Name: identification of virulence markers of mycobacterium abscessus for intracellular replication in phagocytes
Uploaded: 2018-09-27T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification of Virulence Markers of Mycobacterium abscessus for Intracellular Replication in Phagocytes at JoVE.com

Biz büyük ölçüde mutant değerli hediye için PR EJ Rubin (Harvard Tıp Okulu, Boston, ABD) kabul Kütüphane ve Ben Marshall'ın (Tıp Fakültesi, Southampton Üniversitesi, İngiltere) el yazması düzeltmeler için. Biz büyük ölçüde Fransızca hasta Derneği kistik fibrozis "Vaincre la Mucoviscidose" ve "L'Association Gregory Lemarchal" için mali destek (RF20150501377) için kabul edersiniz. Biz de araştırma (ANR programı DIMIVYR (ANR-13-BSV3-0007-01)) ve Région Ile-de-France için Ulusal Ajans teşekkür (Domaine d'Intérêt Majeur Maladies Infectieuses et Emergentes) V.L-m doktora sonrası bursu finansman için. L. l. doktora bir dost "Ministère de L'Enseignement Supérieur et de la Recherche".

1. Kütüphane tarama
<ol><li>İnşaat Tn mutant Kütüphanesi
	<ol>
<li>Transposon Kütüphane elde edilir. Not: Bu deneme için EJ Rubin, Harvard Halk Sağlığı Okulu, Boston, ABD transposon mutant Kütüphane elde edildi. Kütüphanede bir pürüzsüz klinik yük (43S), M. abscessus karmaşık (M. abscessus subsp. massiliense) bir phagemid tek bir Tn rasgele ekleme izin M. abscessus tanıttı ile inşa edilmiştir TA dinükleotit ( M. ab...

