Name: small-scale colorimetric assays of intracellular lactate and pyruvate in the nematode caenorhabditis elegans
Uploaded: 2018-10-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Bu eser mali Sumino Yanase için bir özel araştırma hibe Daito Bunka Üniversitesi tarafından desteklenmiştir.

1. C. elegans eşitlenmiş kültürü
<ol><li>Tohum önce kültür Escherichia coli (e.coli) süzün OP50 gecede Luria-Bertani (LB) et suyu sıvı orta 300 ml 37 ° C'de. -4 ° C'de kültürlü OP50 depolamak<ol>
<li>LB suyu sıvı orta yapmak için tryptone 10 g, 5 g, maya özü, NaCl 10 g ve 1 N NaOH 1,5 mL kullanıp için 1 L deiyonize su ile ekleyebilirsiniz. Basınçlı kap. Not: OP50 ve C. elegans suşları Caenorhabditis genetik Merkezi'nden (Minnesota Üniversitesi, St. Pa...

<ol>
	<li>Warburg, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+origin+of+cancer+cells.">On the origin of cancer cells.</a> Science. 123, 309-314 (1956).</li><li>Matoba, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p53+regulates+mitochondrial+respiration.">p53 regulates mitochondrial respiration.</a> Science. 312, 1650-1653 (2006).</li><li>Yanase, S., Suda, H., Yasuda, K., Ishii, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+p53/CEP-1+is+associated+with+lifespan+extension+through+an+age-related+imbalance+in+the+energy+metabolism+of+C.+elegans.">Impaired p53/CEP-1 is associated with lifespan extension through an age-related imbalance in the energy metabolism of C. elegans.</a> Genes to Cells. 22 (12), 1004-1010 (2017).</li><li>Page, A. P., Johnstone, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cuticle.">The cuticle.</a> WormBook. , (2007).</li><li>Hulme, S. E., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemistry+and+the+worm:+Caenorhabditis+elegans+as+a+platform+for+integrating+chemical+and+biological+research.">Chemistry and the worm: Caenorhabditis elegans as a platform for integrating chemical and biological research.</a> Angewandte Chemie International Edition. 50, 4774-4807 (2011).</li><li>Lewis, J. A., Fleming, J. T., Epstein, H. F., Shakes, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+culture+methods.">Basic culture methods.</a> Methods in Cell Biology, Volume 48, Caenorhabditis elegans: Modern Biological Analysis of an Organism. , 3-29 (1995).</li><li>Senoo-Matsuda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+defect+in+the+cytochrome+b+large+subunit+in+complex+II+causes+both+superoxide+anion+overproduction+and+abnormal+energy+metabolism+in+Caenorhabditis+elegans.">A defect in the cytochrome b large subunit in complex II causes both superoxide anion overproduction and abnormal energy metabolism in Caenorhabditis elegans.</a> The Journal of Biological Chemistry. 276 (45), 41553-41558 (2001).</li><li>Butler, J. A., Mishur, R. J., Bhaskaran, S., Rea, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+metabolic+signature+for+long+life+in+the+Caenorhabditis+elegans+Mit+mutants.">A metabolic signature for long life in the Caenorhabditis elegans Mit mutants.</a> Aging Cell. 12, 130-138 (2013).</li><li>Marbach, E. P., Weil, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+enzymatic+measurement+of+blood+lactate+and+pyruvate:+Use+and+significance+of+metaphosphoric+acid+as+a+common+precipitant.">Rapid enzymatic measurement of blood lactate and pyruvate: Use and significance of metaphosphoric acid as a common precipitant.</a> Clinical Chemistry. 13 (4), 314-325 (1967).</li><li>Mishur, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+metabolites+extend+lifespan.">Mitochondrial metabolites extend lifespan.</a> Aging Cell. 15, 336-348 (2016).</li></ol>

Bu Renkölçer tahlil kitleri kullanarak zaman hücresel laktat algılamak için örnek çıkarma en kritik adımda ve pyruvate C. elegans içinde doğru homojenizasyon (Şekil 1) sırasında protein yağış işlemidir. Teflon homogenizer, diğer homogenizers kullanmak kesinlikle gerekli değildir (Örn., Dounce ve konik doku öğütücüler veya boncuk fabrikaları) da solucanlar küçük ölçekli çıkarılması uygundur. Biz hücresel laktat ve pyruvate homogenizer pro...

