Name: characterization of thymus-dependent and thymus-independent immunoglobulin isotype responses in mice using enzyme-linked immunosorbent assay
Uploaded: 2018-09-07T14:30:00
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Este estudio fue apoyado por los institutos nacionales de becas en salud CA158402 R01 (P. Xie) y R21 AI128264 (P. Xie), el Ministerio de defensa conceder W81XWH-13-1-0242 (P. Xie), un premio de piloto del cáncer Institute de New Jersey a través de la concesión número P30CA072720 del Instituto Nacional del cáncer (P. Xie), una subvención Biomédica de Busch (P. Xie), una beca Stollar Victor (Lalani a.) y Anne B. y James B. Leathem beca (S. Zhu).

Este protocolo sigue las directrices del Comité de ética institucional de investigación animal de la Universidad de Rutgers. Todos los ratones se utilizan con arreglo a las directrices de los NIH y bajo un protocolo animal aprobado por la institucional Animal cuidado y uso.
1. preparación de ratones y recogida de sueros de ingenuo ratón
<ol><li>Mantenga todos los ratones para los experimentos de inmunización en un específico Animalario libre de patógenos.</li>
	<li>Nocaut de sexo-emp...

Aquí, describimos el protocolo para la caracterización de las respuestas del TD y TI Ig isotipo en ratones usando ELISA. Exitosa implementación de este protocolo requiere el uso de materiales especificados en la tabla 1, incluyendo placas de ensayo ELISA, inmunización Ags, anticuerpos de isotipo-específicos de Ig de ratón y las normas. Debe tener cuidado de evitar el uso de las placas de cultivo de tejidos tratado para ELISA. Diluciones de los estándares y las muestras de suero deben ser en placas...

