاملة عمل أعلى التي يجب تنفيذها في نماذج الماوس لأمراض الكلي من أجل إجراء تقييم كامل للدالة الكبيبي.
الأساس المنطقي لاستخدام هذا الأسلوب أنه يتيح النمط الظاهري الكبيبي تقييمه بشكل كامل من جوانب متعددة. وهذا يشمل تقييم نفاذية الكبيبي، سواء للبروتين والماء، والتشوهات الهيكلية الكبيبي، والتغييرات في التعبير/الربط مرناس والبروتينات ضروري لوظيفة الكبيبي طبيعية. باستخدام هذا الأسلوب، الباحث قادراً على تحديد النمط الظاهري الكلي للنموذج وتقييم الآلية بشأن لماذا يتطور النمط الظاهري. هذه هي معلومات حيوية عن الآلية للمرض، ومطلوب عند دراسة السبل العلاجية المحتملة في هذه النماذج.
في الأدب، هو شائع لتقديمها مع نموذج الفأر من المرض الكبيبي حيث يتم تحديد النمط الظاهري بزيادة مستوى الزلال في البول. ومع ذلك، هناك أدلة على أن أسلوب واحد لتحديد دالة الكبيبي ليست دائماً فعالة؛ قياس معدل إفراز الزلال البولي أو نسبة كرياتينين الزلال البولي (أواكر) فقط يوفر معلومات عن الدالة المجموع الكلي، وليس من جلوميرولي الفردية. وقد أثبتت الدراسات السابقة أن النفاذية يمكن أن تختلف في جلوميرولي مختلفة من نفس الكلي5،،من910. وبالإضافة إلى ذلك، يتم تقييم نفاذية glomeruli الفردية بطريقة أكثر حساسية لتقييم دالة الكبيبي؛ تقنية قياس نفاذية المياه الكبيبي الفردية (LpA/Vأنا) قد أظهرت أن تكون أكثر حساسية للتغيرات في وظيفة الكبيبي من قياس أواكر9. هذا التحليل مفيد في نماذج الماوس التي تقاوم بروتينية، مثل تلك المتعلقة خلفية c57BL/611. وميزة هذه الورقة الأسلوب أن يفحص نفاذية الكلي الإجمالي للزلال فضلا عن نفاذية الكبيبي الفردية للمياه.
غالباً ما يتم تقييم دراسة التشوهات الهيكلية الكبيبي ببطارية من البقع مثل حمض الدوري Schiff (PAS)، تريتشرومي، والبقع الفضية. وهي تمكن أخصائي الكلي مدربين لتقييم مستوى مرض الكلي عن طريق أسلوب التهديف. على الرغم من أن جميع طرق جيدة، تغييرات على الهيكل الكلي الكبيبي لا تحترم دائماً في نماذج كلوي حاد إصابة12. وتقترح هذه الطريقة أن الترا الكبيبي-الهيكل ينبغي أيضا تقييم بالإضافة إلى اضطلاعها بالانسجة الكلوية التقنيات الموضحة أعلاه، عن طريق الميكروسكوب الإلكتروني (م). الكبيبة الملون يمكن أن تبدو طبيعية نسبيا تحت مجهر خفيفة عادية؛ ومع ذلك، عند تقييم مع م، التغييرات الصغيرة في عرض الغشاء الكبيبي (GBM)، بودوسيتي القدم عملية عفو، فينيستريشنز بطانية، وتغطية مساحة بودوسيتي الفرعية يتم تحليل. ولذلك، من المهم أن الكبيبي الترا-الهيكل والبنية الصغرى هو تقييم لتحديد إليه الخلل الوظيفي الكبيبي.
وبالإضافة إلى تقييم التشوهات الهيكلية الكبيبي، ينبغي دراسة التغيرات في مرناً والتعبير البروتين والربط، فضلا عن تنشيط البروتين (مثلاً، الفسفرة)، لتوضيح آليات المرض الكبيبي. عندما ننظر إلى المرض الكبيبي، أو، على سبيل المثال، عندما كو/عبر-expressing جينات على وجه التحديد في الخلايا الكبيبي، مثلما حدث في بودوسيتي الخاصة "فيجفا كو" الماوس5، من المهم أن يتم فحص التغييرات البروتين ومرناً فقط داخل الخلايا الكبيبي، وليس كله الكلي. ويصف هذا البروتوكول وسيلة التي glomeruli أنها معزولة من قشرة الكلي الماوس، ومن ثم يتم عزل البروتين/الجيش الملكي النيبالي. يسمح هذا التحليل محددة من التقلبات البروتين/مرناً في جلوميرولي طراز المرض.
ويصف هذا البروتوكول عمل الكلي كامل متابعة التي ينبغي الاضطلاع بها في نماذج الماوس من المرض الكبيبي، تمكين كمية هائلة من المعلومات المتعلقة بالكلى ودالة الكبيبي يمكن الحصول عليها من ماوس واحدة. الأساليب التي يسمح بإجراء تحليل الوظيفية والهيكلية والميكانيكية مفصلة وظيفة الكبيبي، والتي يمكن تطبيقها على جميع نماذج الماوس من المرض الكبيبي.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Metabolic Cages</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>52-6731</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris buffered saline (10x)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T5912-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A2058</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Albumin ELISA Quantitation Set</td>
			<td>Bethyl Laboratories</td>
			<td>E90-134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TMB ELISA Substrate solution</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>34028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulphuric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>339741</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPECTRstar nano</td>
			<td>BMG Labtech</td>
			<td>SPECTRstar nano or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAlater stabilisation solution</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AM7020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-15% precast protein gel</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>4568084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x Laaemmli Sample buffer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>161-0747</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Trans-Blot cell</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>1703930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x Tris running buffer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>1610732</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coomassie Brilliant Blue Dye</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>20278</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Creatinine Companion</td>
			<td>Exocell</td>
			<td>1012 Strip Plate</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde Solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Cacodylate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AM9625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Acetate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2889</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>342483</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M2643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D(+)Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA Blood Collection tubes</td>
			<td>BD</td>
			<td>367835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23-25G Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>PMC0735</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 ml Glass Vial</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>0914X10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 10 ml Polypropylene Tubes</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>10110101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5 ml Tubes</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>10681894</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Tissue Molds</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>22-363-553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Surgical Disection Kit</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>13-005-204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optimal Cutting Medium</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>23-730-571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% Paraformaldehyde</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AAJ19943K2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary Tubes</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>EC1 64-0770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glomerular Permeability Rig</td>
			<td>Built at the Univeristy of Bristol - not comercially available</td>
			<td>Citation of LpA rig: Salmon et al. 2006; J. Physiol</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Sieves</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>WZ-59984</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Periodic Acid-Schiff (PAS) Staining System</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>395B-1KT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>MerckMillipore</td>
			<td>108298</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-Prep Slides</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P0425-72EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Medium</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>8030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmium tetroxide solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>75632</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aradite Resin</td>
			<td>Agar Scientific</td>
			<td>CY212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uranyl Acetate</td>
			<td>Agar Scientific</td>
			<td>AGR1260A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lead Citrate</td>
			<td>Agar Scientific</td>
			<td>AGR1210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>e.g. 957000H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophobic Pen</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab2601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nephrin (1243-1256) Antibody</td>
			<td>Acris</td>
			<td>BP5030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Podocin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P0372-200UL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD31</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550274</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor Secondary Antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A32732</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectashield Mounting Medium with DAPI</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP40 Cell Lysis Buffer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>FNN0021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halt Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>78437X4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x Transfer Buffer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>1610734</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVDF Membrane</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>LC2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP-Conjugated Secondary Antibodies</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6721</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECF Substrate for Western Blotting</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>10713387</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15596018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dnase I</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>M0303S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-MLV Reverse Transcriptase</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>M053S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oligo dT</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>18418012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Random Primers</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>48190011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNTP</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>18427088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ribonuclease Inhibitor</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>10777019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DEPC Water</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AM9915G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent Light Miscroscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image J Analysis Software</td>
			<td>Image J</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCR Thermocycler</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TEM Microscope</td>
			<td>Britannica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of kidney function in mouse models of glomerular disease

