Name: stiffness measurement of soft silicone substrates for mechanobiology studies using a widefield fluorescence microscope
Uploaded: 2018-07-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stiffness Measurement of Soft Silicone Substrates for Mechanobiology Studies Using a Widefield Fluorescence Microscope at JoVE.com

Wij danken Margaret Gardel voor royaal waardoor het gebruik van de rheometer. Wij erkennen de steun van de NIH (1R15GM116082), die dit werk ingeschakeld.

1. fabricage van zachte siliconen coating
<ol><li>Weeg 1.75 g van de een-component en 1,75 g van de B-component (A:B = 1:1) uit de zachte silicone-elastomeer kit met behulp van (polystyreen) met een gewicht van trays.</li>
	<li>De een-component toevoegen aan de B-component in de wegen lade en meng ze samen voor 5 min met behulp van een passende applicator stick.</li>
	<li>Het bovenstaande mengsel toevoegen aan een 35 mm petrischaal. Laat het mengsel gelijkmatig verspreid over de petrischaal voor een paar minuten. Op...

<ol>
	<li>Handorf, A. M., Zhou, Y., Halanski, M. A., Li, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+stiffness+dictates+development,+homeostasis,+and+disease+progression.">Tissue stiffness dictates development, homeostasis, and disease progression.</a> Organogenesis. 11 (1), 1-15 (2015).</li><li>Pelham, R. J., Wang, Y. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+locomotion+and+focal+adhesions+are+regulated+by+substrate+flexibility.">Cell locomotion and focal adhesions are regulated by substrate flexibility.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (25), 13661-13665 (1997).</li><li>Lo, C. M., Wang, H. B., Dembo, M., Wang, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+movement+is+guided+by+the+rigidity+of+the+substrate.">Cell movement is guided by the rigidity of the substrate.</a> Biophysical Journal. 79, 144-152 (2000).</li><li>Discher, D. E., Janmey, P., Wang, Y. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+cells+feel+and+respond+to+the+stiffness+of+their+Substrate.">Tissue cells feel and respond to the stiffness of their Substrate.</a> Science. 310, 1139-1143 (2005).</li><li>Kandow, C. E., Georges, P. C., Janmey, P. A., Beningo, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyacrylamide+hydrogels+for+cell+mechanics:+steps+toward+optimization+and+alternative+uses.">Polyacrylamide hydrogels for cell mechanics: steps toward optimization and alternative uses.</a> Methods in Cell Biology. 83, 29-46 (2007).</li><li>Johnston, I. D., McCluskey, D. K., Tan, C. K. L., Tracey, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+characterization+of+bulk+Sylgard+184+for+microfluidics+and+microengineering.">Mechanical characterization of bulk Sylgard 184 for microfluidics and microengineering.</a> Journal of Micromechanics and Microengineering. 24 (3), 035017 (2014).</li><li>Style, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traction+force+microscopy+in+physics+and+biology.">Traction force microscopy in physics and biology.</a> Soft Matter. 10 (23), 4047-4055 (2014).</li><li>Lee, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+the+cytoplasmic+domain+of+N-cadherin+reduces,+but+does+not+eliminate,+traction+force-transmission.">Deletion of the cytoplasmic domain of N-cadherin reduces, but does not eliminate, traction force-transmission.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 478 (4), 1640-1646 (2016).</li><li>Frey, M. T., Engler, A., Discher, D. E., Lee, J., Wang, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+methods+for+measuring+the+elasticity+of+gel+substrates+for+cell+culture:+microspheres,+microindenters,+and+atomic+force+microscopy.">Microscopic methods for measuring the elasticity of gel substrates for cell culture: microspheres, microindenters, and atomic force microscopy.</a> Methods Cell Biol. 83, 47-65 (2007).</li><li>Lee, D., Rahman, M. M., Zhou, Y., Ryu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+confocal+microscopy+indentation+method+for+hydrogel+elasticity+measurement.">Three-dimensional confocal microscopy indentation method for hydrogel elasticity measurement.</a> Langmuir. 31 (35), 9684-9693 (2015).</li><li>Dimitriadis, E. K., Horkay, F., Maresca, J., Kachar, B., Chadwick, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+elastic+moduli+of+thin+layers+of+soft+material+using+the+atomic+force+microscope.">Determination of elastic moduli of thin layers of soft material using the atomic force microscope.</a> Biophysical Journal. 82 (5), 2798-2810 (2002).</li><li>Hertz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#220;ber+die+Beru&#776;hrung+fester+elastischer+Ko&#776;rper.">&#220;ber die Beru&#776;hrung fester elastischer Ko&#776;rper.</a> Journal f&#252;r die reine und angewandte Mathematik. 92, 156-171 (1882).</li><li>Azioune, A., Carpi, N., Tseng, Q., Th&#233;ry, M., Piel, M., Cassimeris, L., Tran, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+micropatterns:+a+direct+printing+protocol+using+deep+UVs.">Protein micropatterns: a direct printing protocol using deep UVs.</a> Microtubules: In Vivo. , 133-146 (2010).</li><li>Bashirzadeh, Y., Qian, S., Maruthamuthu, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-intrusive+measurement+of+wall+shear+stress+in+flow+channels.">Non-intrusive measurement of wall shear stress in flow channels.</a> Sensors and Actuators A: Physical. 271, 118-123 (2018).</li><li>Muhamed, I., Chowdhury, F., Maruthamuthu, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biophysical+tools+to+study+cellular+mechanotransduction.">Biophysical tools to study cellular mechanotransduction.</a> Bioengineering (Basel). 4 (1), 12 (2017).</li><li>Dumbali, S. P., Mei, L., Qian, S., Maruthamuthu, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+sheet-averaged+tension+within+a+large+epithelial+cell+colony.">Endogenous sheet-averaged tension within a large epithelial cell colony.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 139 (10), 101008 (2017).</li></ol>