<ol>
	<li>Qvist, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+the+harmful+effects+of+nontuberculous+mycobacteria+and+Gram+negative+bacteria+on+lung+function+in+patients+with+cystic+fibrosis.">Comparing the harmful effects of nontuberculous mycobacteria and Gram negative bacteria on lung function in patients with cystic fibrosis.</a> Journal of Cystic Fibrosis. 15 (3), 380-385 (2016).</li><li>Roux, A. -. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+distinct+fate+of+smooth+and+rough+Mycobacterium+abscessus+variants+inside+macrophages.">The distinct fate of smooth and rough Mycobacterium abscessus variants inside macrophages.</a> Open Biology. 6 (11), 160185 (2016).</li><li>Casta&#241;eda-S&#225;nchez, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defensin+Production+by+Human+Limbo-Corneal+Fibroblasts+Infected+with+Mycobacteria.">Defensin Production by Human Limbo-Corneal Fibroblasts Infected with Mycobacteria.</a> Pathogens. 2 (4), 13-32 (2013).</li><li>Bakala N'Goma, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycobacterium+abscessus+phospholipase+C+expression+is+induced+during+coculture+within+amoebae+and+enhances+M.+abscessus+virulence+in+mice.">Mycobacterium abscessus phospholipase C expression is induced during coculture within amoebae and enhances M. abscessus virulence in mice.</a> Infection and Immunity. 83 (2), 780-791 (2015).</li><li>Ripoll, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non+mycobacterial+virulence+genes+in+the+genome+of+the+emerging+pathogen+Mycobacterium+abscessus.">Non mycobacterial virulence genes in the genome of the emerging pathogen Mycobacterium abscessus.</a> Public Library of Science One. 4 (6), 5660 (2009).</li><li>Tailleux, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Constrained+intracellular+survival+of+Mycobacterium+tuberculosis+in+human+dendritic+cells.">Constrained intracellular survival of Mycobacterium tuberculosis in human dendritic cells.</a> Journal of Immunology. 170 (4), 1939-1948 (2003).</li><li>Jacquier, N., Aeby, S., Lienard, J., Greub, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+new+intracellular+pathogens+by+amoebal+coculture+and+amoebal+enrichment+approaches.">Discovery of new intracellular pathogens by amoebal coculture and amoebal enrichment approaches.</a> Journal of Visualized Experiments. (80), e51055 (2013).</li><li>Ad&#233;kambi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amoebal+coculture+of+"Mycobacterium+massiliense"+sp.+nov.+from+the+sputum+of+a+patient+with+hemoptoic+pneumonia.">Amoebal coculture of "Mycobacterium massiliense" sp. nov. from the sputum of a patient with hemoptoic pneumonia.</a> Journal of Clinical Microbiology. 42 (12), (2004).</li><li>Rubin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+transposition+of+mariner-based+elements+in+enteric+bacteria+and+mycobacteria.">In vivo transposition of mariner-based elements in enteric bacteria and mycobacteria.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 96 (4), 1645-1650 (1999).</li><li>Laencina, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+genes+required+for+Mycobacterium+abscessus+growth+in+vivo+with+a+prominent+role+of+the+ESX-4+locus.">Identification of genes required for Mycobacterium abscessus growth in vivo with a prominent role of the ESX-4 locus.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (5), 1002-1011 (2018).</li><li>Rowbotham, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+Legionella+pneumophila+from+clinical+specimens+via+amoebae,+and+the+interaction+of+those+and+other+isolates+with+amoebae.">Isolation of Legionella pneumophila from clinical specimens via amoebae, and the interaction of those and other isolates with amoebae.</a> Journal of Clinical Pathology. 36 (9), 978-986 (1983).</li><li>Moffat, J. F., Tompkins, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+model+of+intracellular+growth+of+Legionella+pneumophila+in+Acanthamoeba+castellanii.">A quantitative model of intracellular growth of Legionella pneumophila in Acanthamoeba castellanii.</a> Infection and Immunity. 60 (1), 296-301 (1992).</li><li>Ripoll, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non+mycobacterial+virulence+genes+in+the+genome+of+the+emerging+pathogen+Mycobacterium+abscessus.">Non mycobacterial virulence genes in the genome of the emerging pathogen Mycobacterium abscessus.</a> Public Library of Science One. 4 (6), 5660 (2009).</li><li>Choo, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+reconnaissance+of+clinical+isolates+of+emerging+human+pathogen+Mycobacterium+abscessus+reveals+high+evolutionary+potential.">Genomic reconnaissance of clinical isolates of emerging human pathogen Mycobacterium abscessus reveals high evolutionary potential.</a> Science Reports. 4, (2015).</li><li>Greub, G., Raoult, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microorganisms+Resistant+to+Free-Living+Amoebae.">Microorganisms Resistant to Free-Living Amoebae.</a> Clinical Microbiology Reviews. 17 (2), 413-433 (2004).</li><li>Kicka, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+Validation+of+Whole-Cell+Based+Fluorescence+Assays+to+Identify+Anti-Mycobacterial+Compounds+Using+the+Acanthamoeba+castellanii+-+Mycobacterium+marinum+Host-Pathogen+System.">Establishment and Validation of Whole-Cell Based Fluorescence Assays to Identify Anti-Mycobacterial Compounds Using the Acanthamoeba castellanii - Mycobacterium marinum Host-Pathogen System.</a> Public Library of Science One. 9 (1), 87834 (2014).</li><li>Thomas, V., Loret, J. -. F., Jousset, M., Greub, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodiversity+of+amoebae+and+amoebae-resisting+bacteria+in+a+drinking+water+treatment+plant.">Biodiversity of amoebae and amoebae-resisting bacteria in a drinking water treatment plant.