Name: database-guided flow-cytometry for evaluation of bone marrow myeloid cell maturation
Uploaded: 2018-11-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Database-guided Flow-cytometry for Evaluation of Bone Marrow Myeloid Cell Maturation at JoVE.com

इस अध्ययन में प्रयुक्त एंटीबॉडी BD के द्वारा प्रदान किया गया । लेखक अपने सहयोगी, डॉ पास्कल Flandrin-Gresta, आणविक जीवविज्ञान विभाग, रुधिर प्रयोगशाला, संत के विश्वविद्यालय अस्पताल-एटीन, फ्रांस, जो दूसरे के लिए NGS डेटा की व्याख्या के लिए विशेषज्ञता प्रदान की है से धंयवाद करना चाहूंगा MDS मामला । लेखक उनके हित और इस अध्ययन में शामिल करने के लिए और रोगियों और उनके इस अध्ययन में भाग लेने के लिए समझौते के लिए स्वस्थ दाताओं के लिए चिकित्सक hematologists के लिए आभारी हैं । लेखक भी प्रकाशन के लिए वित्तीय सहायता के लिए "लेस आमिष de Rémi" फाउंडेशन का शुक्रिया अदा करना चाहेंगे ।

नीचे सूचीबद्ध प्रोटोकॉल "Comité de protection des Personnes" (भरोसेमंद नैतिकता समिति) सूद-Est 1 से सेंट-एटीन, फ्रांस के विश्वविद्यालय अस्पताल से अनुमोदित किया गया है ।
1. Cytometer सेटिंग्स
नोट: cytometer सेटिंग्स फ्रां...

<ol>
	<li>Orfao, A., Ortu&#241;o, F., de Santiago, M., Lopez, A., San Miguel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunophenotyping+of+Acute+Leukemias+and+Myelodysplastic+Syndromes.">Immunophenotyping of Acute Leukemias and Myelodysplastic Syndromes.</a> Cytometry Part A. 58, 62-71 (2004).</li><li>Porwit, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revisiting+guidelines+for+integration+of+flow+cytometry+results+in+the+WHO+classification+of+Myelodysplastic+Syndromes+-+proposal+from+the+International/European+LeukemiaNet+Working+Group+for+Flow+Cytometry+in+MDS+(IMDSFlow).">Revisiting guidelines for integration of flow cytometry results in the WHO classification of Myelodysplastic Syndromes - proposal from the International/European LeukemiaNet Working Group for Flow Cytometry in MDS (IMDSFlow).</a> Leukemia. 28 (9), 1793-1798 (2014).</li><li>Westers, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+flow+cytometry+in+the+diagnostic+work-up+of+myelodysplastic+syndromes+in+a+multicenter+approach:+Report+from+the+Dutch+Working+Party+on+Flow+Cytometry+in+MDS.">Implementation of flow cytometry in the diagnostic work-up of myelodysplastic syndromes in a multicenter approach: Report from the Dutch Working Party on Flow Cytometry in MDS.</a> Leukemia Research. 36, 422-430 (2012).</li><li>Meehan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AutoGate:+automating+analysis+of+flow+cytometry+data.">AutoGate: automating analysis of flow cytometry data.</a> Immunologic Research. 58, 218-223 (2014).</li><li>Greenberg, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NCCN+Clinical+Practice+Guidelines+in+Oncology:+myelodysplastic+syndromes.">NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology: myelodysplastic syndromes.</a> Journal of the National Comprehensive Cancer Network. 9, 30-56 (2011).</li><li>Greenberg, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+Syndromes,+Version+2.2017,+Clinical+Practice+Guidelines+in+Oncology.">Myelodysplastic Syndromes, Version 2.2017, Clinical Practice Guidelines in Oncology.</a> Journal of the National Comprehensive Cancer Network. 15, (2017).</li><li>Swerdlow, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. Revised 4th Edition. (2), 86-128 (2017).</li><li>. https://lists.purdue.edu/pipermail/cytometry/2009-March/036889.html Available from: <a target="_blank" href="https://lists.purdue.edu/pipermail/cytometry/2009-March/036889.html">https://lists.purdue.edu/pipermail/cytometry/2009-March/036889.html</a> (2018)</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Composition of EuroFlow panels and technical information on reagents Version 1.5. , (2017).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> EuroFlow Standard Operating Procedure (SOP) for sample preparation and staining Version 1.2.1. , (2015).</li><li>Kalina, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EuroFlow+standardization+of+flow+cytometer+instrument+settings+and+immunophenotyping+protocols.">EuroFlow standardization of flow cytometer instrument settings and immunophenotyping protocols.</a> Leukemia. 26, 1986-2010 (2012).</li><li>van Dongen, J. J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EuroFlow+antibody+panels+for+standardized+n-dimensional+flow+cytometric+immunophenotyping+of+normal,+reactive+and+malignant+leukocytes.">EuroFlow antibody panels for standardized n-dimensional flow cytometric immunophenotyping of normal, reactive and malignant leukocytes.</a> Leukemia. 26, 1908-1975 (2012).</li><li>Matarraz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introduction+to+the+Diagnosis+and+Classification+of+Monocytic-Lineage+Leukemias+by+Flow+Cytometry.">Introduction to the Diagnosis and Classification of Monocytic-Lineage Leukemias by Flow Cytometry.</a> Cytometry Part B (Clinical Cytometry). 92 (3), 218-227 (2015).</li><li>Westers, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunophenotypic+analysis+of+erythroid+dysplasia+in+myelodysplastic+syndromes.+A+report+from+the+IMDSFlow+working+group).">Immunophenotypic analysis of erythroid dysplasia in myelodysplastic syndromes. A report from the IMDSFlow working group).</a> Haematologica. 102, 308-319 (2017).</li><li>Shen, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometry+immunophenotypic+findings+in+chronic+myelomonocytic+leukemia+and+its+utility+in+monitoring+treatment+response.">Flow cytometry immunophenotypic findings in chronic myelomonocytic leukemia and its utility in monitoring treatment response.</a> European Journal of Haematology. 95, 168-176 (2015).</li></ol>

