Name: characterization of thymus-dependent and thymus-independent immunoglobulin isotype responses in mice using enzyme-linked immunosorbent assay
Uploaded: 2018-09-07T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay at JoVE.com

بتأييد هذه الدراسة بالمعاهد الوطنية للصحة منح R01 CA158402 (P. شيه) و R21 AI128264 (P. شيه)، منح وزارة الدفاع W81XWH-13-1-0242 (ص شيه)، على "جائزة الطيار" من معهد نيو جيرسي السرطان من خلال المنحة رقم P30CA072720 من معهد السرطان الوطني (ص شيه) منحة بوسكه الطبية الحيوية (ص شيه)، وزمالة فيكتور ستولر (A. لالاني)، وب أن والزمالة لازم جيمس باء (س. تشو).

هذا البروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية التي وضعتها لجنة أخلاقيات البحوث الحيوانية المؤسسية من جامعة روتجرز. وتستخدم جميع الفئران وفقا للمبادئ التوجيهية للمعاهد الوطنية للصحة وإطار بروتوكول حيوانية وافقت عليها لجنة الاستخدام ورعاية الحيوان المؤسسية.
1-إعداد الفئران وجمع ا?...

هنا، نحن تصف البروتوكول لوصف استجابات ايستب TD و TI Ig في الفئران باستخدام ELISA. ويتطلب التنفيذ الناجح لهذا البروتوكول استخدام المواد المحددة في الجدول 1، بما في ذلك لوحات المقايسة أليسا والتحصين Ags، الماوس Ig ايستب-خاصة بالأجسام المضادة والمعايير. وينبغي الحرص على تجنب استخدام لوحات ?...

