Name: preparation of drosophila larval samples for gas chromatography-mass spectrometry (gc-ms)-based metabolomics
Uploaded: 2018-06-06T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry GC-MS-based Metabolomics at JoVE.com

इंडियाना विश्वविद्यालय के जन स्पेक्ट्रोस्कोपी सुविधा और यूटा विश्वविद्यालय Metabolomics कोर सुविधा के सदस्यों के लिए इस प्रोटोकॉल के अनुकूलन में सहायता के लिए धंयवाद । J.M.T. पुरस्कार संख्या R35GM119557 के अंतर्गत राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के जनरल मेडिकल साइंसेज के नेशनल इंस्टीट्यूट द्वारा समर्थित है ।

1. अंडा संग्रह
<ol><li>वयस्क पुरुषों और वांछित पादी की कुंवारी महिलाओं को इकट्ठा । व्यक्तिगत रूप से 3-5 दिनों के लिए मानक ब्लूमिंगटन मीडिया के साथ एक भोजन की शीशी में इन जानवरों की उंर ।</li>
	<li>एक नए भोजन की शीशी क?...

<ol>
	<li>Owusu-Ansah, E., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+metabolic+homeostasis+and+nutrient+sensing+in+Drosophila:+implications+for+aging+and+metabolic+diseases.">Modeling metabolic homeostasis and nutrient sensing in Drosophila: implications for aging and metabolic diseases.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 7 (3), 343-350 (2014).</li><li>Sieber, M. H., Spradling, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+metabolic+states+in+development+and+disease.">The role of metabolic states in development and disease.</a> Current Opinion in Genetics &amp; Development. 45, 58-68 (2017).</li><li>Tennessen, J. M., Barry, W. E., Cox, J., Thummel, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+studying+metabolism+in+Drosophila.">Methods for studying metabolism in Drosophila.</a> Methods. 68 (1), 105-115 (2014).</li><li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+larvae+synthesize+the+putative+oncometabolite+L-2-hydroxyglutarate+during+normal+developmental+growth.">Drosophila larvae synthesize the putative oncometabolite L-2-hydroxyglutarate during normal developmental growth.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (6), 1353-1358 (2017).</li><li>Tennessen, J. M., Baker, K. D., Lam, G., Evans, J., Thummel, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+Estrogen-Related+Receptor+Directs+a+Metabolic+Switch+that+Supports+Developmental+Growth.">The Drosophila Estrogen-Related Receptor Directs a Metabolic Switch that Supports Developmental Growth.</a> Cell Metabolism. 13 (2), 139-148 (2011).</li><li>Nicholson, J. K., Lindon, J. C., Holmes, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabonomics':+understanding+the+metabolic+responses+of+living+systems+to+pathophysiological+stimuli+via+multivariate+statistical+analysis+of+biological+NMR+spectroscopic+data.">Metabonomics': understanding the metabolic responses of living systems to pathophysiological stimuli via multivariate statistical analysis of biological NMR spectroscopic data.</a> Xenobiotica. 29 (11), 1181-1189 (1999).</li><li>Fiehn, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolomics+-+the+link+between+genotypes+and+phenotypes.">Metabolomics - the link between genotypes and phenotypes.</a> Plant Molecular Biology. 48 (1-2), 155-171 (2002).</li><li>Cox, J. E., Thummel, C. S., Tennessen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolomic+Studies+in+Drosophila.">Metabolomic Studies in Drosophila.</a> Genetics. 206 (3), 1169-1185 (2017).</li><li>Lenz, E. M., Wilson, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+strategies+in+metabonomics.">Analytical strategies in metabonomics.</a> Journal of Proteome Research. 6 (2), 443-458 (2007).</li><li>Pasikanti, K. K., Ho, P. C., Chan, E. C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gas+chromatography/mass+spectrometry+in+metabolic+profiling+of+biological+fluids.">Gas chromatography/mass spectrometry in metabolic profiling of biological fluids.</a> Journal of Chromatography B-Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 871 (2), 202-211 (2008).