Name: in situ hybridization techniques for paraffin-embedded adult coral samples
Uploaded: 2018-08-31T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Situ Hybridization Techniques for Paraffin-Embedded Adult Coral Samples at JoVE.com

Detta arbete finansierades av award ingen. OCE-1323652 genom den nationella Science Foundation Ocean vetenskap postdoktorsstipendium och award no.1012629 från Burroughs Wellcome fonden postdoktorala berikande Program.

1. borttagning av Paraffin
Försiktighet: Utför följande steg under ett dragskåp.
<ol><li>Dewax tunn-sektioneras paraffin-inbäddat bilder med 100% xylen under huven i Coplin glasburkar i 10 min. Använd inte Coplin plastburkar, som xylen smälter plast. Sterilisera Coplin burkarna i en autoklav före användning.</li>
	<li>Förbereda fyra sterila Coplin glasburkar med följande: 100% etanol, 80% etanol, 70% etanol och 60% etanol. Späd etanolen med RNase-gratis vatten.<ol>
<li>Överföra...

<ol>
	<li>Hughes, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Climate+Change,+Human+Impacts,+and+the+Resilience+of+Coral+Reefs.">Climate Change, Human Impacts, and the Resilience of Coral Reefs.</a> Science. 301 (5635), 933 (2003).</li><li>Chen, P. -. Y., Chen, C. -. C., Chu, L., McCarl, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+the+economic+damage+of+climate+change+on+global+coral+reefs.">Evaluating the economic damage of climate change on global coral reefs.</a> Global Environmental Change. 30 (Supplement C), 12-20 (2015).</li><li>Hoegh-Guldberg, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coral+Reefs+Under+Rapid+Climate+Change+and+Ocean+Acidification.">Coral Reefs Under Rapid Climate Change and Ocean Acidification.</a> Science. 318 (5857), 1742 (2007).</li><li>Grasso, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+identifies+candidate+genes+for+key+roles+in+coral+development.">Microarray analysis identifies candidate genes for key roles in coral development.</a> BMC Genomics. 9 (1), 540 (2008).</li><li>Miller, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+innate+immune+repertoire+in+Cnidaria+-+ancestral+complexity+and+stochastic+gene+loss.">The innate immune repertoire in Cnidaria - ancestral complexity and stochastic gene loss.</a> Genome Biology. 8 (4), R59 (2007).</li><li>Shinzato, C., Iguchi, A., Hayward, D. C., Technau, U., Ball, E. E., Miller, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sox+genes+in+the+coral+Acropora+millepora:+divergent+expression+patterns+reflect+differences+in+developmental+mechanisms+within+the+Anthozoa.">Sox genes in the coral Acropora millepora: divergent expression patterns reflect differences in developmental mechanisms within the Anthozoa.</a> BMC Evolutionary Biology. 8 (1), 311 (2008).</li><li>Anctil, M., Hayward, D. C., Miller, D. J., Ball, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+and+expression+of+four+coral+G+protein-coupled+receptors+distinct+from+all+classifiable+members+of+the+rhodopsin+family.">Sequence and expression of four coral G protein-coupled receptors distinct from all classifiable members of the rhodopsin family.</a> Gene. 392 (1-2), 14-21 (2007).</li><li>Darby, I. A., Hewitson, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In situ hybridization protocols. , (2006).</li><li>Valentino, K. L., Eberwine, J. H., Barchas, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In situ hybridization. , (1987).</li><li>Tautz, D., Pfeifle, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+non-radioactive+in+situ+hybridization+method+for+the+localization+of+specific+RNAs+in+Drosophila+embryos+reveals+translational+control+of+the+segmentation+gene+hunchback.">A non-radioactive in situ hybridization method for the localization of specific RNAs in Drosophila embryos reveals translational control of the segmentation gene hunchback.</a> Chromosoma. 98 (2), 81-85 (1989).</li><li>Traylor-Knowles, N., Rose, N. H., Palumbi, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cell+specificity+of+gene+expression+in+the+response+to+heat+stress+in+corals.">The cell specificity of gene expression in the response to heat stress in corals.</a> Journal of Experimental Biology. 220 (10), (2017).</li><li>Wolenski, F. S., Layden, M. J., Martindale, M. Q., Gilmore, T. D., Finnerty, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+the+spatiotemporal+expression+of+RNAs+and+proteins+in+the+starlet+sea+anemone,+Nematostella+vectensis.">Characterizing the spatiotemporal expression of RNAs and proteins in the starlet sea anemone, Nematostella vectensis.</a> Nature Protocols. 8, 900 (2013).</li><li>Schnitzler, C. E., Simmons, D. K., Pang, K., Martindale, M. Q., Baxevanis, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+multiple+Sox+genes+through+embryonic+development+in+the+ctenophore+Mnemiopsis+leidyi+is+spatially+restricted+to+zones+of+cell+proliferation.">Expression of multiple Sox genes through embryonic development in the ctenophore Mnemiopsis leidyi is spatially restricted to zones of cell proliferation.</a> EvoDevo. 5 (1), 15 (2014).</li><li>Traylor-Knowles, N. G., Kane, E. G., Sombatsaphay, V., Finnerty, J. R., Reitzel, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-specific+and+developmental+expression+of+Dmrt+genes+in+the+starlet+sea+anemone,+Nematostella+vectensis.">Sex-specific and developmental expression of Dmrt genes in the starlet sea anemone, Nematostella vectensis.</a> EvoDevo. 6 (1), (2015).</li><li>Barry, S. N., Crow, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+HoxA11+and+HoxA13+in+the+evolution+of+novel+fin+morphologies+in+a+representative+batoid+(Leucoraja+erinacea).">The role of HoxA11 and HoxA13 in the evolution of novel fin morphologies in a representative batoid (Leucoraja erinacea).</a> EvoDevo. 8 (1), 24 (2017).</li><li>Sharma, P. P., Gupta, T., Schwager, E. E., Wheeler, W. C., Extavour, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subdivision+of+arthropod+cap-n-collar+expression+domains+is+restricted+to+Mandibulata.">Subdivision of arthropod cap-n-collar expression domains is restricted to Mandibulata.</a> EvoDevo. 5 (1), 3 (2014).</li><li>Piatigorsky, J., Kozmik, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cubozoan+jellyfish:+an+Evo/Devo+model+for+eyes+and+other+sensory+systems.">Cubozoan jellyfish: an Evo/Devo model for eyes and other sensory systems.</a> The International Journal of Developmental Biology. 48 (8-9), 719-729 (2004).</li></ol>

