Name: generating a murine orthotopic metastatic breast cancer model and performing murine radical mastectomy
Uploaded: 2018-11-29T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generating a Murine Orthotopic Metastatic Breast Cancer Model and Performing Murine Radical Mastectomy at JoVE.com

Bu eser bioluminescence görüntüleri paylaşılan kaynak görüntüleme translasyonel paylaşılan kaynak Roswell Park tarafından satın alınan K.T. farelere NIH grant R01CA160688 ve Susan G. Komen Vakfı araştırmacı araştırma başlatılan Hibe (IIR12222224) tarafından desteklenmiştir Büyük Kanser Merkezi Destek Grant (P30CA01656) ve paylaşılan araçları hibe (S10OD016450) tarafından desteklenen kapsamlı Kanser Merkezi.

Roswell Park kapsamlı Kanser Merkezi kurumsal hayvan bakım ve kullanım komite onayı için tüm deneylerin elde edildi.
Not: Dokuz on iki hafta-yaşlı kadın BALB/c farelere elde edilir. 4T1-luc2 hücreler, hızlı luciferase için tasarlanmış BALB/c fare türetilmiş bir fare meme adenokarsinom hücre satırı kullanılır. Bu hücreler Roswell Park Memorial Enstitüsü (RPMI) 1640 orta % 10 fetal Sığır serum (FBS) ile kültürlü.
1. Araçl...