Terwijl de bol inspringing methode eenvoudig is te implementeren, moet zorgvuldig aandacht worden besteed aan de keuze van de indentor en de dikte van het monster van de siliconen. De vergelijking voor de berekening van de Youngs modulus is geldig onder een aantal voorwaarden11en deze meestal wordt voldaan wanneer de dikte van het monster silicone > 10% van de indentor-straal is en < ~ 13 x de straal van de indentor. We vonden dat een siliconen dikte van 5-10 x de straal van de indentor een goede ...

Cellen in zachte weefsels bevinden zich in een micro-omgeving waarvan stijfheid is in kilopascal bereik1, in tegenstelling tot weefselkweek gerechten waarvan stijfheid verschillende ordes van grootte hoger is. Vroege experimenten met cellen in de extracellulaire matrix eiwitten-bedekt zachte ondergronden toonde aan dat de stijfheid van het substraat beïnvloedt hoe cellen verplaatsen op, alsmede voldoen aan de extracellulaire matrix onder2,3. In feite, beïnvloedt de stijfheid van het substraat fundamenteel de cel functie4 op een wijze vergelijkbaar met doordringende biochemische signalen. Polyacrylamide gels (bekleed met extracellulaire matrix eiwitten) zijn (water-doordringt) hydrogels die intensief zijn gebruikt als cel cultuur substraten voor mechanobiology5 bestudeert. Polydimethylsiloxaan (PDMS), de meest voorkomende silicone (polysiloxaan), wijd gebruikt als een stijve siliconen met megapascal gasgroep stijfheid voor micron-schaal fabricage6. Meer recentelijk, zachte siliconen substraten met stijfheid in het meer fysiologisch relevante kilopascal bereik hebben gewerkt als cel cultuur substraten voor mechanobiology studies7,8.
Verschillende methoden zijn gebruikt voor het meten van de stijfheid van flexibele substraten, met inbegrip van atomaire kracht microscopie, macroscopische vervorming van hele monsters op zich het uitrekken, reologie en inspringen met behulp van bollen en sferisch getipt microindentors9 . Terwijl elke techniek zijn eigen voor- en nadelen heeft, is inspringen met een bol een bijzonder eenvoudige nog vrij nauwkeurige methode waarvoor alleen de toegang tot een widefield fluorescentie Microscoop. Inspringen met een metalen bol is gebruikt voor het meten van de stijfheid van de hydrogels in eerder werk3,9,10. Vroege werk dat het belang van substraat stijfheid aan cel beweging aangetoond gebruikt deze methode om te bepalen van hydrogel substraat stijfheid3. Confocale microscopie is recenter, ook gebruikt voor een elegante karakterisering10.
Hier presenteren we een stapsgewijze protocol voor het voorbereiden van een zacht siliconen substraat, koppeling van fluorescerende kralen (en een extracellulaire matrix eiwitten zoals collageen ik) gewoon aan de bovenste oppervlakte, imaging een inspringen sfeer en de bovenste oppervlakte met behulp van fase en fluorescentie imaging, respectievelijk, en ten slotte analyseren van de beelden om te berekenen van de Youngs modulus van de siliconen coating. Het zachte silicone substraat voorbereid op deze wijze kan gemakkelijk worden gebruikt voor tractie kracht microscopie experimenten. Het gebruik van stijve siliconen (in plaats van een petrischaal) als basis voor de zachte siliconen kan ook mechanobiology studies met een externe stretch. Gerechtvaardigde klachten zijn ook praktische overwegingen nodig voor het vermijden van mogelijke complicaties aangegeven.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="949">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:353px;">CY 52-276 A/B silicone elastomer kit</td>
			<td style="width:191px;">&#160;Dow Corning</td>
			<td style="width:144px;">CY 52-276</td>
			<td style="width:263px;">Store at room temperature</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thermo Scientific Pierce EDC</td>
			<td style="width:191px;">Fisher Scientific</td>
			<td>PI22980</td>
			<td>Store at -20&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thermo Scientific&#160;Pierce Sulfo-NHS crosslinker</td>
			<td style="width:191px;">Fisher Scientific</td>
			<td>PI-24510</td>
			<td>Store at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Carboxyl fluorescent pink particles, 0.4-0.6 &#181;m, 2 mL</td>
			<td>Spherotech, Inc.</td>
			<td>CFP-0558-2</td>
			<td>Store at 4&#176;C, do not freeze</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1.0 mm Acid washed Zirconium beads</td>
			<td style="width:191px;">OPS Diagnostics LLC</td>
			<td>BAWZ 1000-250-33</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:353px;">Deep UV chamber with ozone evacuator</td>
			<td style="width:191px;">Novascan Technologies, Inc.</td>
			<td style="width:144px;">PSD-UV4, OES-1000D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Wide field fluorescence microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica Microsystems</td>
			<td style="width:144px;">DMi8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Collagen I, from rat tail</td>
			<td style="width:191px;">Corning</td>
			<td style="width:144px;">354236</td>
			<td>Stock concentration = 4 mg/ml; store at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">ImageJ-NIH</td>
			<td style="width:191px;">N/A</td>
			<td style="width:144px;">N/A</td>
			<td>public-domain software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