</a> Environmental Microbiology. 10 (10), 2728-2745 (2008).</li><li>Lamrabet, O., Medie, F. M., Drancourt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acanthamoeba+polyphaga-enhanced+growth+of+mycobacterium+smegmatis.">Acanthamoeba polyphaga-enhanced growth of mycobacterium smegmatis.</a> Public Library of Science One. 7 (1), (2012).</li><li>Cosson, P., Soldati, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eat,+kill+or+die:+when+amoeba+meets+bacteria.">Eat, kill or die: when amoeba meets bacteria.</a> Current Opinion in Microbiology. 11 (3), 271-276 (2008).</li><li>Lelong, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+magnesium+and+a+phagosomal+P-type+ATPase+in+intracellular+bacterial+killing.">Role of magnesium and a phagosomal P-type ATPase in intracellular bacterial killing.</a> Cellular microbiology. 13, 246-258 (2011).</li><li>Ouertatani-Sakouhi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitors+of+Mycobacterium+marinum+virulence+identified+in+a+Dictyostelium+discoideum+host+model.">Inhibitors of Mycobacterium marinum virulence identified in a Dictyostelium discoideum host model.</a> Public Library of Science One. 12 (7), 0181121 (2017).</li><li>Trofimov, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimycobacterial+drug+discovery+using+Mycobacteria-infected+amoebae+identifies+anti-infectives+and+new+molecular+targets.">Antimycobacterial drug discovery using Mycobacteria-infected amoebae identifies anti-infectives and new molecular targets.</a> Science Reports. 8 (1), 3939 (2018).</li><li>Cardenal-Mu&#241;oz, E., Barisch, C., Lefran&#231;ois, L. H., L&#243;pez-Jim&#233;nez, A. T., Soldati, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=When+Dicty+Met+Myco,+a+(Not+So)+Romantic+Story+about+One+Amoeba+and+Its+Intracellular+Pathogen.">When Dicty Met Myco, a (Not So) Romantic Story about One Amoeba and Its Intracellular Pathogen.</a> Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 7, 529 (2017).</li><li>Delafont, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+evidence+of+amoebae-mycobacteria+association+in+drinking+water+network.">First evidence of amoebae-mycobacteria association in drinking water network.</a> Environmental Science &amp; Technology. 48 (20), (2014).</li><li>Cirillo, J. D., Falkow, S., Tompkins, L. S., Bermudez, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+Mycobacterium+avium+with+environmental+amoebae+enhances+virulence.">Interaction of Mycobacterium avium with environmental amoebae enhances virulence.</a> Infection and Immunity. 65 (9), (1997).</li><li>Stamm, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycobacterium+marinum+escapes+from+phagosomes+and+is+propelled+by+actin-based+motility.">Mycobacterium marinum escapes from phagosomes and is propelled by actin-based motility.</a> Journal of Experimental Medicine. 198 (9), 1361-1368 (2003).</li><li>Groschel, M. I., Sayes, F., Simeone, R., Majlessi, L., Brosch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESX+secretion+systems:+mycobacterial+evolution+to+counter+host+immunity.">ESX secretion systems: mycobacterial evolution to counter host immunity.</a> Nature Reviews Microbiology. 14 (11), 677-691 (2016).</li><li>Pym, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recombinant+BCG+exporting+ESAT-6+confers+enhanced+protection+against+tuberculosis.">Recombinant BCG exporting ESAT-6 confers enhanced protection against tuberculosis.</a> Nature Medicine. 9 (5), 533-539 (2003).</li><li>Hsu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+primary+mechanism+of+attenuation+of+bacillus+Calmette-Guerin+is+a+loss+of+secreted+lytic+function+required+for+invasion+of+lung+interstitial+tissue.">The primary mechanism of attenuation of bacillus Calmette-Guerin is a loss of secreted lytic function required for invasion of lung interstitial tissue.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 100 (21), 12420-12425 (2003).</li><li>Smith, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+pore+formation+in+host+cell+membranes+by+ESX-1-secreted+ESAT-6+and+its+role+in+Mycobacterium+marinum+escape+from+the+vacuole.">Evidence for pore formation in host cell membranes by ESX-1-secreted ESAT-6 and its role in Mycobacterium marinum escape from the vacuole.</a> Infection and Immunity. 76 (12), 5478-5487 (2008).</li><li>Schnappinger, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional+Adaptation+of+Mycobacterium+tuberculosis.+within+Macrophages.">Transcriptional Adaptation of Mycobacterium tuberculosis. within Macrophages.</a> Journal of Experimental Medicine. 198 (5), 693-704 (2003).</li><li>Fontan, P., Aris, V., Ghanny, S., Soteropoulos, P., Smith, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+Transcriptional+Profile+of+Mycobacterium+tuberculosis+during+THP-1+Human+Macrophage+Infection.">Global Transcriptional Profile of Mycobacterium tuberculosis during THP-1 Human Macrophage Infection.</a> Infection and Immunity. 76 (2), 717-725 (2008).</li><li>Miranda-CasoLuengo, A. A., Staunton, P. M., Dinan, A. M., Lohan, A. J., Loftus, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+characterization+of+the+Mycobacterium+abscessus+genome+coupled+with+condition+specific+transcriptomics+reveals+conserved+molecular+strategies+for+host+adaptation+and+persistence.">Functional characterization of the Mycobacterium abscessus genome coupled with condition specific transcriptomics reveals conserved molecular strategies for host adaptation and persistence.</a> BMC Genomics. 17 (1), 553 (2016).</li></ol>