Los linfocitos B son el jugador principal en la inmunidad humoral y el único tipo de célula en mamíferos que son capaces de producir anticuerpos, denominados también como inmunoglobulinas (Ig)1,2. Anticuerpos secretados por las células de B proporcionan una defensa formidable contra los invasores patógenos a través de diversos mecanismos incluyendo la opsonización, neutralización y activación del complemento, conduciendo a inmunidad protectora3. Secreción de anticuerpos por las células B se logra después de la completa activación de células B específicas, que normalmente requiere que dos distintas señales3. Señal 1 es retransmitida por atascamiento directo del antígeno (Ag) al receptor de células B (BCR) expresado en la superficie de ingenuo específico B células3. Dependiendo de la fuente de señal 2, activación de la célula de B puede dividirse en timo dependiente (TD) o timo-independientes (TI)3,4. En una respuesta de antígeno TD, 2 señal es proporcionada por cognado T CD4 helper (TH) las células activadas, que expresan CD154, el ligando para el receptor coestimuladoras CD40 expresado en las células de B1,2,3. En una respuesta antígeno TI señal 2 viene de cualquier participación de receptores Toll-like (TLRs en el caso del tipo 1 TI Ag) o Cross-linking extenso de las BCRs (en el caso del tipo 2 TI Ag) en la B células3,4. Antígenos de TI (TI-1) de tipo 1 son ligandos microbianos de TLRs, incluyendo lipopolisacáridos bacterianos (LPS), RNAs virales y CpG de ADN microbiano4,5. Tipo 2 TI (TI-2) antígenos tienen estructura altamente repetitiva y son capaces de entregar prolongada y persistente de señalización a la célula de B por varios Cross-linking de la BCRs4,6. Típicos los antígenos TI-2 ejemplos de polisacáridos de neumococos y polisacárido conjugado hapteno-6,7. Antígenos de TD y TI pueden provocar respuestas de IgM específica de antígeno sólidas y también pueden inducir la producción de anticuerpos de isotipo-switched (IgG, IgA e IgE) con la ayuda brindada por el antígeno que presenta las células (APCs), como las células dendríticas (DCs)1 ,2,3. Además, TD y TI antígenos son capaces de inducir respuestas de memoria con la ayuda de APC, pero TD antígenos son más eficientes en la inducción de memoria células B generación3,8.
En este protocolo, TD y TI Ig respuestas son sacadas en ratones por la inmunización intraperitoneal (i.p.) con hemocianina de Lapa 2,4,6-trinitrophenyl-cerradura modelo hapteno conjugado antígenos (PNT-KLH) y PNT-polisacárido (neutro, muy ramificado y la Misa), respectivamente9,10,11. Antígenos de TD se utilizan generalmente con un adyuvante para mejorar la producción de anticuerpos12. Aquí en nuestro protocolo, PNT-KLH se inyecta con el alumbre, un coadyuvante utilizado en estudios de inmunización12. Otros ejemplos de aditivos que pueden utilizarse son completo o incompleto adyuvante de Freund (CFA o IFA), monophosphoryl-lípido A / dicorynomycolate de trehalosa (adyuvante de "Ribi del") y oligodeoxynucleotides de CpG, etc.13, 14. después de la inmunización, sueros de ratón son cosechados en diferentes puntos temporales y anticuerpos de PNT específicos en el suero se cuantifican utilizando Ig isotipo específica enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA) de ensayo9,10, 11.
ELISA es un ensayo basado en la placa que es ampliamente utilizado como una herramienta de diagnóstico en medicina y también como una herramienta de análisis en investigación biomédica15,16. Se utiliza para detectar y cuantificar analitos como anticuerpos, hormonas, citoquinas, quimiocinas y varios antígenos, etcetera. ELISA se puede realizar en varios formatos diferentes, incluyendo directo, indirecto, sandwich y competitivo ELISA15,16. En general, implica la inmovilización del antígeno en una superficie sólida, generalmente una placa de microtitulación de 96 pocillos, que se incuba con un anticuerpo primario. Después de la incubación, el anticuerpo no Unido se lava lejos. En un ELISA directo, el anticuerpo primario directamente se conjuga a una enzima (generalmente la peroxidasa de rábano o fosfatasa alcalina), que puede unirse un sustrato cromogénico para producir un cambio de color visible detectado por un instrumento de detección de señal como un Espectrofotómetro15,16. Por el contrario, si un anticuerpo enzima-ligado del secundario se utiliza para enlazar el anticuerpo primario, entonces esto se considera como un indirecto ELISA15,16. ELISA directo es más rápido mientras que ELISA indirecta es más sensible15,16. En un sandwich ELISA, las placas están recubiertas con un anticuerpo de la «captura» utilizado para inmovilizar el antígeno de interés en las muestras, y luego puede detectarse el antígeno capturado por otro anticuerpo de la "detección" de una manera directa o indirecta15, 16. ELISA Sandwich ofrece alta especificidad ya que el antígeno es detectado por dos diversos anticuerpos del antígeno. En un ELISA competitivo, la competencia se establece entre el antígeno de la muestra y el antígeno de limite de placa de unión del anticuerpo primario, y entonces la concentración de antígeno en la muestra se cuantifica midiendo la reducción de señal del substrato 15 , 16. ELISA competitivo puede realizarse utilizando el formato mencionado directo o indirecto y es útil para la detección de antígenos pequeños con un único epitopo15,16.
Técnicas alternativas para la medición de anticuerpos incluyen radio-inmunoanálisis (RIA), electrochemiluminescence (ECL) ensayo y superficie de resonancia de plasmon (SPR) ensayo17. RIA fue el primer inmunoensayo desarrollado que medidas la presencia de un antígeno (o anticuerpos) de alta especificidad y sensibilidad usando reactivos radiactivos18,19. Sin embargo, debido a las preocupaciones de toxicidad radioactiva, sus costes de eliminación, vida útil y licencias especiales para trabajar con materiales radioactivos, ELISA es la mejor y más conveniente técnica común utiliza20,21. ECL es un ensayo altamente sensible que reacciones de quimioluminiscencia se inician usando electricidad para generar especies altamente reactivas a partir de precursores estables en la superficie de un electrodo y pueden ser utilizadas para medir la cantidad de analitos (como antígenos o anticuerpos)22. Sin embargo, ECL requiere un instrumento especial y por lo tanto no es tan ampliamente usado como ELISA23. SPR es un ensayo directo que puede utilizarse para medir la Unión de ligandos (por ej., anticuerpos) para inmovilizar moléculas (e.g., antígenos) en un sensor chip superficial24. SPR detecta las interacciones en tiempo real muy concreto y no requiere el uso de reactivos etiquetados como ELISA. Sin embargo, el SPR también requiere un equipo especial y tiene menor sensibilidad que el ELISA17. Dadas las limitaciones de los métodos alternativos, ELISA es la técnica más adecuada y conveniente para nuestro propósito en este protocolo. Aquí, describimos el uso de sandwich ELISA para el análisis de los niveles totales de isotipo de Ig y los procedimientos de ELISA indirecto para el análisis de los isotipos de Ig específica de antígeno.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:577px;" width="576">