stiffness measurement of soft silicone substrates for mechanobiology studies using a widefield fluorescence microscope

Zachte weefsels in het menselijk lichaam hebben meestal stijfheid in het bereik kilopascal (kPa). Dienovereenkomstig, siliconen en hydrogel flexibele substraten hebben bewezen nuttig substraten voor het kweken van cellen in een fysieke communicatie dat gedeeltelijk in vivo voorwaarden nabootst. Hier presenteren we een eenvoudig protocol voor het karakteriseren van de Youngs moduli isotrope lineaire elastische ondergronden meestal gebruikt voor mechanobiology studies. Het protocol bestaat uit voorbereiding van een zacht siliconen substraat in een petrischaal of stijve siliconen coating van de oppervlaktelaag van de siliconen coating met fluorescerende kralen, met behulp van een millimeter-schaal bol laten inspringen van de oppervlaktelaag (door zwaartekracht), de TL imaging kralen op de ingesprongen siliconen oppervlak met behulp van een fluorescentie Microscoop, en het analyseren van de resulterende afbeeldingen als u wilt berekenen van de Youngs modulus van de siliconen coating. Koppeling van de oppervlaktelaag van het substraat met een moduli extracellulaire matrix eiwitten (naast de fluorescerende kralen) kan het siliconen substraat te gemakkelijk worden gebruikt voor de cel plating en latere studies met behulp van tractie kracht microscopie experimenten. Het gebruik van stijve silicone, in plaats van een petrischaaltje, als basis voor de zachte siliconen, maakt het gebruik van mechanobiology studies waarbij externe stretch. Een specifieke voordeel van dit protocol is dat een widefield fluorescentie Microscoop, die gewoonlijk beschikbaar in vele labs is, belangrijke uitrusting die nodig is voor deze procedure. We laten zien van dit protocol door het meten van de Youngs modulus van zachte siliconen substraten voor verschillende elastische moduli.

Met behulp van het protocol die hierboven is uiteengezet, wij bereid siliconen in een 35 mm petrischaal, uitharden kan het oppervlak bij 70 ° C gedurende 30 minuten en combinatie van fluorescent microbeads (en collageen ik) naar de bovenste oppervlakte als schematisch afgebeeld in figuur 1. Diepe UV nog eerder is gebruikt voor de uiteindelijke proteïne koppelen aan substraten13. Opmerking (I) de uithardende voorwaarden die hier ...

