Name: bioprintable alginate/gelatin hydrogel 3d in vitro model systems induce cell spheroid formation
Uploaded: 2018-07-02T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bioprintable Alginate/Gelatin Hydrogel 3D In Vitro Model Systems Induce Cell Spheroid Formation at JoVE.com

타오 장 그들의 장학금 지원에 대 한 중국 장학금 위원회 (201403170354)와 맥 길 엔지니어링 박사 수상 (90025) 감사합니다. 호세 G. Munguia-로페즈 CONACYT (250279와 290936 291168) 및 FRQNT (258421) 그들의 장학금 지원에 대 한 감사. 살바도르 플로레스-토레스 CONACYT을 자금 (751540) 그들의 장학금 감사 합니다. 조셉 M. Kinsella 주셔서 국가 과학 및 공학 연구 위원회, 캐나다 재단 혁신, 타운센드 Lamarre 가족 재단, 그리고 맥 길 대학에 대 한 자신의 자금. 우리는 Allen Ehrlicher 그의 고분자, 우리 우리에 게 붙일 레이블된 셀 라인에 대 한 액세스를 부여에 대 한 그의 confocal 현미경, Morag 공원 사용 하 수 있도록 댄 Nicolau 사용 하 수 있도록 하는 것을 감사 하 고 싶습니다.

1. 재료, 하이드로 겔, 셀 문화 자료의 준비
<ol><li>
소재와 솔루션 준비
	<ol>
<li>세척 하 고 건조 한 250 mL 및 100 mL 유리 비 커, 자석 교 반기, 주걱, 10 mL 카트리지, 25 G (0.5의 길이)와 250 µ m의 내경 원통 노즐. 압력가 마로 소독 하 여 자료를 소독 그들에서 121 ° C/15 분/1 atm. 사용까지 무 균 조건 하에서 재료를 유지. 참고: 공급 업체 정보에 대 한 테이블의 자료 를 참조 하십?...

<ol>
	<li>Cui, X., Hartanto, Y., Zhang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+multicellular+spheroids+formation.">Advances in multicellular spheroids formation.</a> Journal of the Royal Society Interface. 14 (127), (2017).</li><li>Yip, D., Cho, C. 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Structural investigation.</a> Journal de Physique (France). 49 (2), 319-332 (1988).</li><li>Djabourov, M., Leblond, J., Papon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gelation+of+aqueous+gelatin+solutions.+II.+Rheology+of+the+sol-gel+transition.">Gelation of aqueous gelatin solutions. II. Rheology of the sol-gel transition.</a> Journal de Physique (France). 49 (2), 333-343 (1988).</li><li>Coussot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Rheometry of Pastes, Suspensions, and Granular Materials: Applications in Industry and Environment. , (2005).</li><li>Ouyang, L., Yao, R., Zhao, Y., Sun, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+bioink+properties+on+printability+and+cell+viability+for+3D+bioplotting+of+embryonic+stem+cells.">Effect of bioink properties on printability and cell viability for 3D bioplotting of embryonic stem cells.</a> Biofabrication. 8 (3), 035020 (2016).</li><li>Michon, C., Cuvelier, G., Launay, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentration+dependence+of+the+critical+viscoelastic+properties+of+gelatin+at+the+gel+point.">Concentration dependence of the critical viscoelastic properties of gelatin at the gel point.</a> Rheologica Acta Rheologica Acta: An International Journal of Rheology. 32 (1), 94-103 (1993).</li><li>Mouser, V. 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셀-라덴 구조 오염 (생물학 또는 화학) 과정에서 어느 시점에 발생 하는 경우 손상 될 수 있습니다. 일반적으로, 생물 학적 오염 2 후 본 또는 색 문화의 3 일 문화 미디어 또는 bioprinted 구조 변경. 따라서, 살 균 (물리적, 화학적 소독) 모든 셀 관련 프로세스에 대 한 중요 한 단계 이다. 주목할 만한, 압력가 마로 소독 젤라틴 우리가 실시 하는 시험에서 느리게 젤 만든 고 속성을 변경 합니다. 따라서, ...