M. abscessus çok daha benzer patojenik SGM M. tuberculosis gibi davranışını RGM2' ye ait diğer mikobakteriler daha bir davranıştır. Anahtar SGM patojenitesi, hayatta ya da antijen sunan hücreler gibi makrofaj ve dendritik hücreler içinde bile çarpmak için yeteneklerini öğedir.
M. abscessus genomik bazı avantajları bir ökaryotik fagositik hücre içinde hayatta kalmak için onun genom14 toplam sırası...

Cins Mycobacterium zararsız saprofit canlılar için büyük insan patojenleri değişen türler içerir. Mycobacterium tüberküloz, Mycobacterium marinum ve Mycobacterium ulcerans gibi iyi bilinen patojen türün ait yavaş büyüyen alt için mikobakteriler (SGM). Buna karşılık, alt grup hızlı büyüyen mikobakteriler (RGM) 7 günden daha az sürede agar ortamdaki görülebilir koloniler kurmaya yeteneklerini karakterizedir. RGM grup 180'den fazla tür, özellikle patojenik olmayan saprofit mikobakteriler oluşmaktadır. Onların ana bilgisayarlarla RGM etkileşimleri üzerinde çalışmalar çoğunlukla Mycobacterium smegmatis üzerinde odaklanmıştır ve bu mikobakteriler makrofajlar bakterisidal eylem tarafından hızla ortadan kalkar gösterilmektedir.
Mycobacterium abscessus insanlara patojenik nadir RGM biridir ve çok çeşitli deri ve yumuşak doku enfeksiyonları pulmoner ve dissemine enfeksiyonlara karşı değişen enfeksiyonlar sorumludur. M. abscessus , Mycobacterium aviumile birlikte, kistik fibrozis hastalarının1ana Mikobakteriyel patojen olarak kabul edilir.
Bu yol hücre içi bir patojen, makrofaj ve fibroblast akciğer ve deri, genellikle RGM içinde gözlenen değil bakteri yok edici yanıt kalan yeteneğine gibi davranır M. abscessus üzerinde yapılan çeşitli araştırmalar gösteriyor 2 , 3 , 4. M. abscessus Genom Analizi metabolik yollar genellikle çevresel mikroorganizmaların toprak ile temas halinde bulunan tespit, bitkiler ve su ortamları, nerede ücretsiz amip çoğu kez mevcut5. Onlar de M. abscessus muhtemelen yatay gen transferi bir niş toplamak genetik Exchange'e olumlu tarafından alınan saprofit ve patojenik olmayan RGM bulunamadı birkaç virülans genler ile donatılmış olan göstermiştir çeşitli amip dirençli bakteri.
Deneysel, ilk çarpıcı sonuçlardan biri de M. tuberculosis6gelince makrofajlar M. abscessus hücre içi büyüme gözlem idi. M. abscessus da phagosome, apoptozis ve autophagy, üç temel mekanizmaları enfeksiyon2hücresel direnç asitleştirme direnir. Hatta M. abscessus phagosome ve sitozol, bakteriyel çarpma2lehine bir daha fazla besin zengin ortam arasında hemen bir iletişim kurmak mümkün olduğunu gösterilmiştir. Çok az M. abscessus sahip veya hücre içi bir ortamda hayatta kalma izin vermek için satın aldı genomik avantajları hakkında bilinir. Amip coculture birçok yeni amip dirençli bakteri yalıtım Mycobacterium massiliense7,8olarak izin verimli bir yöntemdir. M. abscessus kloroformu farelerde, M. abscessus4artan bir virülans görüşmek, bir modeli içinde amip çarpmak için bir yetenek gözlendi. M. abscessus genetik özellikleri patojenik olmayan diğer RGM farklı fagositik hücreleri hayatta kalmak için bu ortamda karşılaştı gelişen bir hipotezdir. Bu satın alma yeteneği yaymak için ve onun virülans insan ev sahibi lehine.
Bu rapor araç ve amip ortamda hayatta kalmak için M. abscessus haiz genomik avantajları vurgulamak için yöntemleri açıklar. Bu amaçla, M. abscessus transposon mutantlar ile taranması ilk, mutantın arızalı hücre içi büyüme için kimliği sağlar Acanthamoeba castellanii türü zorlanma üzerinde tanımlanır. Makrofajlar içinde ikinci bir tarama, bu kusur insan konukçuda devam edip etmediğini onaylamak için de bildirilmektedir. İkinci olarak, hangi mekanizmalar fagositik hayata adapte M. abscessus harnessed vardır anlamak için hücreleri ve onun virülans hayvan ev sahibi, M. abscessus için özel olarak uyarlanmış bir yöntem olduğunu artış, sonra ortak kültür geliştirilen Toplam RNA çıkarma içi amoebal bakteri izin amip huzurunda. Sonuç olarak, hücre içi bir yaşam için gerekli olan M. abscessus genler kapsamlı bir görünümünü geliştirilmiştir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:815px;" width="815">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:128px;"></td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:211px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">24-well plates</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td>11874235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">96-well plates</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">10687551</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:19px;">Beadbeater&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Bertin</td>
			<td style="width:135px;">Precellys 24</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:19px;width:341px;">Bioanalyzer</td>
			<td style="width:128px;">Agilent</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:19px;width:341px;">Genepulser Xcell</td>
			<td style="width:128px;">Biorad</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:19px;">Nanodrop spectrophotometer 2000</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:19px;">QuBit fluorometer</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">Q33226</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">zirconium beads/silica beads</td>
			<td style="width:128px;">Biospec products</td>
			<td style="width:135px;">11079101Z</td>
			<td>Beads</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:19px;width:341px;">Name of reagent/cells</td>
			<td style="width:128px;"></td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Acanthamoeba&#160;castellanii&#160;</td>
			<td style="width:128px;">ATCC</td>
			<td style="width:135px;">30010</td>
			<td>strain</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Amikacin&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Mylan</td>
			<td style="width:135px;">150927-A</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">B-mercaptoethanol&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">M6250</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CaCl2</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">C1016</td>
			<td>&#62;93% granular anhydrous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Chloroform&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Fluka</td>
			<td style="width:135px;">25666</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ClaI enzyme</td>
			<td style="width:128px;">New England Biolabs</td>
			<td style="width:135px;">R0197S</td>
			<td>enzyme</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Columbia agar&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Biomerieux</td>
			<td style="width:135px;">43041</td>
			<td>90 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">G8270&#160;</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">DMEM&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">11500596</td>
			<td>medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DNase and RNase free water&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:135px;">10977-035</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">E.&#160;coli electrocompetent&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">18265017</td>
			<td>bacteria</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">EDTA</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">E4884</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Escherichia coli&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Clinical isolate</td>
			<td style="width:135px;">personal stock</td>
			<td>bacteria</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fe(NH4)2(SO4)-6H20&#160;</td>
			<td>EMS</td>
			<td style="width:135px;">15505-40</td>
			<td>sulfate solution 4% aqueous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Calf Serum</td>
			<td style="width:128px;">Gibco</td>
			<td style="width:135px;">10270</td>
			<td>serum</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">Glycerol</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">G5516</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Guanidium thiocyanate&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Euromedex</td>
			<td style="width:135px;">EU0046-D</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isopropanol&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">I9516</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">J774.2 macrophages</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">J774.2</td>
			<td>Strain</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">kanamycin&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>60615</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">KH2PO4</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">P0662</td>
			<td>Monobasic, anhydrous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">LB liquid medium&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:135px;">12795-027</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lysozyme</td>
			<td style="width:128px;">Roche</td>
			<td style="width:135px;">10837059001</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MgSO4</td>
			<td>Labosi</td>
			<td style="width:135px;">M275</td>
			<td>pur</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">Microbank TM (cryotubes with beads)</td>
			<td style="width:128px;">Pro-Lab Diagnostic</td>
			<td style="width:135px;">PL.170/M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">Middlebrook 7H11 medium</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>M0428</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">Middlebrook 7H9 medium</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">11753473</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">M&#252;ller-Hinton agar</td>
			<td style="width:128px;">Biorad</td>
			<td>3563901</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">N-Lauryl-sarcosine</td>
			<td style="width:128px;">Merck</td>
			<td style="width:135px;">S37700 416</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Na2HPO4-7H2O</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">S9390</td>
			<td>98-102%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phenol/chloroforme&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">77617</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Proteinase K</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">EO0491</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">proteose peptone</td>
			<td>BD</td>
			<td style="width:135px;">211684</td>
			<td>enzymatic digest of animal tissue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">pUC19 plasmid</td>
			<td style="width:128px;">New England Biolabs</td>
			<td style="width:135px;">54357</td>
			<td>plasmid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SDS&#160; 20%</td>
			<td style="width:128px;">Biorad</td>
			<td style="width:135px;">1610418</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium citrate</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td style="width:135px;">567446</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thiourea</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">88810</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">Tris</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">154563</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Trizol&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td>12044977</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween 80</td>
			<td style="width:128px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">P1754&#160;</td>
			<td>solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Yeast extract&#160;</td>
			<td>BD</td>
			<td style="width:135px;">212750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:341px;">Kit</td>
			<td style="width:128px;"></td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">AMBION DNase kit&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td>10792877</td>
			<td>kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DNA Agilent Chip</td>
			<td style="width:128px;">Agilent</td>
			<td>5067-1504</td>
			<td>kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">GeneJET Plasmid Miniprep kit&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">K0503</td>
			<td>kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PureLink PCR Purification kit</td>
			<td style="width:128px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:135px;">K310001</td>
			<td>kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quant-It&#34; assays kit</td>
			<td style="width:128px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:135px;">Q33140/Q32884</td>
			<td>kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">T4 DNA ligase&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:135px;">Y90001</td>
			<td>kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TruSeq Stranded RNA LT prep kit</td>
			<td style="width:128px;">Illumina</td>
			<td>15032611</td>
			<td>kit</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification of virulence markers of mycobacterium abscessus for intracellular replication in phagocytes