</li><li>Want, E. J., Nordstrom, A., Morita, H., Siuzdak, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+exogenous+to+endogenous:+The+inevitable+imprint+of+mass+spectrometry+in+metabolomics.">From exogenous to endogenous: The inevitable imprint of mass spectrometry in metabolomics.</a> Journal of Proteome Research. 6 (2), 459-468 (2007).</li><li>Garcia, A., Barbas, C., Metz, T. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Metabolic Profiling: Methods and Protocols Vol. 708 Methods in Molecular Biology. , 191-204 (2011).</li><li>Chan, E. C. Y., Pasikanti, K. K., Nicholson, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+urinary+metabolic+profiling+procedures+using+gas+chromatography-mass+spectrometry.">Global urinary metabolic profiling procedures using gas chromatography-mass spectrometry.</a> Nature Protocols. 6 (10), 1483-1499 (2011).</li><li>Dunn, W. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procedures+for+large-scale+metabolic+profiling+of+serum+and+plasma+using+gas+chromatography+and+liquid+chromatography+coupled+to+mass+spectrometry.">Procedures for large-scale metabolic profiling of serum and plasma using gas chromatography and liquid chromatography coupled to mass spectrometry.</a> Nature Protocols. 6 (7), 1060-1083 (2011).</li><li>Ashburner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drosophila: A Laboratory Manual. , 171-178 (1989).</li><li>Biyasheva, A., Do, T. V., Lu, Y., Vaskova, M., Andres, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glue+secretion+in+the+Drosophila+salivary+gland:+a+model+for+steroid-regulated+exocytosis.">Glue secretion in the Drosophila salivary gland: a model for steroid-regulated exocytosis.</a> Developmental Biology. 231 (1), 234-251 (2001).</li><li>Lommen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MetAlign:+Interface-driven,+versatile+metabolomics+tool+for+hyphenated+full-scan+mass+spectrometry+data+preprocessing.">MetAlign: Interface-driven, versatile metabolomics tool for hyphenated full-scan mass spectrometry data preprocessing.</a> Analytical Chemistry. 81 (8), 3079-3086 (2009).</li><li>Xia, J., Wishart, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+MetaboAnalyst+3.0+for+comprehensive+metabolomics+data+analysis.">Using MetaboAnalyst 3.0 for comprehensive metabolomics data analysis.</a> Current Protocols in Bioinformatics. 55, (2016).</li><li>Xia, J., Sinelnikov, I. V., Han, B., Wishart, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MetaboAnalyst+3.0-making+metabolomics+more+meaningful.">MetaboAnalyst 3.0-making metabolomics more meaningful.</a> Nucleic Acids Research. 43 (W1), W251-W257 (2015).</li><li>Lommen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Data+(pre-)processing+of+nominal+and+accurate+mass+LC-MS+or+GC-MS+data+using+MetAlign.">Data (pre-)processing of nominal and accurate mass LC-MS or GC-MS data using MetAlign.</a> Methods in Molecular Biology. 860, 229-253 (2012).</li><li>Xia, J., Wishart, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+MetaboAnalyst+3.0+for+comprehensive+metabolomics+data+analysis.">Using MetaboAnalyst 3.0 for comprehensive metabolomics data analysis.</a> Current Protocols in Bioinformatics. 55, (2016).</li><li>Xia, J., Wishart, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Web-based+inference+of+biological+patterns,+functions+and+pathways+from+metabolomic+data+using+MetaboAnalyst.">Web-based inference of biological patterns, functions and pathways from metabolomic data using MetaboAnalyst.</a> Nature Protocols. 6 (6), 743-760 (2011).</li><li>Li, H., Tennessen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+studying+the+metabolic+basis+of+Drosophila+development.">Methods for studying the metabolic basis of Drosophila development.</a> Wiley Interdisciplinary Reviews Developmental Biology. 6 (5), (2017).</li></ol>

Metabolomics एक अद्वितीय अवसर चयापचय प्रतिक्रियाओं कि मध्यस्थ चयापचय रचना के सर्वेक्षण के लिए प्रदान करता है । इस तकनीक की संवेदनशीलता, तथापि, renders डेटा आनुवंशिक पृष्ठभूमि, विकास cues, और तापमान, आर्द्रता, जनसंख्य...

