Name: small-scale colorimetric assays of intracellular lactate and pyruvate in the nematode caenorhabditis elegans
Uploaded: 2018-10-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans at JoVE.com

وأيد هذا العمل ماليا "منحة بحثية خاصة" من ديتو بونكا جامعة إلى ياناسي سومينو.

1-تزامن ثقافة C. ايليجانس
<ol><li>قبل البذر، سلالة الثقافة الإشريكيّة القولونية (كولاي) OP50 بين عشية وضحاها في 37 درجة مئوية في 300 مل مرق لوريا بيرتاني (رطل) متوسطة السائل. متجر OP50 مثقف-4 درجة مئوية.<ol>
<li>جعل رطل مرق المتوسطة السائل، استخدام 10 جرام تريبتوني، 5 غ خميرة استخراج، 10 غم من ك...

<ol>
	<li>Warburg, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+origin+of+cancer+cells.">On the origin of cancer cells.</a> Science. 123, 309-314 (1956).</li><li>Matoba, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p53+regulates+mitochondrial+respiration.">p53 regulates mitochondrial respiration.</a> Science. 312, 1650-1653 (2006).</li><li>Yanase, S., Suda, H., Yasuda, K., Ishii, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+p53/CEP-1+is+associated+with+lifespan+extension+through+an+age-related+imbalance+in+the+energy+metabolism+of+C.+elegans.">Impaired p53/CEP-1 is associated with lifespan extension through an age-related imbalance in the energy metabolism of C. elegans.</a> Genes to Cells. 22 (12), 1004-1010 (2017).</li><li>Page, A. P., Johnstone, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cuticle.">The cuticle.</a> WormBook. , (2007).</li><li>Hulme, S. E., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemistry+and+the+worm:+Caenorhabditis+elegans+as+a+platform+for+integrating+chemical+and+biological+research.">Chemistry and the worm: Caenorhabditis elegans as a platform for integrating chemical and biological research.</a> Angewandte Chemie International Edition. 50, 4774-4807 (2011).</li><li>Lewis, J. A., Fleming, J. T., Epstein, H. F., Shakes, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+culture+methods.">Basic culture methods.</a> Methods in Cell Biology, Volume 48, Caenorhabditis elegans: Modern Biological Analysis of an Organism. , 3-29 (1995).</li><li>Senoo-Matsuda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+defect+in+the+cytochrome+b+large+subunit+in+complex+II+causes+both+superoxide+anion+overproduction+and+abnormal+energy+metabolism+in+Caenorhabditis+elegans.">A defect in the cytochrome b large subunit in complex II causes both superoxide anion overproduction and abnormal energy metabolism in Caenorhabditis elegans.</a> The Journal of Biological Chemistry. 276 (45), 41553-41558 (2001).</li><li>Butler, J. A., Mishur, R. J., Bhaskaran, S., Rea, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+metabolic+signature+for+long+life+in+the+Caenorhabditis+elegans+Mit+mutants.">A metabolic signature for long life in the Caenorhabditis elegans Mit mutants.</a> Aging Cell. 12, 130-138 (2013).</li><li>Marbach, E. P., Weil, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+enzymatic+measurement+of+blood+lactate+and+pyruvate:+Use+and+significance+of+metaphosphoric+acid+as+a+common+precipitant.">Rapid enzymatic measurement of blood lactate and pyruvate: Use and significance of metaphosphoric acid as a common precipitant.</a> Clinical Chemistry. 13 (4), 314-325 (1967).</li><li>Mishur, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+metabolites+extend+lifespan.">Mitochondrial metabolites extend lifespan.</a> Aging Cell. 15, 336-348 (2016).</li></ol>

عند استخدام هذه المجموعات اللونية المقايسة، الخطوة الأكثر أهمية في استخراج عينة للكشف عن لاكتات الخلوية وبيروفات بدقة في C. ايليجانس هي عملية ترسيب البروتين خلال التجانس (الشكل 1). ليس من الضرورة القصوى لاستخدام الخالطون تفلون، كسائر أجهزة المجانسة (مثلاً.، دونس ?...