Den metod som beskrivs i detta protokoll har ändrats från tidigare arbete i medicinsk och evolutionära utvecklings forskning8,9,10,12,17. Detta protokoll fokuserar på nyanserna i ett i situ -hybridisering med en gräva-märkt RNA anti känsla sond på vuxen koraller, som har bevarat och inbäddade i paraffin. Denna metod kan lätt överföras till...

Koraller är kritiska ekosystem byggare och viktig för den biologiska mångfalden i havet och människors hälsa1,2,3. De är hotade på grund av klimatförändringar och andra antropogena stressfaktorer och många korallarter betraktas som akut hotad. Det finns således ett betydande behov av cellulära och molekylära verktyg för att diagnostisera koraller under stress. Också, det är lite förstås om där generna uttrycks inom vuxen korall vävnad och därför lite förståelse för funktionerna av dessa gener. Om du vill åtgärda det här problemet har vi anpassat i situ hybridisering (ISH) protokollet, vanligen används i humanmedicin och evolutionär utvecklingsbiologi, för användning på paraffin-inbäddat vävnadsprover på vuxen koraller. Denna teknik är mest kraftfulla när de används på vuxna koraller som har genomgått en stressande händelse såsom exponering för värmestress. Men denna teknik kan användas på ett brett utbud av vävnader och levnadsstadier i koraller och är inte begränsad till endast värme-stressade koraller4,6,7. Dessutom kan denna teknik användas på vävnader eller celler av någon metazoan så länge det finns cDNA sekvensinformation.
Syftet med denna metod är att visualisera RNA sonder i vuxen korall vävnad som har bevarat och inbäddade i paraffin och sektioneras på bilder. Denna metod är ett kraftfullt diagnostiska verktyg som möjliggör visualisering av nukleinsyror inom vuxen korall vävnad. Utvecklades inledningsvis denna metod för medicinsk diagnostik, och det har sedan dess blivit ett populärt verktyg inom utvecklingsbiologi och evolutionär utvecklingsbiologi8,9,10. ISH är också en kritisk metod, särskilt i icke-modellsystem, när genomisk och transcriptomic sekvens uppgifter finns tillgängliga men rumsliga gen uttrycksmönster är okänd. För diagnostiska arbetet i icke-modellsystem är denna teknik kraftfulla eftersom det kan indikera vilka celler och vävnader express en gen av intresse och kan leda till mer riktade behandlingsmetoder8,9,10, 11,12. Slutligen, denna teknik är kvalitativa och mer kraftfull när den är ihopparad med kvantitativ gen uttryck data11.
Det synsätt som beskrivs i detta dokument kommer att vara av intresse för forskare som redan har utformat en digoxigenin (DIG)-märkt RNA sonden (både känsla och antisense sonder) och är nu redo att utföra i situ hybridisering av sonderna till ett urval. För att utföra denna metod, kommer två seriella sektioner av en paraffin korall vävnad att behövas för varje sond som testas. En del kommer att användas för sonden avkänningen och den andra för antisense sonden. Sonden avkänningen blir en kontroll för att ange icke-specifik bindning. Om missfärgning observeras i sonden avkänningen, då är antisense sonden inte specifika för RNA av intresse. Sonderna kan utformas för någon gen uttryckt. I detta protokoll, flera exempel används som befanns tidigare uttryckas under värmestress i koraller: FBJ murina osteosarkom virala onkogen homolog B (Fos-B), Activator protein (AP1), och tumörnekrosfaktor receptor 41 (TNFR 41)11. ISH använder gräva-märkt RNA sonder är att föredra framför med radioaktiva sonder eftersom deras hantering är mycket säkrare10. Dessutom, denna teknik är mycket känsliga och kan utföras på ett brett utbud av vävnader och embryon utöver värme-stressad vuxen koraller13,14,15,16.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Denhardt&#39;s solution</td>
			<td>Affymetrix</td>
			<td>70468 50 ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioworld Alkaline phosphatase buffer</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>50-198-724</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide mailers</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>12-587-17B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioworld Alkaline phosphatase buffer</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>50-198-724</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Falcon tubes</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-959-49A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPure Salmon Sperm DNA solution</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15632-011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS - Phosphate-Buffered Saline (10X) pH 7.4</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AM9625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPure DNase/RNase-Free Distilled Water, 10 x 