<ol>
	<li>Rashid, O. M., Takabe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+exploring+the+pharmacokinetics+of+breast+cancer+therapies.">Animal models for exploring the pharmacokinetics of breast cancer therapies.</a> Expert Opinion on Drug Metabolism &amp; Toxicology. 11 (2), 221-230 (2015).</li><li>Schuh, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trials,+tribulations,+and+trends+in+tumor+modeling+in+mice.">Trials, tribulations, and trends in tumor modeling in mice.</a> Toxicologic Pathology. 32, 53-66 (2004).</li><li>Katsuta, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+breast+cancer+model+for+preclinical+immunotherapy+studies.">Modified breast cancer model for preclinical immunotherapy studies.</a> Journal of Surgical Research. 204 (2), 467-474 (2016).</li><li>Sidell, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Composite+mandibulectomy:+a+novel+animal+model.">Composite mandibulectomy: a novel animal model.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 146 (6), 932-937 (2012).</li><li>Ewens, A., Mihich, E., Ehrke, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distant+metastasis+from+subcutaneously+grown+E0771+medullary+breast+adenocarcinoma.">Distant metastasis from subcutaneously grown E0771 medullary breast adenocarcinoma.</a> Anticancer Research. 25, 3905-3915 (2005).</li><li>Kocaturk, B., Versteeg, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+injection+of+breast+cancer+cells+into+the+mammary+fat+pad+of+mice+to+study+tumor+growth.">Orthotopic injection of breast cancer cells into the mammary fat pad of mice to study tumor growth.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), e51967 (2015).</li><li>Rashid, O. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+syngeneic+orthotopic+murine+model+of+human+breast+cancer+progression.">An improved syngeneic orthotopic murine model of human breast cancer progression.</a> Breast Cancer Research and Treatment. 147 (3), 501-512 (2014).</li><li>Bertozzi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence,+risk+factors,+and+prognosis+of+peritoneal+metastasis+from+breast+cancer.">Prevalence, risk factors, and prognosis of peritoneal metastasis from breast cancer.</a> SpringerPlus. 4, 688 (2015).</li><li>Kennecke, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metastatic+behavior+of+breast+cancer+subtypes.">Metastatic behavior of breast cancer subtypes.</a> Journal of Clinical Oncology. 28 (20), 3271-3277 (2010).</li><li>Valero, M. G., Golshan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+the+Axilla+in+Early+Breast+Cancer.">Management of the Axilla in Early Breast Cancer.</a> Cancer Treatment and Research. 173, 39-52 (2018).</li><li>. Breast Cancer, NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology Available from: <a target="_blank" href="https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/breast.pdf">https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/breast.pdf</a> (2018)</li><li>Versteeg, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+tissue+factor+signaling+suppresses+tumor+growth.">Inhibition of tissue factor signaling suppresses tumor growth.</a> Blood. 111 (1), 190-199 (2008).</li><li>Katsuta, E., Rashid, O. M., Takabe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+breast+cancer+mastectomy+model+that+predicts+patient+outcomes+for+drug+development.">Murine breast cancer mastectomy model that predicts patient outcomes for drug development.</a> Journal of Surgical Research. 219, 310-318 (2017).</li><li>Veenhof, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+stress+response+and+postoperative+immune+function+after+laparoscopy+or+open+surgery+with+fast+track+or+standard+perioperative+care:+a+randomized+trial.">Surgical stress response and postoperative immune function after laparoscopy or open surgery with fast track or standard perioperative care: a randomized trial.</a> Annals of Surgery. 255 (2), 216-221 (2012).</li><li>Wei, S., Siegal, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surviving+at+a+distant+site:+The+organotropism+of+metastatic+breast+cancer.">Surviving at a distant site: The organotropism of metastatic breast cancer.