تركيزات لاكتات وبيروفات تعتبر على نطاق واسع كوسيطة استقلاب الطاقة، وهي تتصل بالدول من تحلل، ودورة حمض تريكاربوكسيليتش (TCA)، وسلسلة نقل الإلكترون في خلايا الكائنات الحية الهوائية. سلسلة من ردود الفعل في تحلل أكسدة الجلوكوز إلى بيروفات، التي تقع في مفترق طرق الأيض ويمكن تحويلها إلى الكربوهيدرات عن طريق جلوكونيوجينيسيس، الأحماض الدهنية والايض الطاقة عن طريق البيروفات، والأنين من الأحماض الأمينية. دورة TCA يحدث تحت وجود الأوكسجين الذائب كافية، وهو أمر أساسي لتحويل الجلوكوز إلى طاقة. خاصة، هو تغيير الأيض الثانوية ظاهرة مثيرة لاهتمام التي تحلل يستخدم أساسا لإنتاج الطاقة والتنفس المتقدرية الهوائية، والذي يتضمن بدوره TCA وسلسلة نقل الإلكترون، دوونريجولاتيد في الثدييات سرطان الخلايا1،2. وأظهرت لنا مؤخرا أن مستويات اللاكتات ونسبة ما يترتب عليها من لاكتات/بيروفات (L/P) انخفض خلال الشيخوخة في الكائن الحي النموذجي ايليجانس كاينورهابديتيس (C. ايليجانس). وبالمثل، وجدنا أن القامع الورم الثدييات أورثولوج p53 المجلس الانتخابي المؤقت-1 في C. ايليجانس دوراً هاما في التعديلات المتعلقة بالسن في استقلاب الطاقة من خلال تفعيل أهداف النسخي3.
في فحوصات بيولوجية، مثل قياس تركيزات لاكتات وبيروفات في الخلايا، والحساسية، ودقة وحجم العينة، ووقت الحضانة لمجموعات مقايسة اللونية/فلوريميتريك قد تحسنت جذريا. ونظرا للابتكارات التكنولوجية، ونحن الآن قادرة على تحليل مختلف نواتج الأيض ونواتج الأيض الوسيطة دون ثقافة واسعة النطاق من C. ايليجانس، هو أمر صعب نظراً لصغر حجمه. وبصفة عامة، حساسية مقايسة اللونية أمر من حجم أصغر من أن الإنزيم فلوريميتريك؛ بيد أن النهج اللونية أكثر ملاءمة في الإعداد لمختبرات مشتركة. وعلاوة على ذلك، أسلوب استخراج تتضمن ترسيب البروتين وتجانس حاسمة لتحديد كمية تركيزات لاكتات وبيروفات في الخلايا C. ايليجانس نظراً لديدان أسطوانية هذا مضمن في الهيكل الخارجي ودعا بشرة، خلافا لخلايا الثدييات خطوط4،5. هنا، يمكننا وصف بروتوكول تحليل تركيزات لاكتات وبيروفات باستخدام مجموعات مقايسة اللونية التجارية بما في ذلك النصائح لاستخراج عينة من C. ايليجانس.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:696px;" width="696">
	<tbody>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:247px;">Lactate Colorimetric/Fluorimetric Assay kit&#160;</td>
			<td style="width:100px;">BioVision</td>
			<td style="width:136px;">#K607-100</td>
			<td style="width:213px;">colorimetric/fluorimetric 
			100 assays; Store at -20oC</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:247px;">EnzyChrom Pyruvate 
			Assay Kit</td>
			<td style="width:100px;">BioAssay 
			Systems</td>
			<td style="width:136px;">#EPYR-100</td>
			<td style="width:213px;">colorimetric/ fluorometric 
			100 assays; Store at -20oC</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:247px;">BCA Protein Assay Kit</td>
			<td style="width:100px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:136px;">#23225</td>
			<td style="width:213px;">colorimetric assay; store at 
			&#160;room temperature</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:247px;">Trichloroacetic Acid</td>
			<td style="width:100px;">Wako Pure Chemical</td>
			<td style="width:136px;">#207-04955</td>
			<td>store at room temperature</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:247px;">Teflon homogenizer&#160;</td>
			<td style="width:100px;">Iwaki/Pyrex</td>
			<td style="width:136px;">#358034 (Wheaton)</td>
			<td style="width:213px;">Instead of Iwaki/Pyrex, 
			available by Wheaton</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

small-scale colorimetric assays of intracellular lactate and pyruvate in the nematode caenorhabditis elegans