ب اللمفاويات هي اللاعب الرئيسي في حصانة humoral ونوع الخلية فقط في الثدييات التي قادرة على إنتاج الأجسام المضادة، كما وصفته المناعية (Ig)1،2. الأجسام المضادة التي تفرزها الخلايا ب تقديم دفاع هائلة ضد غزو العوامل الممرضة عبر آليات متنوعة بما في ذلك تحييد، opsonization، وتكمل التنشيط، مما يؤدي إلى حصانة الحماية3. ويتحقق إفراز الأجسام المضادة بخلايا ب فقط بعد التنشيط الكامل ب خلايا معينة، الأمر الذي يتطلب عادة اثنين متميزة إشارات3. يتم ترحيل إشارة 1 بالربط المباشر من المستضد (Ag) لمستقبلات الخلية ب (المركز) أعرب على سطح الخلايا السذاجة محددة ب3. تبعاً لمصدر 2 إشارة، يمكن تقسيم الخلية بالتنشيط تعتمد على الغدة الصعترية (الدفتيريا) أو مستقلة عن الغدة الصعترية (TI)3،4. في رد مستضد TD، توفرها 2 إشارة تنشيط المشابهة CD4 مساعد (رح) خلايا تي، التي تعبر عن CD154، يجند لمستقبلات كوستيمولاتوري CD40 أعرب ب الخلايا1،،من23. في استجابة مستضد TI، 2 إشارة تأتي من الاشتباك أما مستقبلات مثل عدد القتلى (TLRs في حالة النوع 1 جي تي) أو العابرة للربط واسعة النطاق من بكرس (في حالة النوع 2 جي تي) في ب3،4خلايا. نوع 1 منظمة الشفافية الدولية (TI-1) مولدات المضادات الميكروبية يغاندس من TLRs، بما في ذلك ليبوبوليساكتشاريديس البكتيرية (لبس)، الكشف الفيروسية، والجرثومية "البد الحمض النووي"4،5. نوع 2 منظمة الشفافية الدولية (TI-2) مولدات المضادات بنية متكررة عالية، وهي قادرة على تقديم فترات طويلة ومستمرة إشارات إلى الخلية بواسطه العابرة للربط متعددة من4،بكرس6. وتشمل أمثلة نموذجية من المستضدات تي-2 السكريات المكوّرات الرئوية ومترافق هابتين السكاريد6،7. يمكن الحصول على ردود IgM محددة مستضد قوية المستضدات TD ومنظمة الشفافية الدولية ويمكن أيضا تحفز إنتاج الأجسام المضادة تحولت ايستب (مفتش، والقاهرة، وفريق الخبراء الحكومي الدولي) بمساعدة تقدمها مستضد تقديم الخلايا (Apc) مثل الخلايا الجذعية (DCs)1 ،،من23. وعلاوة على ذلك، المستضدات TD ومنظمة الشفافية الدولية قادرة على حمل ردود الذاكرة مع المساعدة من ناقلات الجنود المدرعة، ولكن TD المستضدات أكثر كفاءة في حفز الذاكرة خلية بالجيل3،8.
في هذا البروتوكول، هي أثارت ردود TD و TI Ig في الفئران بالتحصين داخل (القائمة) مع نموذج مترافق هابتين المستضدات مفج 2,4,6-ترينيتروفينيل-ثقب المفتاح هيموسيانين (TNP-كله) و TNP-السكاريد (المحايدة، الغاية تشعبت وكتلة عالية)، على التوالي9،،من1011. عادة ما تستخدم مولدات TD مع أخرى الأعشاب لتعزيز إنتاج الأجسام المضادة12. هنا في موقعنا البروتوكول، يتم حقن TNP-كله مع الشب، adjuvant استخداماً في التحصين الدراسات12. وتشمل الأمثلة الأخرى من المواد التي يمكن أن تستخدم كامل أو غير كامل فروند الشعبية adjuvant (فرنكات الجماعة المالية الأفريقية أو إيفا)، بدهن مونوفوسفوريل/تريهالوسي ديكورينوميكولاتي ("ربي" adjuvant)، والبد أوليجوديوكسينوكليوتيديس،، إلخ13 14. بعد التحصين، سيرا الماوس يتم حصادها في نقاط زمنية مختلفة، والأجسام المضادة TNP محددة في الأمصال كمياً باستخدام Ig ايستب محددة مرتبطة بالانزيم المرتبط بالانزيم (إليزا)9،10، 11.
أليسا هو تحليل القائم على لوحة يستخدم على نطاق واسع كأداة تشخيص في الطب، وأيضا كأداة تحليلية في بحوث الطب الأحيائي15،16. يتم استخدامه للكشف والتحديد الكمي لتحليلها بما في ذلك الأجسام المضادة، الهرمونات، السيتوكينات، المستقطبات، ومختلف المستضدات، إلخ. يمكن أن يؤديها أليسا في العديد من تنسيقات مختلفة، بما في ذلك ساندويتش، المباشرة وغير المباشرة، وتنافسية أليسا15،16. وبصفة عامة، أنها تنطوي على تعطيل تداول المستضد على سطح صلب، عادة لوحة microtiter 96، حسنا، الذي هو المحتضنة مع جسم الأولية. بعد الحضانة، يتم غسلها الجسم غير منضم بعيداً. في أليسا مباشرة، هو مترافق جسم الأولية مباشرة إلى إنزيم (عادة الفجل البيروكسيديز أو الفوسفاتيز القلوية)، التي يمكن أن تنشق الركازة اللونية تسفر عن تغيير لون مرئية الكشف عنها بواسطة أداة الكشف عن إشارة مثل جهاز المطياف الضوئي15،16. وفي المقابل، إذا كان جسم ثانوية المرتبطة بالانزيم يستخدم لربط جسم الأولية، ثم هذا يعتبر غير مباشرة15،أليسا16. أليسا المباشر أسرع حين أليسا غير المباشر هو أكثر حساسية15،16. في ساندويتش أليسا، اللوحات المغلفة بجسم "التقاط" تستخدم لشل مستضد الاهتمام بالعينات، ومن ثم يمكن الكشف عن مستضد الملتقطة بالضد "اكتشاف" آخر بطريقة مباشرة أو غير مباشرة15، 16-"ساندويتش أليسا" يوفر خصوصية عالية منذ الكشف عن antigen بواسطة اثنين من الأجسام المضادة المختلفة للمستضد. في أليسا تنافسية، يتم تأسيس المنافسة بين مستضد عينة مستضد لوحة زمنياً للربط لجسم الأولية، وثم يتم تركيز مستضد في عينة كمياً بقياس الانخفاض في إشارة من الركازة 15 , 16. أليسا تنافسية يمكن أن يؤديها باستخدام التنسيق المباشر أو غير المباشر المشار إليها أعلاه وهي مفيدة للكشف عن المستضدات صغيرة مع15،بيفرتون واحد فقط16.
تشمل التقنيات البديلة لقياس الأجسام المضادة راديو-المناعة (ريا)، اليكتروتشيميلومينيسسينسي (القامة) المقايسة وسطح الرنين مأكل مثل الطحين (موارد البرنامج الخاصة) الاعتداء17. وكان ريا المناعة الأولى وضع تلك التدابير وجود مستضد (أو جسم) بخصوصية عالية وحساسية باستخدام الكواشف راديولابيليد18،19. ومع ذلك، بسبب المخاوف من سمية المشعة والعمر التخزيني وتكاليف التخلص من التراخيص الخاصة للعمل مع المواد المشعة، أليسا أفضل ويستخدم الأسلوب أكثر ملاءمة للمشترك20،21. هو القامة مقايسة حساسة للغاية التي يتم تهيئتها باستخدام الكهرباء لتوليد الأنواع شدة رد الفعل من السلائف مستقرة على سطح القطب ردود فعل تشيميلومينيسسينت، ويمكن استخدامها لقياس مقدار تحليلها (مثل المستضدات أو 22من الأجسام المضادة). ومع ذلك، يصدرون يتطلب أداة خاصة وبالتالي لا تستخدم على نطاق واسع أليسا23. من موارد البرنامج الخاصة فحص مباشر التي يمكن استخدامها لقياس ربط يغاندس (مثلاً.، الأجسام المضادة) للجزيئات معطلة (مثلاً.، المستضدات) على جهاز استشعار رقاقة السطحية24. موارد البرنامج الخاصة بالكشف عن التفاعلات في الوقت الحقيقي جداً على وجه التحديد ولا تتطلب استخدام الكواشف المسمى كما هو الحال في أليسا. ومع ذلك، موارد البرنامج الخاصة أيضا يتطلب معدات خاصة ولديه حساسية أقل مما أليسا17. ونظرا للقيود المفروضة على الطرق البديلة، أليسا هو الأسلوب الأكثر ملائمة ومريحة لهدفنا في هذا البروتوكول. هنا، يمكننا وصف استخدام ساندويتش أليسا لتحليل مجموع مستويات ايستب Ig وإجراءات أليسا غير المباشرة لتحليل محددة مستضد Ig إيسوتيبيس.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:577px;" width="576">
	<tbody>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">VersaMax Tunable Microplate Reader</td>
			<td style="width:111px;">MDS Analytical Technologies</td>
			<td style="width:109px;">VERSAMAX</td>
			<td style="width:201px;">Equipment to read the plates</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">SOFTmax PRO 5.3</td>
			<td style="width:111px;">MDS Analytical Technologies</td>
			<td style="width:109px;">SOFTmax PRO 5.3</td>
			<td style="width:201px;">Software for the plate reader</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">GraphPad Prism</td>
			<td style="width:111px;">GraphPad</td>