Ne diğer saprofit mikobakteriler Mycobacterium abscessus farkı insan makrofajlar tarafından fagositoz direnmeye becerisi ve yeteneği bu tür hücrelerin içinde çarpmak için olduğunu. Bu virülans Özellikler M. abscessus patojen, özellikle de temel yapısal akciğer hastalığı, kistik fibrozis, bronşiektazi veya tüberküloz gibi savunmasız ailelerle render. Nasıl hastalar M. abscessus ile enfekte olma belirsizdir. Aksine birçok mikobakteriler, M. abscessus ortamında bulunmayan ancak amip, M. abscessusiçin potansiyel bir rezervuar temsil çevre fagositler içinde bulunur. Nitekim, M. abscessus amoebal fagositoz dayanıklıdır ve M. abscessus virülans enfeksiyon, deneysel bir modeli artırmak için Intra-amip hayat gibi görünüyor. Ancak, az M. abscessus virülans kendisi hakkında bilinir. M. abscessus hücre içi yaşam için bir avantaj veriyor genlerin deşifre için M. abscessus transposon mutant kitaplığa bir tarama geliştirilmiştir. Buna paralel olarak, hücre içi mikobakteriler RNA çıkarma amip ile ortak kültür sonra bir yöntem geliştirildi. Bu yöntem doğrulanmış ve bütün M. abscessus sıralama izin transcriptomes hücrelere; , ilk kez, M. abscessus adaptasyon hücre içi yaşam için bir genel görünüm sağlar. Her iki yaklaşımın insanlarda airways kolonize etmek M. abscessus etkinleştirmek M. abscessus virülans faktörleri içine bir fikir verin.