</a> Seminars in Diagnostic Pathology. 35 (2), 108-111 (2018).</li><li>Nagahashi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sphingosine-1-phosphate+produced+by+sphingosine+kinase+1+promotes+breast+cancer+progression+by+stimulating+angiogenesis+and+lymphangiogenesis.">Sphingosine-1-phosphate produced by sphingosine kinase 1 promotes breast cancer progression by stimulating angiogenesis and lymphangiogenesis.</a> Cancer Research. 72 (3), 726-735 (2012).</li><li>Jones, C., Lancaster, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+Operative+Technique+for+Mastectomy.">Evolution of Operative Technique for Mastectomy.</a> Surgical Clinics of North America. 98 (4), 835-844 (2018).</li><li>Rashid, O. M., Maurente, D., Takabe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Systematic+Approach+to+Preclinical+Trials+in+Metastatic+Breast+Cancer.">A Systematic Approach to Preclinical Trials in Metastatic Breast Cancer.</a> Chemotherapy (Los Angeles). 5 (3), (2016).</li><li>Ramaswamy, S., Ross, K. N., Lander, E. S., Golub, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+signature+of+metastasis+in+primary+solid+tumors.">A molecular signature of metastasis in primary solid tumors.</a> Nature Genetics. 33 (1), 49-54 (2003).</li><li>Aoki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+long-term+obstructive+jaundice.">Murine model of long-term obstructive jaundice.</a> Journal of Surgical Research. 206 (1), 118-125 (2016).</li><li>Terracina, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+metastatic+murine+colon+cancer+model.">Development of a metastatic murine colon cancer model.</a> Journal of Surgical Research. 199 (1), 106-114 (2015).</li><li>Rashid, O. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+tail+vein+injection+a+relevant+breast+cancer+lung+metastasis+model?.">Is tail vein injection a relevant breast cancer lung metastasis model?.</a> Journal of Thoracic Disease. 5 (4), 385-392 (2013).</li><li>Rashid, O. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resection+of+the+primary+tumor+improves+survival+in+metastatic+breast+cancer+by+reducing+overall+tumor+burden.">Resection of the primary tumor improves survival in metastatic breast cancer by reducing overall tumor burden.</a> Surgery. 153 (6), 771-778 (2013).</li><li>Troy, T., Jekic-McMullen, D., Sambucetti, L., Rice, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+comparison+of+the+sensitivity+of+detection+of+fluorescent+and+bioluminescent+reporters+in+animal+models.">Quantitative comparison of the sensitivity of detection of fluorescent and bioluminescent reporters in animal models.</a> Molecular Imaging. 3 (1), 9-23 (2004).</li><li>Adams, S. T., Miller, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+D-luciferin:+expanding+the+scope+of+bioluminescence+imaging+in+vivo.">Beyond D-luciferin: expanding the scope of bioluminescence imaging in vivo.</a> Current Opinion in Chemical Biology. 21, 112-120 (2014).</li><li>Close, D. M., Xu, T., Sayler, G. S., Ripp, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+bioluminescent+imaging+(BLI):+noninvasive+visualization+and+interrogation+of+biological+processes+in+living+animals.">In vivo bioluminescent imaging (BLI): noninvasive visualization and interrogation of biological processes in living animals.</a> Sensors (Basel). 11 (1), 180-206 (2011).</li><li>Chen, H., Thorne, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+Methods+for+Molecular+In+Vivo+Optical+Imaging.">Practical Methods for Molecular In Vivo Optical Imaging.</a> Current Protocols in Cytometry. 59 (1224), (2012).</li><li>Wurdinger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+secreted+luciferase+for+ex+vivo+monitoring+of+in+vivo+processes.">A secreted luciferase for ex vivo monitoring of in vivo processes.</a> Nature Methods. 5 (2), 171-173 (2008).</li><li>Aoki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+sphingosine+kinase+1+worsens+pancreatic+cancer+peritoneal+carcinomatosis.">Host sphingosine kinase 1 worsens pancreatic cancer peritoneal carcinomatosis.</a> Journal of Surgical Research. 205 (2), 510-517 (2016).</li></ol>

