Name: decellularization and recellularization methodology for human saphenous veins
Uploaded: 2018-07-27T13:30:00
Duration: 11 min 35 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Decellularization and Recellularization Methodology for Human Saphenous Veins at JoVE.com

Мы хотели бы поблагодарить профессор Anders Джепсона за помощь в предоставлении кровеносных сосудов, используемых в экспериментах. Это исследование финансируется грантом LUA ALF для SSH.

<ol>
	<li>Brockbank, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+cryopreservation+upon+vein+function+in+vivo.">Effects of cryopreservation upon vein function in vivo.</a> Cryobiology. 31 (1), 71-81 (1994).</li><li>O'Donnell, T. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+operative+findings+with+angiographic+and+noninvasive+hemodynamic+factors+associated+with+failure+of+polytetrafluoroethylene+grafts.">Correlation of operative findings with angiographic and noninvasive hemodynamic factors associated with failure of polytetrafluoroethylene grafts.</a> Journal of Vascular Surgery. 1 (1), 136-148 (1984).</li><li>Atala, A., Bauer, S. B., Soker, S., Yoo, J. J., Retik, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-engineered+autologous+bladders+for+patients+needing+cystoplasty.">Tissue-engineered autologous bladders for patients needing cystoplasty.</a> Lancet. 367 (9518), 1241-1246 (2006).</li><li>Raya-Rivera, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-engineered+autologous+urethras+for+patients+who+need+reconstruction:+an+observational+study.">Tissue-engineered autologous urethras for patients who need reconstruction: an observational study.</a> Lancet. 377 (9772), 1175-1182 (2011).</li><li>Macchiarini, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+transplantation+of+a+tissue-engineered+airway.">Clinical transplantation of a tissue-engineered airway.</a> Lancet. 372 (9655), 2023-2030 (2008).</li><li>Olausson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+an+allogeneic+vein+bioengineered+with+autologous+stem+cells:+a+proof-of-concept+study.">Transplantation of an allogeneic vein bioengineered with autologous stem cells: a proof-of-concept study.</a> Lancet. 380 (9838), 230-237 (2012).</li><li>Olausson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Application+of+Tissue-Engineered+Veins+Using+Autologous+Peripheral+Whole+Blood:+A+Proof+of+Concept+Study.">In Vivo Application of Tissue-Engineered Veins Using Autologous Peripheral Whole Blood: A Proof of Concept Study.</a> EBioMedicine. 1 (1), 72-79 (2014).</li><li>Ott, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+and+orthotopic+transplantation+of+a+bioartificial+lung.">Regeneration and orthotopic transplantation of a bioartificial lung.</a> Nature Medicine. 16 (8), 927-933 (2010).</li><li>Uygun, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+reengineering+through+development+of+a+transplantable+recellularized+liver+graft+using+decellularized+liver+matrix.">Organ reengineering through development of a transplantable recellularized liver graft using decellularized liver matrix.</a> Nature Medicine. 16 (7), 814-820 (2010).</li><li>Conconi, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracheal+matrices,+obtained+by+a+detergent-enzymatic+method,+support+in+vitro+the+adhesion+of+chondrocytes+and+tracheal+epithelial+cells.">Tracheal matrices, obtained by a detergent-enzymatic method, support in vitro the adhesion of chondrocytes and tracheal epithelial cells.</a> Transplant International. 18 (6), 727-734 (2005).</li><li>Gilbert, T. W., Sellaro, T. L., Badylak, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularization+of+tissues+and+organs.">Decellularization of tissues and organs.</a> Biomaterials. 27 (19), 3675-3683 (2006).</li><li>Zhang, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+human+fetal+mesenchymal+stem+cells+for+off-the-shelf+bone+tissue+engineering+application.">The potential of human fetal mesenchymal stem cells for off-the-shelf bone tissue engineering application.</a> Biomaterials. 33 (9), 2656-2672 (2012).</li><li>Elebring, E., Kuna, V. K., Kvarnstrom, N., Sumitran-Holgersson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cold-perfusion+decellularization+of+whole-organ+porcine+pancreas+supports+human+fetal+pancreatic+cell+attachment+and+expression+of+endocrine+and+exocrine+markers.">Cold-perfusion decellularization of whole-organ porcine pancreas supports human fetal pancreatic cell attachment and expression of endocrine and exocrine markers.</a> Journal of Tissue Engineering. 8, 2041731417738145 (2017).</li><li>Masumoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+iPS+cell-engineered+cardiac+tissue+sheets+with+cardiomyocytes+and+vascular+cells+for+cardiac+regeneration.">Human iPS cell-engineered cardiac tissue sheets with cardiomyocytes and vascular cells for cardiac regeneration.</a> Science Reports. 4, 6716 (2014).</li><li>Wiles, K., Fishman, J. M., De Coppi, P., Birchall, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Host+Immune+Response+to+Tissue-Engineered+Organs:+Current+Problems+and+Future+Directions.">The Host Immune Response to Tissue-Engineered Organs: Current Problems and Future Directions.</a> Tissue Engineering Part B Reviews. 22 (3), 208-219 (2016).</li><li>Young, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cells+in+the+eyes+of+an+immunologist.">Endothelial cells in the eyes of an immunologist.</a> Cancer Immunology Immunotherapy. 61 (10), 1609-1616 (2012).