बीएम महाप्राण की गुणवत्ता अंतिम परिणाम पर प्रभाव सकता है । बीएम महाप्राण के hemodilution progenitors या पूर्ववर्ती कोशिकाओं के अभाव के कारण परिपक्वता के विभिन्न चरणों में कोशिकाओं के वितरण को विकृत कर सकता है । शायद ...

phenotypic मार्करों के अभाव में dysplastic माइलॉयड कोशिकाओं में होने वाले परिवर्तन के लिए विशिष्ट MDS दीक्षा और प्रगति, एक नया दृष्टिकोण हाल के वर्षों में परिपक्वता रास्ते के मूल्यांकन के आधार पर प्रस्तावित किया गया है (की अभिव्यक्ति बदल माइलॉयड एंटीजन परिपक्व माइलॉयड कोशिकाओं के उत्पादन के दौरान) या अस्थि मज्जा (बीएम) सेल डिब्बों के भीतर अलग सेल प्रकार के असामान्य वितरण की1,2.
यह लेख myelodysplastic सिंड्रोम (MDS) या अन्य माइलॉयड रक्त रोगों से संबंधित बीएम माइलॉयड सेल डिब्बों में dysplastic परिवर्तन का पता लगाने के लिए MFC के मानकीकृत आवेदन के लिए एक नई विधि प्रस्तुत करता है । यह अध्ययन MFC डेटा विश्लेषण के लिए परिपक्वता डेटाबेस का उपयोग करने की उपयोगिता भी दिखाता है ।
नमूना तैयारी प्रक्रिया का मानकीकरण, डेटा अधिग्रहण, और विश्लेषण डेटाबेस का उपयोग सबसे अधिक प्रासंगिक phenotypic असामान्यताओं की पहचान बीएम माइलॉयड कोशिकाओं में dysplastic परिवर्तन करने के लिए संबंधित की अनुमति होगी । इसलिए, सांख्यिकीय रूप से चयनित उपसमुच्चय अच्छी तरह से लेबल और सुपरिचित स्वरूपों पर आधारित है (स्वचालित जनसंख्या विभाजक (एपीएस) आरेख, हिस्टोग्राम और डॉट भूखंड) एक विश्लेषण कार्यनीति विकसित करने के लिए आवश्यक हैं, जिसका अनुवर्ती विश्लेषण में उपयोग किया जा सकता है दौर. MDS में मजबूत phenotypic विषमताओं की खोज के साथ या न्यूनतम रूपात्मक dysplasia और बिना सितोगेनिक क aberrancies के मामलों में निदान कम हो जाएगा । immunophenotypic पैनलों की कमी के लिए अनुमति भेदभावपूर्ण मापदंडों की पहचान वर्तमान स्कोर को सरल कर सकते हैं2, नैदानिक विकृति प्रयोगशालाओं में अपने प्रयोज्यता की अनुमति.
यह विधि cytometry डेटा के व्यक्तिपरक व्याख्याओं सीमा, के रूप में MDS निदान3में संकेत दिया गया है । यह चरण संसाधन और विश्लेषण प्रवाह डेटा4के लिए स्वचालित उपकरण के विकास के लिए एक पूर्वावश्यकता है ।
mds क्लोनल टेम स्टेम सेल (HSC) विकारों जिसमें spliceosome उत्परिवर्तनों विशिष्ट epigenetic संशोधक के साथ सहयोग करने के लिए mds phenotype उपज का एक विषम समूह शामिल हैं । अब यह ज्ञात है कि, HSC उत्परिवर्तनों के साथ, अंय तंत्र ऐसे ंयायपालिका प्रतिरक्षा मध्यस्थता सूजन और घातक HSCs और बीएम के stromal microenvironment के बीच बातचीत के रूप में MDS pathophysiology, में शामिल हैं । हालांकि, इन तंत्र खराब समझ में रहते हैं । MDS के व्यापक नैदानिक और जैविक विविधता निदान और इष्टतम चिकित्सा एक चुनौती का चयन करता है । पिछले दशक में, कई अध्ययनों से पता चला है कि MFC अक्सर dysplasia आकृति विज्ञान की तुलना में2 का पता लगाने में अधिक संवेदनशील है, लेकिन तकनीकी और आर्थिक बाधाओं इस तकनीक को मानकीकरण मुश्किल बनाने के लिए, परिणाम के साथ अक्सर पर निर्भर करता है दुभाषिया3का अनुभव । इसके अलावा, यह कैसे MFC के साथ या न्यूनतम रूपात्मक dysplasia के बिना और सितोगेनिक क विसंगतियों के अभाव में मामलों में mds की ओर संतुलन टिप कर सकते हैं स्पष्ट नहीं है, या hypocellular MDS जैसे मामलों की सीमा रेखा में, एक कम विस्फोट गिनती के साथ, अन्य गैर-क्लोनर बीएम से ऐसे अस्थि मज्जा विफलता के रूप में विकारों (यानी, अप्लास्टिक एनीमिया). यह भी गंभीर माइलॉयड ल्यूकेमिया (एएमएल) से विस्फोटों की एक अतिरिक्त के साथ MDS के मामलों की सीमा रेखा अंतर करने के लिए मुश्किल रहता है । इन सभी कारणों के लिए, नैदानिक दिशानिर्देशों MFC परीक्षण MDS अंतिम निदान में एकीकृत नहीं है । २०११ में, अमेरिका के राष्ट्रीय व्यापक कैंसर नेटवर्क (NCCN) CD34 के प्रतिशत के अनुमान के लिए MFC की सिफारिश की + कोशिकाओं, कंपकंपी स्वप्नदोष hemoglobinuria क्लोन का पता लगाने, और साइटोटोक्सिक में hypocellular टी-सेल क्लोनों की उपस्थिति5MDS । इन दो बाद स्थितियों को भी एक चिकित्सकीय लक्ष्य शामिल है क्योंकि नैदानिक डेटा immunosuppressive चिकित्सा के लिए इन रोगियों की एक अच्छी प्रतिक्रिया दिखाई है6। २०१७ NCCN दिशानिर्देश, अंतर्राष्ट्रीय कार्य समूह (IWG) सिफारिशों का हवाला देते हुए, MDS निदान के लिए सह-मापदंड के बीच MFC द्वारा ंयायपालिका immunophenotyping डिटेक्शन सूचीबद्ध, लेकिन कोई भी विनिर्देशों बनाने के बिना6. इसके अलावा, हाल ही में प्रकाशित जो वर्गीकरण निर्धारित कि MFC निष्कर्षों अकेले निर्णायक रूपात्मक और/या सितोगेनिक क डेटा7के अभाव में MDS के एक प्राथमिक निदान स्थापित करने के लिए पर्याप्त नहीं हैं । फिर भी, MFC एक अतिरिक्त माइलॉयड कोशिका परिपक्वता पैटर्न के dysregulation दिखा परीक्षण के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है और रोग पाठ्यक्रम में एक विशिष्ट समय पर एक रोगी के लिए "सामांय से दूरी" बढ़ाता है ।