Son on yıldır ki meme kanser modelleri3,7,13,16,20,21de dahil olmak üzere birden çok fare kanser modelleri kurulması. Daha önce biz meme kanseri hücre orthotopic aşılama direkt görüş altında meme bezi doku haline daha büyük bir tümör hücreleri bir cerrahi kesi7 olmadan meme çevresinde enje...

Hayvan modelleri kanser araştırmalarında önemli bir rol oynar. Bir hipotez tüp bebek kanıtlanmış zaman içinde vivo klinik önemini değerlendirmek için sınanmalıdır. Kanser ilerlemesi ve metastaz genellikle daha iyi tüp bebek modelleri ile karşılaştırıldığında hayvan modelleri tarafından yakalanır ve ilaç geliştirme1,2için preklinik bir çalışma olarak bir hayvan modelinde yeni bir ilaç test etmek esastır. Ancak, teknik ayrıntılarını hayvan deneyleri de zorlu model başarılı çoğaltmak için yapım o yayınlanan makalelerinde açıklanan değildir. Gerçekten de, bu orthotopic aşılama ve mastektomi modeller kuran yazarlar deneme yanılma uzun ve titiz süreçler gitti. Sonra kanser hücre aşılama başarısını belirlemek için önemli faktörlerden biri ve verimlilik bir hayvan tumorigenesis başarı oranını3çalışma. Hücre ve hücre aşılamak için aşı site ve fareler suşu sayısı tüm önemli faktörlerdir. İyi için tüp bebek teknikleri ile karşılaştırıldığında bireysel farklılıklar nedeniyle hayvan deneyleri sonuçlarına büyük varyasyon vardır bilinmektedir. Bu nedenle, köklü bir model ile standart bir teknikle istikrarlı sonuçları, hayvan deneyleri verimliliğini artırmak ve yanıltıcı sonuçlar önlemek için elde etmek önemlidir.
Bu İnceleme köklü teknikleri4 meme kanseri orthotopic ve mastektomi fare modelleri oluşturmak için sağlar. 1) insan meme kanseri ilerleme ve tedavi kursları taklit etmek için 2) daha fazla verimlilik ve diğer meme kanseri aşısı veya mastektomi teknikleri ile karşılaştırıldığında daha yüksek başarı oranları ile içinde vivo deneyler için bu yöntemlerin amacı vardır. Orthotopic kanser hücre aşı insan meme kanseri ilerleme, taklit etmek için biz #2 meme yağ yastığı göğüs içinde yer alan bir aşı site olarak seçin. Çalışmaların çoğunda, meme kanseri hücrelerinin subkutan aşılanmış5. Bu teknik ameliyat gerektirmez ve böylece, basit ve anlaşılır olmuştur. Ancak, subkutan microenvironment oldukça farklı kanser ilerlemesi ve hatta moleküler profilleri6,7ile sonuçlanır meme bezi microenvironment farklıdır. Bazı çalışmalarda #4 meme bezi, karın içinde bulunan bir aşı Makinası6olarak kullanın. #4 meme dokuları karın içinde yer alır, ancak, periton carcinomatosis7metastatik meme kanseri8az % 10 ile oluşur, en yaygın metastatik deseni vardır. #2 meme bezi burada anlatılan tekniği ile üretilen meme kanseri en sık görülen meme kanseri metastatik siteleri9biridir akciğer için metastaz.
Bu teknik ile aynı zamanda diğer meme kanseri aşılama teknikleri ile karşılaştırıldığında çok az tümör boyutu değişkenliği ile daha yüksek bir tumorigenesis oranı elde etmek için hedeftir. Bunu yapmak için kanser hücrelerinin bir jelatinimsi protein karışımı askıya bir medyan ön göğüs duvarı kesi yoluyla direkt görüş altında aşı. Bu teknik ile tümör boyutu ve şekli daha önce bildirilen3,7olarak subkutan veya cerrahi olmayan enjeksiyon kıyasla daha az değişkenlik yüksek tumorigenesis oranı üretir.
Biz de hangi orthotopic meme tümör çevre dokular ve aksiler lenf düğümleri ile rezeke bir fare radikal mastektomi teknik tanıtmak. Klinik, standart meme kanserli hastalarda olmadan uzak metastaz hastalık için tedavi mastektomi10,11ayardır. Daha önce bir mastektomi, aksiler lenf nodu metastazı görüntüleme ve sentinel lenf nodu biyopsisi tarafından incelenmiştir. Hasta aksiler lenf nodu metastazı kanıtı yok ise, bir toplam veya kısmi mastektomi aksiler lenf nodu rezeksiyon atlandı, o zaman kabul edilir. Toplam mastektomi meme kanseri tüm meme dokusu ile en bloc çıkarabileceğim için bir tekniktir kısmi mastektomi meme kanseri normal meme dokusu sadece, çevresindeki kenar boşluğu ile dalağı ise böylece kalan normal meme dokusunun korunması hasta. Ancak, sonra kısmi bir mastektomi normal meme dokusu kalan korumak hastalar postoperatif radyoterapi yerel yineleme10önlemek için gerektirir. Radikal mastektomi meme kanseri ile tüm normal kaldıran taahhüt aksiler lenf nodu metastazı olan hastalarda meme dokusu ve aksiller lenf düğümleri ve doku tr blok10,11işgal. Fare modelinde, gözetleme aksiler lenf nodu metastazı ve/veya post operatif radyasyon için uygun ya da mümkün değil. Böylece, biz yerel veya aksiler lenf nodu metastazı önlemek için radikal mastektomi tekniği kullanır.
Kanser hücre aşılama yolu ile kuyruk damar en yaygın akciğer metastazı fare modeli12, sözde "deneysel metastaz" var. Bu model oluşturmak kolaydır ve ameliyat gerektirmez; Ancak, farklı metastatik hastalık davranışlara neden olabilir insan meme kanseri ilerleme taklit değil. Metastaz kez Mastektomi sonra oluştuğu insan meme kanseri tedavi sahası taklit etmek için birincil tümör orthotopic kanser hücre aşı sonra kaldırılır. Bu teknik olarak daha önce raporlanmış13, basit Tümör rezeksiyonu kıyasla daha az yerel yineleme üretir ve Roman therapeutics, preklinik çalışmaları ve metastatik meme kanseri araştırma çalışmaları için yararlıdır. Burada açıklanan teknikler çoğu meme kanseri orthotopic modeli deneyler için geçerlidir. Ancak, jelatinimsi protein karışımı microenvironment etkileyebilir ve cerrahi stres/bağışıklık yanıtı14etkileyebilir dikkate almak önemlidir. Bu nedenle, microenvironment ve/veya stres/bağışıklık yanıtı eğitim müfettişler faktörler semptomlarıdır potansiyelini bilmelidir.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Micro Dissection Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5983</td>
			<td>For cancer cell inoculation and masstectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5233</td>
			<td>For cancer cell inoculation and masstectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holder</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7830</td>
			<td>For cancer cell inoculation and masstectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6873</td>
			<td>For ex vivo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-0 silk sutures</td>
			<td>Look</td>
			<td>774B</td>
			<td>For cancer cell inoculation and masstectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry sterilant (Germinator 500)</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>GER 5287-120V</td>
			<td>For cancer cell inoculation and masstectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clipper</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>9908-717</td>
			<td>For cancer cell inoculation and masstectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354234</td>
			<td>For cancer cell inoculation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Luciferin, potassium salt</td>
			<td>GOLD-Bio</td>
			<td>LUCK-1K</td>
			<td>For bioluminescence quantification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roswell Park Memorial Insitute 1640</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875093</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serub</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10437028</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.25%)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200056</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generating a murine orthotopic metastatic breast cancer model and performing murine radical mastectomy