</li><li>Graham, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cell+seeding+of+prosthetic+vascular+grafts:+early+experimental+studies+with+cultured+autologous+canine+endothelium.">Endothelial cell seeding of prosthetic vascular grafts: early experimental studies with cultured autologous canine endothelium.</a> Archives of Surgery. 115 (8), 929-933 (1980).</li><li>Onuki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+endothelialization+model+for+the+study+of+Dacron+graft+healing.">Accelerated endothelialization model for the study of Dacron graft healing.</a> Annals of Vascular Surgery. 11 (2), 141-148 (1997).</li><li>Clowes, A. W., Kirkman, T. R., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+arterial+graft+healing.+Rapid+transmural+capillary+ingrowth+provides+a+source+of+intimal+endothelium+and+smooth+muscle+in+porous+PTFE+prostheses.">Mechanisms of arterial graft healing. Rapid transmural capillary ingrowth provides a source of intimal endothelium and smooth muscle in porous PTFE prostheses.</a> American Journal of Pathology. 123 (2), 220-230 (1986).</li><li>L'Heureux, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+tissue-engineered+blood+vessels+for+adult+arterial+revascularization.">Human tissue-engineered blood vessels for adult arterial revascularization.</a> Nature Medicine. 12 (3), 361-365 (2006).</li><li>Syedain, Z. H., Meier, L. A., Lahti, M. T., Johnson, S. L., Tranquillo, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+completely+biological+engineered+grafts+following+decellularization+into+the+sheep+femoral+artery.">Implantation of completely biological engineered grafts following decellularization into the sheep femoral artery.</a> Tissue Engineering Part A. 20 (11-12), 1726-1734 (2014).</li><li>Cardiff, R. D., Miller, C. H., Munn, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+hematoxylin+and+eosin+staining+of+mouse+tissue+sections.">Manual hematoxylin and eosin staining of mouse tissue sections.</a> Cold Spring Harb Protocols. 2014 (6), 655-658 (2014).</li><li>Pollack, A. A., Taylor, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+exercise+and+body+position+on+the+venous+pressure+at+the+ankle+in+patients+having+venous+valvular+defects.">The effect of exercise and body position on the venous pressure at the ankle in patients having venous valvular defects.</a> Journal of Clinical Investigation. 28 (3), 559-563 (1949).</li><li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-molecular-weight+peptides+derived+from+extracellular+matrix+as+chemoattractants+for+primary+endothelial+cells.">Low-molecular-weight peptides derived from extracellular matrix as chemoattractants for primary endothelial cells.</a> Endothelium. 11 (3-4), 199-206 (2004).</li><li>van Ark, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Type+2+diabetes+mellitus+is+associated+with+an+imbalance+in+circulating+endothelial+and+smooth+muscle+progenitor+cell+numbers.">Type 2 diabetes mellitus is associated with an imbalance in circulating endothelial and smooth muscle progenitor cell numbers.</a> Diabetologia. 55 (9), 2501-2512 (2012).</li><li>Steen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+lungs+from+a+non-heart-beating+donor.">Transplantation of lungs from a non-heart-beating donor.</a> Lancet. 357 (9259), 825-829 (2001).</li><li>Van Raemdonck, D., Neyrinck, A., Cypel, M., Keshavjee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex-vivo+lung+perfusion.">Ex-vivo lung perfusion.</a> Transplant International. 28 (6), 643-656 (2015).</li><li>Cross, M. J., Claesson-Welsh, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FGF+and+VEGF+function+in+angiogenesis:+signalling+pathways,+biological+responses+and+therapeutic+inhibition.">FGF and VEGF function in angiogenesis: signalling pathways, biological responses and therapeutic inhibition.</a> Trends in Pharmacological Science. 22 (4), 201-207 (2001).</li><li>Peplow, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+factor-+and+cytokine-stimulated+endothelial+progenitor+cells+in+post-ischemic+cerebral+neovascularization.">Growth factor- and cytokine-stimulated endothelial progenitor cells in post-ischemic cerebral neovascularization.</a> Neural Regeneration Research. 9 (15), 1425-1429 (2014).</li><li>Xiao-Yun, X., Zhao-Hui, M., Ke, C., Hong-Hui, H., Yan-Hong, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucagon-like+peptide-1+improves+proliferation+and+differentiation+of+endothelial+progenitor+cells+via+upregulating+VEGF+generation.">Glucagon-like peptide-1 improves proliferation and differentiation of endothelial progenitor cells via upregulating VEGF generation.</a> Medical Science Monitor. 17 (2), BR35-BR41 (2011).</li><li>Dragoni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor+stimulates+endothelial+colony+forming+cells+proliferation+and+tubulogenesis+by+inducing+oscillations+in+intracellular+Ca2++concentration.">Vascular endothelial growth factor stimulates endothelial colony forming cells proliferation and tubulogenesis by inducing oscillations in intracellular Ca2+ concentration.</a> Stem Cells. 29 (11), 1898-1907 (2011).</li><li>Sai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+fibroblast+growth+factor+is+essential+to+maintain+endothelial+progenitor+cell+phenotype+in+TR-BME2+cells.">Basic fibroblast growth factor is essential to maintain endothelial progenitor cell phenotype in TR-BME2 cells.</a> Biological and Pharmaceutical Bulletin. 37 (4), 688-693 (2014).</li><li>Gallus, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspirin+and+other+platelet-aggregation+inhibiting+drugs.">Aspirin and other platelet-aggregation inhibiting drugs.</a> Medical Journal of Asutralia. 142 (1), 41-47 (1985).</li></ol>