			<td style="width:109px;">Prism</td>
			<td style="width:201px;">Software for graphing and statistics</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">TNP-AECM-polysaccharide (FICOLL)</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">F-1300-10</td>
			<td style="width:201px;">A TI Ag for immunization</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">TNP-KLH</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">T-5060-5</td>
			<td style="width:201px;">A TD Ag for immunization</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:156px;">TNP(38)-BSA</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">T-5050-10 (conjugation ratio: 38)</td>
			<td style="width:201px;">Coating Ag for TNP-specific ELISA</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:156px;">TNP(3)-BSA</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">T-5050-10 (conjugation ratio: 3)</td>
			<td style="width:201px;">Coating Ag for high affinity TNP-specific Ig</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Imject Alum</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">PI-77161</td>
			<td style="width:201px;">Alum adjuvant for immunization</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Falcon Polypropylene tubes</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">14-959-11A</td>
			<td style="width:201px;">For incubation of TNP-KLH/alum</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">BD Insulin Syringe</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">14-829-1B</td>
			<td style="width:201px;">For i.p. injection of mice</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Immuno 96-Well Plates, Flat-Bottom</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">14-245-61</td>
			<td style="width:201px;">For ELISA</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:156px;">Untreated 96-Well Microplates, Round-Bottom</td>
			<td style="width:111px;">VWR</td>
			<td style="width:109px;">82050-622</td>
			<td style="width:201px;">For serial dilutions of standards and samples</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Phosphatase substrate, 5 mg Tablets</td>
			<td style="width:111px;">Sigma</td>
			<td style="width:109px;">S0942-200TAB</td>
			<td style="width:201px;">AP substrate</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Diethanolamine</td>
			<td style="width:111px;">VWR</td>
			<td style="width:109px;">IC15251690</td>
			<td style="width:201px;">A component of AP substrate buffer</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgM</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1020-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgM</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG1</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1070-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG2a</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1080-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG2a</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG2b</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1090-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG2b</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG3</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1100-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG3</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgA</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1040-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgA</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgE</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1110-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgE</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgM</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1020-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgM</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG1</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1070-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG2a</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1080-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG2a</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG2b</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1090-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG2b</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG3</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1100-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG3</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgA</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1040-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgA</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgE</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1110-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgE</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgM standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">553472</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgM, Clone&#160; G155-228</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgG1 standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">554054</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgG1, Clone&#160; 107.3</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Mouse IgG2a standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">556651</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgG2a, Clone&#160; G155-178</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgG2b standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">554055</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgG2b, Clone&#160; 49.2</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgG3 standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">553486</td>
			<td style="width:201px;">KLH-specific IgG3, Clone&#160; A112-3</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Mouse IgA standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">550924</td>
			<td style="width:201px;">Mineral oil-induced IgA, Clone&#160; MOPC-320</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgE standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">557079</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgE, Clone&#160; C38-2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