استخدام نماذج مورين لتقليد أمراض الكلي البشرية أصبحت شائعة بشكل متزايد. لدينا أبحاث تركز على تقييم الدالة الكبيبي في حدوث السكري والفئران المغلوب فيجف-أ بودوسيتي على حدة؛ ولذلك، يصف هذا البروتوكول يصل العمل الكلي الكامل المستخدمة في لدينا مختبر لتقييم هذه النماذج الماوس من المرض الكبيبي، تمكين كمية هائلة من المعلومات المتعلقة بالكلى ودالة الكبيبي يمكن الحصول عليها من ماوس واحدة. بالمقارنة مع طرق بديلة عرضت في الأدب لتقييم دالة الكبيبي، يمكن استخدام الطريقة المبينة في هذه الورقة النمط الظاهري الكبيبي تقييمه بشكل كامل من جوانب متعددة. باستخدام هذا الأسلوب، يمكن تحديد النمط الظاهري الكلي للنموذج الباحث وتقييم الآلية بشأن لماذا يتطور النمط الظاهري. هذه المعلومات الحيوية عن الآلية المرض مطلوب عند دراسة السبل العلاجية المحتملة في هذه النماذج. الأساليب تسمح بتقييم وظيفي مفصل للحاجز الترشيح الكبيبي عن طريق قياس نسبة كرياتينين الزلال البولي ونفاذيه المياه الكبيبي الفردية، فضلا عن دراسة هيكلية وهيكلية فائقة استخدام "حمض الدوري شيف" وصمة عار والمجهر الإلكتروني. وعلاوة على ذلك، يتيح تحليل dysregulated الجينات على مستوى البروتين ومرناً آليا إلى تحليل وظيفة الكبيبي. هذا البروتوكول يحدد أساليب عامة ولكن قابلة للتكيف التي يمكن تطبيقها على جميع نماذج الماوس من المرض الكبيبي.