لاكتات وبيروفات وسيطة رئيسية للطاقة داخل الخلايا الأيضية. رصد نسبة لاكتات/بيروفات في الخلايا يساعد على تحديد ما إذا كان هناك اختلال في الأيض الطاقة المرتبطة بالسن بين المتقدرية الفسفرة وتحلل الهوائية. هنا، علينا أن نبدي الاستفادة مجموعات تجارية مقايسة اللونية لاكتات وبيروفات في نموذج الكائن الحي C. ايليجانس. في الآونة الأخيرة، بحساسية ودقة من أطقم مقايسة اللونية/فلوريميتريك قد تحسنت إلى حد كبير بالبحث والتطوير التي تقوم بها الشركات المصنعة للكاشف. ومكنت الكواشف تحسين استخدام فحوصات صغيرة الحجم مع لوحة 96-جيدا في C. ايليجانس. بشكل عام، الإنزيم فلوريميتريك متفوقة في مجال التوعية مقايسة اللونية؛ ومع ذلك، نهج قياس الألوان أكثر مناسبة للاستخدام في المختبرات المشتركة. مسألة هامة أخرى في هذه الاختبارات لتحديد الكمية ترسيب البروتين المتجانس C. ايليجانس العينات. في أسلوبنا ترسيب البروتين، بريسيبيتانتس مشتركة (مثلاً.، حمض التريكلوروسيتيك، وحمض بيرتشلوريك وحمض ميتافوسفوريك) وتستخدم لإعداد نموذج. بإضافة مباشرة مرسب الباردة (تركيز النهائي 5%) خلال التجانس بإعداد عينة فحص خالية من البروتين.

استخدام الاختبارات اللونية لتحديد كمية تركيزات لاكتات وبيروفات، أظهرنا دقة هذه الاختبارات مقارنة بالتقارير السابقة في7، ايليجانس جيم-8. هنا، كانت عملية ترسيب البروتين أثناء استخراج عينة أن الخطوة الأكثر أهمية لتوليد قيم صحيحة. لترس?...

Watch this Scientific Journal Video about Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans

يصف لنا استخراج معدلة على نطاق ضيق وفحوصات اللونية لاكتات وبيروفات في ديدان أسطوانية C. ايليجانس. عند استخدام أدوات التحليل التجاري، المهم التطور التقني الحساسية والدقة. ترسيب البروتين في استخراج هي الخطوة الأكثر أهمية لتحديد الكمية من نواتج الأيض داخل الخلايا.

قياس الألوان فحوصات من داخل الخلايا لاكتات الصغيرة وبيروفات في السلكية ايليجانس كاينورهابديتيس

Lactate and pyruvate are key intermediates of intracellular energy metabolic pathways. Monitoring the lactate/pyruvate ratio in cells helps to determine ...