Watch this Scientific Journal Video about Stiffness Measurement of Soft Silicone Substrates for Mechanobiology Studies Using a Widefield Fluorescence Microscope at JoVE.com

Stiffness Measurement of Soft Silicone Substrates for Mechanobiology Studies Using a Widefield Fluorescence Microscope

Ondergronden met stijfheid in het kilopascal-bereik zijn nuttig zijn te onderzoeken van de reactie van cellen op fysiologisch relevante stijfheid van de micro-omgeving. Met behulp van slechts een widefield fluorescentie Microscoop, kan de Youngs modulus van zachte siliconen gel worden bepaald met behulp van een inkeping met een geschikt gebied.

Meting van de stijfheid van zachte siliconen substraten voor Mechanobiology Studies met een Widefield fluorescentie Microscoop

Soft tissues in the human body typically have stiffness in the kilopascal (kPa) range. Accordingly, silicone and hydrogel flexible substrates have been ...

This method can be used to categorize substrates used to study key phenomena in mechanobiology, the cell migration and first generation. The main advantage of this technique is that it requires the use of a wide-field microscope, a piece of equipment that is commonly available in many labs. This method can be applied to measure the Young's modulus of silicon or polyacrylamide gel, as well as any of the soft isotropic linear elastic material.The substrate's prepared and characterized by this method can also be used for self-stretching experiments with the stiff silicone base. To fabricate the soft silicone substrate after weighting out about 1.75 grams each of components A and B from the soft silicone elastomer kit, add most of the weighed portion of component A to the B component polystyrene weighing tray and use an appropriate applicator stick to mix the two components together for five minutes. Transfer the mixture to a 35 millimeter Petri dish and allow the substrate to spread evenly across the Petri dish for a few minutes.Next, place the Petri dish in a vacuum chamber for 15 minutes to remove any air bubbles and pre-heat a hot plate. When the hot plate reaches 70 degrees Celsius, place a glass slide onto the hot plate, and place the Petri dish onto the glass side. Then, let the silicone cure at 70 degrees Celsius for 30 minutes.To couple the soft silicone with fluorescent beads, place the cured silicone in a deep UV chamber, five to ten centimeters away from the UV lamp and expose the sample to deep UV light for five minutes. While the silicone is being treated, dissolve 19 milligrams of EDC in 500 microliters of deionized water in a 1.5 milliliter microcentrifuge tube. And vortex the tube to dissolve the chemical.Next, add 500 microliters of deionized water to 11 milligrams of sulfo-NHS in a second 1.5 milliliter tube. And vortex to dissolve the chemical. Then, combine the EDC and sulfo-NHS solutions into a single microcentrifuge tube.Now, add 30 microliters of an appropriate suspension of fluoro-4 conjugated carboxylate-modified micro-beads and 0.02 milligrams of rat tail Collagen 1 to the mixture. After briefly vortexing, place a piece of Parafilm onto the lid of a second smaller diameter lid and transfer one milliliter of the EDC-NHS bead Collagen 1 mixture to the Parafilm. Invert the Petri dish containing the soft silicone over the mixture, supporting the dish on both sides with two glass slides, so that the soft silicone surface contacts the bead solution without directly touching the surface of the smaller diameter lid below.Then, cover the sample with aluminum foil for 30 minutes at room temperature, before washing the silicone two times, with two milliliters of PBS per wash and let the silicon cure upright in two milliliters of fresh PBS at 37 degrees Celsius overnight. The next morning, use pointed tweezers to drap five millimeter zirconium sphere indentors onto the soft silicone under at least one milliliter of PBS away from the edges of the silicone layer and at least five indentor diameters away from the location of the other indentors. Next, place the dish of soft silicon onto a wide-field microscope stage and use the 10x objective to obtain a phase image of a whole indentor without any visible defects.After saving the image, select the appropriate fluorescent channel for visualizing the fluorescent micro-beads. With the indentor center near the right edge of the frame, decrease the z-coordinates until the fluorescent micro-beads under the sphere indentor's center go just out of focus. Then, acquire a z-stack with an image for every 0.5 micrometer z-increment until the micro-beads in the top layer of the silicone near the left edge of the imaging frame come in and then out of focus.To calculate the silicone stiffness, first, open the indentor phase image in ImageJ and click analyze and set scale and check unit of length to confirm that the length is set to pixels. Using the line tool, click and hold onto a point on the indentor edge, moving the cursor to a point on the diametrically opposite edge, to measure the diameter of the indentor and note the length in pixels on the status bar of the ImageJ main window before releasing the cursor. Next, open the file menu and select import an image sequence to allow an image in the z-stack of fluorescent micro-bead images to be selected and click okay to open the stack.Using the line tool, draw a line across a well-defined micro-bead in one image and click analyze plot profile in live to obtain the updated line scan intensity across the bead, while selecting different frames. The frame that gives the highest value of the maximum intensity can then be selected as the frame in focus. Fluorescence images of the micro-beads in the top surface of the silicone taken at an x-y frame position, places the region under the indentor to the far-right side of the frame.The region on the far-left side of the frame is then selected as the region away from the indentor. In this representative set of intensity line scans measured across a single micro-bead, the focus varies in z-increments of 0.5 micrometers. The z-value corresponding to the in-focus image can then be objectively selected based on the z-value corresponding to the line scan with the highest maximum intensity.Here, the Young's modulus of the silicone for various A:B component mixture ratios, was obtained based on the method as just demonstrated. After watching this video, you should have a good understanding of how to prepare soft silicone substrates, cup the fluorescent beads to them, and measure the stiffness of the substrate using a wide-field fluorescent microscope.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Het creëren van twee-dimensionale Patterned Substraten voor eiwit en Cell opsluiting