2 차원 세포 배양은 암 연구에서 널리 이용 된다, 비록 제한 영양분과 산소의 동일한 농도로 단층 형태로 재배 되 고 세포 존재 합니다. 이러한 문화는 중요 한 셀 부족과 상호 작용 세포-매트릭스 네이티브 종양 microenvironment (TME)에 제시. 따라서, 이러한 모델 제대로 탈 셀 동작, 등 부자연 스러운 형태학, 불규칙 한 수용 체 조직, 막 분극, 다른 비정상적인 유전자 발현의 결과로 생리 조건 정리 조건1,2,,34. 다른 한편으로, 3 차원 세포 배양, 어디 집계, spheroids, 또는 organoids로 체적 공간에서 세포를 확장 수 더 정확한 생체 외에서 근본적인 세포 생물학과 생리학을 공부 하는 대안 기술을 제공 합니다. 3D 세포 배양 모델 수 또한 네이티브 TME 생체 외에서1,,45의 중요 한 생리 적 특성은 세포-ECM 상호 작용을 격려 한다. 신흥 3D bioprinting 기술은 이기종 TME를 모방 하는 모델을 만들 가능성을 제공 합니다.
3D bioprinting 신속한 프로토 타입에서 파생 되 고 생활의 복잡 한의 일부를 흉내 낸 수 있는 3 차원 마이크로 구조 제조 조직 샘플6,7. 현재 bioprinting 방법 등 잉크젯, 압출 성형, 레이저를 이용한 인쇄8. 그 중, 압출 메서드는 정확 하 게 다른 초기 위치에서 다른 유형의 자료를 배치 하 여 인쇄 된 매트릭스 내에서 제어 하려면이 수 있습니다. 따라서, 모델 유형이 다른 시험관에 관련 된 여러 종류의 셀 이나 행렬 조작 하 가장 좋은 접근 이다. 압출 bioprinting는 성공적으로 구축 하는 귀의 모양된 건설 기계9, 혈관 구조10,,1112, 및 조직13, 높은 인쇄 충실도 셀에 결과 피부 사용 되었습니다. 생존 능력입니다. 기술 또한 다양 한 소재 선택, 알려진된 밀도와 높은 재현성14,,1516,17 포함 하는 셀 자료를 예금 하는 능력을 갖추고 . 천연 및 합성 hydrogels 자주 그들의 생체 적합성, bioactivity, 및 그들의 친수성 네트워크 ECM7,18 를 구조적으로 설계 될 수 있다 3D bioprinting bioinks로 사용 된다 19,20,21,,2223. 이후 그들은 셀, 구조 요소, 영양소 및 가스, 침투성 접착 사이트를 포함할 수 있습니다 및 장려 하기 위해 적절 한 기계적 속성 셀 개발24Hydrogels 유리한도 있습니다. 예를 들어, 콜라겐 hydrogels 세포를 연결 하는 데 사용할 수 있는 앵커리지 사이트 integrin를 제공 합니다. 젤라틴, 변성된 콜라겐, 유사한 세포 접착 사이트를 유지합니다. 반면, alginate bioinert 이지만 divalent 이온25,26,,2728와 crosslinks를 형성 하 여 기계적 무결성을 제공 합니다.
이 작품에서는, 우리는 bioink, alginate과 젤라틴, 네이티브 종양 stroma의 미세한 구조 유사성으로 이루어진 복합 하이드로 겔 개발. 유방암 세포 및 섬유 아 세포는 hydrogels에 포함 했다 그리고 vivo에서 microenvironment을 모방 하는 3D 모델을 만드는 입체 기반 bioprinter 통해 인쇄. 설계 된 3D 환경 세포 배양 (> 30 일)의 오랜 기간 동안 높은 생존 능력으로 다세포 종양 spheroids (MCTS)를 암 세포 수 있습니다. 이 프로토콜에서는 복합 hydrogels 합성, 재료의 미세 및 전이성, bioprinting 세포 유형이 다른 모델, 특성화 고 MCTS 형성 관찰의 방법론을 보여 줍니다. 이러한 방법론은 약물 검사, 셀 마이그레이션 분석 실험, 및 기본적인 셀에 집중 하는 연구에서 잠재적인 응용 프로그램 뿐만 아니라 다른 유형의 조직 모델의 다른 디자인으로 압출 bioprinting에 다른 bioinks에 적용 될 수 있습니다. 생리 적 기능입니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="925">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Sodium alginate</td>
			<td style="width:213px;">FMC BioPolymer</td>
			<td style="width:173px;">CAS-No: 9005-38-3</td>
			<td style="width:167px;">Protanal LF 10/60 FT</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Gelatin</td>
			<td style="width:213px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">G9391</td>
			<td>Type B gelatin from bovine skin</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Dubelcco&#39;s phosphate buffered saline (DPBS 1X)</td>
			<td style="width:213px;">Gibco</td>
			<td style="width:173px;">LS14190136</td>
			<td>1&#215;, w/o calcium, w/o magnesium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Magnetic hotplate</td>
			<td style="width:213px;">Corning&#160;</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>Stirrer/hot plate model PC-420</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">50 mL centrifuge tubes</td>
			<td style="width:213px;">Corning</td>
			<td style="width:173px;">352098</td>
			<td>Falcon&#174; 50mL High Clarity PP Centrifuge Tube, Conical Bottom, Sterile</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:213px;">GMI</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>Sorvall RT6000D, GMI, USA</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Calcium chloride anhydrous</td>
			<td style="width:213px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>C1016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">MilliQ water</td>
			<td style="width:213px;">Millipore</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Millipore 0.22 &#181;m filters</td>
			<td style="width:213px;">Millipore</td>
			<td style="width:173px;">SLGS033SB</td>
			<td>Millex-GS Syringe Filter Unit, 0.22&#160;&#181;m, mixed cellulose esters, 33&#160;mm, ethylene oxide sterilized</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Oscillation rheometer MCR 302</td>
			<td style="width:213px;">Anton Paar</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Rheometer measuring tool CP25</td>
			<td style="width:213px;">Anton Paar</td>
			<td style="width:173px;">79038</td>
			<td>Conical plate geometry for rheometer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">RheoCompass</td>
			<td style="width:213px;">Anton Paar</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>Software controlling rheometer MCR 302</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Scanning electron microscope</td>
			<td style="width:213px;">Hitachi</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>SEM, Hitachi SU-3500 Variable Pressure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Paraformaldehyde, 96%, extra pure</td>
			<td style="width:213px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:173px;">416785000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Dulbecco modified eagle medium (DMEM)</td>
			<td style="width:213px;">Gibco</td>
			<td>11965092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antibiotic/Antimycotic solution (100X) stabilized</td>
			<td style="width:213px;">Sigma</td>
			<td>A5955</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal bovine serum</td>
			<td>Wisent Bioproducts</td>
			<td style="width:173px;">080-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:372px;">Cell culture T-75 flasks</td>
			<td style="width:213px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">CLS430641</td>
			<td>75 cm2 TC-Treated surface treatment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3D bioprinter BioScaffolder 3.1</td>
			<td style="width:213px;">GeSiM</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">GeSim software</td>
			<td style="width:213px;">GeSiM</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>Software controlling BioScaffolder 3.1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10cc cartridge UV resist</td>
			<td>EFD Nordson</td>
			<td>7012126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">End cap</td>
			<td>EFD Nordson</td>
			<td>7014472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tip cap</td>
			<td>EFD Nordson</td>
			<td>7014469</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Piston&#160;</td>
			<td>EFD Nordson</td>
			<td>7012182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stainless nozzle G25</td>
			<td>EFD Nordson</td>
			<td>7018345</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Water bath</td>
			<td style="width:213px;">VWR</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Agarose</td>
			<td style="width:213px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">A9539</td>
			<td>Bioreagent, for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Costar 6-well plates&#160;</td>
			<td style="width:213px;">Corning</td>
			<td style="width:173px;">3516</td>
			<td>TC-Treated Multiple Well Plates, Individually Wrapped, Sterile&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Confocal spinning disk inverted microscope</td>
			<td style="width:213px;">Olympus Life Science</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>Olympus IX83</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">MTS assay kit</td>
			<td style="width:213px;">Promega</td>
			<td style="width:173px;">G3582</td>
			<td>CellTiter 96&#174; AQueous&#160;One Solution Cell Proliferation Assay&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Live/Dead viability cytotoxicity kit</td>
			<td>Molecular Probes,ThermoFisher Scientific</td>
			<td>L3224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Trypsin 0.25/EDTA 1X</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Corning 96-well plate</td>
			<td style="width:213px;">Corning</td>
			<td style="width:173px;">3595</td>
			<td>Clear Flat Bottom Polystyrene TC-Treated Microplate, Individually Wrapped, with Low Evaporation Lid, Sterile</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Autoclave Tuttnauer</td>
			<td style="width:213px;">Heidolph Brinkmann</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>Heidolph Tuttnauer 2540E Autoclave Sterilizer Electronic Model with 4 Stainless Steel Trays, 23L Capacity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Trypan blue</td>
			<td style="width:213px;">Invitrogen&#160;</td>
			<td style="width:173px;">T10282</td>
			<td>0.4% solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Ethanol</td>
			<td style="width:213px;">Commercial Alcohols</td>
			<td style="width:173px;">P016EA95</td>
			<td>Greenfield Speciality Alcohols</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:372px;">CO2 Incubator</td>
			<td style="width:213px;">Panasonic</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>MCO 19AIC-PA</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">Lyophilizer&#160;</td>
			<td style="width:213px;">SP Scientific</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>Virtis Sentry 2.0</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">SolidWorks</td>
			<td style="width:213px;">Dassault Systems</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>A CAD software used to build demostrative propeller-like model</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:372px;">MATLAB</td>
			<td style="width:213px;">The MathWorks</td>
			<td style="width:173px;">N/A</td>
			<td>A programming software used to generate G-code for BioScaffolder 3.1</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bioprintable alginate/gelatin hydrogel 3d in vitro model systems induce cell spheroid formation