M. abscessus karşı ve makrofajlar ve çevresel tek hücreli amipler gibi bakteri yok edici yanıt-e doğru kaçmak için yeteneği vardır. M. abscessus fareler4' te daha öldürücü kılan amip ile temas büyüdü virülans faktörleri ifade eder. M. abscessus , hayatta kalma ve amip içinde çarpma sağlayan mevcut genlerin tanımlamak için bu yöntemlerden ilk hedefi oldu.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="1...

Watch this Scientific Journal Video about Identification of Virulence Markers of Mycobacterium abscessus for Intracellular Replication in Phagocytes at JoVE.com

Identification of Virulence Markers of Mycobacterium abscessus for Intracellular Replication in Phagocytes

Burada, hücre -Mycobacterium abscessus etkileşimleri çalışmaya iki protokol mevcut: transposon mutant kitaplığa bakteriyel hücre içi eksikliği ve bakteriyel hücre içi transcriptome RNA üzerinden belirlenmesi için tarama sıralama. Her iki yaklaşımın genomik avantajları ve hücre içi bakteri fitness artırılması transcriptomic uyarlama içgörü sağlamak.

Mycobacterium abscessus virülans işaretleri tanımlaması fagositler hücre içi çoğaltma için

What differentiates Mycobacterium abscessus from other saprophytic mycobacteria is the ability to resist phagocytosis by human macrophages and the ability ...