फल मक्खी Drosophila melanogaster आणविक तंत्र है कि मध्यस्थ चयापचय को विनियमित अध्ययन के लिए एक आदर्श प्रणाली के रूप में उभरा है । न केवल सबसे चयापचय रास्ते Drosophila और मनुष्यों के बीच संरक्षित हैं, लेकिन मुख्य पोषक तत्व सेंसरों और ऐसे इंसुलिन, टो के रूप में विकास नियामकों, और myc, भी मक्खी में सक्रिय हैं1,2. नतीजतन, Drosophila मधुमेह और मोटापे से neurodegeneration और कैंसर से लेकर मानव रोगों के चयापचय आधार का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । इस संबंध में, Drosophila लार्वा विकास आदर्श ढांचा प्रदान करता है जिसमें एरोबिक glycolysis, या Warburg प्रभाव के रूप में जाना जाने वाला चयापचय कार्यक्रम का अध्ययन करना है । बस के रूप में कई ट्यूमर एरोबिक glycolysis का उपयोग करने के लिए कार्बोहाइड्रेट से बायोमास उत्पंन, तो क्या Drosophila लार्वा सक्रिय एरोबिक glycolysis को बढ़ावा देने के विकासात्मक विकास3,4,5। लार्वा और ट्यूमर चयापचय के बीच ये समानताएं कैसे एरोबिक glycolysis को समझने के लिए एक महत्वपूर्ण मॉडल के रूप में Drosophila स्थापित vivo मेंविनियमित है ।
तथ्य यह है कि मक्खी चयापचय का अध्ययन करने के लिए एक लोकप्रिय मॉडल के रूप में उभरा है के बावजूद, सबसे Drosophila अध्ययन तरीकों कि trehalose, ट्राइग्लिसराइड्स, या एटीपी के रूप में व्यक्तिगत चयापचयों3, को मापने के लिए डिज़ाइन कर रहे हैं पर भरोसा करते हैं. के बाद से एक विशिष्ट प्रोटोकॉल को मापने के लिए आवश्यक है प्रत्येक metabolite, परख आधारित अध्ययन कर रहे है श्रम गहन, महंगी, और उन यौगिकों कि वाणिज्यिक किट का उपयोग कर मापा जा सकता है के प्रति पक्षपाती । इन सीमाओं का एक समाधान metabolomics के क्षेत्र से उभरा है, जो Drosophila चयापचय का अध्ययन करने का एक अधिक कुशल और निष्पक्ष साधन प्रदान करता है । एक परख आधारित अध्ययन के विपरीत, एक एकल metabolomic विश्लेषण एक साथ छोटे अणु चयापचयों के सैकड़ों उपाय कर सकते है और एक जीव चयापचय स्थिति6,7की एक व्यापक समझ प्रदान करते हैं । यह तकनीक काफी Drosophila चयापचय अध्ययन के दायरे का विस्तार किया गया है और इस उभरते क्षेत्र के भविष्य8का प्रतिनिधित्व करता है ।
Metabolomic अध्ययन मुख्यतः तीन प्रौद्योगिकियों का उपयोग कर आयोजित कर रहे हैं: (i) नाभिकीय चुंबकीय अनुनाद (एनएमआर), (ii) तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (LC-ms), और (iii) गैस क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (GC-ms)9. प्रत्येक दृष्टिकोण अलग फायदे और नुकसान प्रदान करता है, और इन प्रौद्योगिकियों के सभी सफलतापूर्वक Drosophila चयापचय का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है । चूंकि हमारे प्रयोगशाला में किए गए अनुसंधान छोटे, ध्रुवीय चयापचयों पर केंद्रित है, हम मुख्य रूप से एक GC-एमएस-पद्धति आधारित काम करते हैं । GC-MS उच्च reproducibility, पीक संकल्प, संवेदनशीलता सहित लाभ के एक नंबर के साथ उपयोगकर्ता प्रदान करता है, और एक मानक इलेक्ट्रॉन प्रभाव की उपलब्धता (ेि) वर्णक्रमीय पुस्तकालय है, जो खोज की चयापचय की तेजी से पहचान के लिए अनुमति देता है 10,11सुविधाएं । GC-MS के लिए नमूनों की तैयारी, तथापि, कुछ जटिल है और विस्तार करने के लिए एक सावधान ध्यान देने की आवश्यकता है । नमूनों को एकत्र किया जाना चाहिए, धोया, तौला, और एक तरह से है कि जल्दी से चयापचय प्रतिक्रियाओं बुझती में जमे हुए । इसके अलावा, मक्खी लोथ मानक homogenization प्रोटोकॉल के लिए प्रतिरोधी है और एक मनका मिल की आवश्यकता के लिए इष्टतम metabolite निष्कर्षण सुनिश्चित करते हैं । अंत में, GC-MS द्वारा विश्लेषण नमूनों का पता लगाने से पहले रासायनिक derivatization से गुजरना चाहिए12. जबकि पहले प्रकाशित तरीकों के सभी इन चरणों का वर्णन3,13,14, एक दृश्य प्रोटोकॉल है कि नौसिखिए उपयोगकर्ता reproducibly उच्च गुणवत्ता डेटा उत्पंन करने की अनुमति होगी अभी भी जरूरत है । यहां हम प्रदर्शन कैसे GC-MS-आधारित metabolomics विश्लेषण के लिए Drosophila लार्वा नमूने तैयार करने के लिए । इस प्रोटोकॉल reproducibly छोटे ध्रुवीय चयापचयों कि केंद्रीय कार्बन चयापचय रचना के कई उपाय करने के लिए उपयोगकर्ता की अनुमति देता है ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:827px;" width="826">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Unsulfured blackstrap molasses</td>
			<td style="width:141px;">Good Food, INC</td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Drosophila Agar Type II</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>66-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pyridine</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>PX2012-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Methoxyamine hydrocholoride (MOX)</td>
			<td>MP Biomedicals, LLC</td>
			<td>155405</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MSTFA with 1% trimethylchlorosilane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>69478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fleischmann&#8217;s Active dry yeast</td>
			<td>AB Mauri Food Inc</td>
			<td>2192</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">6oz Drosophila stock bottle</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>32-130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Soft tissue homogenizing mix (2 mL tubes)&#160;</td>
			<td>Omni International</td>
			<td>SKU:19-627</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vial insert, 250 &#181;L deactivated glass with polymer feet</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5181-8872</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Succinic acid-2,2,3,3-d4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>293075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SpeedVac</td>
			<td>Thermo&#160;</td>
			<td>SC210A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">o-Phosphoric acid</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A242-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Propionic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5561</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">p-Hydroxy benzoic acid methyl ester</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>20-258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bead Ruptor</td>
			<td>Omni International</td>
			<td>SKU:19-040E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ThermoMixer F1.5</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5384000012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MultiTherm Shaker with a 24 X 12 mm block</td>
			<td>Benchmark Scientific</td>
			<td>H5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Methanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>34860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1.5 mL centrifuge tube</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22364111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Falcon 35 X 10 mm tissue culture dish</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>353001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">GC column</td>
			<td>Phenomex</td>
			<td>ZB-5MSi</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of drosophila larval samples for gas chromatography-mass spectrometry (gc-ms)-based metabolomics