وجمعت البول استخدام الأقفاص الأيضية من نوع البرية (WT) الخاصة بودوسيتي فيجف-أ ضرب إيندوسيبلي (فيجفا كو) والفئران ب165فيجفا كو X نيف-VEGF (الفئران "فيجفا كو" الإفراط تعبر عن isoform ب البشرية VEGF-أ165في بودوسيتيس في طريقة التأسيسي). عند قياس نسبة كرياتينين الزلال البولي في الأسابيع 0, 4 و 10 و 14 بعد تحريض الدوكسي "كو فيجفا"، وضعت الفئران "فيجفا كو" بيله التدريجي قبل 10 أسابيع مقارنة بوزن ليتيرماتي عناصر التحكم. يمكن أن ينظر إليه القيم المطلقة في الشكل 2 ألف، وتم تسويتها بخط الأساس لكل قيم الماوس في الشكل 2. بيله في لا تراعي في الفئران ب165فيجفا X نيف-فيجف-أ (الشكل 2)، مما يشير إلى أن فيجف-أ165ب غير الواقية في نموذج بيله5.
الكبيبي لفAVأنا كان قياس glomeruli الفردية غربلة من وزن، فيجفا كو، والكلى ب165نف س فيجفا-فيجف-أ. مثال عن كيف يتم صيده من الكبيبة والانكماش لاحظ عندما بيريفوسيد مع جيش صرب البوسنة 8% ويرد في الشكل 3A. ثم يتم استخدام هذا الانكماش لتحديد الكبيبي LpA/Vأنا لكل الكبيبة (الشكل 3B). فيجف-أ كو الفئران قد زيادة كبيرة الكبيبي LpA/Vأنا في 14 أسبوعا آخر التعريفي VEGF-كو جلوميرولي التحكم بالوزن بالمقارنة مع. على الرغم من أن أقل في فيجفا س نيف-فيجف-أ165ب الفئران، L الكبيبي زيادةفA/Vأنا لم يمنع من التعبير المفرط عن VEGF-أ165ب 14 أسبوعا5.
PAS تلطيخ أبواب قشرة الكلي 14 أسبوعا بعد تحريض "كو فيجفا" لم تكشف عن أي شذوذ هيكلية الكبيبي في كو فيجفا أو فيجفا X نيف-فيجف-أ الفئران ب165(الشكل 4 أ). بيد بناء على تحليل للهيكل الترا الكبيبي عن طريق م، "كو فيجفا" الفئران قد نمواً زيادة عرض الخليج للحاسبات الآلية وانخفض عدد fenestrae بطانية، انخفاض التغطية النباتية، وزاد متوسط بودوسيتي شق العرض (الشكل 4-4F ). عملية القدم بودوسيتي متوسط العرض وعدد من الشقوق وظلت دون تغيير (الشكل 3B والجيل الثالث 3g). منع التغييرات إلى الخليج للحاسبات الآلية التعبير المفرط عن ب VEGF-أ165في الفئران "فيجفا كو" وشق العرض (الشكل 4 و 4F). بيد أنه فيجف-A165ب أي تأثير على عدد فينسترا المعدلة والصحة والصحة النباتية التغطية (الشكل 4 و 4E)5.
RT-PCR تجري على الحمض النووي الريبي المستخرج من glomeruli ينخل كشفت أن ب165ألف VEGF البشرية مرناً موجودة فقط في الفئران ب165فيجفا كو X نيف-فيجف-أ (الشكل 5A). عند استخراج البروتين من glomeruli ينخل وتقييم مستويات البروتينات عن طريق النشاف الغربية، تعبير البروتين الكبيبي فيجفر-2 وجد أن يكون قد انخفض في الفئران "فيجفا كو"، الذي منعت بسبب الإفراط في التعبير عن VEGF-أ165ب ( الشكل 5B وج 5)5.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57764/57764fig1.jpg"> الشكل 1. إعداد البيانية من تلاعب نفاذية الكبيبي (LpA)- (أ) يتم القبض عليه في الكبيبة في (ب) ميكروبيبيتي داخل حامل استخدام الشفط، التي فرضت على جبل للاستقرار. (ج) ميكروسليدي مستطيلة. (د) الهدف X 4 مجهر مع كاميرا فيديو. (ه) درجة حرارة حل جيش صرب البوسنة 1% إلى 37 درجة مئوية. (و) تحسنت حل جيش صرب البوسنة 8 ٪ إلى 37 درجة مئوية. (ز) بعد الاستفادة من تأثير هذين الخطين المحتوية على بريفوست، الذي يسمح بتبادل بريفوست السريع. (ح) مسار بريفوست نحو ميكروسليدي، الذي ثم تستحم في الكبيبة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57764/57764fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57764/57764fig2.jpg"> رقم 2. نسبة كرياتينين الزلال البولي. (أ) القيم