Hücre içi patojenlerin mutant kütüphane taraması ve transkripsiyonçalışmaları, konak içinde hayatta kalmak için kullanılan ilgi patojenlerinin genomik ve düzenleyici adaptasyonları hakkındaki anahtar soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniklerin başlıca avantajları, büyük ölçekli araştırma teknikleri olmaları ve hücre içi yaşama adaptasyona objektif bir bakış açısı sağlamalarıdır. Bu tekniklerin etkileri aşı tedavisi için potansiyel hedeflere fikir vererek bu hastalıkla ilişkilendirmek Mycobacterium apse tedavisi doğru uzanır.Oda sıcaklığında 75 santimetre kare doku kültürü şişelerinde Peptone Maya Glikoz orta 30 mililitre amip Acanthamoeba castellani veya Ac, culturing tarafından başlayın. Bir saat sonra supernatant kaldırmak için 25 mililitrelik pipet kullanın ve yıkama başına karbon veya azot olmadan Ac tampon 10 mililitre ile hücreleri üç kez yıkayın. Son yıkamadan sonra, tek bir güçlü sallamak ile şişenin altından amip ayırmak ve beş kez 10 taze Ac tampon mil konsantrasyonu başına beş amip için, bir Falcon tüp hücreleri ayarlayın.Tohum beş kez 10 iyi bir 96-iyi plaka başına dört amip. Yüzen amip tropho-zoites kuyulara uymak için izin vermek için, sallayarak olmadan bir saat boyunca 32 derece santigrat plaka yerleştirin. Bu arada, buz üzerinde bakteri Sıcak, ve kuluçka sonunda her kuyuya çözülmüş bakterilerin beş mikrolitre ekleyin.32 santigrat derece de 1,5 saat sonra, bir duman kaputunun altında steril bir metal tepsisteril metal tepsi üzerine steril gazlı bez bir yığın üzerine plaka ters koyarak supernatant atın. Her kuyuda her üç kez her kuyuda 200 mikrolitre taze Ac ortamı ile yıkayın. Son yıkamadan sonra, iki saat boyunca kalan ekstrasellüler mikobakterileri ortadan kaldırmak için, iyi başına amikasin ile takviye taze orta 20 mikrolitre ile co-kültür kuluçka.Taze Ac ortamda üç yıkar ardından, sadece gösterildiği gibi. Sonra, orta 200 mikrolitre ekleyin, her kuyuya taze amikasin ile takviye, yedi ısı inaktive Escherichia coli bakteri beş kez 10 eklenmesi izledi. 48 saat sonra hücreleri kuyu başına %10 sodyum dodeyl sülfat 10 mikrolitre, 32 santigrat derecede 30 dakika boyunca lyse ile lyse ve %5 koyun kanı içeren Columbia Agar plakalarına 5 mikrolitre lysate yayın.Her damlaya 25 mikrolitre steril su ekleyerek lysatları daha da seyreltin. Tüm lysates kaplanmış zaman, plastik parafin film ile plakaları mühür ve 37 santigrat derece 3-4 gün boyunca kültürleri kuluçka. Koloniler plakalar üzerinde göründüğünde, kültürleri fotoğraflamak ve bakteri kolonileri en düşük sayıda mevduat tarafından hücre içi büyüme için bozulmuş mutantlar belirlemek.Hücre içi mikobakteri RNA ekstraksiyonu için, ilk olarak 120 RPM'de 50 mililitrelik tüplerde gliserol ve glikoz ile orta üstel faza gliserol ve glikoz ile takviye 7H9 orta m.apse büyümek. Kültürün sonunda, yıkama başına 10 mililitre Ac tamponu ile bakterileri iki kez yıkayın ve bakteri konsantrasyonu tahmin etmek için O.D.600 ölçün. Sonra, 8.5 kez 10 sekiz mikobakteri için 8.5 kez 10 altı amip taze Ac orta 10 mililitre bir saat kuluçka için 30 derece santigrat ve 80 RPM ekleyin.Kuluçka sonunda, santrifüj ile hücreleri hasat ve aynı santrifüj koşulları altında yıkama başına taze Ac tampon 10 mililitre üç kez pelet yıkayın. Sonra herhangi bir ekstrasellüler bakterileri ortadan kaldırmak için amikasin ile desteklenen taze Ac tampon 10 mililitre hücreleri yeniden askıya, ve 30 santigrat derece ve 80 RPM dört saat boyunca hücreleri kuluçka, taze Ac tampon iki yıkar takip. Son yıkamadan sonra, soğuk çözelti üç dört mililitre enfekte amip yeniden askıya, beta merkaptoetanol 280 mikrolitre ile takviye 10 dakika boyunca buz üzerinde amip bozmak için.Kuluçka sonunda, serbest bırakılan hücre içi bakterileri pelet hücre lizatsan, ve soğuk çözelti üç bir mililitre bakteriyel pelet yeniden askıya. Bu amip RNA veya örnekleri yapmış olabilir proteazlar ile kontaminasyonu önlemek için tüm supernatant kaldırmak önemlidir. Hasat ikinci bir santrifüj ile serbest bakteri, ve ekstraksiyon tampon bir mililitre pelet yeniden askıya.Sonra 24 saat boyunca negatif 80 santigrat derecede kuluçkaya yat. 500 mikrolitrelik geçiş işaretine kadar zirkonyum boncuk içeren iki milikobakteriyel çözeltiye mikobakteriyel çözeltiyi aktarın ve Tüpleri RNA syn aktivasyonu ve hücre çözünmesini kolaylaştırmak için negatif 80 santigrat derecede 24 saat daha saklayın. Analiz günü, buz üzerinde örnekleri eritin ve 25 saniye boyunca 6000 RPM homojenizasyon iki tur ile hücreleri lyse, 20 saniye için 6000 RPM bir yuvarlak homojenizasyon izledi.Homojenizasyonun her turu arasında, RNA bozulmasını önlemek için numuneleri buz üzerinde bir dakika soğutun. Homojenizasyon üçüncü tursonra, 20 dakika buz üzerinde örnekleri serin ve her tüp için isoamyl alkol seyreltilmiş kloroform 200 mikrolitre ekleyin. Bir dakika girdap, sonra örnekleri santrifüj ve negatif 20 santigrat derecede 2-3 saatlik kuluçka için sulu faz soğuk izopropanol 0.8 mililitre ekleyin.Kuluçka sonunda, numuneleri tekrar santrifüj edin ve peletleri 500 mikrolitre soğuk %70 etanolde karıştırmadan yıkayın. Sonra hemen santrifüj ile etanol çıkarın. Bir santrifüj konsantratörü nde pelet kurutmak için supernatant aspire ve DNA / RNA içermeyen su 100 mikrolitre pelet yeniden askıya.Gösterildiği gibi Mikobakteriyel MRNA ekstraksiyonu, indüklenen ve bastırılmış gen ailelerinin, besin ve mineral kaynağında sınırlı bir ortama veya hipoksik veya asidik bir ortama yanıt vermedeki rollerine göre genleri gruplandırarak değerlendirilmesine olanak sağlar. Oksidatif ve nitrosatif strese karşı direnç, ya da çevresel amip yanıt olarak virülans faktörlerin ekspresyonu. Bu yordamları denerken, toplu iş efektlerini önlemek için kontrollü ve enfekte örneklerin kültür ve RNA yalıtımını aynı anda gerçekleştirmeyi unutmamak önemlidir.Bu prosedürü takiben, çift RNA dizilemesi gibi diğer yöntemler konak patojen etkileşimleri hakkında ek soruları cevaplamak için önceden oluşturulabilir. Bu teknik, geliştirildikten sonra, mikrobiyoloji alanında araştırmacıların amip konak modelinde mikobakteri virülansına doğru önünü açtı. Eğer prosedürde açıklanan adımları takip etmezseniz amip kistler dönüşebilir gibi amip ile çalışan son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Identification of Virulence Markers of Mycobacterium abscessus for Intracellular Replication in Phagocytes