SSH проводит акции в Verigraft, компания, которая владеет лицензией на технологию ткани инженерных кровеносных сосудов. Другие авторы имеют ничего не разглашать.

Техника, представленные здесь для decellularization подкожной вены это легкий, простой и экономичный метод, который также может быть применен для всех вен малого диаметра как молочной и пупочную Вены. От наших предыдущих результатов6,7decellularization решения и их концентрации, используемые в этом методе. Несмотря на то, что мы рекомендуем 5 циклов decellularization, в некоторых венах мы также заметили, полный decellularization в 3 циклов. Однако воспроизводимые результаты были получены с помощью 5 циклов. Применяя этот протокол, мы decellularized вен различной длины до 30 см успешно (неопубликованные результат). Отмена решения decellularization розетки 45 см создаст давление 33 мм рт.ст, внутри Вены. В нашем опыте мы заметили это как ключевой шаг в decellularizing весь вен равномерно и можно воспроизвести в 5 циклах. Выбранной давление 3 раза выше, чем давление нормальное подкожной вены (5-10 мм рт.ст.), но что же, как и некомпетентных вен (варикозное расширение вен)23. Кроме того мы предположить, что это высокое давление создаст значительные силы на ключе стен и может таким образом, помочь в эффективной и быстрой клеток удаления.
Так как TnBP нерастворимые в воде и органических растворителей, помешивая моющего средства до тех пор, пока она становится мутным имеет важное значение; в противном случае будет плавать моющего средства. По той же причине чтобы держать TnBP смешанные в растворе, моющее отводной трубки был помещен в верхней части стеклянной банке с шланг розетки. Эффективное удаление TnBP из Вены после ее использования в ходе каждого цикла можно увидеть отсутствие плавающей TnBP капельки в промывают водой. Мы также заметили, что пропуск DNase шаг также производятся decellularized ткани, но в некоторых случаях, было замечено сравнительно высокое содержание ДНК в decellularized ткани. Как высокого давления и высокого расхода не требуются для эффективной деятельности DNase, может использоваться низкой перфузии курс (10 мл/мин). Различные Перистальтический насос был использован как его меньшего размера помогает в управляемость установки. Поскольку мы заметили что повреждение большинства клеток во время decellularization результаты в цикле 2, мы предлагаем пропуск DNase лечения во время циклов 1 и 3 (неопубликованные результат). Даже несмотря на то, что квалификация и количественная оценка белков внеклеточного матрикса, не были выполнены в этой рукописи, наш предыдущий опыт с аналогичными decellularization протоколы показали сохранение биомеханических свойств, внеклеточная матрица структуры и белки7. Хотя наши предварительные количественной эксперименты с этих вен подготовила аналогичный результат (Неизданное), наши уже опубликованные результаты будут укреплять эту уверенность.
Recellularization с помощью крови является удобный и простой процесс над клеток костного мозга расширен как можно избежать долго раз расширения ячейки, спонтанной мутации в расширенной клетки, хирургические вторжения и дискомфорт для пациента. Поскольку известно, что endothelialization может также произойти от циркулирующих Пэк, мы предположили, что перфузии с кровью, следуют перфузии с эндотелиальной среднего будет достаточно для recellularization. Безопасность Вену тканей, разработанные с помощью аналогичного метода видно из успешные результаты трансплантации, когда два таких Вены были имплантированы в детей с дополнительной печеночной воротной вены непроходимость7. Мы предположить, что факторов роста в decellularized внеклеточного матрикса позволят вложение циркулирующих