500 mL</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10977-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPure DNase/RNase-Free Distilled Water, 10 x 500 mL</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10977-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPure Salmon Sperm DNA solution</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15632-011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide white apex superior adhesive</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>3800080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS solution, pH 7.4</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>10010072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteinase K, Molecular Grade, 2 mL</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>P8107S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super Pap Pen Liquid Blocker</td>
			<td>Promega</td>
			<td>22309</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DIG Anti-Digoxigenin-AP Fab fragments</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11093274910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BM Purple, 100 mL</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11442074001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DIG Wash and Block Buffer Set</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11585762001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NBT/BCIP</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11681451001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde solution, 500 mL size</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>252549-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SSC Buffer 20X concentration</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6639-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Anhydride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>320102-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formamide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>47670-250ML-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triethanolamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>90279-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt from porcine intestinal mucosa</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3149-10KU</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylenes, AR (ACS), For Histological Use</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MK866806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>EM-EX0276-4S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TE buffer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>PAV6232</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hybridization oven</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97005-252, 97005-254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital shaker</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89032-088</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in situ hybridization techniques for paraffin-embedded adult coral samples

Koraller är viktigt ocean ryggradslösa djur som är kritiska för ocean hälsa samt människors hälsa. Dock på grund av mänsklig påverkan såsom stigande hav temperaturer och havsförsurning är koraller alltmer hotade. För att tackla dessa utmaningar, har framstegen inom cell- och molekylärbiologi visat sig vara avgörande för att diagnostisera hälsa av koraller. Ändra några av de tekniker som ofta används inom humanmedicinen kunde förbättra forskarnas förmåga att behandla och spara koraller. För att åtgärda detta, har ett protokoll för i situ hybridisering används främst inom humanmedicinen och evolutionär utvecklingsbiologi anpassats för användning i vuxen koraller under stress.
Syftet med denna metod är att visualisera det rumsliga uttrycket för en RNA-probe i vuxen korall vävnad som har bäddats in i paraffin och sektioneras på objektglas. Denna metod fokuserar på avlägsnande av paraffin och rehydrering av provet, förbehandling av provet att säkerställa permeabilitet av prov, före hybridisering inkubation, hybridisering av RNA sonden och visualisering av RNA sonden. Detta är en kraftfull metod när du använder icke-modellorganismer för att upptäcka där specifika gener uttrycks, och protokollet kan enkelt anpassas för andra icke-modellorganismer. Metoden är dock begränsad eftersom det är främst kvalitativ, eftersom uttrycket intensitet kan variera beroende på mängden tid som används under steget visualisering och koncentrationen av sonden. Dessutom krävs tålamod, eftersom detta protokoll kan ta upp till 5 dagar (och i många fall längre) beroende på sonden används. Slutligen, icke-specifik bakgrundsfärgning är vanligt, men denna begränsning kan övervinnas.