يمكن أن يساعد هذا البحث في الإجابة على أي أسئلة في عدد الكيمياء الحيوية ومجال المنهجية مثل تحليل حقوق التنمية في الديدان الخيطية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي هطول البروتين في التدريج والمشروبات وتجانس الديدان. ابدأ هذه التجربة من خلال زراعة سلالة E.coli OP50 في 300 ملليلتر من مرق مرق LB السائل المتوسط عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها.تخزين OP50 ناجحة في أربع درجات مئوية. الماصات مليلتر اثنين من OP50 مثقف على الحد الأدنى ثلاثة NGM أعدت سابقا، أو نعمة نمو وسائل الإعلام لوحات أغار وتنتشر باليد يحوم لوحة. احتضان لوحات في درجة حرارة الغرفة بين عشية وضحاها لخلق طبقة رقيقة من OP50.بعد ذلك ، استخدم مسواك معقمة لاختيار قطعة من أجار من لوحة مع الديدان ، لإضافة ما لا يقل عن 100 ديدان لكل لوحة OP50 NGM. زراعة ما لا يقل عن ثلاثة لوحات مع الديدان في 20 درجة مئوية، حتى الديدان تصل إلى مرحلة الكبار، وهو ما يؤكد تحت المجهر مجسمة. تحديد موقع hermaphrodites غرافيد مليئة البيض باستخدام المجهر مجسمة.بعد إضافة خمسة ملليلتر من S-العازلة إلى لوحات، واستخدام ماصة باستور لنقل الديدان من جميع لوحات ثلاثة إلى أنبوب مخروطي 15 ملليلتر. اغسل الديدان ثلاث مرات عن طريق إضافة 15 ملليلتر من S-buffer ثم الطرد المركزي عند 300 مرة G في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 ثانية. إذا تجاوز حجم المخزن المؤقت S-خمسة ملليلتر، إزالة المخزن المؤقت الزائد بعد الطرد المركزي.للحصول على إستباء ناجحة وعزلة البيض السائبة، قم بحل الديدان في 0.5 ملليلتر من محلول الكلورات القلوية. اخلطي عن طريق العاكس وينكضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 إلى 15 دقيقة. جهاز طرد مركزي في 1، 400 دورة في الدقيقة لمدة 30 ثانية لإزالة الحل.استخدام 15 ملليلتر من S-العازلة لغسل بيليه البيض. بعد الطرد المركزي فإنه إزالة ناطور وتكرار هذا الغسيل ثلاث مرات على الأقل. بعد الغسيل الأخير، نعلق بيليه في خمسة إلى ستة ملليلتر من S-العازلة، دون E.coli واحتضان البيض بين عشية وضحاها في 20 درجة مئوية لتفقيس لهم وتحقيق ثقافة متزامنة H من يرقات المرحلة L1.الماصات 10 ميكرولترات من S-العازلة التي تحتوي على الديدان L1 على ثلاث زلات الغطاء. عد اليرقات تحت المجهر المجسم وحساب المتوسط لتحديد العدد التقريبي لليرقات المرحلة L1. وأخيراً، نقل يرقات المرحلة L1 إلى خمس لوحات NGM Agar مع OP50 وتنميتها عند 20 درجة مئوية حتى مرحلة الشباب البالغين، والتي يحدث خلالها الإخصاب الذاتي ويتم وضع عدد قليل من البيض.مراقبة الديدان كل يوم تحت المجهر ومن ثم جمع الشباب الكبار، أو الديدان القديمة خمسة أيام. لتحديد الديدان الحية فقط، أضف الديدان المعلقة في ثلاثة إلى أربعة ملليلترات من S-العازلة إلى أنبوب مخروطي 15 ملليلتر. ثم إضافة حجم متساو من الجليد الباردة 60٪ السكروز ومزيج.جهاز طرد مركزي الأنبوب في 1، 500 مرة G في أربع درجات مئوية لمدة 15 ثانية. ثم استخدم ماصة باستور لتحريك الديدان بعناية من جدار الأنبوب ، ثم قم بإزالة الديدان العائمة إلى أنبوب جديد. ملء أنبوب مع S-العازلة لغسل الديدان، والطرد المركزي في 1500 مرات G في أربع درجات مئوية لمدة 30 ثانية.إزالة المخزن المؤقت وتكرار غسل مرتين أكثر. بعد الغسيل الثالث، قم بإزالة المابير المُتقلب بعناية، مع التأكد من عدم إزالة أي ديدان، واستخدم طرف ماصة 1000 ميكرولتر لقياس الحجم الرطب للدود المغسول. بالنسبة لهطول البروتين، استخدم ماصة باستور لإضافة الديدان المغسولة إلى حجم متساوٍ من حمض ثلاثي كلوريد الأوسيتيك البارد 10٪، في التجانس الموضوع على الجليد.التجانس باستخدام 40 السكتة الدماغية من باسل مع دوران، ما يصل إلى 1، 300 دورة في الدقيقة. استخدام التجانس بالموجات فوق الصوتية مع دورة 20٪ واجب ل sonicate التجانس. استخدام ماصة باستور لنقل متجانسة إلى 1.5 ملليلتر أنبوب وضعت على الجليد.بعد نقل المتجانس إلى أنبوب أجهزة طرد مركزي صغيرة، الطرد المركزي في 8،000 الوقت G في أربع درجات مئوية لمدة 10 دقائق لتوضيح ذلك. نقل المابير إلى أنبوب جديد وإضافة أربعة كلوريد البوتاسيوم المولر واحتضان على الجليد لمدة 20 دقيقة لتحييده. ثم الطرد المركزي في 8،000 مرات G في أربع درجات مئوية لمدة 10 دقائق.نقل المابير إلى أنبوب جديد وتخزينها في 80 درجة مئوية حتى الحاجة لمزيد من الأقوال. لقياس تركيز اللاكتات، استخدم مجموعة من المعايرة بالألوان لإجراء تحاليل مكررة لعينات الاختبار. إضافة 10 ميكرولترات من عينات الاختبار إلى كل بئر من لوحة 96-well، ثم إضافة مخزن فحص اللاكتات إلى كل عينة لضبط وحدة التخزين إلى 15 ميكرولترات.تخفيف 100 ملليمولار L + لاكتات القياسية مع العازلة المقايسة اللاكتات إلى ملليمتر واحد. ثم، في سلسلة من الآبار، إضافة صفر، اثنين، أربعة، ستة، ثمانية، و 10 ميكرولترات من L + لاكتات القياسية المخففة. إضافة 50 ميكرولترات من مزيج رد فعل إلى كل بئر، واحتضان في درجة حرارة الغرفة المحمية من الضوء لمدة 30 دقيقة على الأقل للون لتطوير.وأخيراً، استخدم قارئ الصهقرة الدقيقة لقياس امتصاص كل بئر عند 570 نانومتر. طرح امتصاص مزيج التحكم في الخلفية من امتصاص مزيج التفاعل. ثم رسم منحنى اللاكتات القياسي، وحساب تركيزات اللاكتات من المنحنى بضرب كل تركيز في 2.25.استخدم مجموعة من المعايرة الملونة لقياس تركيز البيروفات في عينات الاختبار، وإجراء فحوصات دوبليكس. إضافة 10 ميكرولترات من عينات الاختبار إلى آبار مختلفة من لوحة 96 جيدا، وإضافة 90 ميكرولترات من كاشف العمل إلى كل عينة. احتضان تغطي لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.ثم ضع اللوحة في قارئ الصهقرة الصغيرة لقياس امتصاص كل بئر في 570 نانومتر. رسم منحنى البيروفات القياسي، وحساب تركيزات البيروفات من المنحنى القياسي بضرب كل تركيز في 2.25. وأخيرا، لقياس تركيز البروتين في عينات الاختبار، واستخدام مجموعة من المعايرة colorimetric كما هو موضح في بروتوكول النص.بعد هطول البروتين، يمكن استخدام المقايسات colorimetrics لتحديد كمي من تركيزات اللاكتات و بيروفات. هذه التجربة تظهر دقة المعايرات colorimetric على عكس التقارير السابقة في C.Elegans. وعلاوة على ذلك، فإن هذه المقاييس حساسة بما فيه الكفاية لقياس تركيزات اللاكتات والبيروفات حتى في العينات الصغيرة في فترة زمنية قصيرة.للكشف بدقة عن اللاكتات والبيروفات في C.elegans ، من المهم إجراء هطول البروتين أثناء تجانس الديدان. كمية اللاكتات و pyruvate الكشف عن أعلى عندما عينات هي البروتين عجلت أثناء التجانس، مقارنة مع الكسر السيتوسولي السليمة أو بعد التجانس عندما لم يكن هناك لاكتات أو بيروفات الكشف على الإطلاق.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans

Covalent Binding of Antibodies to Cellulose Paper Discs and Their Applications in Naked-eye Colorimetric Immunoassays

التساهمية ملزم من الأجسام المضادة لالسليلوز أقراص الورق وتطبيقاتها في العين المجردة اللونية يمونواسايس

This report presents two methods for the covalent immobilization of capture antibodies on cellulose filter paper grade No. 1 (medium-flow filter paper) ...

Automated Acoustic Dispensing for the Serial Dilution of Peptide Agonists in Potency Determination Assays

الآلي الصوتية الاستغناء عن التخفيف المسلسل من الببتيد ناهضات في الفعالية تحديد فحوصات

As with small molecule drug discovery, screening for peptide agonists requires the serial dilution of peptides to produce concentration-response curves. ...

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

طريقة بسيطة لفحص المواد الكيميائية عالية الإنتاجية في ايليجانس كاينورهابديتيس

Caenorhabditis elegans is a useful organism for testing chemical effects on physiology. Whole organism small molecule screens offer significant advantages ...

A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

أسلوب قياس ألوان لقياس محتوى الحديد في النباتات

Iron, one of the most important micronutrients in living organisms, is involved in basic processes, such as respiration and photosynthesis. Iron content ...

Mapping Metabolism: Monitoring Lactate Dehydrogenase Activity Directly in Tissue

رسم الخرائط الأيض: رصد النشاط نازعة لاكتات مباشرة في الأنسجة

Mapping enzymatic activity in space and time is critical for understanding the molecular basis of cell behavior in normal tissue and disease. In situ ...

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

تحديد المحتوى فيكوبيليبروتين في سيانوباكتيريوم سينيتشوسيستيس سبيكتروفوتوميتريك

This is a simple protocol for the quantitative determination of phycobiliprotein content in the model cyanobacterium Synechocystis. Phycobiliproteins are ...

Plate-based Large-scale Cultivation of Caenorhabditis elegans: Sample Preparation for the Study of Metabolic Alterations in Diabetes

Plate-based Large-scale Cultivation of Caenorhabditis elegans: Sample Preparation for the Study of Metabolic Alterations in Diabetes

زراعة الواسعة النطاق على أساس لوحة ايليجانس كاينورهابديتيس: "إعداد نموذج" "دراسة التعديلات الأيضي" في مرض السكري

Culturing Caenorhabditis elegans (C. elegans) in a large-scale manner on agar plates can be time-consuming and difficult. This protocol describes a simple ...

In Vitro Ubiquitination and Deubiquitination Assays of Nucleosomal Histones

في كل مكان في المختبر واختبارات الديوبيكيتيمنت النيوكليوسوم

Ubiquitination is a post-translational modification that plays important roles in various signaling pathways and is notably involved in the coordination ...