यह विधि dysplasia के मूल्यांकन में बीएम माइलॉयड कोशिकाओं में रुचि MFC immunophenotyping का उपयोग कर, क्रम में dysplastic विषमताओं के साथ MDS या अन्य माइलॉयड विकारों में निदान को परिष्कृत करने के इच्छुक नैदानिक प्रयोगशालाओं पर लागू है ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1217px;" width="1216">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:295px;">BD FACSCanto II flow-cytometer</td>
			<td style="width:235px;">BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td style="width:344px;">SN: V33896301336</td>
			<td style="width:344px;">3-laser, 4-2-2 configuration, Filters and mirrors details: https://www.bdbiosciences.com/documents/BD_FACSCanto_II_FilterGuide.pdf</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Awel C48-R Centrifuge</td>
			<td>AWEL Industries, FR</td>
			<td>SN: 910120016; Model No: 320002001</td>
			<td>low speed centrifuges; capacity 60 FACS tubes</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Pipetts of 10&#181;l and 200&#181;l</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">15 mL Falcon tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">polypropylene tube for FACS</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human HLA-DR</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>655874</td>
			<td style="width:344px;">clone L243 
			Mouse BALB/c IgG2a, &#954; 
			Fluorochrome Horizon V450 
			(Ex max 404 nm/ 
			Em max 448 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD45</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>560777</td>
			<td style="width:344px;">clone HI30 
			Mouse IgG1, &#954; 
			Fluorochrome Horizon V500 (Ex max 415 nm/ 
			Em max 500 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD16</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>656146</td>
			<td style="width:344px;">clone CLB/fcGran1 Mouse BALB/c IgG2a, &#954; 
			Fluorochrome FITC 
			(Ex max 494 nm/ 
			Em max 520 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD13</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>347406</td>
			<td style="width:344px;">clone L138 
			Mouse BALB/c X C57BL/6 IgG1, &#954; 
			Fluorochrome PE 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 578 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD34</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>347222</td>
			<td style="width:344px;">clone 8G12 
			Mouse BALB/c IgG1, &#954; 
			Fluorochrome PerCP-Cy5.5 
			(Ex max 482 nm/ 
			Em max 678 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD117</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>339217</td>
			<td style="width:344px;">clone 104D2 
			Mouse BALB/c IgG1 
			Fluorochrome PE-Cy7 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 785 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD11b</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>333143</td>
			<td style="width:344px;">clone D12 
			Mouse BALB/c IgG2a, &#954; 
			D12, Fluorochrome APC 
			(Ex max 650 nm/ 
			Em max 660nm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD10</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>646783</td>
			<td style="width:344px;">clone HI10A 
			Mouse BALB/c IgG1, &#954; 
			Fluorochrome APC-H7 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 785nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD35</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>555452</td>