أواكر في الأسابيع 0, 4 و 10 و 14 بعد تحريض "كو فيجفا" في الفئران ب165WT فيجفا كو ونف س فيجفا-فيجف-أ. (ب) تطبيع نفس القيم أواكر إلى قيمة خط الأساس (الأسبوع 0) كل الماوس الفردية. أواكر زيادة كبيرة في الفئران "فيجفا كو" في الأسابيع 10 و 14 مقارنة WT ليتيرماتي عناصر التحكم، التي منعت في الفئران ب165فيجفا X نيف-فيجف-أ (* p < 0.05؛ ثنائية الاتجاه ANOVA، تصحيح للمقارنة بين أزواج; n = 4-12 الفئران كل الوقت نقطة؛ أشرطة الخطأ: الخطأ المعياري للوسط [SEM]). وقد تم تعديل هذا الرقم من ستيفنز وآخرون5. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57764/57764fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57764/57764fig3.jpg"> الشكل 3. قياس نفاذية المياه الكبيبي. (أ) يتم القبض عليه في الكبيبة في ميكروبيبيتي عن طريق شفط؛ يتم تبديل بريفوست من جيش صرب البوسنة 1% (منظمة العفو الدولية) إلى 8% جيش صرب البوسنة (أخي)، ويلاحظ تقلص الكبيبي. (ب) تستخدم القياسات المتخذة قبل وبعد رمز التبديل جيش صرب البوسنة 8% لتحديد الكبيبي LpA/Vأنا. (ج) وضع الفئران "كو فيجفا" زيادة الكبيبي LpA/Vأنا في الأسابيع 14 وظيفة تحريض "كو فيجفا" مقارنة بضوابط WT. وهذا لم يمنع إلى حد كبير في الفئران ب165فيجفا X نيف-فيجف-أ (* p < 0.05؛ طريقة واحدة ANOVA، تصحيح بونفيروني للمقارنة بين أزواج; n = 4-9 الفئران، جلوميرولي 15-30؛ أشرطة الخطأ: وزارة شؤون المرأة). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57764/57764fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57764/57764fig4.jpg"> الشكل 4. التحليل الهيكلي الكبيبي. (أ) PAS تلطيخ من قشرة الكلي لم تشر إلى أي شذوذ هيكلية في جلوميرولي من وزن، فيجفا كو ونيف س فيجفا-فيجف-أ165ب الفئران (منظمة العفو الدولية-ثالثا). م كشف التشوهات الهيكلية فائقة في جلوميرولي "كو فيجفا" (Aiv-سادسا). (ب) لم تتغير الخطة الإطارية للمرأة متوسط بين المجموعات. (ج) زيادة "الخليج للحاسبات الآلية" في glomeruli "كو فيجفا"، التي منعت VEGF-أ165باء (د) قد انخفض عدد فينسترا في جلوميرولي "فيجفا كو"، الذي ظل دون تغيير بالتغطية "الصحة والصحة النباتية" (ه) باء-فيجف-A165 وقد انخفض في جلوميرولي "فيجفا كو"، الذي أيضا لم يتغير VEGF-أ165باء (و) زاد متوسط شق العرض في جلوميرولي "كو فيجفا"، والتي منعت بسبب VEGF-أ165ب (ز) عدد الشق لم يتغير بين المجموعات الثلاث (* p < 0.05؛ طريقة واحدة ANOVA، تصحيح بونفيروني للمقارنة بين أزواج; n = 3 الفئران، جلوميرولي 9؛ أشرطة الخطأ: وزارة شؤون المرأة). وقد تم تعديل هذا الرقم من ستيفنز وآخرون5. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57764/57764fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57764/57764fig5.jpg"> الرقم 5. التعبير مرناً والبروتين من علامات. (أ) RT-PCR أظهر أن165ألف VEGF البشرية ب مرناً التعبير فقط واضحة في glomeruli ينخل من الفئران ب165فيجفا كو X نيف-فيجف-أ. (ب) النشاف غربية أشارت إلى أن التعبير البروتين فيجفر-2 أسفل-ينظم glomeruli "كو فيجفا"، التي منعت في فيجفا كو X نيف-فيجف-أ جلوميرولي ب165(* p < 0.05؛ طريقة واحدة ANOVA، تصحيح بونفيروني للمقارنة بين أزواج; n = 3-6 فئران؛ أشرطة الخطأ: وزارة شؤون المرأة). وقد تم تعديل هذا الرقم من ستيفنز وآخرون5. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57764/57764fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease at JoVE.com

Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease

ويصف هذا البروتوكول عمل الكلي كامل حتى التي ينبغي الاضطلاع بها في نماذج الماوس من المرض الكبيبي. الأساليب التي يسمح بإجراء تحليل الوظيفية والهيكلية والميكانيكية مفصلة وظيفة الكبيبي، والتي يمكن تطبيقها على جميع نماذج الماوس من المرض الكبيبي.

تقييم لوظيفة الكلي في نماذج الماوس من المرض الكبيبي

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Cardiac Function and Energetics in Isolated Mouse Hearts Using 31P NMR Spectroscopy

Assessment of Cardiac Function and Energetics in Isolated Mouse Hearts Using 31P NMR Spectroscopy

تقييم وظيفة القلب وعلم الطاقة في قلوب معزولة عن طريق الماوس 31 P الرنين المغناطيسي الطيفي

Bioengineered mouse models have become powerful research tools in determining causal relationships between molecular alterations and models of ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Assessment of Cardiac Function and Myocardial Morphology Using Small Animal Look-locker Inversion Recovery (SALLI) MRI in Rats

Assessment of Cardiac Function and Myocardial Morphology Using Small Animal Look-locker Inversion Recovery SALLI MRI in Rats

تقييم وظيفة القلب والصرف عضلة القلب عن طريق الحيوانات الصغيرة نظرة خزانة الاسترداد عكس (صلي) التصوير بالرنين المغناطيسي في الجرذان

Small animal magnetic resonance  imaging is an important tool to study cardiac function and changes in myocardial  tissue. The high heart rates of small ...

Assessment of Right Ventricular Structure and Function in Mouse Model of Pulmonary Artery Constriction by Transthoracic Echocardiography

تقييم البطين الأيمن هيكل وظيفة في نموذج الفأر من الشريان الرئوي عبر الصدر عن طريق انقباض ضربات القلب

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

تقييم وظيفة الأوعية الدموية في المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المزمن

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

الماوس زرع الكلى: نماذج من طعم خيفي رفض

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

Use of Ultra-high Field MRI in Small Rodent Models of Polycystic Kidney Disease for In Vivo Phenotyping and Drug Monitoring

Use of Ultra-high Field MRI in Small Rodent Models of Polycystic Kidney Disease for In Vivo Phenotyping and Drug Monitoring

استخدام فائقة MRI الميداني في القوارض الصغيرة نماذج من مرض الكلى المتعدد الكيسات ل<em&gt; في فيفو</em&gt; Phenotyping والدواء المراقبة

Several in vivo pre-clinical studies in Polycystic Kidney Disease (PKD) utilize orthologous rodent models to identify and study the genetic and molecular ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

تقييم عبر الجلد من وظيفة الكلى في القوارض واعية

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Cutaneous Surgical Denervation:  A Method for Testing the Requirement for Nerves in Mouse Models of Skin Disease

الجلدي إزالة التعصيب الجراحي: هناك طريقة لاختبار شرط لالأعصاب في نماذج الماوس من الأمراض الجلدية

Cutaneous somatosensory nerves function to detect diverse stimuli that act upon the skin. In addition to their established sensory roles, recent studies ...

Repeated Measurement of Respiratory Muscle Activity and Ventilation in Mouse Models of Neuromuscular Disease

القياس المتكرر التنفسي آخر العضلات والتهوية في نماذج الماوس من مرض عصبي عضلي

Accessory respiratory muscles help to maintain ventilation when diaphragm function is impaired. The following protocol describes a method for repeated ...