기본 종양 microenvironment의, 생화학, 세포 및 생물이 하지 성장 불멸 하 게 암 세포 선을 사용 하 여 기존의 2 차원 (2D) 세포 배양 하 여 지는. 다른 종류의 세포에 의하여 포함 된 다른 유형의 3 차원 (3D) 종양 모델을 만들 bioprinting 기술을 사용 하 여 이러한 문제를 극복할 수 있습니다. Alginate와 젤라틴은 bioprinting 그들의 생체 적합성, biomimicry, 및 기계적 특성 때문에 가장 일반적인 생체 재료의 두. 두 고분자를 결합해 서, 우리는 네이티브 종양 stroma의 미세한 구조 유사성과 bioprintable 복합 하이드로 겔을 달성. 우리는 유동성을 통해 복합 하이드로 겔의 전이성 공부 하 고 얻은 최적의 인쇄 창. 유방암 세포 및 섬유 아 세포는 hydrogels에 포함 되었고 vivo에서 microenvironment를 흉내 낸 3D 모델을 형성 하. Bioprinted 이종 모델 장기 세포 배양 (> 30 일)에 대 한 높은 생존 능력을 달성 하 고 추진 하 고 있는 다세포 종양 spheroids (MCTS)으로 유방암 세포의 자기 조립. 마이그레이션 및 암 관련 fibroblast 세포 (CAFs)의이 모델에는 MCTS 상호 작용 관찰합니다. Bioprinted 셀 문화 플랫폼, 공동 문화 시스템을 사용 하 여 기질 구성 tumorigenesis의 의존도 공부 하는 독특한 도구를 제공 합니다. 이 기술은 높은 처리량, 저렴 한 비용, 및 높은 재현성, 기능 그리고 그것은 또한 기존의 세포 단층 배양을 다른 모델 및 암 생물학 연구를 동물 종양 모델을 제공할 수 있습니다.