			<td style="width:344px;">clone E11 
			Mouse IgG1, &#954; 
			Fluorochrome FITC 
			(Ex max 494 nm/ 
			Em max 520 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD64</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>644385</td>
			<td style="width:344px;">clone 10.1 
			Mouse BALB/c IgG1, &#954; 
			Fluorochrome PE 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 578 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD300e</td>
			<td>Immunostep</td>
			<td>IREM2A-T100</td>
			<td style="width:344px;">clone UP-H2 
			Mouse BALB/c IgG1, k 
			Fluorochrome APC 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 578 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD14</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>641394</td>
			<td style="width:344px;">clone MoP9 
			Mouse BALB/c IgG2b, &#954; 
			Fluorochrome APC-H7 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 785nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD36</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>656151</td>
			<td style="width:344px;">clone CLB-IVC7 
			Mouse IgG1, &#954; 
			Fluorochrome FITC 
			(Ex max 494 nm/ 
			Em max 520 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse Anti-Human CD105</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>560839</td>
			<td style="width:344px;">clone 266 
			Mouse BALB/c IgG1, &#954; 
			Fluorochrome PE 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 578 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="68">
			<td height="68" style="height:68px;">Mouse Anti-Human CD33</td>
			<td></td>
			<td>345800</td>
			<td style="width:344px;">clone P67.6 
			Mouse BALB/c IgG1, &#954; 
			Fluorochrome APC 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 578 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="68">
			<td height="68" style="height:68px;">Mouse Anti-Human CD71</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>655408</td>
			<td style="width:344px;">clone M-A712 
			Mouse BALB/c IgG2a, &#954; 
			Fluorochrome APC-H7 
			(Ex max 496 nm/ 
			Em max 785nm)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lysing Solution 10X Concentrate (IVD)</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>349202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FACSFlow Sheath Fluid</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>342003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FACSDiva CS&#38;T IVD beads</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>656046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RAINBOW CALIBRATION PARTICLES, 8 PEAKS</td>
			<td>Cytognos, Salamanca, Spain</td>
			<td>SPH-RCP-30-5A</td>
			<td>lots EAB01, EAC01, EAD05, EAE01, EAF01, EAG01, EAH01, EAI01, EAJ01, EAK01</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Compensation Particles Multicolor CompBeads(CE/IVD)</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td>ref. #51-90-9001229 + #51-90-9001291</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Diva software versions 6.1.2 and 6.1.3</td>
			<td>BD Biosciences, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate buffered saline tablets</td>
			<td>R&#38;D Systems, Minneapolis, USA</td>
			<td>5564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine serum albumin&#160;(BSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, France</td>
			<td>A9647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Sodium azide 99%</td>
			<td>Sigma-Aldrich, France</td>
			<td style="width:344px;">199931</td>
			<td style="width:344px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Infinicyt software version 1.8.0.e</td>
			<td>Cytognos, Salamanca, Spain</td>
			<td style="width:344px;"></td>
			<td style="width:344px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