Meme kanseri ilerleme değerlendirmek için in vivo fare modelleri preklinik ilaç gelişmeler de dahil olmak üzere kanser araştırmaları için gereklidir. Ancak, pratik ve teknik ayrıntılarını çoğunluk sık, bu nedenle, özellikle cerrahi teknikleri gerektirdiğinde modelleri çoğaltmak zor hale getiren yayımlanan el yazmaları içinde göz ardı edilir. Bir tümör aşikar olmadığında bile bioluminescence teknoloji kanser hücrelerinin küçük miktarlarda değerlendirme için sağlar. Kanser hücrelerinin luciferase ifade kullanmak, biz bir meme kanseri orthotopic aşılama tekniği yüksek tumorigenesis oranı ile kurmak. Akciğer metastazı bir ex vivo tekniği kullanılarak değerlendirilir. Biz, o zaman, mastektomi manken metastatik tümör yükünü değerlendirmek için düşük yerel yineleme oranıyla kurmak. Burada, biz, ayrıntılı olarak orthotopic implantasyon ve mastektomi meme kanseri ile bir yüksek tumorigenesis oranı ve düşük yerel nüks oranları, cerrahi teknikleri sırasıyla, meme kanseri modeli verimliliği artırmak için açıklar.

Orthotopic modeli amacı insan kanseri ilerleme (yani, ardından lenf nodu metastazı ve sonra uzak akciğer metastazı birincil tümör büyümesini) taklit etmektir15. Kanser hücre aşı sonra bioluminescence düzenli olarak sayılabilir (2-3 kez / hafta) (Şekil 1A). Akciğerlerde bioluminescence daha derin ve birincil lezyon daha küçük. Bioluminescence esas olarak canlı fareler3 (<strong class=...

Watch this Scientific Journal Video about Generating a Murine Orthotopic Metastatic Breast Cancer Model and Performing Murine Radical Mastectomy at JoVE.com

Generating a Murine Orthotopic Metastatic Breast Cancer Model and Performing Murine Radical Mastectomy

Fare Orthotopic metastatik meme kanseri Model oluşturma ve fare radikal mastektomi gerçekleştirme

Biz bir fare orthotopic meme kanseri modeli ve radikal mastektomi modeli insan meme kanseri ilerleme taklit etmek için tümör yükünü ölçmek için bioluminescence teknolojisi ile tanıtmak.

In vivo mouse models to assess breast cancer progression are essential for cancer research, including preclinical drug developments. However, the majority ...