Laktat ve pyruvate konsantrasyonları glikoliz, tricarboxylic asit (TCA) ve elektron taşıma zinciri aerobik organizmalar hücrelerdeki Devletleri ile ilgili ve yaygın olarak enerji metabolizmasının ara ürün kabul edilmektedir. Glikoliz reaksiyonları bir dizi okside glikoz pyruvate, metabolik bir kavşakta yatıyor ve karbonhidrat gluconeogenesis, yağ asitleri ve enerji metabolizması acetyl-CoA aracılığıyla aracılığıyla ve amino asit alanin dönüştürülebilir için. TCA döngüsü yeterli çözünmüş oksijen varlığı altında oluşur ve enerji glikoz dönüştürmeye temelini oluşturur. Özellikle, ikincil İLETİMLERİNİZE ilginç bir fenomen glikoliz ağırlıklı olarak enerji üretimi için kullanılır ve TCA döngüsü ve elektron taşıma zinciri içerir, aerobik mitokondrial solunum downregulated memeli kanser hücreleri1,2. Biz son zamanlarda laktat seviyeleri ve bunun sonucunda laktat/pyruvate (L/P) oranı model organizma Caenorhabditis elegans (C. elegans) yaşlanma sırasında azalma gösterdi. Aynı şekilde, bulduk C. elegans içinde memeli tümör baskılayıcı p53 ortholog CEP-1 yaşa bağlı değişiklikler onun transkripsiyon hedefleri3aktivasyonu ile enerji metabolizmasının önemli bir role sahiptir.
Hücreleri, laktat ve pyruvate konsantrasyonlarda ölçümü gibi biyolojik deneyleri, hassasiyet, doğruluk, örnek boyutu ve kolorimetrik/fluorimetric tahlil kitleri kuluçka süresi önemli ölçüde yeniden geliştirilmiştir. Teknolojik yenilikler sayesinde artık zor olan kendi küçük boyutları verilen çeşitli metabolitleri ve ara metabolitleri C. elegans, büyük ölçekli kültür olmadan çözümlenecek edebiliyoruz. Genel olarak, Renkölçer Testin duyarlılığı bir büyüklük fluorimetric tahlil küçük olduğunu; Ancak, Renkölçer yaklaşım daha ortak laboratuvarlar ayarında uygundur. Bu yuvarlak solucanlar bir exoskeleton eklenmiş olduğundan Ayrıca, homojenizasyon ve protein yağış içeren bir ayıklama tekniği C. elegans hücreleri laktat ve pyruvate konsantrasyonlarda kantitatif tayini için çok önemlidir memeli kültürlü hücre hatları4,5aksine kütikül aradı. Burada, laktat ve pyruvate konsantrasyonları C. elegansörnek çıkarılması için ipuçları da dahil olmak üzere ticari Renkölçer tahlil kitleri kullanarak çözümlemek için bir protokol açıklayın.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:696px;" width="696">
	<tbody>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:247px;">Lactate Colorimetric/Fluorimetric Assay kit&#160;</td>
			<td style="width:100px;">BioVision</td>
			<td style="width:136px;">#K607-100</td>
			<td style="width:213px;">colorimetric/fluorimetric 
			100 assays; Store at -20oC</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:247px;">EnzyChrom Pyruvate 
			Assay Kit</td>
			<td style="width:100px;">BioAssay 
			Systems</td>
			<td style="width:136px;">#EPYR-100</td>
			<td style="width:213px;">colorimetric/ fluorometric 
			100 assays; Store at -20oC</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:247px;">BCA Protein Assay Kit</td>
			<td style="width:100px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:136px;">#23225</td>
			<td style="width:213px;">colorimetric assay; store at 
			&#160;room temperature</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:247px;">Trichloroacetic Acid</td>
			<td style="width:100px;">Wako Pure Chemical</td>
			<td style="width:136px;">#207-04955</td>
			<td>store at room temperature</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:247px;">Teflon homogenizer&#160;</td>
			<td style="width:100px;">Iwaki/Pyrex</td>
			<td style="width:136px;">#358034 (Wheaton)</td>
			<td style="width:213px;">Instead of Iwaki/Pyrex, 
			available by Wheaton</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

small-scale colorimetric assays of intracellular lactate and pyruvate in the nematode caenorhabditis elegans