metabolomics के क्षेत्र में हाल ही में अग्रिमों पशु चयापचय का अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली आनुवंशिक मॉडल के रूप में फल मक्खी Drosophila melanogaster की स्थापना की है । मध्यस्थ चयापचय के बड़े swaths सर्वेक्षण करने की क्षमता के साथ Drosophila आनुवंशिक उपकरण के विशाल सरणी के संयोजन के द्वारा, एक metabolomics दृष्टिकोण आहार, जीनोटाइप, जीवन इतिहास की घटनाओं, और पर्यावरण cues के बीच जटिल बातचीत प्रकट कर सकते हैं. इसके अलावा, metabolomics अध्ययन उपंयास एंजाइमी तंत्र की खोज और प्रतीत होता है असमान चयापचय रास्ते के बीच पहले से अज्ञात कनेक्शन को उजागर कर सकते हैं । आदेश में Drosophila समुदाय के बीच इस प्रौद्योगिकी के अधिक व्यापक उपयोग की सुविधा के लिए, यहां हम एक विस्तृत प्रोटोकॉल का वर्णन करता है कि कैसे गैस के लिए Drosophila लार्वा नमूने तैयार करने के लिए क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (जीसी-MS) प्रदान करते हैं- आधारित metabolomic विश्लेषण । हमारे प्रोटोकॉल लार्वा नमूना संग्रह, metabolite निष्कर्षण, रासायनिक derivatization, और जीसी-एमएस विश्लेषण का विवरण भी शामिल है । इस प्रोटोकॉल के सफल समापन उपयोगकर्ताओं एमिनो एसिड, शर्करा सहित छोटे ध्रुवीय चयापचयों के सापेक्ष बहुतायत को मापने के लिए, और कार्बनिक glycolysis और टीसीए चक्र में शामिल एसिड की अनुमति देगा ।

स्तनपान डिहाइड्रोजनेज (dLDH) म्यूटेंट, जो dLDH गतिविधि 4कमी है, और आनुवंशिक रूप से मिलान नियंत्रण मध्य L2 लार्वा के रूप में एकत्र किए गए और प्रोटोकॉल के अनुसार संसाधित ऊपर वर्णित है । ज?...