Пэк от крови24. Recellularization вен после аналогичного протокола показал положительный для рецепторов VEGF-2 и Кластер дифференцировки (CD) 14 на просвет при CD45, выражая клетки были замечены в адвентиции7клетки. Мы также представить, что непрерывное эндотелиального слоя не могут наблюдаться во всех случаях, особенно при использовании крови от старых и больных пациентов, как известно, что таких лиц сократилось количество циркулирующих прогениторных клеток25. Однако, мы утверждать, что перфузии с получателя крови может скрыть многие антигены, которые подвергаются из-за decellularization и таким образом может уменьшить вероятность неблагоприятных воспалительных реакций, когда пересаженные в отличие от пересадки только decellularized кровеносных сосудов. Кроме того перфузии крови могут депонировать повышение уровня факторов роста на просвет и адвентиции, который в свою очередь может набирать рост числа циркулирующих клеток-предшественников в результате быстрого процесса recellularization в естественных условиях.
Преимущества конструкции биореактора, используемые в данном исследовании являются полным автоклавирования, легкий монтаж, рентабельность, управляемость и наименее возможность повреждения. По нашему опыту используя текущий дизайн, Вены были recellularized до 10 см в длину. Даже если Вены до 25 см в длину также может быть recellularized, сохраняя Вену в форме «U» внутри биореактора, это должны быть проверены. Дизайн реактор показывает, что направление потока в духе против силы тяжести и предназначен как таковой, потому что это нормальное направление потока для этих вен в организме человека. 12 h перфузии эндотелиальной средний шаг является предпосылкой Вену и увеличить сродство для вложений входящих ПЭК. Добавление дополнительных гепарин и перфузии для 1 h снизит риск формирования сгустков крови в пробирках во время перфузии крови.
Объем крови требуется зависит от длины Вену. Основной принцип, который мы следуем за объем крови является, что Вены должен быть погружен в крови. Во время перевалки крови больше, чем 45 мл, время от времени перемешивания может потребоваться для предотвращения накопления клеток в нижней части биореактор. Мы добавили решение Стин в крови, поскольку он содержит большое количество белков и компоненты, необходимые для поддержания здоровых тканей во время трансплантации органа26,27. Добавление VEGF и b ФБП выгодно, поскольку они являются мощным ангиогенных факторов роста28 , и их присутствие вызывает миграция, пролиферации и дифференцирования Пэк29,,3031,32 . Количество VEGF добавил основано на наших предыдущих неопубликованным результатам, где распространение Пэк был замечен на 80 нг/мл. Добавление аспирин подавляет активации тромбоцитов33 таким образом уменьшая вероятность их привязанность к эндотелиального слоя. Непрерывный мониторинг и добавлением глюкозы также будет полезным для пролиферации клеток и предотвращения гемолиза эритроцитов.
Поскольку от получателя требуется только простое крови, он может рассматриваться как легко и практически осуществимые процедуры, требующие меньше технического опыта. Несмотря на то, вся процедура показано здесь от начала до конца занимает 20 дней, хранение decellularized вен как полки продукт будет сократить процедуру до 8 дней для пациентов. Хотя технически хранения decellularized вен не должно сказаться на эффективности recellularization, должны быть оценены. Ткани инженерии вен генерируется после этой процедуры может использоваться в клинике для обхода кабинетов, заменив затрудненные вен, венозная недостаточность приводит к варикозного расширения вен без необходимости иммуносупрессия и таким образом обеспечивая лучшее качество жизнь для пациента.