	<tbody>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">VersaMax Tunable Microplate Reader</td>
			<td style="width:111px;">MDS Analytical Technologies</td>
			<td style="width:109px;">VERSAMAX</td>
			<td style="width:201px;">Equipment to read the plates</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">SOFTmax PRO 5.3</td>
			<td style="width:111px;">MDS Analytical Technologies</td>
			<td style="width:109px;">SOFTmax PRO 5.3</td>
			<td style="width:201px;">Software for the plate reader</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">GraphPad Prism</td>
			<td style="width:111px;">GraphPad</td>
			<td style="width:109px;">Prism</td>
			<td style="width:201px;">Software for graphing and statistics</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">TNP-AECM-polysaccharide (FICOLL)</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">F-1300-10</td>
			<td style="width:201px;">A TI Ag for immunization</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">TNP-KLH</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">T-5060-5</td>
			<td style="width:201px;">A TD Ag for immunization</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:156px;">TNP(38)-BSA</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">T-5050-10 (conjugation ratio: 38)</td>
			<td style="width:201px;">Coating Ag for TNP-specific ELISA</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:156px;">TNP(3)-BSA</td>
			<td style="width:111px;">Biosearch Technologies</td>
			<td style="width:109px;">T-5050-10 (conjugation ratio: 3)</td>
			<td style="width:201px;">Coating Ag for high affinity TNP-specific Ig</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Imject Alum</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">PI-77161</td>
			<td style="width:201px;">Alum adjuvant for immunization</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Falcon Polypropylene tubes</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">14-959-11A</td>
			<td style="width:201px;">For incubation of TNP-KLH/alum</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">BD Insulin Syringe</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">14-829-1B</td>
			<td style="width:201px;">For i.p. injection of mice</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Immuno 96-Well Plates, Flat-Bottom</td>
			<td style="width:111px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:109px;">14-245-61</td>
			<td style="width:201px;">For ELISA</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:156px;">Untreated 96-Well Microplates, Round-Bottom</td>
			<td style="width:111px;">VWR</td>
			<td style="width:109px;">82050-622</td>
			<td style="width:201px;">For serial dilutions of standards and samples</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Phosphatase substrate, 5 mg Tablets</td>
			<td style="width:111px;">Sigma</td>
			<td style="width:109px;">S0942-200TAB</td>
			<td style="width:201px;">AP substrate</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Diethanolamine</td>
			<td style="width:111px;">VWR</td>
			<td style="width:109px;">IC15251690</td>
			<td style="width:201px;">A component of AP substrate buffer</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgM</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1020-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgM</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG1</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1070-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG2a</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1080-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG2a</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG2b</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1090-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG2b</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgG3</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1100-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgG3</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgA</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1040-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgA</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Goat anti-mouse IgE</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1110-01</td>
			<td style="width:201px;">Capture Ab for mouse IgE</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgM</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1020-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgM</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG1</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1070-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG2a</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1080-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG2a</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG2b</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1090-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG2b</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgG3</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1100-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgG3</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgA</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1040-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgA</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">AP-Goat anti-mouse IgE</td>
			<td style="width:111px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:109px;">1110-04</td>
			<td style="width:201px;">Detection Ab for mouse IgE</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgM standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">553472</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgM, Clone&#160; G155-228</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgG1 standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">554054</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgG1, Clone&#160; 107.3</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Mouse IgG2a standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">556651</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgG2a, Clone&#160; G155-178</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgG2b standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">554055</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgG2b, Clone&#160; 49.2</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgG3 standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">553486</td>
			<td style="width:201px;">KLH-specific IgG3, Clone&#160; A112-3</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:156px;">Mouse IgA standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">550924</td>
			<td style="width:201px;">Mineral oil-induced IgA, Clone&#160; MOPC-320</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:156px;">Mouse IgE standard</td>
			<td style="width:111px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:109px;">557079</td>
			<td style="width:201px;">TNP-specific IgE, Clone&#160; C38-2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