database-guided flow-cytometry for evaluation of bone marrow myeloid cell maturation

फ्रांस में माइलॉयड रोग निदान के लिए multiparameter फ्लो Cytometry (MFC) के आवेदन के अनुरूप करने के लिए फ्रेंच Cytometry एसोसिएशन (एएफसी) के भीतर शुरू किए गए एक कार्यदल का समूह विकसित किया गया था । यहां प्रस्तुत प्रोटोकॉल पर सहमति हुई थी और सितंबर २०१३ और छह फ्रांसीसी नैदानिक प्रयोगशालाओं में २०१५ नवंबर के बीच लागू किया गया (संत के विश्वविद्यालय अस्पतालों-एटीन, ग्रेनोबल, Clermont-Ferrand, अच्छा है, और लील और Institut पाओली-Calmettes में मार्सैय) और अस्थि मज्जा नमूना तैयारी और डेटा अधिग्रहण के मानकीकरण की अनुमति दी । तीन परिपक्वता डेटाबेस न्युट्रोफिल, monocytic, और अस्थि मज्जा के साथ erythroid वंश "से स्वस्थ" दाता व्यक्तियों (व्यक्तियों के लिए विकसित किए गए एक टेम रोग के किसी भी सबूत के बिना) । प्रत्येक माइलॉयड वंश के लिए विश्लेषण का एक मजबूत तरीका दिनचर्या नैदानिक उपयोग के लिए लागू किया जाना चाहिए । नए मामलों में एक ही तरीके से विश्लेषण किया जा सकता है और सामांय डेटाबेस के खिलाफ तुलना में । इस प्रकार, मात्रात्मक और गुणात्मक phenotypic विषमताओं की पहचान की जा सकती है और सामान्य अस्थि मज्जा के नमूनों के डेटा के साथ तुलना में 2SD ऊपर उन विकृति का संकेत माना जाना चाहिए. प्रमुख सीमा डेटा के बीच उच्च परिवर्तनशीलता है hybridoma प्रौद्योगिकियों पर आधारित तरीकों के साथ प्राप्त मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग कर प्राप्त की और वर्तमान में नैदानिक निदान में इस्तेमाल किया । प्राप्त किए गए डेटा की तकनीकी मांयता के लिए मापदंड सेट कर सकता है मदद MFC निदान के लिए की सुविधा में सुधार । इन मानदंडों की स्थापना के लिए एक डेटाबेस के खिलाफ विश्लेषण की आवश्यकता है । डेटा विश्लेषण में जांचकर्ता मनोवाद की कमी इस विधि का एक महत्वपूर्ण लाभ है ।

कश्मीर में ५४ बीएम नमूनों की कटाई-EDTA थक्कारोधी अध्ययन में शामिल थे. MFC डेटा रोगियों के बारे में कोई जानकारी के अभाव में विश्लेषण किया गया । पूर्वव्यापी अध्ययन से पता चला कि बीएम नमूने 7 स्वस्थ...