Сосудистые трубопроводов необходимы для нескольких клинических условий как аневризм, стеноз сонной артерии и атеросклероза, ведущих к серьезным сосудистых проблем. Хирурги используют аутологичной, аллогенной или синтетических сосудистых трубопроводы для восстановления функциональных крови. Хотя использование аутологических кровеносных сосудов до сих пор считается идеальным подходом, наличие у больных majorly ограничен. Альтернативы, такие как аллогенной или синтетических графтов имеют глубокие проблемы с иммуносупрессивной лечения и плохой проходимости, ведущих к повторная операция1,2, что привело к серьезной экономического бремени стран. Тканевая инженерия кровеносных сосудов стремится обеспечить графтов с естественным гомологии и аутологичных клеток. Таким образом иммунной системе получателя признается self пересаженных трансплантата и поскольку такой трансплантата содержит натуральные протеины и клетки в первоначальной конфигурации, она может функционировать лучше по сравнению с текущей альтернатив. Ткани инженерии органы, такие, как мочевого пузыря3, мочеиспускательного канала4, трахею5и вен6,7, были успешно использованы в клинике.
Ткани инженерных произвести персональные имплантатов требует трансплантата от донора, а затем decellularization и recellularization. Decellularization — это многообещающая технология для удаления клеток тканей и органов8,9,10. Decellularization может выполняться конкретные физические, химические и ферментативные методы11 или комбинируя их. На оптимальное использование этих методов decellularized тканей может иметь аналогичные структурных и функциональных белков внеклеточного матрикса, похож на собственные ткани. Такие органы обладают внутреннего потенциала для повышения степени привязанности, миграция, распространение и дифференцирования стволовых клеток, входящих.
Recellularization представляет собой динамический процесс посев клеток трансплантата, и получателей стволовых клеток могут быть использованы для клинических трансплантации. Стволовые клетки в настоящее время используется для таких целей включают костного мозга, мезенхимы и орган жителей3,5,6. Животных и научно ориентированных исследований использовали стволовые клетки из мезенхимы происхождения, которые являются плода и индуцированных плюрипотентных12,,1314. Этот процесс требует биореактора (палата, которая держит Вену и обеспечивает необходимые условия как температуры, газы, рН и давление), клетки и культуры средств массовой информации. В recellularization задача получить необходимое количество клеток определенного типа и посева стратегия, в которой клетки может достигать цельной ткани или органа. Даже несмотря на то, что не полный ткань или орган структурно и функционально был создан и оценены до сих пор, несколько достижений в этой области и первые результаты показывают в будущем возможность15. Основная функция Вены находится в Люминал эндотелия, который контролирует проникновение воспалительных клеток в тканях и слой среднего гладких мышц, который помогает в сужения и также обеспечивает силу держать артериальное давление16. Исследования показали, что во время повреждения, endothelialization происходит от анастомоза либо от циркулирующих эндотелиальные прародитель клеток (ПЭК) в крови17,18,19. Наша стратегия для recellularization вен опирается на Пэк в циркулирующей крови.
Тканевая инженерия вен и артерий была выполнена несколькими группами, после различных decellularization и recellularization стратегии20,21. Наша группа также выполняется и разработали стратегии decellularization и recellularization для молочной и подвздошных вен6,7. Decellularization была выполнена путем перемешивания Вены в Тритон X-100, tri н бутил-фосфат (TnBP) и фермент дезоксирибонуклеаза (DNase). Recellularization была выполнена с использованием костного мозга, полученных эндотелия и гладкой мышечной клетки6 или7периферической крови. Вен recellularized либо протоколом, показали клинических обещание в обеспечении функциональной кровоснабжение в трансплантации педиатрических больных с дополнительной печеночной воротной вены непроходимость6,7.
В настоящее время мы разработали модифицированную версию тот же протокол для улучшения и легко производительности обработки decellularization, recellularization и биореактор вен малого диаметра. Текущий decellularization протокол требует перфузии моющих средств через Вену, вместо давления агитации с моющими средствами. Recellularization протокол включает в себя дополнительный шаг по предварительной подготовки для улучшения клеточной адгезии и добавление факторов роста в циркулирующей крови для улучшения клеточной адгезии, выживания и распространения. Мы также улучшили дизайн биореактора, использование коммерчески доступных продуктов. В этой статье мы представляем подробное описание измененного Протокола для выполнения decellularization и recellularization человека подкожной вен.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1159px;" width="1158">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:333px;">4-Port Cap</td>
			<td style="width:208px;">CPLabSafety</td>
			<td style="width:119px;">WF-GL45-4Kit</td>
			<td style="width:499px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Acetyl salicylic acid</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">A5376</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Anti-Anti</td>
			<td style="width:208px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:119px;">15240-062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">B-FGF</td>
			<td style="width:208px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">cc-4113B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:333px;">Blood Glucose monitoring system - Free style Lite</td>
			<td style="width:208px;">Abbott</td>
			<td style="width:119px;">70808-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">G8769</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">DNase-I</td>
			<td style="width:208px;">Worthington</td>
			<td style="width:119px;">LS0020007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:333px;">Dulbecco&#39;s PBS with CaCl2 and MgCl2</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D8662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">EDTA disodium salt dihydrate</td>
			<td style="width:208px;">AlfaAesar</td>
			<td style="width:119px;">A15161.OB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">EGM-2 Growth Factors Kit</td>
			<td style="width:208px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">CC-4176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:333px;">EG-VEGF</td>
			<td style="width:208px;">Peprotech</td>
			<td style="width:119px;">100-44</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:333px;">Glass bottle 250ml</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2151593</td>