characterization of thymus-dependent and thymus-independent immunoglobulin isotype responses in mice using enzyme-linked immunosorbent assay

الأجسام المضادة، كما وصف كما المناعية (Ig)، التي يفرزها ميزت ب الخلايا الليمفاوية، خلايا بلاسمابلاستس/البلازما، بالحصانة humoral تقديم دفاع هائلة ضد غزو العوامل الممرضة عبر آليات متنوعة. واحد الأهداف الرئيسية للتطعيم الحث على أجسام محددة مستضد واقية لمنع حدوث إصابات تهدد الحياة. على حد سواء تعتمد على الغدة الصعترية (TD) ومستقلة عن الغدة الصعترية المستضدات (TI) يمكن الحصول على ردود IgM محددة مستضد قوية ويمكن أن تحفز أيضا إنتاج الأجسام المضادة تحولت ايستب (مفتش، والقاهرة، وفريق الخبراء الحكومي الدولي) فضلا عن توليد خلايا الذاكرة ب بمساعدة المقدمة من مستضد تقديم الخلايا (Apc). وهنا يصف لنا بروتوكولا لوصف استجابات ايستب TD و TI Ig في الفئران باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم (ELISA). في هذا البروتوكول، استجابات TD والمفتش العام منظمة الشفافية الدولية هي في الفئران التي تلقاها التحصين داخل (القائمة) مع المستضدات مترافق هابتين النموذجي كله TNP (في الشب) و TNP-السكاريد (في برنامج تلفزيوني)، على التوالي. للحث على استجابة الذاكرة TD، يرد تحصين الداعم TNP-كله في الشب في 3 أسابيع بعد التحصين الأولى مع نفس المستضد/adjuvant. يتم حصاد الأمصال الماوس عند نقاط زمنية مختلفة قبل وبعد التحصين. مجموع مستويات مصل Ig والأجسام المضادة TNP على حدة في وقت لاحق كمياً استخدام Ig محددة ايستب ساندويتش وإليزا غير المباشرة، على التوالي. من أجل قياس تركيز المصل كل ايستب Ig بشكل صحيح، العينات تحتاج إلى أن تضعف على نحو مناسب لاحتواء ضمن النطاق الخطي للمنحنيات القياسية. باستخدام هذا البروتوكول، نحصل دائماً على نتائج يمكن الاعتماد عليها بخصوصية عالية وحساسية. عندما تستخدم بالاقتران مع أساليب أخرى مكملة مثل التدفق الخلوي، والثقافة في المختبر ب خلايا الطحال والمناعي تلطيخ (المدينة)، سيسمح هذا البروتوكول الباحثين للحصول على فهم شامل لجسم الردود في وضع تجريبي معين.