Laktat ve pyruvate hücre içi enerji metabolik yollar anahtar ara ürün vardır. Hücrelerdeki laktat/pyruvate oranı izleme yaşa bağlı enerji metabolizması mitokondriyal Oksidatif fosforilasyon ve aerobik glikoliz arasında bir dengesizlik var olup olmadığını belirlemek için yardımcı olur. İşte, model organizma C. elegansticari Renkölçer tahlil kitleri için laktat ve pyruvate kullanımını göstermektedir. Son zamanlarda, duyarlılık ve kolorimetrik/fluorimetric tahlil kitleri doğruluğunu büyük ölçüde araştırma ve geliştirme reaktif üreticileri tarafından yürütülen tarafından geliştirilmiştir. Geliştirilmiş reaktifler C. elegansbir 96-şey plaka ile küçük ölçekli deneyleri kullanımı etkinleştirdiniz. Genel olarak, bir fluorimetric tahlil kolorimetrik bir tahlil için duyarlılık içinde üstündür; Ancak, Renkölçer yaklaşım daha laboratuarında ortak kullanım için uygundur. Başka bir önemli kantitatif tayin için bu deneyleri homojenize C. elegans protein yağış sorundur örnekleri. Bizim protein yağış yöntemindeki ortak precipitants (Örn., trichloroacetic asit, perklorik asit ve metaphosphoric asit) numune hazırlama için kullanılır. Bir tahlil protein ücretsiz örnek doğrudan homojenizasyon sırasında soğuk precipitant (% 5'lik son konsantrasyonu) ekleyerek hazırlanır.

Renkölçer deneyleri laktat ve pyruvate konsantrasyonları kantitatif tayin için biz C. elegans7,8önceki raporlar ile karşılaştırıldığında bu deneyleri doğruluğunu gösterdi. Burada, örnek çıkarma sırasında protein yağış süreç doğru değerleri oluşturmak için en önemli bir adım oldu. Protein yağış, ortak precipitants için (Örn., TCA, PCA, veya metaphosphoric asit) test örnekleri ...

Watch this Scientific Journal Video about Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans

Değiştirilmiş küçük ölçekli çıkarma ve laktat ve Yuvarlak solucanlar pyruvate Renkölçer deneyleri tarif C. elegans. Ticari tahlil kitleri kullanarak, teknik geliştirme hassasiyet ve doğruluk önemlidir. Ayıklama protein yağış hücre içi metabolitleri kantitatif tayini için en önemli adımdır.

Küçük ölçekli Renkölçer deneyleri, intrasellüler laktat ve Pyruvate nematodunun Caenorhabditis elegans içinde

Lactate and pyruvate are key intermediates of intracellular energy metabolic pathways. Monitoring the lactate/pyruvate ratio in cells helps to determine ...