			<td>Any bottle with GL45 cap can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Glass bottle 1L</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2151595</td>
			<td>Any bottle with GL45 cap can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Glass jar 500ml with bottom hose outlet</td>
			<td style="width:208px;">Kimble Chase Life Science</td>
			<td style="width:119px;">14607</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Heparin</td>
			<td style="width:208px;">Leo</td>
			<td style="width:119px;">387107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Heparin Coated Vacutainer Tubes</td>
			<td style="width:208px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">368480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Human AB Serum</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">H3667</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">L-Glutamine</td>
			<td style="width:208px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:119px;">25030-024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Luer Female with 1/8&#34; ID Barb</td>
			<td style="width:208px;">Oina</td>
			<td style="width:119px;">LF-2PP-QC</td>
			<td>For 3X5mm silicon tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Luer Female with 3/32&#34; ID Barb</td>
			<td style="width:208px;">Oina</td>
			<td style="width:119px;">LF-1.5PP-QC</td>
			<td>For 2X4mm silicon tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Luer Male with 3/32&#34; ID Barb</td>
			<td style="width:208px;">Oina</td>
			<td style="width:119px;">LM-1.5PP-QC</td>
			<td>For 2X4mm silicon tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Luer Male with 1/8&#34; ID Barb</td>
			<td style="width:208px;">Oina</td>
			<td style="width:119px;">LM-2PP-QC</td>
			<td>For 3X5mm silicon tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Luer Male with 5/32&#34; ID Barb</td>
			<td style="width:208px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:119px;">EW-45518-06</td>
			<td>For 5X8mm silicon tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">MCDB 131</td>
			<td style="width:208px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:119px;">10372-019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Per acetic acid</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">433241</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Peristaltic pump I</td>
			<td style="width:208px;">Masterflex</td>
			<td style="width:119px;">7524-45</td>
			<td>For Decellularization setup 1 and 2. The cassette used is 7519-75</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Peristaltic pump II</td>
			<td style="width:208px;">Ismatec</td>
			<td style="width:119px;">ISM941</td>
			<td>For Decellularization setup 3 and Recellularization bioreactor.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Potassium chloride</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P5405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Potassium hydrogen phosphate</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P9791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Reducing Connector 1.5mmX2.5mm</td>
			<td style="width:208px;">Biotech</td>
			<td style="width:119px;">ISM569A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Shaker</td>
			<td style="width:208px;">Ika</td>
			<td style="width:119px;">KS4000 i&#160; control</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Sodium Azide</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">71290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Sodium chloride</td>
			<td style="width:208px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">13423</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Sodium hydrogen phosphate</td>
			<td style="width:208px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">71640-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Steen solution</td>
			<td style="width:208px;">Xvivo</td>
			<td style="width:119px;">19004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Suture</td>
			<td style="width:208px;">Agnthos</td>
			<td style="width:119px;">14817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Tri-n-butyl Phosphate</td>
			<td style="width:208px;">AlfaAesar</td>
			<td style="width:119px;">A16084.AU</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Triton-X-100</td>
			<td style="width:208px;">AlfaAesar</td>
			<td style="width:119px;">A16046.OF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Tube 60ml with flat base</td>
			<td style="width:208px;">Sarstedt</td>
			<td style="width:119px;">60596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube A</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280706</td>
			<td>Cut 3 pieces, each of 25 cm length for decellularization perfusion steup 1 and 2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube B</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280706</td>
			<td>Cut 1 piece of 35 cm length for decellularization perfusion steup</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube C</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280706</td>
			<td>Cut 5 pieces, each of 75 cm length for decellularization perfusion steups 1-3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube D</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280706</td>
			<td>Cut 1 piece of 90 cm length for decellularization perfusion steup 2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube E</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280706</td>
			<td>Cut 1 piece of 20 cm length for recellularization perfusion steup</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube F</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280713</td>
			<td>Cut 2 pieces, each of 15 cm length for decellularization perfusion steup 1 and 2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube G</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280713</td>
			<td>Cut 2 pieces, each of 15 cm length for decellularization perfusion steup 1 and 2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube H</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280703</td>
			<td>Cut 1 piece of 15 cm length for recellularization perfusion steup</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube I</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280703</td>
			<td>Cut 1 piece of 20 cm length for recellularization perfusion steup</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube J</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280703</td>
			<td>Cut 1 piece of 25 cm length for recellularization perfusion steup</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube K</td>
			<td style="width:208px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">2280703</td>
			<td>Cut 2 pieces, each of 35 cm length for recellularization perfusion steup</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