characterization of thymus-dependent and thymus-independent immunoglobulin isotype responses in mice using enzyme-linked immunosorbent assay

Anticuerpos, también llamados como distinguen de inmunoglobulinas (Ig), secretadas por los linfocitos B, células de plasma plasmablasts, en la inmunidad humoral proporcionan una formidable defensa contra la invasión de patógenos a través de diversos mecanismos. Un objetivo importante de la vacunación es inducir anticuerpos protectores específicos de antígeno para prevenir las infecciones mortales. Tanto timo dependiente (TD) y antígenos de timo-independientes (TI) pueden provocar respuestas de IgM específica de antígeno sólidas y también pueden inducir la producción de anticuerpos de isotipo-switched (IgG, IgA e IgE) así como la generación de células de memoria B con la ayuda proporcionado por el antígeno que presenta las células (APCs). Aquí, describimos un protocolo para caracterizar las respuestas del TD y TI Ig isotipo en ratones usando el análisis enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). En este protocolo, TD y TI Ig respuestas son sacadas en ratones por inmunización intraperitoneal (i.p.) con antígenos conjugado hapteno-modelo PNT-KLH (en alumbre) y PNT-polisacárido (PBS), respectivamente. Para inducir la respuesta de memoria TD, una inmunización de refuerzo de PNT-KLH en alumbre se da en 3 semanas después de la primera vacunación con el mismo antígeno/adyuvante. Suero de ratón es cosechada en diferentes puntos temporales antes y después de la inmunización. Total niveles de Ig y anticuerpos específicos a la PNT posteriormente se cuantifican utilizando Ig isotipo específica Sandwich y ELISA indirecto, respectivamente. Para cuantificar correctamente la concentración de suero de cada isotipo de Ig, las muestras deben diluirse adecuadamente para encajar dentro de la gama linear de las curvas estándar. Usando este protocolo, siempre hemos obtenido resultados confiables con sensibilidad y alta especificidad. Cuando se utiliza en combinación con otros métodos complementarios como la citometría de flujo, en vitro cultura de esplénico de células B e immunohistochemical tinción (IHC), este protocolo permitirá a los investigadores obtener una comprensión completa del anticuerpo respuestas en un entorno experimental dado.

Hemos utilizado este protocolo para investigar las funciones de un regulador crítico del sistema inmune, TRAF3, TI y TD Ig isotipo respuestas9,10,11. TRAF3 directa o indirectamente regula la transducción de la señal de un número de receptores inmunes innatos y adaptativos, incluyendo la superfamilia de receptores TNF, receptores Toll-like y T de la célula del receptor/CD28, entre otros<sup c...

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Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

En este artículo se describe un protocolo para caracterizar las respuestas de isotipo de inmunoglobulina (Ig) T dependientes y T independientes en ratones usando ELISA. Este método se usa solo o en combinación con el flujo cytometry permitirá a los investigadores identificar las diferencias en las respuestas de isotipo de Ig mediada por células B en ratones después de la inmunización de antígenos T dependientes y T independientes.

Caracterización de las respuestas de isotipo de inmunoglobulina dependiente del timo y timo-independiente en ratones usando el análisis enzima-ligado del inmunosorbente

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Enzyme-linked Immunospot Assay (ELISPOT):  Quantification of Th-1 Cellular Immune Responses Against Microbial Antigens

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Enzima-inmunoensayo de ensayo (ELISPOT): La cuantificación de la Th-1 respuesta inmune celular contra antígenos microbianos

Adaptive immunity is an important component to clearance of intracellular pathogens.  The ability to detect and quantify these responses in humans is an ...

Investigación

Inmunología e Infección

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

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La medición de la carga bacteriana y la respuesta inmune en ratones infectados con Listeria monocytogenes</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Use of Interferon-&gamma; Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

Use of Interferon-ÃƒÅ½Ã‚Â³ Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

El uso de interferón-γ enzimo-inmunoensayo para la Caracterización de Nuevos epítopos de células T del virus del papiloma humano

A protocol has been developed to overcome the difficulties of isolating and characterizing rare T cells specific for pathogens, such as human ...

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

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Caracterización De Las Respuestas Inflamatorias Durante La Colonización Intranasal Con Streptococcus pneumoniae

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

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Application of Long-term cultured Interferon-&#947; Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle

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Aplicación de Ensayo inmunoensayo de largo plazo culta Interferón-γ ligado a enzimas para la evaluación efectoras y de memoria T respuestas celulares en el ganado

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Bacterial Leaf Infiltration Assay for Fine Characterization of Plant Defense Responses using the Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae Pathosystem

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Ensayo de infiltración bacteriana de la hoja por Fine Caracterización de las respuestas de defensa de la planta utilizando el<em&gt; Thaliana-Pseudomonas syringae Arabidopsis</em&gt; Patosistema

In the absence of specialized mobile immune cells, plants utilize their localized programmed cell death and Systemic Acquired Resistance to defend ...

Measuring Influenza Neuraminidase Inhibition Antibody Titers by Enzyme-linked Lectin Assay

La medición de la influenza neuraminidasa inhibición títulos de anticuerpos mediante un ensayo de lectina ligado a enzimas

Antibodies to neuraminidase (NA), the second most abundant surface protein on influenza virus, contribute toward protection against influenza. Traditional ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Aislamiento de Salmonella typhimurium-que contienen fagosomas de los macrófagos

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-&#945;

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â±

Desarrollo y validación de una sola molécula ultrasensible matriz Digital análisis de enzima-ligado del inmunosorbente para interferón-α humano

The main aim of this protocol is to describe the development and validation of an interferon (IFN)-&#945; single molecule array digital Enzyme-Linked ...