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Time-lapse Fluorescence Imaging of Arabidopsis Root Growth with Rapid Manipulation of The Root Environment Using The RootChip

Time-lapse fluorescentie beeldvorming van Arabidopsis wortelgroei met Rapid Manipulatie van het wortelmilieu Het gebruik van de RootChip

The root functions as the physical anchor of the plant and is the organ responsible for uptake of water and mineral nutrients such as nitrogen, ...

Cell Patterning on Photolithographically Defined 
Parylene-C: SiO2 Substrates

Cell Patterning on Photolithographically Defined 
Parylene-C: SiO2 Substrates

Cel Patterning op fotolithografisch Defined Parylene-C: SiO<sub&gt; 2</sub&gt; Substrates

Cell patterning platforms support broad research goals, such as construction of predefined in vitro neuronal networks and the exploration of certain ...

Quantitative Optical Microscopy: Measurement of Cellular Biophysical Features with a Standard Optical Microscope

Kwantitatieve Optische Microscopie: Meting van Cellulaire biofysische eigenschappen met een standaard optische microscoop

We describe the use of a standard optical microscope to perform quantitative measurements of mass, volume, and density on cellular specimens through a ...

3D Orbital Tracking in a Modified Two-photon Microscope: An Application to the Tracking of Intracellular Vesicles

3D Orbital Tracking in een gemodificeerde twee-foton microscoop: een toepassing op het volgen van intracellulaire blaasjes

The objective of this video protocol is to discuss how to perform and analyze a three-dimensional fluorescent orbital particle tracking experiment using a ...

From Fast Fluorescence Imaging to Molecular Diffusion Law on Live Cell Membranes in a Commercial Microscope

Van Fast Fluorescentie Imaging om moleculaire diffusie wet op de Live-celmembranen in een Commercial Microscoop

It has become increasingly evident that the spatial distribution and the motion of membrane components like lipids and proteins are key factors in the ...

Isolation of Primary Human Colon Tumor Cells from Surgical Tissues and Culturing Them Directly on Soft Elastic Substrates for Traction Cytometry

Isolatie van primaire humane Colon tumorcellen uit Chirurgische weefsels en kweken ze rechtstreeks op zachte elastische substraten voor Traction Cytometry

Cancer cells respond to matrix mechanical stiffness in a complex manner using a coordinated, hierarchical mechano-chemical system composed of adhesion ...

Simple Polyacrylamide-based Multiwell Stiffness Assay for the Study of Stiffness-dependent Cell Responses

Eenvoudige-Polyacrylamide gebaseerde Multiwell Stiffness Assay voor de Studie van stijfheid-afhankelijke cel responsen

Currently, most of the in vitro cell research is performed on rigid tissue culture polystyrene (~1 GPa), while most cells in the body are attached to a ...

Composite Scaffolds of Interfacial Polyelectrolyte Fibers for Temporally Controlled Release of Biomolecules

Composiet Steigers van Interfacial Polyelectrolyte vezels voor stoffelijk Controlled Release van biomoleculen

Various scaffolds used in tissue engineering require a controlled biochemical environment to mimic the physiological cell niche. Interfacial ...

Soft Lithographic Procedure for Producing Plastic Microfluidic Devices with View-ports Transparent to Visible and Infrared Light

Zachte lithografische Procedure voor de productie van kunststof Microfluidic apparaten met weergave-poorten transparant voor zichtbaar en infrarood licht

Infrared (IR) spectro-microscopy of living biological samples is hampered by the absorption of water in the mid-IR range and by the lack of suitable ...