Bu yöntem, bir fare modelinde insan meme kanseri ilerleme ve tedavi taklit hakkında meme kanseri alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu fare meme kanseri modelinin en büyük avantajı ortotopik implantasyon sonrası yüksek tümörigenez oranına ve mastektomi sonrası düşük lokal nüks oranına sahip olmasıdır. Anestezili dişi farede ayak parmak kıskacına yanıt eksikliğini onaylayarak ve hayvanın uzuvlarını cerrahi tahtaya bantlayarak başlayın.Steril pamuk bezleri nin kullanılması cerrahi bölgeyi klorheksidin, iyot ve %75 etanol ile sterilize eder. Ve ön göğüs duvarının ortasında beş milimetrelik deri kesiği yapın. Sonraki kesi bitişik cildin sağ tarafını kaldırın ve göğüs duvarından cilt ayırmak için steril mikrodiseksiyon makası kullanın.Doğru iki numaralı meme yağ yastığıortaya çıkarmak için cilt ters ve dikkatle yağ yastığı içine yara yoluyla kanser hücresi süspansiyon 20 mikrolitre enjekte etmek için 28,5-gauge iğne ile donatılmış bir mililitrelik insülin şırınga kullanın. Jelatinimsi kanser hücresi protein karışımının iğneyi çıkarmadan önce katılaşmasını sağlamak ve kesiyi steril 5-0 emilemez dikişlerle kapatmak için iğneyi yağ yastığının içinde beş saniye tutun. Sonra tam recumbency kadar izleme ile temiz bir kafese hayvan yerleştirin.Kanser aşısı sekiz gün sonra mastektomi gerçekleştirmek için sadece gösterildiği gibi cerrahi için fare hazırlamak, ve kanser hücresi inoülasyonu cerrahi yara iki milimetre solunda beş milimetrelik deri kesi yapmak. Tümörü çıkarmak için ön ekstremite köküne doğru kesi genişletin, ve deri, cerrahi yara dahil, ve tümör ile temas lezyon, ve genellikle görünür lenf düğümleri mastektomi sırasında mevcut aksiller lenf düğümü havzası. Daha sonra y.şeklinde steril 5-0 emilir dikişler ile cilt kusurlarını kapatın ve tam görevde kalakadar izleyerek hayvanı kafesine geri döndürün.İnogülasyondan 21 gün sonra akciğer metastazı niceliği için ötanaziden 15 dakika önce d-Luciferin IP kilogramı başına 150 miligram enjekte edin. Ve orta karın deri ve periton açmak için kavisli Mayo makas kullanın. Diyafram görüntülenebilir kadar karaciğer aşağı basın, ve diyafram ve bilateral kaburga caudad cephalad kesti.Akciğerleri ortaya çıkarmak için ön toraks duvarını çevirin ve akciğerleri kaldırarak akciğerleri omurilikle bağlayan bir kordona benzeyen torasik özofagusu tanımlayın. Mikrodiseksiyon makas ile yemek borusu kesin ve kaudad doğru ikili akciğerler ve kalp çekmek için forceps kullanın. Sonra sefalad de akciğer apeks için trakea ve büyük damarları kesmek ve biyolüminesans görüntüleme için 10 santimetre Petri çanak içine akciğerler yerleştirin.Akciğer dokusundan kalp kaldırmak için makas kullanın. Meme yağ yastığı kanser hücresi aşılama yaklaşık sekiz gün sonra başlayan akciğerlerde biyolüminesans daha derin ve canlı farelerde birincil tümör yükünü yansıtan primer lezyon daha küçüktür. Kaliperlerle tümör boyutunun ölçülmesi, tümör hacminin yerinde tahmin insasına olanak sağlar.Bu mastektomi modeli aynı zamanda hayvanları ötenazi ye gerek kalmadan seri metastatik tümör yükünün izlenmesine olanak sağlar. Akciğer metastazlarının tümör yükü de ex vivo görüntüleme ile ölçülebilir, ancak sınırlama farelerin ötenazi olması gerektiğidir. Cerrahi tedavi sonrası fare sağkalım da translatable klinik uç nokta olarak izlenebilir.Bu teknik, geliştirilmesinden sonra meme kanseri alanında araştırmacıların sadece yeni ilaç gelişimini değil, genel olarak meme kanseri araştırmalarını da keşfetmelerinin önünü açmıştır.

Research

JoVE Journal

Medicine

Murine Bioluminescent Hepatic Tumour Model

Murin Bioluminescent Karaciğer Tümör Modeli

This video describes the establishment of liver metastases in a mouse model that can be subsequently analysed by bioluminescent imaging. Tumour cells are ...

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

Murin Mesane Kanseri bir Ortotopik Model

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Ortotopik Akciğer Transplantasyonu bir Mürin Modelinde Obliteratif Bronşiolit Gelişimi

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression

Pankreas Kanseri İlerleme Bioluminescent Ortotopik Model

Pancreatic cancer has an extremely poor five-year survival rate of 4-6%.  New therapeutic options are critically needed and depend on improved ...

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

Subaraknoid Kanama bir fare modeli

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

İnsan Prostat Kanser metastaz Ortotopik fare modeli

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer

Meme Kanseri Bir Roman Transgenik Fare Modeli: Adenovirüs-Kretasedekine ile epiteli Hedefleme ile Metastatik Meme Kanseri Başlatma

Breast cancer is a heterogeneous disease involving complex cellular interactions between the developing tumor and immune system, eventually resulting in ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

Üç boyutlu (3D) Modeli Kullanılarak Meme Kanseri Hücre invazivliğinin Kantitasyonu

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

A Preclinical Murine Model of Hepatic Metastases

Karaciğer metastazları Klinik öncesi fare modeli

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, ...

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

Vivo ve Ex Vivo Periton yağ içinde Samanyolu Nokta Yapıların Yumurtalık Kanseri Metastatik Kolonizasyon Eğitim Yaklaşımlar içinde

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of ...