Efter att ha avslutat detta protokoll, kommer identifiering av celler och vävnader som uttrycker RNA sonden av intresse att uppnås. De representativa resultat för detta protokoll är för AP-1, FosB och TNFR41. Dessa resultat, tidigare utgiven av Traylor-Knowles o.a. 11, Visa rumsliga uttryck av RNA sonder på vuxen koraller som utsattes för värmestress. Två exempel på olika färgning typer presenteras i figur 1. <stron...

Watch this Scientific Journal Video about In Situ Hybridization Techniques for Paraffin-Embedded Adult Coral Samples at JoVE.com

In Situ Hybridization Techniques for Paraffin-Embedded Adult Coral Samples

Målet med detta protokoll är att utföra i situ hybridisering på vuxen korall prover som har bäddats in i paraffin och sektioneras på objektglas. Detta är en kvalitativ metod som används för att visualisera det rumsliga uttrycket för en RNA anti känsla probe i paraffin-inbäddat vävnader.

In Situ Hybridisering tekniker för Paraffin-inbäddat vuxen korall prover

Corals are important ocean invertebrates that are critical for overall ocean health as well as human health. However, due to human impacts such as rising ...

Research

JoVE Journal

Environment

In Situ Hybridization Techniques for Paraffin-Embedded Adult Coral Samples

A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters (Homarus americanus)

A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters Homarus americanus

En icke-invasiv metod för att<em&gt; In situ</em&gt; Fastställande av parning Framgång i Kvinnliga amerikanska Hummer (<em&gt; Homarus americanus</em&gt;)

Despite being one of the most productive fisheries in the Northwest Atlantic, much remains unknown about the natural reproductive dynamics of American ...

Experimental Protocol for Detecting Cyanobacteria in Liquid and Solid Samples with an Antibody Microarray Chip

Experimental Protocol for Detecting Cyanobacteria in Liquid and Solid Samples with an Antibody Microarray Chip

Experimentellt protokoll för att upptäcka<em&gt; Cyanobakterier</em&gt; I flytande och fasta prover med en antikropp microarray Chip

Global warming and eutrophication make some aquatic ecosystems behave as true bioreactors that trigger rapid and massive cyanobacterial growth; this has ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

En lipid extraktions- och analysmetod för karakterisering av markmikrober i experiment med många prov

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

Preparation of Authigenic Pyrite from Methane-bearing Sediments for In Situ Sulfur Isotope Analysis Using SIMS

Preparation of Authigenic Pyrite from Methane-bearing Sediments for In Situ Sulfur Isotope Analysis Using SIMS

Beredning av Authigenic pyrit från metan-bärande sediment för In Situ svavel isotopen analys använder SIMS

Different sulfur isotope compositions of authigenic pyrite typically result from the sulfate-driven anaerobic oxidation of methane (SO4-AOM) and ...

Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

Tekniker för att utreda det Ant visuella systemet anatomi

This article outlines a suite of techniques in light microscopy (LM) and electron microscopy (EM) which can be used to study the internal and external eye ...

Collection and Extraction of Occupational Air Samples for Analysis of Fungal DNA

Samling och utvinning av yrkesmässig luftprover för analys av svamp DNA

Traditional methods of identifying fungal exposures in occupational environments, such as culture and microscopy-based approaches, have several ...

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

Bioindication provning av Stream miljö lämplighet för ung sötvatten pärla musslorna med i Situ exponering metoder

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol ...

Single-throughput Complementary High-resolution Analytical Techniques for Characterizing Complex Natural Organic Matter Mixtures

Singel-genomströmning kompletterande högupplösta analysmetoder för kännetecknar komplexa naturliga organiska ämnen blandningar

Natural organic matter (NOM) is composed of a highly complex mixture of thousands of organic compounds which, historically, proved difficult to ...

In Situ Chemotaxis Assay to Examine Microbial Behavior in Aquatic Ecosystems

In Situ Chemotaxis Assay att undersöka mikrobiellt beteende i akvatiska ekosystem

Microbial behaviors, such as motility and chemotaxis (the ability of a cell to alter its movement in response to a chemical gradient), are widespread ...

Determination of Total Lipid and Lipid Classes in Marine Samples

Bestämning av totala lipid- och lipidklasser i marina prover

Lipids are largely composed of carbon and hydrogen and, therefore, provide a greater specific energy than other organic macromolecules in the sea. Being ...