온도 스윕 25 ° C와 37 ° C에서 A3G7 전조의 뚜렷한 차이 보여줍니다. 전조는 37 ° C에 액체 있으며 1938.1 ± 84.0 mPa의 복잡 한 점도 큰 G에 의해 유효성이 검사 되는 s, x "G 이상 '. 으로 온도 감소, 전조 트라이-나선 형성29,30에 젤라틴 분자의 자발적인 물리적 녹 채 인해 실제 겔 화를 겪 습. 모두 G'는 g "증가 하 고 솔-젤 전환을 나타내는...

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Bioprintable Alginate/Gelatin Hydrogel 3D In Vitro Model Systems Induce Cell Spheroid Formation

우리 불멸 하 게 종양 및 섬유 세포 bioprintable alginate/젤라틴 bioink에 포함 된 구성 된 이기종 유 방 암 모델 개발. 모델이 비보에 종양 microenvironment tumorigenesis 운전 메커니즘에 대 한 통찰력을 양보 하는 다세포 종양 spheroids의 형성을 촉진 한다.

셀 회전 타원 체 형성을 유발 하는 모델 시스템에 3D 생체 외에서 Bioprintable Alginate/젤라틴 하이드로 겔

The cellular, biochemical, and biophysical heterogeneity of the native tumor microenvironment is not recapitulated by growing immortalized cancer cell ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioprintable Alginate/Gelatin Hydrogel 3D In Vitro Model Systems Induce Cell Spheroid Formation

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

복원 된 인간의 각막 모양의 상피 (RHCE) 조직 모델을 사용하여 눈에 자극성 화학 물질의 위험 식별을위한 눈 자극 시험 (EIT)

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

연구

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Modeling Ovarian Cancer Multicellular Spheroid Behavior in a Dynamic 3D Peritoneal Microdevice

동적 3D 복막의 마이크로 디바이스의 모델링 난소 암 다세포 회전 타원체 동작

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<em&gt; 체외</em쥐의 추간판의&gt; 장기 문화 모델

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

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Gelatin methacryloyl (GelMA) has become a popular biomaterial in the field of bioprinting. The derivation of this material is gelatin, which is hydrolyzed ...

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다층 하이드로겔 바이오잉크를 3차원 바이오프린팅에 사용하여 균일한 세포 분배

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장기 나노 물질 노출 다음 체외 물질 독성 테스트를 위한 고급 3D 간 모델

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...

3D Printing of In Vitro Hydrogel Microcarriers by Alternating Viscous-Inertial Force Jetting

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점성-관성 포스 제팅을 번갈아 가며 생체외 하이드로겔 마이크로캐리어의 3D 프린팅

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