لقد استخدمنا هذا البروتوكول للتحقيق في دور منظم الحاسمة للنظام المناعي، TRAF3، ومنظمة الشفافية الدولية والمفتش العام TD ايستب الردود9،10،11. TRAF3 مباشرة أو غير مباشرة وينظم توصيل الإشارة لعدد من المستقبلات المناعية الفطرية و...

Watch this Scientific Journal Video about Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay at JoVE.com

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

في هذه الورقة، ويصف لنا بروتوكولا لوصف استجابات ايستب الغلوبولين المناعي (Ig) T-تعتمد على والمستقلة تي في الفئران باستخدام ELISA. تستخدم هذه الطريقة وحدها أو في تركيبة مع التدفق الخلوي سوف تسمح الباحثين تحديد الفروق في الاستجابات ايستب بالخليه بوساطة Ig في الفئران بعد التحصين مستضد تعتمد على T ومستقلة عن تي.

وصف الاستجابات ايستب الغلوبولين المناعي تعتمد على الغدة الصعترية، والغدة الصعترية مستقلة في الفئران باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Enzyme-linked Immunospot Assay (ELISPOT):  Quantification of Th-1 Cellular Immune Responses Against Microbial Antigens

Enzyme-linked Immunospot Assay ELISPOT:  Quantification of Th-1 Cellular Immune Responses Against Microbial Antigens

انزيم مرتبط Immunospot الفحص (ELISPOT) : القياس الكمي للردود TH - 1 المناعة الخلوية ضد مولدات المضادات الجرثومية

Adaptive immunity is an important component to clearance of intracellular pathogens.  The ability to detect and quantify these responses in humans is an ...

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

قياس الحمولة الجرثومية والاستجابات المناعية في الفئران المصابة المستوحدة الليستيريا</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Use of Interferon-&gamma; Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

Use of Interferon-ÃƒÅ½Ã‚Â³ Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

استخدام مضاد للفيروسات، γ الإنزيم المرتبط الفحص Immunospot لوصف الرواية تي خلية الحواتم من فيروس الورم الحليمي البشري

A protocol has been developed to overcome the difficulties of isolating and characterizing rare T cells specific for pathogens, such as human ...

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

توصيف الاستجابات الالتهابية خلال الاستعمار داخل الشرج مع الالتهاب الرئوي العقدي

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

زرع الجلد الذيل لدراسة خيفي CD4 T الردود الخليوي في الفئران

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

Application of Long-term cultured Interferon-&#947; Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle

Application of Long-term cultured Interferon-ÃƒÅ½Ã‚Â³ Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle

تطبيق على المدى الطويل مثقف انترفيرون γ انزيم مرتبط Immunospot الفحص لتقييم المستجيب والذاكرة T الردود خلية في الماشية

Effector and memory T cells are generated through developmental programing of na&#239;ve cells following antigen recognition. If the infection is ...

Bacterial Leaf Infiltration Assay for Fine Characterization of Plant Defense Responses using the Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae Pathosystem

Bacterial Leaf Infiltration Assay for Fine Characterization of Plant Defense Responses using the Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae Pathosystem

بكتيريا ورقة تسلل الفحص لتوصيف غرامة الردود الدفاع النبات باستخدام<em&gt; نبات الأرابيدوبسيس thaliana-الزائفة syringae</em&gt; Pathosystem

In the absence of specialized mobile immune cells, plants utilize their localized programmed cell death and Systemic Acquired Resistance to defend ...

Measuring Influenza Neuraminidase Inhibition Antibody Titers by Enzyme-linked Lectin Assay

قياس الأنفلونزا النورامينيداز تثبيط الجسم المضاد التتر من قبل انزيم مرتبط كتين الفحص

Antibodies to neuraminidase (NA), the second most abundant surface protein on influenza virus, contribute toward protection against influenza. Traditional ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

عزل السالمونيلا تيفيموريوم-التي تحتوي على فاجوسوميس من الضامة

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-&#945;

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â±

التنمية والتحقق من جزيء واحد أولتراسينسيتيفي الصفيف الرقمي المرتبط بالانزيم مقايسة الممتز للبشرية انترفيرون-α

The main aim of this protocol is to describe the development and validation of an interferon (IFN)-&#945; single molecule array digital Enzyme-Linked ...