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Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry GC-MS-based Metabolomics

यह प्रोटोकॉल GC-MS-आधारित metabolomic विश्लेषण के लिए Drosophila लार्वा तैयार करने के तरीके का वर्णन करता है ।

गैस क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (GC-MS) के लिए Drosophila लार्वा नमूनों की तैयारी-आधारित Metabolomics

Recent advances in the field of metabolomics have established the fruit fly Drosophila melanogaster as a powerful genetic model for studying animal ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)-based Metabolomics

Preparation of Mitochondrial Enriched Fractions for Metabolic Analysis in Drosophila

Preparation of Mitochondrial Enriched Fractions for Metabolic Analysis in Drosophila

में चयापचय विश्लेषण के लिए Mitochondrial समृद्ध भागों की तैयारी<em&gt; ड्रोसोफिला</em

Since mitochondria play roles in amino acid metabolism, carbohydrate metabolism and fatty acid oxidation, defects in mitochondrial function often ...

Dissection of Larval Zebrafish Gonadal Tissue

लार्वा zebrafish जननांगों ऊतक के विच्छेदन

Although wild zebrafish possess a ZZ/ZW sex-determination system, domesticated zebrafish have lost the sex chromosome. They utilize a polygenic sex ...

Medium-scale Preparation of Drosophila Embryo Extracts for Proteomic Experiments

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मध्यम स्तर की तैयारी<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; प्रोट्योमिक प्रयोगों के लिए भ्रूण निष्कर्ष

Analysis of protein-protein interactions (PPIs) has become an indispensable approach to study biological processes and mechanisms, such as cell signaling, ...

Establishment of Larval Zebrafish as an Animal Model to Investigate Trypanosoma cruzi Motility In Vivo

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वीवो में Trypanosoma cruzi गतिशीलता की जांच के लिए एक पशु मॉडल के रूप में लार्वा Zebrafish की स्थापना

Chagas disease is a parasitic infection caused by Trypanosoma cruzi, whose motility is not only important for localization, but also for cellular binding ...

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

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गल, Culturing, और Cryopreserving Drosophila सेल लाइनों

There are currently over 160 distinct Drosophila cell lines distributed by the Drosophila Genomics Resource Center (DGRC). With genome engineering, the ...

Development of a Larval Zebrafish Infection Model for Clostridioides difficile

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क्लोस्ट्रीडिओइड्स डिफिसिल के लिए लार्वा जेब्राफिश संक्रमण मॉडल का विकास

Clostridioides difficile infection (CDI) is considered to be one of the most common healthcare-associated gastrointestinal infections in the United ...

Preparation of Drosophila Larval and Pupal Testes for Analysis of Cell Division in Live, Intact Tissue

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लाइव, बरकरार ऊतक में सेल डिवीजन के विश्लेषण के लिए ड्रोसोफिला लार्वा और पुपल टेस्ट की तैयारी

Experimental analysis of cells dividing in living, intact tissues and organs is essential to our understanding of how cell division integrates with ...

Drosophila Embryo Preparation and Microinjection for Live Cell Microscopy Performed using an Automated High Content Analyzer

लाइव सेल माइक्रोस्कोपी के लिए ड्रोसोफिला भ्रूण तैयारी और माइक्रोइंजेक्शन एक स्वचालित उच्च सामग्री विश्लेषक का उपयोग करके किया जाता है

Modern approaches in quantitative live cell imaging have become an essential tool for exploring cell biology, by enabling the use of statistics and ...

Imaging Live Brain Explants from Drosophila melanogaster Third Instar Larvae

Live-Cell Imaging of Drosophila melanogaster Third Instar Larval Brains

Investigating Asymmetric Cell Division Dynamics: A Protocol for Live-Imaging of Drosophila Larval Brain Explants (Video) | JoVE

ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर थर्ड इनस्टार लार्वा ब्रेन की लाइव-सेल इमेजिंग

Drosophila neural stem cells (neuroblasts, NBs hereafter) undergo asymmetric divisions, regenerating the self-renewing neuroblast, while also forming a ...

Dissection of Drosophila melanogaster Third Instar Larval Brain for Live-Cell Imaging

Dissection of Drosophila melanogaster Third Instar Larval Brain for Live-Cell Imaging (Video) | JoVE 

लाइव-सेल इमेजिंग के लिए ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर थर्ड इनस्टार लार्वा मस्तिष्क का विच्छेदन