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Database-guided Flow-cytometry for Evaluation of Bone Marrow Myeloid Cell Maturation

MDS निदान रूपात्मक मापदंड या गैर-जानकारीपूर्ण cytogenetics के अभाव में कठिन है । MFC MDS निदान प्रक्रिया को परिष्कृत करने में मदद कर सका । नैदानिक अभ्यास के लिए उपयोगी बनने के लिए, MFC विश्लेषण पर्याप्त विशिष्टता और संवेदनशीलता के साथ पैरामीटर्स पर आधारित होना चाहिए, और डेटा विभिन्न ऑपरेटर्स के बीच reproducible होना चाहिए ।

डेटाबेस निर्देशित प्रवाह-अस्थि मज्जा माइलॉयड कोशिका परिपक्वता के मूल्यांकन के लिए cytometry

A working group initiated within the French Cytometry Association (AFC) was developed in order to harmonize the application of multiparameter flow ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Preparation of Myeloid Derived Suppressor Cells (MDSC) from Naive and Pancreatic Tumor-bearing Mice using Flow Cytometry and Automated Magnetic Activated Cell Sorting (AutoMACS)

Preparation of Myeloid Derived Suppressor Cells MDSC from Naive and Pancreatic Tumor-bearing Mice using Flow Cytometry and Automated Magnetic Activated Cell Sorting AutoMACS

अनुभवहीन और अग्नाशय के ट्यूमर असर चूहों से माइलॉयड व्युत्पन्न दबानेवाला कोशिकाओं (MDSC) फ्लो और स्वचालित चुंबकीय सक्रिय सेल छंटनी (AutoMACS) के का उपयोग कर की तैयारी

MDSC are a heterogeneous population of immature macrophages, dendritic cells and granulocytes that accumulate in lymphoid organs in pathological ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

गंभीर बीमारी भ्रष्टाचार बनाम मेजबान के बायोमार्कर के सत्यापन के लिए उच्च Throughput अनुक्रमिक एलिसा

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

एक्यूट ल्यूकेमिया के इलाज के लिए tyrosine kinase inhibitors के पूर्व नैदानिक ​​मूल्यांकन

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

मानव सीरम में एन मिथाइल-D-aspartate रिसेप्टर या dopamine का 2 रिसेप्टर के लिए एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए उच्च throughput फ्लो सेल आधारित परख

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Adaptation of Semiautomated Circulating Tumor Cell (CTC) Assays for Clinical and Preclinical Research Applications

Adaptation of Semiautomated Circulating Tumor Cell CTC Assays for Clinical and Preclinical Research Applications

नैदानिक ​​और preclinical अनुसंधान अनुप्रयोगों के लिए ट्यूमर सेल (सीटीसी) Assays घूम semiautomated का अनुकूलन

The majority of cancer-related deaths occur subsequent to the development of metastatic disease. This highly lethal disease stage is associated with the ...

Femoral Bone Marrow Aspiration in Live Mice

जीवित चूहों में ऊरु अस्थि मज्जा आकांक्षा

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed ...

Imaging- and Flow Cytometry-based Analysis of Cell Position and the Cell Cycle in 3D Melanoma Spheroids

Imaging- और फ्लो के आधार पर सेल की स्थिति का विश्लेषण और 3 डी मेलेनोमा spheroids में कोशिका चक्र

Three-dimensional (3D) tumor spheroids are utilized in cancer research as a more accurate model of the in vivo tumor microenvironment, compared to ...

Combining Volumetric Capnography And Barometric Plethysmography To Measure The Lung Structure-function Relationship

संयोजन Volumetric Capnography और बैरोमीटर का Plethysmography फेफड़ों संरचना को मापने के लिए-समारोह संबंध

Tools to measure lung and airways volume are critical for pulmonary researchers interested in evaluating the impact of disease or novel therapies on the ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cell Subsets within the Murine Spleen, Bone Marrow, Lymph Nodes and Synovial Tissue in an Osteoarthritis Model

एक ऑस्टियोआर्थराइटिस मॉडल में मुरीन स्प्लेन, बोन मैरो, लिम्फ नोड्स और सिनोवियल ऊतक के भीतर प्रतिरक्षा सेल सबसेट का प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण

Osteoarthritis (OA) is one of the most prevalent musculoskeletal diseases, affecting patients suffering from pain and physical limitations. Recent ...

Isolation and Cultivation of Mandibular Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Rats

चूहों में मंडीबुलर बोन मैरो मेसेंचिमल स्टेम सेल की अलगाव और खेती

Here we present an efficient method for isolating and culturing mandibular bone marrow mesenchymal stem cells (mBMSCs) in vitro to rapidly obtain numerous ...