decellularization and recellularization methodology for human saphenous veins

Сосудистой трубопроводы, используемые во время большинство сосудистых операций являются аллогенной или синтетических графтов, которые часто приводят к осложнений, вызванных иммуносупрессии и плохой проходимости. Тканевая инженерия предлагает новое решение для создания персонализированных графтов с естественным внеклеточного матрикса, содержащий получателя ячейки с помощью метода decellularization и recellularization. Мы показываем подробный метод для выполнения decellularization человека подкожной вены и recellularization от кровоснабжения периферической крови. Вену был decellularized perfusing 1% X-100 Тритон, 1% tri-n бутил фосфат (TnBP) и 2000 единиц Кунитц дезоксирибонуклеаза (DNase). Тритон X-100 и TnBP были увлажненную на 35 мл/мин в течение 4 ч, хотя DNase был увлажненную 10 мл/мин при 37 ° C в течение 4 ч. Вену был промывают в ультрачистая вода и PBS и затем стерилизовать в 0,1% надуксусной кислоты. Он был снова промывают в PBS и выдержано в эндотелиальных среде. Вену был подключен к биореактора и увлажненную с эндотелиальной среде, содержащей 50 МЕ/мл гепарина для 1 ч. Recellularization была выполнена путем заполнения биореактор с свежей крови, разбавленных 1:1 в растворе Стин и добавление, желез внутренней секреции производный сосудистой эндотелиальный фактор роста (80 нг/мл), факторы роста фибробластов основные (4 мкл/мл) и ацетил салициловая кислота (5 мкг/мл). Биореактор была затем переехали в инкубаторе и увлажненную за 48 ч в 2 мл/мин при сохранении глюкозы между 3-9 ммоль/л Позже Вену был промывают с PBS, заполнены с эндотелиальной среднего и увлажненную за 96 ч в инкубаторе. Лечение с X-100 Тритон, TnBP и DNase decellularized подкожной вены в 5 циклах. Decellularized вен посмотрел белый в отличие от обычных и recellularized вен (светло-красный). Гематоксилином и эозином (H & E) показало наличие ядер только в обычном режиме, но не в decellularized вен. В recellularized ключе H & E-окрашивание показали наличие клеток на поверхности Люминал Вены.

Валового морфология нормальные Вены это свет красного (рис. 3A). Красный цвет теряется в прогрессивной decellularization циклов (цикл 2, рисунок 3B; цикл 3, рис. 3 c) и 5й циклом, он выглядит бледно и белый (рис. 3D). Recellularized вен после перфузии крови (Рисунок 3E) и эндотелиальных СМИ перфузии (Рисунок 3F) выглядит ярко-красного цвета. 5 циклов лечения decellularization успешно удален клетки из Вены как не синий ядер в H & E окрашивание (рис. 4B) были замечены. В отличие от несколько ядер были замечены в нормальной ключе (рис. 4A). Наличие вложенных клеток на стороне Люминал рассматривается в H & E пятнать в recellularized ключе с кровью за 48 ч (рис. 4 c, черные стрелки) и после перфузии с эндотелиальной средой для 96 h (рис. 3D, черные стрелки).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57803/57803fig1.jpg"> Рисунок 1 : Монтаж установок перфузии для decellularization. A) изображения показаны собранные decellularization установки 1 для X-100 Тритон и стирки. Белые стрелки показывают пути потока для решения и красные стрелки показывают впуски и выпуски для вен и решений. B) картина собрал decellularization установки 2 для TnBP перфузии. Точно так же как и decellularization установки 1, белые стрелки указывают пути потока для решения и красные стрелки показывают впуски и выпуски для вен и решений. C) картина собрал decellularization установки 3 для дезоксирибонуклеаза перфузии. Белые стрелки показывают пути потока для решения и красные стрелки показывают вводов для вен и решений. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57803/57803fig1large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a> 
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57803/57803fig2.jpg"> Рисунок 2 : Подготовка и монтаж биореактора для recellularization. A) изображения показаны материалы, необходимые для сборки биореактор. B) картина внутри 4-Порт Кап показаны размещение сокращения разъемы (красные стрелки), указывает на подключения вен входе и выходе (белые стрелки) и расположения трубы H, I и Дж. Свободный конец трубки H помещается в биореактор для возврата средств массовой информации. C) можно увидеть соответствующие трубы, и происходит от верхней части 4 Порт Кап. D) картинка, показывающая собрал биореактора. E) картинка, показывающая весь биореактор установки с перистальтического насоса. Трубы K расширить соединения от биореактор перистальтического насоса. F) схематическое представление всего биореактор перфузии системы. Оранжевые стрелки показывают направление потока. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57803/57803fig2large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a> 
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57803/57803fig3.jpg"> Рисунок 3 : Общая морфология вен во время decellularization и recellularization. A) валовой морфология нормальные Вены выглядит ярко-красного цвета. С увеличением числа циклов decellularization теряется цвет B) цикл 2 и C) цикл 3. D) по 5 циклов, вен выглядит бледно и белый. Вен после perfusing с E) кровь для 48 h и F) с эндотелиальной среднего за 96 ч выглядит еще раз ярко-красного цвета. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57803/57803fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57803/57803fig4.jpg"> Рисунок 4 : Характеристика вен decellularized и recellularized. Гематоксилином и эозином, окрашивание образ A) нормальной ключе содержит много синий ядра, но они отсутствуют в B) decellularized вен. В том духе, recellularized с C) кровь за 48 ч и с D) заметил эндотелиальной среднего за 96 ч, вложение клеток (черные стрелки) на просвет. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57803/57803fig4large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Decellularization and Recellularization Methodology for Human Saphenous Veins at JoVE.com