Bu araştırma, nematod gelişim haklarının analizi gibi biyokimya sayımı ve metodoloji alanındaki tüm soruların yanıtlatına yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı ekstradüksiyon ve içecek protein çökeltme ve solucanların homojenizasyonudur. Bu deneye, bir gecede 37 santigrat derecede 300 mililitre LB suyu sıvı ortasında E.coli OP50 suşunu büyüterek başlayın.Başarılı OP50'yi dört santigrat derecede saklayın. Pipet en az üç önceden hazırlanmış NGM, veya Nematode Büyüme Medya Agar Plakalar kültürlü OP50 iki mililitre ve elle plaka girdap yayıldı. OP50 ince bir tabaka oluşturmak için bir gecede oda sıcaklığında plakalar kuluçka.Daha sonra, her OP50 NGM plaka en az 100 solucan eklemek için, solucanlar ile bir tabak agar bir parça almak için steril bir kürdan kullanın. Kültür solucanlar 20 santigrat derecede solucanlarla en az üç tabak, ta ki solucanlar stereoskopik mikroskop altında doğrulanan yetişkin aşamasına ulaşana kadar. Stereoskopik mikroskop kullanarak yumurta dolu gravid hermafroditler bulun.Plakalara beş mililitre S-tampon ekledikten sonra, solucanları her üç plakadan 15 mililitrekonik tüpe aktarmak için Pasteur pipetini kullanın. Solucanları 15 mililitre S-tampon ekleyerek ve 30 saniye oda sıcaklığında 300 kez G'de santrifüj ederek üç kez yıkayın. S-arabelleği hacmi beş mililitreyi aşarsa, santrifüjden sonra fazla arabelleği çıkarın.Başarılı eksonizasyon ve dökme yumurta izolasyonu için solucanları 0,5 mililitre alkalin hipo klorat çözeltisi içinde çözün. 10-15 dakika oda sıcaklığında ters çevirerek ve kuluçka ile karıştırın. Çözümü çıkarmak için 30 saniye boyunca 1, 400 RPM'de santrifüj.Yumurta pelet yıkamak için S-tampon 15 mililitre kullanın. Santrifüj den sonra supernatant çıkarın ve en az üç kez bu yıkama tekrarlayın. Son yıkamadan sonra, peleti 5-6 mililitre S-tampon uzerine askıya alıyoruz, E.coli olmadan ve yumurtaları bir gecede 20 santigrat derecede kuluçkaya yatırıp yumurtaları yumurtadan çıkarıyoruz ve L1 sahne larvalarının H senkron kültürünü elde ediyoruz.Pipet 10 mikrolitre S-tampon içeren L1 solucanları üç kapak fişinde. Stereoskopik mikroskop altında larvaları sayın ve yaklaşık L1 evre larvalarının sayısını belirlemek için ortalamayı hesaplayın. Son olarak, Op50 ile beş NGM Agar Plakaları L1 sahne larvaları aktarın ve genç yetişkin aşamasına kadar 20 santigrat derece onları büyümek, sırasında kendi kendine döllenme oluşur ve birkaç yumurta yatırılır.Her gün mikroskop altında solucanlar gözlemlemek ve daha sonra genç yetişkin, ya da beş günlük solucanlar toplamak. Sadece yaşayan solucanları seçmek için, 3-4 mililitre S-tamponunda asılı olan solucanları 15 mililitrelik konik bir tüpe ekleyin. Sonra buz gibi eşit hacimli ekleyin 60% sakaroz ve karıştırın.Tüpü 15 saniye boyunca 4 santigrat derecede 1, 500 kez G'de santrifüj edin. Sonra dikkatle tüp duvarından solucanlar taşımak için bir Pasteur pipet kullanın ve sonra taze bir tüp içine yüzen solucanlar kaldırın. Solucanları yıkamak için tüpü S-tamponile doldurun ve 30 saniye boyunca 4 santigrat derecede 1500 kez G'de santrifüj yapın.Arabelleği çıkarın ve yıkamayı iki kez daha tekrarlayın. Üçüncü yıkamadan sonra, herhangi bir solucan ıstırmama emin olmak için, supernatant çıkarın ve yıkanmış solucanların ıslak hacmini ölçmek için 1.000 mikrolitrelik pipet ucu kullanın. Protein yağışı için, yıkanmış solucanları buz üzerine yerleştirilen bir homogenizer %10 trikloroasetik asit hacmine eşit hacimde eklemek için pasteur pipeti kullanın.1, 300 RPM'ye kadar dönüşlü 40 pasel darbesi kullanarak homojenleştirin. Homojen sonicate% 20 görev döngüsü ile bir ultrasonik homogenizer kullanın. Homojeni buz üzerine yerleştirilen 1,5 mililitrelik tüpe aktarmak için pasteur pipetkullanın.Bir mikro santrifüj tüpü için homojen transfer sonra, santrifüj 8, 000 zaman G dört derece santigrat 10 dakika açıklığa kavuşturmak için. Supernatant'ı taze bir tüpe aktarın ve nötralize etmek için dört azı lı potasyum klorür ekleyin ve 20 dakika boyunca buzüzerinde kuluçkaya yatırın. Sonra 8,000 kez G'de 4 santigrat derecede 10 dakika santrifüj edin.Supernatant'ı taze bir tüpe aktarın ve daha fazla tahlil için gerekli olana kadar 80 santigrat derecede saklayın. Laktat konsantrasyonu ölçmek için, test örnekleri için yinelenen analizler yürütmek için bir kolorimetrik test kiti kullanın. 96 kuyulu bir plakanın her kuyuya test numunelerinden 10 mikrolitre ekleyin ve sonra ses seviyesini 15 mikrolitreye ayarlamak için her numuneye laktat test arabelleği ekleyin.Seyreltik 100 milimolar L + Laktat Standart laktat tsay tampon ile bir milimolar. Sonra, kuyubir dizi içine, sıfır, iki, dört, altı, sekiz ve seyreltilmiş L + Laktat Standart 10 mikrolitre ekleyin. Her kuyuya 50 mikrolitre reaksiyon karışımı ekleyin ve rengin gelişmesi için ışıktan en az 30 dakika boyunca oda sıcaklığında kuluçkaya yatırın.Son olarak, 570 nanometre de her kuyunun emiciliğini ölçmek için bir mikroplaka okuyucu kullanın. Reaksiyon karışımının emiciliğinden arka plan kontrol karışımının emiciliğini çıkarın. Daha sonra laktat standart eğrisini çizin ve her konsantrasyonu 2,25 ile çarparak eğriden laktat konsantrasyonlarını hesaplayın.Test numunelerinde pirüvat konsantrasyonu ölçmek ve çift yönlü incelemeler yapmak için kolorimetrik bir test kiti kullanın. 96 kuyulu bir plakanın farklı kuyularına test numunelerinden 10 mikrolitre ekleyin ve her numuneye 90 mikrolitre çalışma reaktifi ekleyin. Oda sıcaklığında 30 dakika boyunca inkübasyon.Sonra 570 nanometre her kuyunun emiciliğini ölçmek için mikroplaka okuyucu plaka yerleştirin. Pirüvat standart eğrisini çizin ve her konsantrasyonu 2,25 ile çarparak standart eğriden pirüuvat konsantrasyonlarını hesaplayın. Ve son olarak, test örneklerindeki protein konsantrasyonu ölçmek için metin protokolünde açıklandığı gibi kolorimetrik bir test kiti kullanın.Protein çökeltmesinden sonra laktat ve pirüvat konsantrasyonlarının kantitatif tayini için kolorimetrik tahliller kullanılabilir. Bu deney, C.Elegans'taki önceki raporlara aykırı olarak kolorimetrik tahlillerin doğruluğunu göstermektedir. Ayrıca, bu tahliller kısa bir süre içinde küçük ölçekli numunelerde bile laktat ve pirüvat konsantrasyonlarını ölçmek için yeterince duyarlıdır.C.elegans laktat ve pirüvat doğru tespit etmek için, solucanların homojenizasyonu sırasında protein çökeltme gerçekleştirmek için çok önemlidir. Tespit edilen laktat ve pirüuvat miktarı, homojenizasyon sırasında proteinlerin protein olarak çöktürüldüğünde, bozulmamış sitosolik fraksiyona göre veya homojenizasyondan sonra laktat veya pirüuvat saptanmadığunda daha yüksektir.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Small-Scale Colorimetric Assays of Intracellular Lactate and Pyruvate in the Nematode Caenorhabditis elegans