Dissecting Host-virus Interaction in Lytic Replication of a Model Herpesvirus

Model Herpesvirüs Litik çoğaltma Diseksiyon Host-virüs Etkileşim

In response to viral infection, a host develops various defensive responses, such as activating innate immune signaling pathways that lead to antiviral ...

Sample Preparation of Mycobacterium tuberculosis Extracts for Nuclear Magnetic Resonance Metabolomic Studies

Sample Preparation of Mycobacterium tuberculosis Extracts for Nuclear Magnetic Resonance Metabolomic Studies

Numune Hazırlama<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</emNükleer Manyetik Rezonans metabolomik Araştırmaları&gt; özler

Mycobacterium tuberculosis is a major cause of mortality in human beings on a global scale. The emergence of both multi- (MDR) and extensively-(XDR) ...

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

Büyüme Mycobacterium tuberculosis Biyofilmler

Mycobacterium tuberculosis, the etiologic agent of human tuberculosis, has an extraordinary ability to survive against environmental stresses including ...

Purification of Pathogen Vacuoles from Legionella-infected Phagocytes

Purification of Pathogen Vacuoles from Legionella-infected Phagocytes

Patojen Vakuoller saflaştırılması gelen<em&gt; Legionella</em&gt;-Enfekte Fagositler

The opportunistic pathogen Legionella pneumophila is an amoeba-resistant bacterium, which also replicates in alveolar macrophages thus causing the severe ...

Following in Real Time the Impact of Pneumococcal Virulence Factors in an Acute Mouse Pneumonia Model Using Bioluminescent Bacteria

Biyoluminesen Bakteriler Kullanılarak Gerçek Zamanda Bir Akut Fare Pnömoni Modelinde Pnömokok virulans faktörlerinin etkisi aşağıdaki

Pneumonia is one of the major health care problems in developing and industrialized countries and is associated with considerable morbidity and mortality. ...

Applying an Inducible Expression System to Study Interference of Bacterial Virulence Factors with Intracellular Signaling

Bir uyarılabilir İfade Sistemi uygulamak Hücre içi Sinyali ile Bakteriyel Virulans Faktörler Girişim Eğitim için

The technique presented here allows one to analyze at which step a target protein, or alternatively a small molecule, interacts with the components of a ...

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

Görüntüleme Patogenez ve Cording Deşifre ve<em&gt; Mycobacterium abscessus</em&gt; Zebra balığı Embriyolar

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as an infection model to study the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

İnsan Nötrofil türetilmiş Dev Fagositler bir Roman ICSI&#39;nin Gelişimi ve Kimlik<em&gt; İn Vitro</em

Neutrophils (PMN) are best known for their phagocytic functions against invading pathogens and microorganisms. They have the shortest half-life amongst ...

System for Efficacy and Cytotoxicity Screening of Inhibitors Targeting Intracellular Mycobacterium tuberculosis

System for Efficacy and Cytotoxicity Screening of Inhibitors Targeting Intracellular Mycobacterium tuberculosis

Hücre içi Hedefleme İnhibitörleri Etkinliği ve Sitotoksisite Taraması için sistem<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em

Mycobacterium tuberculosis, the causative agent of tuberculosis (TB), is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. With the increased spread ...

Quantification of Intracellular Growth Inside Macrophages is a Fast and Reliable Method for Assessing the Virulence of Leishmania Parasites

Quantification of Intracellular Growth Inside Macrophages is a Fast and Reliable Method for Assessing the Virulence of Leishmania Parasites

Hızlı ve güvenilir yöntem LEISHMANIA parazit virülans değerlendirmek için hücre içi büyüme makrofajlar içinde miktar olduğunu

The lifecycle of Leishmania, the causative agent of leishmaniasis, alternates between promastigote and amastigote stages inside the insect and vertebrate ...