Decellularization and Recellularization Methodology for Human Saphenous Veins

Decellularization и Recellularization методика для человека подкожной вены

Здесь мы описываем протокол для подкожной вены decellularization помощью перфузии периферической крови и эндотелиальных среднего моющих и recellularization.

Vascular conduits used during most vascular surgeries are allogeneic or synthetic grafts that often lead to complications caused by immunosuppression and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Decellularization and Recellularization of Whole Livers

Decellularization и Recellularization Целых Печень

The liver is a complex organ which requires constant perfusion for delivery of nutrients and oxygen and removal of waste in order to survive1. Efforts to ...

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Массовые цитометрии: Протокол для ежедневного настройка и запуск образцы клеток на Цитометр массовой CyTOF

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Procedure for Decellularization of Porcine Heart by Retrograde Coronary Perfusion

Порядок Decellularization свиного сердца, ретроградная коронарная перфузия

Perfusion-based  whole organ decellularization has recently gained interest in the field of  tissue engineering as a means to create site-specific ...

A Decellularization Methodology for the Production of a Natural Acellular Intestinal Matrix

Decellularization Методология по производству природного Бесклеточная кишечника Matrix

Successful tissue engineering involves the  combination of scaffolds with appropriate cells in vitro or in vivo.  Scaffolds may be synthetic, ...

Nonhuman Primate Lung Decellularization and Recellularization Using a Specialized Large-organ Bioreactor

Приматов легких Decellularization и Recellularization помощью специализированного большого органа биореактор

There are an insufficient number of lungs available to meet current and future organ transplantation needs. Bioartificial tissue regeneration is an ...

Procedure for Decellularization of Rat Livers in an Oscillating-pressure Perfusion Device

Порядок Decellularization из печени крыс в перфузии устройство Качающийся давления

Decellularization and recellularization of parenchymal organs may enable the generation of functional organs in vitro, and several protocols for rodent ...

Methodology for Biomimetic Chemical Neuromodulation of Rat Retinas with the Neurotransmitter Glutamate In Vitro

Methodology for Biomimetic Chemical Neuromodulation of Rat Retinas with the Neurotransmitter Glutamate In Vitro

Методология для Biomimetic химических Neuromodulation сетчатки крыс с нейромедиатора глутамата в пробирке

Photoreceptor degenerative diseases cause irreparable blindness through the progressive loss of photoreceptor cells in the retina. Retinal prostheses are ...

Comparable Decellularization of Fetal and Adult Cardiac Tissue Explants as 3D-like Platforms for In Vitro Studies

Сопоставимых Decellularization плода и взрослых сердечной ткани эксплантов как 3D-как платформы для в исследованиях in Vitro

Current knowledge of extracellular matrix (ECM)-cell communication translates to large two-dimensional (2D) in vitro culture studies where ECM components ...

Two Methods for Decellularization of Plant Tissues for Tissue Engineering Applications

Два метода для Decellularization растительных тканей для приложений, инженерия тканей

The autologous, synthetic, and animal-derived grafts currently used as scaffolds for tissue replacement have limitations due to low availability, poor ...

Decellularization of Whole Human Heart Inside a Pressurized Pouch in an Inverted Orientation

Decellularization всего человеческого сердца внутри под давлением мешочек в Перевернутый ориентации

The ultimate solution for patients with end-stage heart failure is organ transplant. But donor hearts are limited, immunosuppression is required, and ...