Covalent Binding of Antibodies to Cellulose Paper Discs and Their Applications in Naked-eye Colorimetric Immunoassays

Selüloz Kağıt Diskler ve Çıplak göz Kolorimetrik İmmüno Onların Uygulamaları antikorların bağlama Kovalent

This report presents two methods for the covalent immobilization of capture antibodies on cellulose filter paper grade No. 1 (medium-flow filter paper) ...

Automated Acoustic Dispensing for the Serial Dilution of Peptide Agonists in Potency Determination Assays

Etkili belirlenmesi tahlillerinde Peptit Agonistlerinin seri Seyreltme için Dağıtım Otomatik Akustik

As with small molecule drug discovery, screening for peptide agonists requires the serial dilution of peptides to produce concentration-response curves. ...

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

Yüksek işlem hacmi Caenorhabditis Elegans kimyasal tarama için basit bir yöntem

Caenorhabditis elegans is a useful organism for testing chemical effects on physiology. Whole organism small molecule screens offer significant advantages ...

A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

Demir içeriği tesislerinde ölçme kolorimetrik yöntemi

Iron, one of the most important micronutrients in living organisms, is involved in basic processes, such as respiration and photosynthesis. Iron content ...

Mapping Metabolism: Monitoring Lactate Dehydrogenase Activity Directly in Tissue

Eşleme metabolizma: doğrudan dokusunda laktat dehidrogenaz etkinliğini izleme

Mapping enzymatic activity in space and time is critical for understanding the molecular basis of cell behavior in normal tissue and disease. In situ ...

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

Cyanobacterium Synechocystis Phycobiliprotein içeriğinde spektrofotometrik tayini

This is a simple protocol for the quantitative determination of phycobiliprotein content in the model cyanobacterium Synechocystis. Phycobiliproteins are ...

Plate-based Large-scale Cultivation of Caenorhabditis elegans: Sample Preparation for the Study of Metabolic Alterations in Diabetes

Plate-based Large-scale Cultivation of Caenorhabditis elegans: Sample Preparation for the Study of Metabolic Alterations in Diabetes

Large-scale tarımı plaka tabanlı Caenorhabditis elegans: diyabet metabolik değişiklikler çalışma için numune hazırlama

Culturing Caenorhabditis elegans (C. elegans) in a large-scale manner on agar plates can be time-consuming and difficult. This protocol describes a simple ...

In Vitro Ubiquitination and Deubiquitination Assays of Nucleosomal Histones

Nükliosomal Histones in vitro Ubiquitination ve Deubiquitination bulguları

Ubiquitination is a post-translational modification that plays important roles in various signaling pathways and is notably involved in the coordination ...